抗肾综合征出血热病毒人单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及初步鉴定

以亲和层析技术纯化的肾综合征出血热病毒（ＨＦＲＳＶ）结构蛋白（５５０００，６７０００）为特异性抗原，体外免疫正常人外周血淋巴细胞（ＰＢＬ），然后将体外免疫的淋巴细胞与人－鼠种间杂交瘤细胞（Ｋ６Ｈ６／Ｂ５）融合，经ＥＬＩＳＡ间接法筛选出２株（２Ｄ５，１Ｂ７）分泌抗－ＨＦＲＳＶ人单克隆抗体（Ｈ－ＭｃＡｂ）杂交瘤细胞株，４次克隆化后，１００％阳性。对２Ｄ５株初步鉴定表明，其抗体类型为ＩｇＧ１；培养上清中抗体浓度为２０～３０μｇ／ｍｌ；特异性免疫荧光反应证明２Ｄ５株Ｈ－ＭｃＡｂ是ＨＦＲＳＶ特异性；中和效价为１∶１６０；体外连续传代６个月仍稳定分泌抗体。     

肾综合征出血热病毒大鼠单克隆抗体亲和力及抗原结合位点测定

应用非竞争ＥＬＩＳＡ和ＥＬＩＳＡ相加试验对８株抗肾综合征出血热病毒（ＨＦＲＳＶ）大鼠单克隆抗体（ＭｃＡｂ）进行了抗体亲和力和抗原结合位点的测定。结果提示这些ＭｃＡｂ至少可识别ＨＦＲＳＶ核壳蛋白（ＮＰ）上６种不同抗原决定簇，并且表明ＮＰ上可能存在ＨＦＲＳＶ组、亚组、型或亚型抗原决定簇。ＭｃＡｂ亲和常数测定的高低排序结果为ＫＦ１２＞ＤＥ１１＞Ｘ１０＞ＣＨ１０＞ＩＧ４。     

广西不同人群庚型肝炎病毒感染状况的调查

目的 了解庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）感染在广西柳州地区不同人群中的感染状况，并比较静脉毒瘾者与健康体检者ＨＧＶ，乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）、丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）与ＨＧＶ共同感染的特点，方法 应用酶联免疫法（ＥＬＡ）检测抗－ＨＧＶ，抗－ＨＣＶ，ＨＢＶＭ（ＨＢｓＡｇ，ＨＢｓＡｂ，ＨＢｅＡｇ，ＨＢｅＡｂ，ＨＢｃＡｂ），并对抗－ＨＧＶ阳性者随机抽取２０例（１９％）进一步用逆转录套式ＰＣＲ（ＰＴ－ｎＰＣＲ）法检测     

STUDY OF NOVEL MEMBRANOUS MATERIAL FOR ADSORPTION ARTIFICIAL KIDNEY

ＳＴＵＤＹＯＦＮＯＶＥＬＭＥＭＢＲＡＮＯＵＳＭＡＴＥＲＩＡＬＦＯＲＡＤＳＯＲＰＴＩＯＮＡＲＴＩＦＩＣＩＡＬＫＩＤＮＥＹＧｕＨａｎｑｉｎｇ；ＬｕＭｏｚｕ（ＴｉａｎｊｉｎＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＵｒｏｌｏｇｉｃＳｕｒｇｅｒｙ，Ｔｉａｎｊｉｎ，３００２１１，...     

一个新的CD4单克隆抗体的研制

用基因工程重组人ＣＤ４分子免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，制备了一个分泌抗ＣＤ４ＭｃＡｂ的杂交瘤细胞株。该ＭｃＡｂ与ＣＤ４分子有强反应，其亲和力常数Ｋａｆｆ＝６．１２５×１０￣９Ｍ￣（－１）。竞争结合实验表明，它与ＡＴＣＣ克隆ＣＲＬ８００２（ＯＫＴ４）分泌的ＭｃＡｂ分别识别ＣＤ４分子中不同的表位，其腹水滴度较ＡＴＣＣ（ＯＫＴ４）ＭｃＡｂ腹水高约１０倍。     

抗人Ⅳ型胶原蛋白单克隆抗体的制备和鉴定

用人Ⅳ型胶原蛋白免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，克隆了一组分泌抗人Ⅳ型胶原蛋白的杂交瘤细胞株，并且对其中的Ａ２、Ａ４、Ａ５、Ｂ３和Ｅ２进行了鉴定。其抗体亚类分别为ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ２ｂ、ＩｇＧ２和ＩｇＧ１。其亲和力常数Ｋａｆｆ＝６．６×１０８Ｍ（－１）～６．０×１０（１０）Ｍ（－１）。它们均能特异性地识别人Ⅳ型胶原蛋白。     

