荷叶水提物清除自由基的ESR研究

目的研究了荷叶水提物(LLE)对羟基自由基(·OH)和超氧阴离子自由基(O2)的清除效果.方法采用电子自旋共振法自旋捕集技术.结果26.95μg/mL的LLE对次黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶体系产生O2的清除率达65.6%,LLE浓度大于8.98 mg/mL时可以全部清除由Fenten反应体系产生的·OH.结论LLE对·OH和O2有很强的清除能力.     

鲤鱼精巢DNA对自由基的清除作用

目的：研究鲤鱼精巢DNA对自由基的清除作用。方法：采用 化学发光法测定鲤鱼精巢DNA对Cu2 -Vit C-H2O2发光体系产生的·OH自由 基的清 除作用，采用分光光度法检测鲤鱼精巢DNA对大鼠腹腔多形核白细胞(PMNs)呼吸爆发产生O ÷2自由基的清除作用，采用电子自旋共振(ESR)法测定鲤鱼精巢DNA对DPPH有机自由基的 清 除作用。结果：鲤鱼精巢DNA使Cu2 -Vit C-H2O2发光体系的发光计数率降低， 使 PMNs呼吸爆发产生O÷2自由基的数量减少，使DPPH的特征波峰逐渐降低直至消失。结论 ：鲤鱼精巢DNA对·OH自由基、O÷2自由基和有机自由基均有显著的消除作用。     

水杨醛缩L-丝氨酸席夫碱Cu（Ⅱ）配合物的制备及消除超氧阴离子自由基活性

目的：制备水杨醛L-丝氨酸席夫碱Cu （Ⅱ）配合物,并研究配合物对超氧阴离子自由基的清除作用。方法以水杨醛、L-丝氨酸、硫酸铜为原料,合成了水杨醛L-丝氨酸席夫碱Cu（Ⅱ）配合物,利用紫外-可见吸收光谱和红外吸收光谱表征其结构,利用邻苯三酚自氧化法对配合物清除超氧阴离子自由基的能力进行了测定。结果水杨醛L-丝氨酸席夫碱中的亚甲胺基N 原子及酚羟基O原子与Cu2＋配位,配合物在浓度1．25～50．0 mg/L的范围内,对超氧自由基的清除率为45．04％～78．37％。结论水杨醛L-丝氨酸席夫碱铜配合物对超氧阴离子自由基具有一定的清除作用。     

羟丙基芦丁及其铜(Ⅱ)配合物的SOD样活性

0　引言　从天然抗氧化剂及其衍生物中来寻找具有 SOD样活性的药物 ,是当今人们关注的热点 [1 - 4 ] .我们对羟丙基芦丁及其铜配合物的歧化 O2 · - 活性进行了测定 ,并以 SOD作为对照 .以期寻到一种具有 SOD样作用的防治心脑血管病的药物 .1　材料和方法1.1　材料　黄嘌呤氧化酶 (XO) ,Sigma公司产品 ,使用之前用 PBS(p H 7.8,0 .0 5 mol· L- 1 )稀释 2 0倍 ;黄嘌呤 ,E.Merck公司产品 ;鲁米诺 ,上海试剂一厂产品 ;羟丙基芦丁及其铜配合物由第四军医大学骆文博教授提供 ;超氧化物歧化酶 (SOD) ,甘肃夏河生化试剂厂产品 ,使用时分…     

