兔蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛诱导海马组织p38 MAPK磷酸化

目的: 观察蛛网膜下腔出血(SAH)后脑血管痉挛(CVS)模型中海马组织内p38 MAPK及其磷酸化的时相变化特点,初步探讨CVS导致缺血性脑损伤的分子机制. 方法: 用Western blot方法检测兔SAH后CVS时海马组织内p38 MAPK和磷酸化p38 MAPK (p-p38 MAPK)蛋白的表达变化.结果: p38 MAPK在SAH组各时间点的海马组织内的表达保持相对恒定,与正常对照组相比无明显变化(P > 0.05).p-p38 MAPK的表达水平在SAH组1 d时即有明显升高,4 d时达到高峰,7 d时仍维持较高的表达水平,与正常对照组相比有显著差异(P < 0.01),分别是其在正常组海马组织中表达水平的3.1,7.9和6.2倍.结论: p38 MAPK信号通路的激活可能与SAH后CVS所造成的海马神经元的损伤有密切关系.     

实验性蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛兔海马组织中Bcl-2和Bax mRNA的表达

目的：探讨蛛网膜下腔出血(SAH)后脑血管痉挛(CVS)造成脑损伤的机制．方法：用反转录聚合酶链式反应(RT—PCB)技术检测兔SAH后CVS时海马组织Bcl—2和BaxmRNA的表达变化．结果：Bcl—2mBNA的表达水平在SAH组1d时即开始下降，3d时降至最低，持续至7d．SAH组海马组织中BaxmRNA的表达呈上升趋势，3d时达最高，7d时仍显著高于正常组．在假手术组海马组织内的Bcl—2和BaxmRNA的表达水平保持相对恒定．结论：Bcl—2和Bax可能参与了SAH后CVS所造成的海马神经元损伤过程。     

人组织激肽释放酶对兔脑血管痉挛的影响

目的 探讨人组织激肽释放酶(HTK)对兔蛛网膜下腔出血(SAH)后症状性脑血管痉挛(CVS)的影响.方法 建立兔CVS模型,将双侧颈总动脉结扎2周后存活的兔子随机分为4组:假手术(Sham)组、蛛网膜下腔出血(SAH)组、HTK组,尼莫地平(ND)组.除Sham组外,其余3组动物行二次枕大池注血.后两组于第1次注血后第1～5天分别经静脉给HTK或ND.所有动物于第6天处死.用三维CT血管造影(3D-CTA)观察各组注血前后基底动脉直径变化,并对比基底动脉病理改变.结果 与SAH组相比,HTK组基底动脉痉挛不明显(P<0.01),光镜见基底动脉病理改变不明显,ND组基底动脉痉挛无明显缓解(P>0.05).结论 SAH后早期应用人组织激肽释放酶对兔脑血管痉挛具有明显的改善作用.     

蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛模型制作的优化与观察

目的明确蛛网膜下腔出血(SAH)模型经改良后脑血管痉挛(CVS)双相变化时程发展及与缺血损伤的关系。方法新西兰大白兔随机分为对照组和注血后不同时间点模型组。用优化的经皮一次注血法制作SAH模型,取脑组织冠状切视交叉前后2～4mm和中段基底动脉制备组织病理切片,HE染色后测定动脉皱缩指数(CC)和海马CA1区正常神经元细胞。每日行神经行为学评分,观察血凝块并评分。结果动物苏醒时间短。血管皱缩从注血后12h开始出现至第4d均明显,第5d时有所缓解后再次加重(P<0.05);海马CA1区存活神经元密度在各组间比较差异无统计学意义(P>0.05);CC和海马CA1区存活神经元数量间无相关关系。结论本改良模型短时、平稳,注血后12h直至第4d属于急性脑血管痉挛,第5d后属于迟发性脑血管痉挛,暂不适宜用海马CA1区神经细胞作SAH后脑损伤的病理评价。     