STUDY OF NOVEL MEMBRANOUS MATERIAL FOR CHARCOAL KIDNEY

ＳＴＵＤＹＯＦＮＯＶＥＬＭＥＭＢＲＡＮＯＵＳＭＡＴＥＲＩＡＬＦＯＲＣＨＡＲＣＯＡＬＫＩＤＮＥＹＳＴＵＤＹＯＦＮＯＶＥＬＭＥＭＢＲＡＮＯＵＳＭＡＴＥＲＩＡＬＦＯＲＣＨＡＲＣＯＡＬＫＩＤＮＥＹＧｕＨａｎｑｉｎｇ；ＬｕＭｏｚｕ（Ｔｉａｎｊｉｎｉｎｓｔｉｔｕ...     

抗远缘链球菌OMZ176表面蛋白抗原（220kD）单克隆抗体的制备

采用远缘链球菌ＯＭＺ１７６（ｄ血清型）全菌细胞作抗原，通过免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，细胞融合，杂交瘤细胞的筛选及亚克隆，最终获得抗远缘链球菌ＯＭＺ１７６表面蛋白抗原（２２０ｋＤ）的单克隆抗体（Ｗｃ３Ａ６）。结果表明：ＭｃＡｂ的Ｉｇ及亚类鉴定为ＩｇＧ２ａ，ＥＬＩＳＡ效价１：８０００，Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｂ１－ｏｔｉｎｇ鉴定可见ＭｃＡｂ与２２０ｋＤ蛋白抗原发生特异性结合。与变形链球菌ＭＴ６Ｒ（Ｃ血清型）有弱的     

人醛缩酶A单克隆抗体的制备及应用

纯化并鉴定了人醛缩酶Ａ、Ｂ、Ｃ（ｈＡＬＤ－Ａ、Ｂ、Ｃ）。用ｈＡＬＤ－Ａ免疫Ｂａｌｂ／Ｃ小鼠，将免疫的脾细胞和Ｐ＿３－Ｘ＿（６３）－Ａｇ８．６５３骨髓瘤细胞用ＰＥＧ进行融合，用ＥＬＩＳＡ法筛选，ｈＡＬＤ－Ｂ、Ｃ作阴性对照，将阳性反应的杂交瘤细胞进行克隆，获得３株杂交瘤细胞株。其ＭｃＡｂ的亚类分别为ＩｇＧ２ｂ，ＩｇＧ１、ＩｇＭ，亲合常数分别为７．５×１０￣（１０）、３．５×１０￣９、２．３×１０￣９。３株细胞株分泌的单抗通过Ｉｍｍｕｎｏｂｌｏｔｔｉｎｇ得到证实。用亲合层析法从人肝癌细胞中提纯了ＡＬＤ－Ａ，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ显示为单一区带，但其电泳迁移率较ｈＡＬＤ－Ａ滞后。     

培养的大鼠血管平滑肌细胞中bFGF基因表达与血管紧张素Ⅱ …

采用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交检测培养的自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）和正常血压ＷＫＹ大鼠的血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）中碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）基因表达，用紫外法和放免法分别测定培养液中血管紧张素转换酶（ＡＣＥ）活性和血管紧张素Ⅱ（ＡｎｇⅡ）含量，发现ＡｎｇⅡ能明显促进ＶＳＭＣ中ｂＦＧＦ基因表达，而ｂＦＧＦ则能明显诱导ＡＣＥ活性和提高ＡｎｇⅡ释放，且ＳＨＲＶＳＭＣ的ｂＦＧＦ基因表达，ＡＣＥ活性和Ａ     

人巨细胞病毒单克隆抗体的研制检定和应用

采用人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）ＡＤ１６９株作为免疫原，制备出１３株鼠－鼠杂交瘤细胞系。对其中的６株进行了检定．免疫印迹试验结果表明：单克隆抗体（ＭｃＡｂ）７Ｂ４、７Ｄ７、７Ｅ１１、８Ｅ８和８Ｄ６相对应的ＨＣＭＶ多肽分子量分别为４６、１５０、３８、５１７２和６５ｋＤ．ＨＣＭＶ感染人胚肺二倍体细胞（２ＢＳ）后不同时间制成抗原片，与ＭｃＡｂ作间接免疫荧光试验。结果表明：ＭｃＡｂ８Ｂ８相应的病毒多肽为即刻早期抗原，其它５株ＭｃＡｂ相应的病毒多肽均为晚期抗原，６株ＭｃＡｂ等量混合后，标上辣根过氧化物酶，用于ＩｇＭ抗体捕获法ＥＬＩＳＡ（ＭａｃＥＬＩＳＡ）中，并与间接ＥＬＩＳＡ（ＩＥＬＩＳＡ）同时检测ＨＣＭＶ－ＩｇＭ．在未经选择的１００份脐带血中，两法均为阳性的３份，两法均为阴性的９４份；ＭａｃＥＬＩＳＡ阳性而ＩＥＬＩＳＡ阴性的２份血清的特异性试验证明，ＨＣＭＶ－ＩｇＭ确为阳性．ＩＥＬＩＳＡ阳性而ＭａｃＥＬＩＳＡ阴性的１份血清的特异性试验证明，它是由ＲＦ引起的假阳性。     

