肥厚型和扩张型心肌病患者β肌球蛋白重链基因错义突变的研究

肥厚型和扩张型心肌病患者β肌球蛋白重链基因错义突变的研究徐军，李运有，张寄南，马文珠，王敬良近年来，β肌球蛋白重链（βＭＨＣ）基因突变是心肌疾病研究的焦点之一，有研究认为βＭＨＣ基因中的点突变是家族性肥厚型心肌病（ＦＨＣＭ）的重要发病原因［１］。本研...     

原发性心肌病β肌球蛋白重链基因突变研究

目的探讨β-肌球蛋白重链(βMHC)基因点突变与肥厚型心肌病(HCM)及扩张型心肌病(DCM)发病的关系。方法选择56例原发性心肌病病人(HCM13例,DCM43例)及53例健康对照,应用聚合酶链反应(PCR)限制性扩增心脏β-肌球蛋白重链基因第13、14外显子,用DdeⅠ、NⅠaⅢ限制性内切酶酶解其扩增产物,分析有无8848位及9124位点突变。结果 1例扩张型心肌病病人出现8848位点突变应产生的394bp片段,提示该病人可能存在8848位点突变。HCM病人未发现突变。结论β-肌球蛋白重链基因可能是DCM遗传易感性的基因标志之一。     

肥厚型心肌病心肌β-肌球蛋白重链基因Gln893Lys突变

目的：研究中国人肥厚型心肌病致病基因-β-肌球蛋白重链基因（β-MHC）,分析基因型与临床表型的关系．方法：在96例肥厚型心肌病患者及100例正常对照中进行β-肌球蛋白重链（β—MHC）基因扫描,聚合酶链反应（PCR）扩增其功能区的外显子片段,双脱氧末端终止法测序．对阳性结果者进行家系调查,收集临床资料,分析其临床表型．结果：在4个家系及2例散发患者中,β—MHC基因第23号外显子的Gln893Lys错义突变,而正常对照组同一位置未见异常．4个家系临床表型不同．结论：β—MHC基因Gln893Lys突变是中国人肥厚型心肌病的致病突变之一,其临床表型的异质性,提示多因素参与了肥厚型心肌病的发生和发展．     

一个May-Hegglin异常家系非肌性肌球蛋白重链9基因突变位点的鉴定

目的：鉴定一个May-Hegglin异常（MHA）家系非肌性肌球蛋白重链9基因（MYH9）突变的类型及临床表型特点。方法：用聚合酶链反应（PCR）技术扩增先证者及其父亲的非性肌球蛋白重链9基因（MYH9）的25、31－32、38、40号外显子,分析PCR产物的核苷酸序列。确定突变位点后,分别扩增正常对照、后天获得性血小板减少症患者的对应基因区域并行核苷酸序列分析以资对照。进而进行PCR扩增片段的CpoI(RsrII）限制性内切酶图谱分析。结果：本家系中May-Hegglin异常患者具有典型的“血小板减少、巨大血小板、粒细胞包涵体”三连征。先证者及其父亲在MYH9的38号外显子上第5521位核苷酸存在G→A突变（GAG→AAG),并导致特征性的CpoI限制性内切酶图谱改变。结论：中国人的May-Hegglin异常存在MYH9基因突变。本家系中,其突变位点位于38号外显子（G5521A）,MYH9基因突变的传递规律与家系中临床表型分布相符。     

中国汉族家族性肥厚型心肌病肌球蛋白重链基因G823E突变分析

目的 研究中国人家族性肥厚型心肌病(HCM)的致病基因突变位点,分析基因型与临床表型的相互关系.方法 在1个中国汉族HCM家系中进行心脏肌钙蛋白T基因(TNNT2)、心脏肌球蛋白结合蛋白C基因(MYBPC3)和心脏β-肌球蛋白重链基因(MYH7)的突变筛查,聚合酶链反应(PCR)扩增基因功能区外显子片段,并对PCR产物进行测序分析.以120名正常志愿者为对照组.结果 在该家系接受调查的12名成员中有4名成员携带MYH7基因G823E杂合突变,该突变位点位于MYH7基因的22号外显子并使823位的甘氨酸(G)转换为谷氨酸(E),该突变在西方人中未见报道,其导致的临床表型在家系内部呈现较明显的异质性,携带该突变的家族成员发病年龄和临床症状差异较大.该家系成员TNNT2及MYBPC3基因未发现突变且对照组相同位置未发现异常.结论 MYH7基因为我国家族性HCM的致病基因之一,G823E突变所致肥厚型心肌病呈现明显的个体异质性表型.     