新生鼠缺氧缺血再灌注后海马p-CREB的表达

目的 :探讨新生鼠缺氧缺血再灌注后 ,c AMP反应元件结合蛋白 (CREB)磷酸化在海马的表达变化及其与海马神经元损伤后修复、存活的关系 .方法 :选用 7d龄SD鼠 16只 (不同窝 ) ,随机分入假术对照组、缺氧缺血脑损伤组 .经弹性管穿线法阻断右颈总动脉 3h ,予低氧 1h ;制备缺氧缺血脑损伤 (HIBD)模型 .3h后剪开扎线予再灌注 2 4h ,彩色多普勒监测血流 .应用免疫组织化学检测磷酸化的CREB (p CREB)在新生仔鼠HIBD再灌注 2 4h后海马区的表达 .结果 :HIBD组再灌注 2 4h仔鼠右侧海马CA1,CA3,DG区p CREB的表达明显增加 ,左侧相应区的增加低于右侧 ,但明显高于假术对照(P <0 .0 1) .缺血敏感区CA1低于耐受区CA3,DG(P <0 .0 1) .对照组p CREB两侧有基础表达 ,但无差别 .结论 :磷酸化CREB在HIBD再灌注 2 4h后海马区高表达 ,可能对保护CA1,CA3,DG区锥体神经元有重要作用     

镁对兔全脑缺血神经保护作用及氨基酸在其中作用的实验研究（摘要）

目的 :探讨硫酸镁对兔全脑缺血神经保护作用及氨基酸在其中的作用 .方法 :30只兔 ,随机分为 3组 ,对照组 (n =10 ) ,缺血组 (n =10 )和镁处理组 (n =10 ) .阻断兔双侧椎动脉和双侧颈总动脉 6min ,诱导全脑缺血 .检测缺血再灌注 3d海马CA1区神经元密度和凋亡神经元密度 .测定缺血再灌注 30min兔海马谷氨酸、天冬氨酸、γ -氨基丁酸和甘氨酸含量 .结果 :(1)镁处理组海马CA1区正常神经元密度显著高于缺血组 (P <0 0 1) ;镁处理组缺血神经元密度显著低于缺血组 (P <0 0 1) .(2 )镁处理组海马CA1区凋亡神经元密度显著低于缺血组 (P<0 0 1)…     

大鼠脑局部缺血再灌流后c-fos mRNA及c-Fos蛋白的表达

线栓法复制大鼠大脑中动脉缺血再灌流动物模型 ,于缺血 1h后分别再灌流 1h及 2h。原位杂交及免疫组化染色显示 ,再灌流 1h及 2h ,缺血侧额叶及顶叶皮质、海马各区以及齿状回c fosmRNA及c Fos蛋白表达均有不同程度诱导 ,于再灌流前电针“百会”及“风府”2穴 3 0min ,c fosmRNA和c Fos蛋白的诱导于再灌流 1h及 2h在缺血侧额叶、顶叶皮质 (P <0 .0 0 1 )及齿状回 (P <0 .0 1 )均显著增加 ;海马各区c Fos蛋白表达于再灌流 2h亦有显著增加(CA1与CA4:P <0 .0 5 ;CA2与CA3 :P <0 .0 1 )。该区c fosmRNA表达增加仅见于再灌流 1h的CA1及CA4区 (P <0 .0 5 )。HE染色示缺血区的神经元变性亦减轻。结果表明 :再灌流前给予电针处理使c fosmRNA及其产物c Fos蛋白表达增加 ,可能与电针对脑缺血再灌流动物模型的脑保护作用有关     

