HPLC法同时测定地黄中的5种核苷和碱基的含量(英文)

建立HPLC法同时测定来自中国不同地区的地黄中次黄嘌呤、尿苷、腺嘌呤、鸟苷、腺苷等5种核苷类成分的含量。采用的色谱柱为Diamonsil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.04 mol.L-1磷酸二氢钾溶液梯度洗脱,流速1 mL.min-1,柱温30℃,检测波长254 nm。次黄嘌呤、尿苷、腺嘌呤、鸟苷和腺苷的质量浓度分别在1.0～16.0μg.mL-1(r2=0.999 8),5.0～80.0μg.mL-1(r2=0.999 8),1.0～16.0μg.mL-1(r2=0.999 5),1.25～20.0μg.mL-1(r2=0.999 8)和1.0～16.0μg.mL-1(r2=0.999 8)内线性关系良好,平均回收率为98.8%～100.7%。结果表明,不同地区的地黄中次黄嘌呤、尿苷、腺嘌呤、鸟苷和腺苷的含量有显著性差异。该方法准确,重复性好,适用于地黄药材中5种核苷类成分的含量测定。     

皖产古尼虫草中核苷和碱基成分的HPLC分析

目的:建立高效液相色谱法测定皖产古尼虫草中核苷和碱基成分(尿嘧啶、虫草素、腺苷、腺嘌呤、尿苷、次黄嘌呤、肌苷和鸟苷)的含量,并比较其与天然冬虫夏草核苷和碱基成分的异同。方法:采用Zorbax SB-Aq(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以水-乙腈为流动相,梯度洗脱,流速为0.8 mL.min-1,检测波长260 nm,柱温20℃。结果:尿嘧啶、虫草素、腺苷、腺嘌呤、尿苷、次黄嘌呤、肌苷和鸟苷进样浓度分别在0.38～191.08,0.37～188.48,0.37～189.72,0.37～190.92,0.37～188.55,0.50～168.55,0.37～190.36,0.24～125.00μg.mL-1范围内线性关系良好,R2为0.9998～0.9999;加样回收率分别为102.1%,102.1%,95.3%,96.2%,96.9%,94.1%,108.7%,101.8%,RSD未超过2.8%。皖产古尼虫草和冬虫夏草均含有核苷和碱基成分,其中:皖产古尼虫草含有较高的尿嘧啶、尿苷、腺苷,而冬虫夏草中肌苷含量较高;二者的次黄嘌呤、鸟苷、腺嘌呤的含量相近;在该检测限下,两者均未测得虫草素。结论:初步认...     

RP-HPLC法同时测定熟地黄中5个核苷类成分的含量

目的:建立同时测定熟地黄中次黄嘌呤、尿苷、腺嘌呤、鸟苷和腺苷5个核苷类成分的RP-HPLC法。方法:采用Dia-monsil C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.04 mol·L-1磷酸二氢钾溶液为流动相梯度洗脱,流速1.0 mL·min-1,检测波长254 nm;柱温30℃。结果:次黄嘌呤、尿苷、腺嘌呤、鸟苷和腺苷浓度分别在1.0～16.0μg·mL-1(r=0.9999)、5.0～80.0μg·mL-1(r=0.9999)、1.0～16.0μg·mL-1(r=0.9997)、1.25～20.0μg·mL-1(r=0.9999)、1.0～16.0μg·mL-1(r=0.9999)范围内线性良好。加样回收率为98.1%～101.0%。结论:该方法可以用于熟地黄中次黄嘌呤、尿苷、腺嘌呤、鸟苷和腺苷的含量测定。     

高效液相色谱法测定灵芝提取物中尿苷和腺苷含量

目的 建立测定不同产地的灵芝提取物(包括赤芝提取物和紫芝提取物)中尿苷和腺苷含量的反相高效液相色谱法.方法 采用Agilent Zorbax SB-Aq柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-水为流动柱(梯度洗脱),流速为0.8 mL/min,检测波长为260 nm.结果 尿苷和腺苷质量浓度分别在2.44 ～ 195.6 μg/mL(r=1.000 0)和2.64 ～ 105.6μg/mL(r=1.000 0)范围内与峰面积呈良好的线性关系,平均回收率分别为102.0％和101.2％,RSD分别为0.2％和1.0％(n=6).不同产地的灵芝提取物中尿苷及腺苷的含量及二者总量差异较大,且同一产地不同批次尿苷及腺苷的含量及二者总量也存在一定差异.结论 该法简便、准确、重复性好,可用于灵芝提取物中尿苷和腺苷的测定,试验结果为灵芝提取物的质量评价提供了参考依据.     