蚕砂中叶绿素类金属配合物清除活性氧作用研究

目的　研究蚕砂中提取、精制叶绿素类金属配合物 [Fe2 ( )、Cu2 ( )、Mn2 ( )、Co2 ( ) ]作为抗活性氧 ( O÷2 、H2 O2 、OH· )模拟酶。方法　核黄素—蛋氨酸光照测其清除 O÷2 作用 ,H2 O2 氧化维生素 C法测其催化H2 O2 的分解 ,Fenton-苯甲酸钠荧光法测其对 OH·清除作用 ,小鼠肝匀浆法测其抗脂质过氧化作用。结果　 1×10 - 5～ 1× 10 - 6 m ol/ L具有良好的清除 O÷2 作用 ,活性顺序为 :Cu2 >Mn2 >Co2 >Fe2 ;约 1× 10 - 7mol/ L具有分解 H2 O2 作用 ,活性顺序为 :Cu2 >Mn2 >Fe2 >Co2 ;约 1× 10 - 8mol/ L 具有清除 OH·的功能 ,活性顺序为 :Cu2 >Co2 >Fe2 >Mn2 ;约 1× 10 - 8m ol/ L 可使脂质过氧化产物明显减少 ,活性顺序为 :Cu2 >Co2 >Mn2 >Fe2 。结论　蚕砂中叶绿素类金属配合物可作为抗多种活性氧 ( O÷2 、H2 O2 、OH· )模拟酶     

仿SOD催化剂的合成及其清除氧自由基作用

合成了一种钢配合物[Cu_2(C_(34)H_(32)N_(10)(Br)_3)Br·2H_2O作为仿Cu·Zn-SOD催化剂,用核黄素-蛋氨酸光照法等证实它有清除的作用;ESR等证实它还有清除,OH的作用;大鼠心脏缺血再灌注实验表明此铜配合物能降低活性氧自由基(和·OH)对心肌的损伤程度,对再灌注损伤心肌有保护作用。     

白藜芦醇苷的体外抗氧化活性

目的研究白藜芦醇苷的清除自由基、抗氧化活性.方法以NADH-PMS-NBT系统产生氧自由基O 2-;EDTANa2-Fe(Ⅱ)-H2O2系统和Fe2++Vit C系统产生羟自由基(·OH);H2O2诱导大鼠红细胞氧化溶血来研究白藜芦醇苷的生物活性.结果白藜芦醇苷体外可清除O2-及·OH;抑制H2O2诱导的大鼠红细胞氧化性溶血;抑制·OH引起的小鼠肝微粒体过氧化脂质(LPO)和大鼠红细胞膜丙二醛(MDA)含量的升高.结论白藜芦醇苷具清除自由基及抗脂质过氧化的作用.     

双功能自由基清除剂原儿茶醛缩氨基硫脲铜(Ⅱ)配合物对O2·-和·OH自由基的清除作用

目的:研究原儿茶醛缩氨基硫脲铜(Ⅱ)配合物(PTC)对高脂血症模型大鼠血脂、主动脉组织形态学及肝组织抗氧化活性的影响.方法:60只SD大鼠随机分为6组(每组10只),即正常对照组、高脂血症模型组、药物对照组(即费非诺贝特组,0.04 g/kg),PTC小剂量组(0.005 g/kg),PTC中剂量组(0.05 g/kg),PTC大剂量组(0.25 g/kg).在以高脂饲料喂养5 wk开始,正常对照组和高脂血症模型组给以5 g/L羧甲基纤维素钠水溶液10 mL/kg体质量灌胃.其他实验组分别给以5 g/L羧甲基纤维素钠水溶液配成药物混悬液灌胃,每日一次.实验到10 wk后全自动生化分析仪测定各组动物血脂,HE染色做病理切片观察大鼠主动脉形态学变化,同时测定肝组织超氧化物歧化酶(SOD),过氧化氢酶(CAT)活性及抑制羟自由基(·OH)的能力.结果:原儿茶醛缩氨基硫脲铜(Ⅱ)配合物能使模型大鼠肝组织清除羟自由基(·OH)的能力提高(P＜0.01),SOD的活性增强(P＜0.01或0.05);各剂量组均有降低血清胆固醇和提高血清高密度脂蛋白(HDL-C)含量的趋势,但无统计学意义.结论:原儿茶醛缩氨基硫脲铜(Ⅱ)配合物在实验动物体内的确有清除超氧阴离子自由基(O2·-)和羟自由基(·OH)的双功能作用.     