重组人γ－干扰素单克隆抗体的制备及初步应用

应用常规方法制备了４株能稳定分泌抗人重组γ－干扰素单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的小鼠杂交瘤细胞系：３Ｄ３、３Ｄ１２、３Ｆ９和３Ｂ８．经免疫琼脂双扩散法鉴定，其分泌的ＭｃＡｂ的亚类分别为：ＩｇＧ２ｂ、ＩｇＧ３、ＩｇＧ１和１ｇＧ１．相对亲和常数前两株ＭｃＡｂ为６．２５×１０－１１、后两株ＭｃＡｂ为６．２５×１０－１３．问接ＥＬＩＳＡ法测培养上清的效价为２×１０２～１．２８×１０５．由小鼠腹水提取的４株ＭｃＡｂ与天然γ－干扰素均产生交叉反应，对重组的人γ－干扰素均具有中和活性．其中３Ｆ９和３Ｄ３培养上清对重组人γ－干扰素亦有明显的中和活性。用３Ｆ９ＭｃＡｂ与溴化氢活化的ＳｅＰｈａｒｏｓｅ４Ｂ偶联制备了亲和层析柱，用其纯化粗提的γ－干扰素纯度达到９５％以上，比活性达１．９×１０７ＩＵ／ｍｇ蛋白．     

抗远缘链或菌OMZ176表面蛋白抗原（220kD）单克隆抗体的制备

采用远缘链球菌ＯＭＺ１７６（ｄ血清型）全菌细胞作抗原，通过免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，细胞融合，杂交瘤细胞的筛选及亚克隆，最终获得抗远缘链球菌ＯＭＺ１７６表面蛋白抗原（２２０ｋＤ）的单克隆抗体（ＷＣ３Ａ６）。结果表明：ＭｃＡｂ的Ｉｇ及亚类鉴定为ＪｇＧ２ａ，ＥＬＩＳＡ效价１：８０００，Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｉｎｇ鉴定可见ＭｃＡｂ与２２０ｋＤ蛋白抗原发生特异性结合。与变形链球菌ＭＴ６Ｒ（Ｃ血清型）有弱的交叉反应（ＯＤ值＝０．２３）。     

肾综合征出血热病毒血凝素纯化及免疫学性状分析

应用高压液相色谱法对粗制肾综合征出血热病毒（ＨＦＲＳＶ）血凝素分离纯化获得具有血凝活性的蛋白，效价１８０，分子量为５６６００。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和蔗糖密度梯度超速离心分析显示具有均一的分子量和浮密度，多株位点特异性ＭｃＡｂ分析证实，该蛋白有血凝抗原和中和抗原决定簇，免疫小鼠可产生特异性抗－ＨＦＲＳＶ抗体，其中和效价４０，血凝抑制效价６４。     

几种生长因子及血管内皮细胞生长因子受体在胃肠道平滑肌肉瘤中的表达

本研究是应用免疫组化法观察细胞因子血管内皮细胞生长因子（ＶＥＧＦ）、血小板衍生生长因子（ＰＤＧＦｂ）、转化生长因子（ＴＧＦβ）、碱性成纤维细胞生长因子（ＢＦＧＦ）及血管内皮细胞生长因子受体（ＶＥＧＦＲ）在平滑肌肉瘤组织和ＥＬＩＳＡ法在细胞株的表...     