β-肌球蛋白重链基因与心肌肥厚

心肌肥厚是多种心血管病的一种病理改变。近年研究表明心肌肥厚是一种复杂的多种因素参与调节的动态过程。笔者就β-肌球蛋白重链基因与心肌肥厚的关系在分子遗传学水平做一综述。     

抗肌球蛋白重链和轻链抗体在扩张型心肌病与冠心病鉴别诊断中的价值

目的：旨在探讨抗肌球蛋白重链和轻链抗体，在扩张型心肌病（ＤＣＭ）和冠心病中鉴别诊断的价值。方法；对２１例ＤＣＭ患者，１４例冠心病患者及正常健康组１８例，进行临床免疫学检测，应用ＥＬＩＳＡ法、免疫转印法对检测数值进行分析。结果显示：ＥＬＩＳＡ法ＤＣＭ患者阳性率４３．９％，冠心病组２８．６％，正常对照组均为阴性。免疫转印法２１例的ＤＣＭ患者阳性率４３．９％，冠心组２８．６％，正常对照组均为阴性。免疫转印法２１例的ＤＣＭ患者抗肌球蛋白重链抗体（２００ＫＤ）１０例阳性，阳性率４７．６％，冠心组抗肌球蛋白轻链抗体（２７．５ＫＤ）阳性４例，阳性率２８．６％，ＰＢＳ替代试验均为阴性。结论：抗心肌肌球蛋白重链和轻链的抗体检测有助于ＤＣＭ和冠心病的鉴别诊断     

抗肌球蛋白重链和轻链抗体在扩张型心肌病与冠心病鉴别诊断中的价值

目的　旨在探讨抗肌球蛋白重链和轻链抗体,在扩张型心肌病（DCM）和冠心病中鉴别诊断的价值。方法对21例DCM患者,14例冠心病患者及正常健康组18例,进行临床免疫学检测,应用ELISA法,免疫转印法检测数值予以分析。结果ELISA法DCM组阳性率43．9％,冠心病组28．6％,正常对照组均为阴性。免疫转印法21例的DCM患者抗肌球蛋白重链抗体（200KD）10例阳性,阳性率47.6％,冠心组抗肌球蛋白轻链抗体（27．SKD）阳性4例,阳性率28．6％,PBS替代试验均为阴性。结论抗心肌肌球蛋白重链和轻链的抗体检测有助于DCM和冠心病的鉴别诊断。     

阿霉素致大鼠心衰心肌肌球蛋白重链变化

为观察阿霉素所致大鼠心衰时心肌肌球蛋白重链的变化及心肌结构的改变，采用雄性SD大鼠22只，随机分为2组：①正常对照组：ip等体积生理盐水；②阿霉素组（ADR）：于实验开始后第2、4天ip ADR 1mg/kg；第6、8天ip ADR 2mg/kg；第10天、12天ip ADR 3mg/kg；第14、16天ip ADR 4mg/kg,16d累计用药剂量达20mg/kg。停药24h后，称体重、心肌重量、左心室重复及心肌蛋白的提取、肌球蛋白重链（MHC）分析，电镜观察心肌细胞超微结构的变化。结果表明ADR组大鼠的体重、心体比及左室心体比（LVM／BW）均较正常对照组有显著改变（P＜0．01）。电镜下可见心肌纤维溶解，肌质网扩张空泡化，线粒体水肿，嵴断裂。心肌α-MHC向β-MHC转化，即α-MHC含量下降，β－MHC含量上升。结果提示阿霉素导致的心肌损害伴有心肌细胞结构和功能蛋白质合成的改变。     