五种维吾尔药的清除羟自由基及抗DNA损伤作用研究

目的　研究 5种维吾尔药的清除羟自由基 (· OH)及保护 DNA氧化损伤的作用。方法　采用现代生物化学发光分析技术 ,以 Cu SO4- Vit C- H2 O2 -酵母菌发光体系测定药材对· OH的清除作用。结果　研究表明 ,5种维吾尔药材对· OH具有不同程度的清除作用 ,并能保护 DNA的氧化损伤 ,而且它们清除· OH及抗 DNA氧化损伤的作用与它们的浓度之间存在正比性依赖关系。结论　 5种维吾尔药清· OH及抗 DNA损伤的作用可能是它们抗衰老、防治某些疾病的主要作用机制之一。     

抗坏血酸氧化酶及铜(Ⅱ)络合物催化抗坏血酸的有氧氧化

在生理pH下,研究了抗坏血酸氧化酶(AAO),Cu(Ⅱ)-白蛋白,Cu(Ⅱ)-甘氨酸及Cu(Ⅱ)催化抗坏血酸(AA)有氧氧化的动力学;用化学方法检测了催化反应过程中生成的·OH及C_2~-自由基。结果表明,在本实验条件下、AAO及Cu(Ⅱ)-白蛋白催化AA的反应中不产生活性氧自由基,其中,AAO催化AA的反应符合一般酶催化反应动力学机制;Cu(Ⅱ)-甘氨酸及Cu(Ⅱ)的催化反应过程中有·OH及O_2~-生成,其中·OH的生成速率方程符合d[OH]/dt=K"[N][AA]。     

壳聚糖硫酸酯的合成及其抑菌作用

以壳聚糖为原料,研究了合成壳聚糖硫酸酯的条件及其分子量对抑菌效果的影响。结果表明:改变反应温度可制备不同分子量的壳聚糖硫酸酯,并且其对金黄葡萄球菌、大肠杆菌有不同的抑菌效果。     

壳聚糖固定胰蛋白酶的研究

目的：从蟹壳中提取壳聚糖，将胰蛋白酶固定在从蟹壳中提取的壳聚糖上。方法：以自制壳聚糖为载体，戊二醛为双官能团交联剂，将胰蛋白酶固定化。结果：０．２ｇ壳聚糖（干）与４％戊二醛交联后再与５．０ｍｇ胰蛋白酶固定结合，效果较好。固定化酶的表现米氏常数Ｋ′ｍ＝１．５ｍｍｏｌ／Ｌ，而天然酶Ｋｍ＝７．６ｍｍｏｌ／Ｌ；固定化酶最适温度为８０℃，比天然酶提高了２０℃；固定化酶最适ｐＨ为７．０．而天然酶为８．０。该载体来源广，易提取，固定化酶的贮存稳定性很好，２个多月重复使用，酶活力未见明显下降     

壳聚糖的酶法降解

用壳聚糖酶降解壳聚糖,探讨了壳聚糖降解过程中温度、pH值、底物浓度和金属离子对酶促反应的影响。结果表明:酶促反应进行到5 h左右时,即可得到聚合度小于10的壳寡糖。该酶促反应的最适温度为50℃,最适pH=5.5;最适底物浓度为0.02 g/mL;金属离子Ca2+和Mg2+对酶降解有一定的促进作用,而Zn2+、Cu2+对酶降解有较强的抑制作用。该酶促反应符合米氏动力学方程,米氏常数Km=7.80 g/L,最大反应速率Vmax=7.72 g/(min.L)。     

呋喃甲酰壳聚糖的制备、表征及其抗氧化活性

以壳聚糖与呋喃甲酰氯反应得到呋喃甲酰壳聚糖。通过FT-IR、1H-NMR、X射线衍射、热重分析、溶解度实验、元素分析、抗氧化活性测试等手段对产物进行了结构和性能表征。结果表明：产物为目标产物且热稳定性好于壳聚糖;在水中的溶解性能良好,溶解度为0.04 g/mL;取代度为0.69;当对羟基自由基的清除率达到50%时,呋喃甲酰壳聚糖的质量浓度为 1.1 mg/mL,其还原能力随质量浓度增加而增强,抗氧化活性优于壳聚糖。     