一株与正常人细胞成分反应的巨细胞病毒单克隆抗体的鉴定

用ＨＣＭＶ－ＡＤ１６９株抗原建立了一株分泌ＨＣＭＶＭｃＡｂ的杂交瘤细胞株Ｎ４Ｅ６。经Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ分析发现ＭｃＡｂ与ＨＣＭＶ抗原和正常人成纤维细胞（ＨＥＦ）抗原均有多条免疫沉淀带出现：与ＨＣＭＶ－ＡＤ１６９株抗原反应的沉淀带为８９Ｋ，８７Ｋ，７３Ｋ和４２Ｋ；与Ｄａｖｉｓ株抗原反应的为８９Ｋ，８７Ｋ，４４Ｋ；与８１６地方株抗原反应的为８９Ｋ，８７Ｋ，７３Ｋ，４４Ｋ；与ＨＥＦ抗原反应的为８９Ｋ，８７Ｋ，４４Ｋ。表明Ｎ４Ｅ６除能识别ＨＣＭＶ－ＡＤ１６９株和８１６地方株特异成分７３Ｋ，外，尚能识别ＨＣＭＶ和ＨＥＦ共同成分８９Ｋ，８７Ｋ和４４Ｋ。     

THE RELATIONSHIP BETWEEN THE VOLUMINA CHANGES OF LINK ATRIUM

ＴＨＥＲＥＬＡＴＩＯＮＳＨＩＰＢＥＴＷＥＥＮＴＨＥＶＯＬＵＭＩＮＡＣＨＡＮＧＥＳＯＦＬＩＮＫＡＴＲＩＵＭＰｅｎｇＢａｏ；ＬｉｎＺｈｏｎｇＷｅｎ（ＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＳｈｅｎｇｚｈｅｎＣｉｔｙ，Ｓｈｅｎｇｚｈｅｎ，５１８０００，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａ...     

抗bFGF单克隆抗体的鉴定及其意义

用重组牛ｂＦＧＦ免疫Ｂａｌｂ／ｃ小鼠，通过细胞融合，以反向间接血凝和间接ＥＬＩＳＡ筛选，以及有限稀释法克隆化，建立了９株稳定分泌抗ｂＦＧＦ单克隆抗体（ｍＡｂ）杂交瘤细胞。对其中３株用Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ和生物活性抗体中和实验进行了鉴定。结果显示，ｍＡｂ可结合重组牛或人ｂＦＧＦ，并能抑制ｂＦＧＦ刺激Ｂａｌｂ／ｃ３Ｔ３细胞的生长；腹水的ＥＬＩＳＡ滴度为１∶３０００；用其中２株ｍＡｂ建立的双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法灵敏度可达５０ｐｇ／孔。本文还讨论了抗ｂＦＧＦｍＡｂ的应用价值。     

大鼠三叉神经尾侧亚核和脊髓内离子型谷氨酸受体、GABA_A受体和甘氨酸受体的分布

为了搞清兴奋性和抑制性氨基酸受体在伤害性刺激信息传递和调制初级门户内的精确定位，本研究用免疫组织化学技术观察了大鼠三叉神经尾侧亚核（Ｖｃ）和脊髓内离子型谷氨酸受体（ＮＭ－ＤＡ受体、ＡＭＰＡ受体和Ｋａｉｎａｔｅ受体）、ＧＡＢＡＡ受体和甘氨酸（Ｇｌｙ）受体的分布。ＮＭＤＡ受体１亚型分布于Ｖｃ和脊髓的各层，ＮＭＤＡ受体２Ａ／Ｂ亚型、Ｋａｉｎａｔｅ受体和ＧＡＢＡＡ受体α亚单位散在性地分布于Ｖｃ和脊髓后角的Ⅰ层，ＧＡＢＡＡ受体α亚单位仅见于Ｖｃ和脊髓Ⅰ层内轴突样结构。ＡＭＰＡ受体、ＧＡＢＡＡ受体β亚单位和Ｇｌｙ受体较密集地分布于Ｖｃ和脊髓的各层，尤其是它们的浅层（Ⅰ和Ⅰ层）。结合机能学研究的结果，讨论了这些受体阳性神经元在伤害性刺激信息传递和调制方面的作用。     

用一种新的免疫方法制备抗NPY单克隆抗体

本文报道了在８淋巴细胞杂交瘤技术中采用脾内微量免疫及腹腔植入联合免疫方法获得了两株分泌抗神经肽Ｙ（ＮＰＹ）单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的杂交瘤细胞系，用ＥＬＩＳＡ法测定腹水ＭｃＡｂ的效价为１０￣（－３）～１０￣（－５）。ＥＬＩＳＡ交叉试验结果表明，该ＭｃＡｂ不与ＡＣＴＨ反应，两种ＭｃＡｂ的亲和常数（Ｋａ）各为１×１０￣９Ｍ￣（－１）和５×１０￣７ｍｏｌ／Ｌ￣（－１），抗原决定簇分析结果表明此两种ＭｃＡｂ针对不同抗原决定簇。