三叉神经支配对面瘫后肌球蛋白重链亚型的影响

目的：探讨三叉神经对失神经支配后面部上唇提肌肌球蛋白重链(MHC)各亚型变化的影响。方法：采用组织化学、SDS-PAGE凝胶电泳以及电生理等方法观察上唇提肌形态学、电刺激收缩阈值、最大收缩力以及MHC各亚型的变化。结果：三叉神经可以明显减轻面肌MHC各亚型去神经后的蛋白降解，维持肌纤维的兴奋阈值，保持肌纤维的最大收缩力。结论：肌肉失神经支配后，感觉神经可以减轻MHC各亚型的蛋白降解，临床修复运动神经时应尽可能同时修复感觉神经。     

非肌性肌球蛋白重链9基因突变相关疾病:一个家系报告

目的:提高对非肌性肌球蛋白重链9基因(myosin heavy chain 9, nonmuscle,MYH9)突变相关疾病的认识.方法:报告一个MYH9相关疾病家系的临床及实验室检查资料,包括外周血和骨髓涂片的细胞形态学检查(瑞姬染色),外周血超微结构检查,流式细胞术分析血小板膜糖蛋白,应用逆转录-聚合酶链反应和直接测序的方法分析MYH9 mRNA,应用聚合酶链反应和直接测序方法分析MYH9基因.结果:患儿及其父亲均有巨大血小板、血小板减少和粒细胞内包涵体(D(o)hle样小体).患儿及其父亲血小板膜糖蛋白GPIb均轻度降低.mRNA和基因组DNA分析均证实,患儿存在杂合的碱基替代突变(5797C＞T),使第1933位密码子CGA转为终止密码子TGA.基因组DNA分析显示,其父亲携带有与患儿相同的突变.结论:本例患儿及其父亲具有巨大血小板、血小板减少、粒细胞内包涵体和MYH9基因点突变,MYH9相关疾病的诊断成立.     

家兔半膜肌各亚部肌球蛋白重链表达差异的实验研究

目的利用家兔半膜肌各亚部肌纤维类型的分布特征,观察骨骼肌两型肌纤维肌球蛋白重链（MHC）的构成特点,为进一步探讨两型肌纤维的区别以及两型肌纤维转化机制奠定基础。方法取成年家兔半膜肌,通过改良肌球蛋白ATP酶染色法观察半膜肌四个亚部肌纤维类型的构成,应用RT-PCR方法检测各亚部4种MHC亚型mRNA的表达情况。结果固有半膜肌只含有慢肌（Ⅰ型）肌纤维,表达MHCⅠ型和少量MHCⅡa型基因。副半膜肌腹侧亚部除含有少量Ⅰ型肌纤维外,主要含有快肌（Ⅱ型）肌纤维,表达少量MHCⅠ型基因以及MHCⅡa、MHCⅡb和MHCⅡx型基因等四种类型;而副半膜肌背侧和外侧亚部只含有Ⅱ型肌纤维,仅表达MHCⅡa、MHCⅡb和MHCⅡx型基因。结论家兔半膜肌各亚部肌纤维类型几乎均呈单一类型分布。固有半膜肌亚部主要表达MHCⅠ型基因;副半膜肌各亚部主要表达MHCⅡa、MHCⅡb和MHCⅡx型基因,以MHCⅡx型基因为主,各亚部之间存在细微差别。     

利用变性高效液相色谱方法进行HCM家系MYH7基因突变筛查研究

目的:研究利用变性高效液相色谱技术(DHPLC)检测家族性肥厚型心肌病(hypertrophic cardiomyopathy,HCM)的主要致病基因β-肌球蛋白重链(beta-myosin heavy chain gene,MYH7)突变情况.方法:采用DHPLC结合DNA测序方法对3个新疆地区HCM家系成员的MYH7基因8、14外显子及附近上下游序列进行检测分析.结果:在其中一个家系中发现MYH7基因14外显子中存在Thr441Met突变,该突变在中国人中是首次发现.另外两个家系也发现有不同位点的突变.结论:MYH7基因在HCM家系中具有较高的突变率,不同突变基因型以及基因突变携带个体在临床表型上有所差异.运用变性高效液相色谱技术,能够快速有效地进行基因突变筛查,有利于对HCM家族成员的诊断、患病风险预测及疾病早期预防和治疗.     