HPLC法同时测定康复新液中两种成分的含量

目的:建立同时测定康复新液中尿苷和黄嘌呤含量的方法。方法:采用HPLC法,Diamonsil C18(250mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,甲醇-水(5:95)作为流动相,于254 nm波长下检测,流速1.0 mL·min~(-1),柱温30℃。结果:尿苷、黄嘌呤分别在0.10~3.96μg·mL~(-1)(r~2=0.9998)、0.52~20.80μg·mL~(-1)(r~2=0.9992)浓度范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为97.86%(RSD=1.25%)、97.39%(RSD=0.68%)。测定5批次康复新液中尿苷和黄嘌呤的含量范围分别为1.69~1.76μg·mL~(-1)、12.76~13.06μg·mL~(-1),说明各批样品质量较均一。结论:本文建立的方法精密度高、重复性好,操作简便快速,可用于康复新液的质量控制。     

高效液相色谱法同时测定耳聋通窍丸中龙胆苦苷和栀子苷含量

目的建立一种同时测定耳聋通窍丸中龙胆苦苷和栀子苷含量的高效液相色谱法。方法采用Agilent Extend C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇-0.1%磷酸溶液(21∶79)为流动相,流速为1.0 mL/min,检测波长为254 nm,进样量为10μL,柱温为30℃。结果龙胆苦苷和栀子苷与其相邻杂质峰能完全分离,龙胆苦苷、栀子苷质量浓度分别在6.048～60.48μg/mL(r=1.000 0,n=5)和20.74～207.4μg/mL(r=1.000 0,n=5)范围内与峰面积具有良好线性关系。龙胆苦苷、栀子苷的平均回收率分别为97.49%(RSD=0.88%)和97.56%(RSD=1.19%)。结论该方法简便、快速、准确,一种方法同时测定两种成分,可用于耳聋通窍丸的质量控制。     

高效液相色谱法同时测定清浊祛毒丸中咖啡酸、虎杖苷、丹皮酚含量

目的建立同时测定清浊祛毒丸中咖啡酸、虎杖苷和丹皮酚含量的高效液相色谱法。方法采用AgilentEclipse XDB-C18色谱柱(250mm×4.6 mm,5μm),用甲醇-0.1%磷酸流动相进行梯度洗脱,流速1.0 mL/min,检测波长314 nm,进样量5μL。结果咖啡酸、虎杖苷和丹皮酚质量浓度线性范围分别是4.8～96.0μg/mL(r=0.9995,n=5),4.1～82.0μg/mL(r=1.0,n=5)和12.0～240.0μg/mL(r=0.9999,n=5),平均加样回收率分别为101.10%(RSD=1.6%,n=9),101.62%(RSD=0.8%,n=9),102.71%(RSD=1.2%,n=9)。结论该法方便、快捷、准确、灵敏、重现性好,能更全面地控制清浊祛毒丸的质量。     

高效液相色谱法同时测定养血当归糖浆中芍药苷和甘草酸铵含量

目的建立同时测定养血当归糖浆中芍药苷、甘草酸铵含量的高效液相色谱法。方法色谱柱为Kromasil-C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈(A)-0.085%磷酸溶液(B)为流动相(梯度洗脱),流速为1.0 mL/min,柱温为30℃,进样量为10μL,检测波长为230 nm。结果芍药苷和甘草酸铵质量浓度分别在5.54~55.35μg/mL和9.63~115.56μg/mL范围内与峰面积线性关系良好(r≥0.9990);平均加样回收率分别为88.42%和87.08%,RSD分别为3.66%和3.52%(n=6)。结论该方法简便、准确、专属性强、重复性好,可用于养血当归糖浆制剂的质量控制。     