羧甲基壳聚糖对钙离子的络合

目的 研究壳聚糖及其水溶性衍生物对钙离子的络合作用。方法 以氯化钙饱和溶液与羧甲基壳聚糖形成络合沉淀,离改后溶液用紫腺酸铵显色,分光光度法测定溶液中钙离子含量。结果 羧甲基壳聚糖对钙离子的格合能力随ＰＨ值的值大而增大,ＰＨ６～８时,络合程度趋于最双。温度升高时,络合程度下降。络合反应１０ｍｉｎ可达到平衡。羧甲基壳聚糖对钙离子的络合能力随着甲基以代度的增大而增大,且比水溶性低聚壳聚糖（壳寡糖）及壳聚     

微波合成羧甲基壳聚糖

介绍了在微波条件下，以氯乙酸为改性剂制备羧甲基壳聚糖。探讨了反应时间、投料比和多次羧化等工艺条件对壳聚糖羧甲基化程度及产物收率的影响，并对产物进行了红外光谱分析。确定了制备羧甲基壳聚糖的最佳反应条件：氨基葡萄糖单元：氢氧化钠：氯乙酸=1：20：12(摩尔比)，氨基葡萄糖单元：异丙醇=1：40(摩尔比)，w碱=0．45，碱化温度为30℃，碱化时间为1h，羧化时间为30min，羧甲基壳聚糖取代度和收率分别达到0．95和95％。研究了多次羧甲基化反应对羧甲基壳聚糖取代度的影响，其取代度可进一步提高到1．70。     

壳聚糖固定化胰蛋白酶的研究

目的虾蛄壳提取壳聚糖，将胰蛋白酶固定在该壳体聚糖上，方法以自制壳聚糖为载体，一氯醋酸为交联剂，将胰蛋白酶固定化，结果，固相酶的最适温度为５０℃，原酶为４５℃固相酶最适ｐＨ值为７．０，原酶为８．０，固相酶的表面米氏常数Ｋｍ＝１２ｍｍｏｌ／Ｌ，原酶Ｋｍ＝２３ｍｍｏｌ／Ｌ，结论该固定化酶活力较高，抗酸能力强，热稳定性和储存稳定性好，是良好的检验试剂。     

以甲壳胺为载体固定乙酰胆碱酯酶

目的 探讨以甲壳胺为载体固定乙酰胆碱酯酶的最佳条件及固定化酶的理化性质.方法 以戊二醛为交联剂,将乙酰胆碱酯酶固定在甲壳胺上,并分别测定固定化酶与溶液酶的活力.结果 固定化酶与溶液酶的最适温度相同,均为37℃;固定化酶与溶液酶最适pH分别为8.2、8.0;固定化酶在50℃仍有较高热稳定性,而溶液酶活力明显下降;固定化酶的米氏常数Km=0.84 mmol/L,溶液酶的Km=1.16 mmol/L;固定化酶活力回收为44.66%,在重复使用8次后仍能保持原有活力的50%.结论 该固定化酶与溶液酶相比,其热稳定性提高,与底物的亲和能力增大,且重复使用性较好.     

脱乙酰壳多糖的抗细菌感染作用

研究了脱乙酰壳多糖对细菌的抗感染作用。给昆明系小鼠腹腔注射壳多糖3次(每次剂量300 mR/kg 体重),然后以金葡菌或大肠杆菌进行腹腔感染。观察小鼠体重变化与死亡情况,并与对照组比较.结果接受壳多糖的小鼠体重增加,死亡数明显降低(P<0.05)。而体外试验表明壳多糖不能直接杀死细菌,说明壳多糖通过增强机体免疫功能而起抗感染作用.     

壳聚糖微囊的部分特性研究

以壳聚糖为主要材料,制备壳聚糖微囊。微囊直径在０．５－０．８ｍｍ间,微囊在ｐＨ４－１１的缓冲液中稳定,能耐受３０００ｒ／ｍｉｎ离心３０ｍｉｎ以上。用牛血清白和蛋白γ－球蛋白测其通透性,表明随着微囊所在溶液ｐＨ的升高,微囊通透性降低。壳聚糖的分子量在一定范围内对微囊通透性几乎无影响而脱乙酰度对通透笥影响很大。