阿霉素致大鼠心衰心肌肌球蛋白重链变化

阿霉素(Doxorbincin,Adrinmycin,简称ADR)是一种临床应用广泛的蒽环类抗肿瘤药,对很多肿瘤均有较好的疗效。然而,ADR具有严重的心脏毒性作用,这在一定程度上限制了ADR的大剂量、长期应用。本实验目的是观察对阿霉素所致大鼠心衰时的心肌肌球蛋白重链的变化及心肌结构的改变。     

低压低氧环境对大鼠心肌肌球蛋白重链表达的影响

【目的】 研究模拟高原低压低氧环境对小鼠心肌肌球蛋白重链α、β亚型表达的影响。【方法】取清洁级SD大鼠20只,随机分成2组：常氧组和模拟高原6000m低压低氧组。记录各组大鼠心脏指数。制作各组心肌组织切片,常规HE染色观察心肌细胞形态改变。免疫荧光法检测各组心肌肌球蛋白重链α-MHC和β-MHC两种亚型蛋白的表达变化。【结果】常氧组和低压低氧组大鼠心脏指数差异不具有统计学意义（P〉0．05）。HE染色可见低压低氧组大鼠心肌细胞水肿,心肌间质内小血管及毛细血管明显扩张充血。低压低氧组大鼠心肌中MHC蛋白质表达水平异常改变,即α-MHC蛋白表达量增高而α-MHC蛋白表达量下降。【结论】模拟高原6000m高原低压低氧可致大鼠心肌细胞形态异常改变同时可刺激心肌MMC亚型表达出现“由快到慢”的趋势,提示MHC表达异常参与了心脏重塑,可能是高原低压低氧致心力衰竭发生、发展的基础。     

抗肌球蛋白重链和轻链抗体在扩张型心肌病与冠心病鉴别诊断中的 …

目的：旨在探讨抗肌球蛋白重轻链抗体，在扩张型心肌病（ＤＣＭ）和冠心病中鉴别诊断的价值。方法：对２１例ＤＣＭ患者，１４例冠心病患者及正常健康组１８例，进行临床免疫学检测，应用ＥＬＩＳＡ法、免疫转抑法对检测数值进行分析。结果显示：ＥＬＩＳＡ法ＤＣＭ患者阳性率４３．９％、冠心病组２８．６％，正常组均为阴性。免疫转印法２１例的ＤＣＭ哮是性率４３．９％，冠心组２８．６％，正常组均生。免疫转印法２１便的是抗肌     

骨骼肌肌球蛋白重链研究近展

<正>肌球蛋白广泛存在于肌细胞中并作为一种细胞骨架组成成分存在于非肌细胞中。肌球蛋白含有两条分子量约为19.4²1.2万道尔顿的重链(MHC)和两对分子量约2.0万道尔顿左右的轻链(MLC)。肌球蛋白重链是肌球蛋白的分子主干,由约1800个氨基酸组成。两条链从羧基端起并行排列,在氨基端形成球头部,呈a-螺旋杆状。其头部具有ATP酶活性,通过与肌动蛋白相互作用水解ATP的末端磷酸基团,将化学能     

人心肌肌凝蛋白重链的制备研究

目的：探讨制备人心肌肌凝蛋白重链（MHC）的方法,为制备其抗体提供抗原。方法：采用改良性制备人心肌MHC,通过SDS-PAGE及Western印迹分析其纯度及抗原特性。结果：①SDS-PAGE显示,纯化的人心肌MHC呈现只有一分子量较大的代表人心肌MHC带的典型图像;②Western印迹显示,200ku处有一典型的感光带。结论：所用的改良法能有效地提取纯化人心肌MHC,可满足制备其抗体的需要。