柱层析预处理RP-HPLC法测定女贞子中红景天苷的含量

目的:建立女贞子中红景天苷含量测定的RP-HPLC法。方法:样品溶液经大孔树脂和聚酰胺柱层析纯化,采用Hypersil C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相为甲醇∶水(20∶80),流速0.4 mL/min,检测波长220 nm。结果:红景天苷在1~80μg/mL范围内线性关系良好(r=0.999 9),高、中、低浓度(40、10、5μg/mL)加样回收率分别为(101.4±1.52)%(、95.6±1.45)%、(100.5±2.18)%(n=5)。浓度为80、40、10μg/mL的红景天苷日内RSD分别为0.28%、0.17%、0.48%(n=5);日间RSD分别为0.56%、0.06%、0.12%(n=5)。稳定性的RSD=1.64%,表明红景天苷在24 h内稳定。应用该法测定女贞子中红景天苷的含量为0.718 mg/g。结论:本法简便、快捷、准确,适用于女贞子中红景天苷的含量测定。     

高效液相色谱法测定双黄连注射液中连翘苷含量

目的建立测定双黄连注射液中连翘苷含量的高效液相色谱法。方法采用Agilent Technologies Zorbax Extend-C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-水(25∶75),流速为1.0 mL/min,检测波长为277 nm,柱温为30℃。结果连翘苷质量浓度在80.00～200.00μg/mL范围内与峰面积线性关系良好(r=0.999 4),平均加样回收率为95.83%,RSD=4.02%(n=6)。结论该方法简便易行、结果准确可靠,可用于测定双黄连注射液中连翘苷的含量。     

RP-HPLC法测定青海不同产地冬虫夏草中核苷类成分的含量

目的:测定青海不同产地冬虫夏草中主要核苷类成分的含量并比较其差异。方法:采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)法测定不同产地的9份样品中尿苷、鸟苷、肌苷、腺苷、虫草素的含量。色谱柱为Symmetry ShieldTMRp18(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-水(梯度洗脱),流速为0.2～1.2mL·min-1,检测波长为260nm,柱温为30℃。结果:5种成分的进样量分别在0.331～1.796、0.375～2.046、0.256～1.389、0.338～1.844、0.384～2.110mg范围与各自峰面积积分值呈良好的线性关系(r分别为0.9999、0.9999、0.9998、0.9997、0.9998);平均回收率分别为98.72%、101.48%、99.74%、98.46%、98.09%,RSD分别为1.96%、1.68%、1.82%、1.57%、2.74%(n均为6)。青海不同产地间冬虫夏草主要核苷类成分含量有差异。结论:本方法能有效鉴别天然冬虫夏草中的核苷类成分,而冬虫夏草化学成分与生态因子的相关性还需要进一步研究。     

冬虫夏草和虫草菌丝体中腺苷成分的比较

目的 比较冬虫夏草与虫草菌丝体(以下简称菌丝体)中腺苷成分,为菌丝体在临床治疗中替代冬虫夏草提供实验依据.方法 采用薄层色谱法对腺苷进行定性鉴别;采用高效液相色谱法(色谱柱为Hypersil ODS2 C18(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相为0.01 mmol·L-1磷酸二氢钾水溶液∶甲醇=17:3;流...     

HPLC法测定冬虫夏草中核苷类成分的含量

目的建立用HPLC法测定不同方法(熏干、新鲜和阴干)处理冬虫夏草样品中核苷类成分(腺苷、尿苷、肌苷、鸟苷和胸苷)含量的方法。方法样品用纯化水超声提取,流动相为甲醇-水,梯度洗脱,柱温:30℃,流速:1.0mL·min-1。结果虫草中含有的5种核苷标准曲线的相关系数均在0.999 0以上,精密度检测RSD值为0.31%~1.95%(n=5),重复性检测RSD值为0.50%~2.56%(n=5),回收率在99.46%~100.11%之间。结论该方法灵敏、简便、快速、准确、重复性好,能有效测定虫草中核苷类成分的含量,可为评价虫草的质量提供依据。     

RP-HPLC法测定北虫草发酵培养物中虫草素的含量

目的:建立测定北虫草发酵培养物中虫草素含量的方法。方法:采用反相高效液相色谱法。色谱柱为DIAMONSIL-C18(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-水-甲醇(5∶90∶5),流速为0.8mL·min-1,柱温为40℃,检测波长为259nm。结果:虫草素检测浓度在2.56～51.20μg·mL-1范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系(r=0.9998);平均回收率为98.35%,RSD=2.71%(n=6)。结论:本方法灵敏、快速、准确,适用于北虫草发酵培养物中虫草素的检测。     