P38信号转导通路对蛛网膜下腔出血后迟发性脑血管痉挛的影响

目的:探讨促分裂原活化蛋白激酶P38(P38 MAPK)在兔蛛网膜下腔出血(SAH)后迟发性脑血管痉挛(CVS)中的作用。方法:35只新西兰白兔随机分为对照组(n=5),SAH组(n=10)、SAH+DMSO(n=10)、SAH+SB203580组(n=10),采用枕大池二次注血的方法建立SAH模型。分别在注血后第5天、第7天活体灌注处死,留取基底动脉标本。用免疫组织化学、测量基底动脉横截面积的方法检测P38 MAPK的表达和CVS程度的变化。结果:5 d处死的SAH组、SAH+DMSO组兔基底动脉横截面积与对照组相比有统计学意义(P<0.01),平滑肌细胞P38 MAPK的表达与对照组相比显著增强(P<0.01);5 d处死的SAH+SB203580组CVS明显缓解(P<0.01),平滑肌细胞P38 MAPK的表达减弱。结论:SAH后兔基底动脉平滑肌细胞内激活的P38 MAPK诱导了迟发性CVS的产生;SB203580能够有效的缓解基底动脉平滑肌持续性的收缩。     

Effect of Fentanyl on cerebral vasospasm after subarachnoid hemorrhage

目的 研究芬太尼(Fentanyl)对蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛的影响及其作用机制.方法 选用健康成年家兔72只,随机分成假手术对照组(A组)、SAH组(B组)、芬太尼静脉干预组(C组)、芬太尼肌注干预组(D组).每天进行神经生物学评分,并在实验24h、72h、7d后处死,取基底动脉进行H-E染色,观察管壁情况,同时取左侧海马分别行HE染色及免疫组化染色,观测神经元密度、Bcl-2及Bax的表达.结果 SAH后Bcl-2、Bax表达均增加,芬太尼干预后Bcl-2表达升高,Bax表达下降.B组的神经生物学评分、神经元密度、Bcl-2及Bax的表达与C、D组差异有统计学意义(P＜0.05).结论 芬太尼可抑制CVS后细胞凋亡,可能通过促进SAH家兔Bcl-2的表达而抑制Bax表达.     

七氟醚对幼鼠获取空间学习记忆能力及海马pERK1/2表达的影响

目的探讨七氟醚对幼鼠获取空间学习记忆能力及海马p ERK1/2表达的影响。方法出生后14 d SD幼鼠54只,随机分为对照组(C组)、七氟醚5%组(Sevo组)、假手术组(Sham组)各18只。C组不做任何处理,Sevo组幼鼠暴露于5%的七氟醚4 h,Sham组幼鼠吸入氧气4 h,1周、3周、6周后于上午8:00~11:00应用Morris水迷宫对幼鼠进行7 d的行为学观察,记录逃避潜伏期,行为学结束后随即取出6只幼鼠用免疫组化法测定海马CA1区神经元p ERK1/2的表达。结果与Sham组比较,Sevo组逃避潜伏期和探索时间明显延长(P<0.01),Sevo组海马CA1区神经元p ERK1/2的表达明显减少(P<0.01);Sham组与C组逃避潜伏期时间差异无统计学意义,海马CA1区神经元p ERK1/2的表达之间差异无统计学意义。结论七氟醚对幼鼠获取空间学习记忆能力的影响与抑制海马p ERK1/2表达有关。     

脑血管痉挛大鼠血和脑组织ET—1、NO含量动脉变化的研究

目的：探讨内皮素（ET）－1和一氧化氮（NO）在蛛网膜下腔出血（SAH）后脑血管痉挛（CVS）及脑缺血性损害中的作用。方法：采用非开颅法大鼠SAH模型,检测24h内血及脑组织中NO和ET－1含量,并测定脑微区血流（rCBF）和基底动脉管径。结果：大鼠SAH后30min基底动脉管径缩小,rCBF持续下降;血NO减少,ET－1增多;脑组织NO和ET－1均增加。结论：血NO减少,ET增多系SAH后CVS发生的原因之一;脑组织NO和ET增多则加重脑损伤。     