RP-HPLC法测定地黄及其复方制剂中尿苷和腺苷的含量

目的分别建立HPLC外标法测定地黄药材及其制剂中尿苷和腺苷含量的方法。方法采用Thermo C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),尿苷以5 mmol·L-1醋酸铵(乙酸调节pH为6.0)为流动相,腺苷以20 mmol·L-1磷酸二氢钾∶甲醇(90∶10)为流动相,流速均为1 mL·min-1,检测波长均为254 nm。结果尿苷浓度在4.17～20.85 mg·L-1(r=0.999 9)范围内线性关系良好,腺苷浓度在1.01～20.23 mg·L-1(r=0.999 8)范围内线性关系良好,平均加样回收率(n=9)分别为100.8%和100.1%。测得6批地黄药材中尿苷的平均含量为(0.027 8±0.003 5)%,腺苷的平均含量为(0.008 4±0.003 1)%。制剂中尿苷含量为0.032 1%,腺苷含量为0.006 9%。结论建立的方法准确可靠,专属性好,可作为地黄及其制剂中核苷含量测定方法。地黄药材中尿苷是主要的核苷成分,其它核苷成分含量甚微。     

HPLC法测定虫草被孢菌胶囊中腺苷的含量

目的 建立虫草被孢菌胶囊中腺苷含量测定方法.方法 采用高效液相色谱法测定虫草被胞菌胶囊中腺苷的含量.采用Hypersil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相:磷酸二氢钾溶液(0.05 mol·L-1)-甲醇(85∶15)为流动相,流速1.0 mL· min-1,检测波长为260hm.结果 腺苷在1.011～ 50.55μg·mL-1范围内线性关系良好,线性方程为:A=60901C-2347.7,r=1;平均回收率为100.49％(n=6,RSD=1.1％).结论 本法操作简便,不受杂质干扰,精密度好,结果准确可靠,可用于虫草被孢菌胶囊的质量控制.     

HPLC法测定皂角刺提取物中槲皮素的含量

目的:建立以高效液相色谱法测定皂角刺提取物中槲皮素含量的方法。方法:色谱柱为Dikma Kromasil C18(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液(30∶70),检测波长为360nm,柱温为30℃,流速为1.0mL·min-1。结果:槲皮素进样量在0.134～1.072μg范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系(r=0.9999);平均回收率为98.98%,RSD=1.87%(n=9)。结论:本方法灵敏、准确、简便、快速,可用于皂角刺提取物的质量控制。     

虫草花与冬虫夏草腺苷成份的比较研究

目的 比较研究虫草花与冬虫夏草腺苷成份的含量.方法 采用高效液相色谱法测定腺苷的含量,色谱柱为岛津Shim-pack VP-ODS柱(200mm×4.6 mm,5μm);流动相为磷酸盐缓冲剂(pH=6.5)-甲醇(17:3);流速为1ml/min;检测波长为260nm.结果 腺苷的线性范围为0.078 35-0.399 88μg,呈现较好的线性关系,平均加样回收率为96.22%,RSD为0.21%(n=5).结论 虫草花的活性成份腺苷含量明显高于冬虫夏草腺苷含量,具有与冬虫夏草相似的滋补功效.     

反相高效液相色谱法同时测定冬虫夏草中腺苷、虫草素、肌苷含量方法的研究

目的建立同时测定冬虫夏草中腺苷、虫草素、肌苷的HPLC方法。方法采用RP-HPLC法,色谱柱：Agilent C18柱（250 nm×4.6 mm,5μm）,甲醇与水梯度洗脱,柱温：30℃,流速：1.0 mL.min-1,检测波长：260 nm。结果腺苷进样量在0.200 8~1.004μg与峰面积呈良好线性关系,回归方程为Y=2 876X＋0.458 8,r=0.998 7,平均加样回收率为100.5%,RSD为2.33%;虫草素进样量在0.202 2~1.011μg与峰面积呈良好线性关系,回归方程为Y=2 018X＋8.726,r=0.999 2,平均加样回收率为99.3%,RSD为2.03%;肌苷进样量在0.201 4~1.007μg与峰面积呈良好线性关系,回归方程为Y=5 845X-5.685,r=0.999 4,平均加样回收率为100.2%,RSD为1.44%。结论本方法简便、准确,重复性好,可用于同时检测冬虫夏草中的腺苷、虫草素及肌苷的含量测定。