急性脑血管痉挛大鼠血浆及脑组织内皮素—1含量动态变化研究

目的 探讨内皮素－１（ＥＴ１）在蛛网膜下腔出血（ＳＡＨ）后急性脑血管痉挛（ＣＶＳ）及其因性缶害中的作用。方法 应用大鼠ＳＡＨ模型,以假手术组为对照,检测２４ｈ内局部脑血流量,血浆及脑组织ＥＴ１含量的动态改变,同时于手术前后测量基底动脉（ＢＡ）管径。结果 ＳＡ后２４内ｒＣＢＦ迅速而持续降低,血浆及脑组织ＥＴＩ浓度显著增加。ＳＡＨ后ＢＡ明显痉挛。结论 血浆及脑组织ＥＴ１增加在ＳＡＨ后急性ＣＶＳ及其脑缺     

Induction of autophagy by cystatin C: a potential mechanism for prevention of cerebral vasospasm after experimental subarachnoid hemorrhage

Background

Studies have demonstrated that autophagy pathways are activated in the brain after experimental subarachnoid hemorrhage (SAH) and this may play a protective role in early brain injury. However, the contribution of autophagy in the pathogenesis of cerebral vasospasm (CVS) following SAH, and whether up-regulated autophagy may contribute to aggravate or release CVS, remain unknown. Cystatin C (CysC) is a cysteine protease inhibitor that induces autophagy under conditions of neuronal challenge. This study investigated the expression of autophagy proteins in the walls of basilar arteries (BA), and the effects of CysC on CVS and autophagy pathways following experimental SAH in rats.

Methods

All SAH animals were subjected to injection of 0.3 mL fresh arterial, non-heparinized blood into the cisterna magna. Fifty rats were assigned randomly to five groups: control group (n = 10), SAH group (n = 10), SAH + vehicle group (n = 10), SAH + low dose of CysC group (n = 10), and SAH + high dose of CysC group (n = 10). We measured proteins by western blot analysis, CVS by H&E staining method, morphological changes by electron microscopy, and recorded neuro-behavior scores.

Results

Microtubule-associated protein light chain-3, an autophagosome biomarker, and beclin-1, a Bcl-2-interacting protein required for autophagy, were significantly increased in the BA wall 48 h after SAH. In the CysC-handled group, the degree of CVS, measured as the inner BA perimeter and BA wall thickness, was significantly ameliorated in comparison with vehicle-treated SAH rats. This effect paralleled the intensity of autophagy in the BA wall induced by CysC.

Conclusions

These results suggest that the autophagy pathway is activated in the BA wall after SAH and CysC-induced autophagy may play a beneficial role in preventing SAH-induced CVS.     

Research on the pathogenesis of cerebral vasospasm following subarachnoid hemorrhage

目的 :进一步研究脑血管痉挛的发生机理 ,为临床治疗服务。方法 :采用 1 4只成年家犬 ,实验组 9只 ,对照组 5只 ,通过 2次枕大池注血法建立蛛网膜下腔出血 (SAH)模型。观察痉挛血管的自由基变化、血管活性、血管造影像、超微结构变化。另外 2 0只犬用来观察血管扩张剂的作用。结果 :实验组较对照组自由基含量高 ,血管活性降低 ,血管狭窄 ,管壁损害重。结论 :尼莫地平对急性痉挛有效 ,对慢性痉挛无效 ;慢性血管痉挛是以管壁结构性狭窄为特点。     

枕大池二次注血法建立大鼠蛛网膜下腔出血模型及尼莫地平的脑保护作用

目的:建立一种适于研究蛛网膜下腔出血(SAH)诱发脑血管痉挛(CVS)的大鼠模型,并探讨尼莫地平的脑保护作用.方法:将Wistar大鼠分为假手术组(枕大池内注入0.3 mL生理盐水)、SAH模型组(无抗凝自体血0.3 mL注入枕大池)及SAH尼莫地平治疗组(简称治疗组,建模后30 min及术后每日均腹腔注射尼莫地平0....     

西洛他唑与尼莫地平联合应用防治蛛网膜下腔出血迟发性脑血管痉挛疗效

目的 探讨联合用药对蛛网膜下腔出血(SAH)后迟发性脑血管痉挛防治的临床疗效.方法 210例SAH患者随机分成对照组(n=105):常规治疗加尼莫地平1 mg/h持续泵入14 d;治疗组(n=105):在对照组治疗基础上同时应用西洛他唑50mg,2次,d.连用14 d.2组均持续监测生命体征,比较治疗前后2组临床表现,意识变化以脑血管痉挛(GCS)、病情以Hunt&Hess分级,预后以CT、MRI、TCD结果为评价指标.结果 (1)总体病情、GCS、Hunt&Hess分级及Fisher分级:治疗前2组无明显差异(P>0.05).(2)头部CT或MRI:治疗组出现脑梗死灶11例(10.5%),低于对照组(23例,21.9%)(P<0.05).(3)TCD:出血后1 d大脑中动脉(MCA)平均流速对照组(115.6±12.5)cm/s,治疗组(112.5±10.92)cm/s,两组比较无统计学差异(P>0.05).分别比较3,7,14 d血流速度,治疗组比对照组明显下降(P<0.05);(4)疗效:治疗组显效率(74.3%)明显高于对照组(60.0%)(P<0.05).结论 SAH后迟发性脑血管痉挛的联合防治效果更佳.     

Relationship between endothelin-1 and ischemic brain damage after subarachnoid hemorrhage and protective effect of Ginkgo biloba extract

Ｃｅｒｅｂｒａｌｖａｓｏｓｐａｓｍ（ＣＶＳ）ｉｓｏｎｅｏｆｔｈｅｍａｊｏｒｃｏｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓｏｆｓｕｂａｒａｃｈｎｏｉｄｈｅｍｏｒｒｈａｇｅ（ＳＡＨ）,ｗｈｉｃｈｃｏｎｔｒｉｂｕｔｅｓｔｏｔｈｅｈｉｇｈｉｎｃｉｄｅｎｃｅｏｆｍｏｒｔａｌｉｔｙａｎｄｄｉｓａｂｉｌｉｔｙｆｒｏｍｔｈｉｓｄｉｓｅａｓｅ．Ｉｎｓｐｉｔｅｏｆｅｘｔｅｎｓｉｖｅｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌａｎｄｃｌｉｎｉｃａｌｓｔｕｄｉｅｓ,ｔｈｅｐｒｅｃｉｓｅｅｔｉｏｌｏｇｙｏｆＣＶＳｒｅｍａｉｎｓｕｎｃｌｅａｒａｎｄｎｏｓａｔｉｓ…     

FKHR及AKT蛋白在大鼠蛛网膜下腔出血脑皮质中的表达及意义

目的 探讨FKHR、AKT蛋白在大鼠蛛网膜下腔出血脑皮质中的表达及意义.方法 将24只大鼠随机分为3组:假手术组、蛛网膜下腔出血(SAH)组、SAH+尼莫地平组,每组8只.采用枕大池二次注血法建立Wistar大鼠蛛网膜下腔出血模型,Loeffler法进行大鼠神经行为学评分,Western blotting检测脑皮质中FKHR(FOXO1)、P-FKHR、AKT及P-AKT蛋白的表达.结果 神经行为评分与假手术组(4.81±0.06)相比,SAH组(2.49±0.34)的神经行为评分明显降低(P<0.05),FKHR的表达明显增加(P<0.01),AKT的表达变化不明显,P-AKT/AKT及P-FKHR的表达明显下降(均P<0.01),而给予尼莫地平治疗后,神经行为评分明显升高(P<0.01),P-AKT/AKT及P-FKHR的表达亦升高(均P<0.01).结论 P-AKT及P-FKHR参与了大鼠蛛网膜下腔出血所致的损伤过程,而尼莫地平通过上调P-AKT及P-FKHR的减轻SAH所致脑损伤.