骨髓增生异常综合征8三体频率的间期荧光原位杂交研究

目的应用间期荧光原位杂交(FISH)技术检测骨髓增生异常综合征(MDS)患者8号染色体三体(8三体)的发生率.方法采用荧光素SpectrumRed直接标记8号染色体着丝粒DNA探针,对66例MDS患者(病例具有连续性)和10例正常人的骨髓细胞进行间期FISH检测,并与常规细胞遗传学(CC)结果相比较.结果66例MDS患者中,间期FISH检测23例(34.8%)为阳性,而CC检测只发现其中15例为阳性.结论间期FISH在检测MDS患者8三体方面十分有用,是CC的一个重要补充.     

急性淋巴细胞白血病8号染色体三体

目的探讨急性淋巴细胞白血病(ALL)中8号染色体三体(8三体)的发生率。方法对87例ALL和8例正常对照骨髓细胞进行经典的细胞遗传学(CC)及红色荧光素Spectrum Red标记的8号染色体着丝粒α卫星特异DNA探针间期荧光原位杂交技术(FISH)分析。结果87例ALL中14例FISH检测为8三体,占16．09％,5例CC检测结果为8三体(5．75％,5／87);FISH还发现8三体／四体嵌合体1例,而CC仅检测到8四体。结论FISH检测8三体的敏感性高于常规核型分析,在小克隆检测方面有其优越性。     

荧光原位杂交技术及染色体核型分析在产前诊断中的应用

目的：探讨荧光原位杂交技术（FISH）及染色体核型分析技术在产前诊断中的应用价值。方法应用FISH 技术对未培养的羊水间期细胞进行13、16、18、21、X／Y 号染色体数目检测，同时对培养后的羊水中期细胞进行染色体核型分析。结果600例羊水标本 FISH 检测均得出结果，检测成功率为100％，FISH 检测出31例阳性结果，异常核型检出率为5．2％。600例羊水标本染色体核型分析中598例检测出结果，2例标本污染无法分析，检测成功率为99．7％。598例检测结果中阳性结果63例，异常核型检出率为10．5％。结论 FISH 检测羊水胎儿染色体非整倍体的方法过程简便、快速，成功率高，结论可靠。但只能检出特定染色体的非整倍体，应用有一定的局限性。与传统染色体核型分析技术相互联合、补充，可以更好地应用于产前诊断中。     

FISH技术在乳腺癌HER-2基因检测中的应用价值评估

目的研究荧光原位杂交(FISH)技术在乳腺癌人类表皮生长因子受体2(HER-2)基因检测中的应用价值。方法50例新发乳腺癌患者,采集乳腺癌标本,分别采用FISH技术和免疫组化(IHC)技术进行HER-2基因检测。观察IHC与FISH检测结果、FISH检测17号染色体多体发生情况。结果IHC结果为+++、++、+/0时,FISH与IHC检测结果的阳性符合率分别为87.50%、94.59%、20.00%,经一致性检验,IHC与FISH检测结果一致性较好(Kappa值=0.543,P<0.05)。IHC检测HER-2高表达(+++、++)患者中17号染色体多体发生率为17.78%,在HER-2低表达或无表达(+、0)患者中的多体发生率为20.00%,比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论FISH技术与IHC技术在乳腺癌HER-2基因检测中的一致性较好,17号染色体多体可能是导致IHC与FISH检测结果不一致的原因之一,FISH技术可以作为检测HER-2基因扩增的确诊手段在临床上应用。     

21／18／13三体综合征联合诊断试剂盒的临床分析

目的探讨21／18／13复合扩增试剂盒对21／18／13三体综合征个体的基因分型进行检测和诊断的可行性。方法本试剂盒选用荧光标记多重STR基因座复合扩增技术对基因DNA的20个STR基因座（2l号染色体上8个，18和13染色体上各6个）进行扩增。共检测了正常样本500例，阳性患者（41例21-三体，3例18三．体，2例13．三体）46例和高危孕妇羊水穿刺样本60例，并将检测结果与传统遗传学方法得到的结果进行比对，以验证试剂盒的有效性、结果准确性。结果正常样本检测结果正常；阻性样本结果符合预期，且与核型分析结果一致；高危样本筛选出1例阳性样本。结论该试剂盒能对每个三体样本进行有效检测，可用于21／18／13三体综合征的快速、准确的基因诊断。     

17号染色体基因拷贝数对评价乳腺癌患者HER-2基因状况的影响

目的探讨17号染色体的基因拷贝数对评价乳腺癌患者HER-2基因状况的影响。方法应用双色免疫荧光探针对294例免疫组化初筛的乳腺癌标本进行荧光原位杂交染色。采用HER-2基因拷贝数〉4的绝对计数法及HER-2基因拷贝数比值法判定HER-2基因状况。结果当HER-2基因与17号染色体基因拷贝数比值〉2时,45.24%（133/294）病例为阳性,绝对计数HER-2基因拷贝数〉4时,阳性率为46.9%（138/294）。两者比较无统计学意义。但比值〈2,绝对计数〉4和比值〉2,绝对计数〈4的病例中,阳性率分别为3.77%和6.91%（P〈0.05）。结论 FISH是比IHC更准确的方法。当17号染色体是异倍体时,导致17号基因拷贝数改变,降低了IHC检测的准确性。导致FISH绝对计数法在评价HER-2基因状况存在一定的偏差。而FISH比值法在17号染色体为异倍体时校正了17号染色体倍体的影响是最佳的评价方法 。     

常规R显带和FISH技术检测慢性淋巴细胞白血病染色体异常的价值

目的 研究FISH技术检测慢性淋巴细胞性白血病(CLL)染色体异常的价值.方法 用3、12、18号标记有不同荧光素的染色体着丝粒探针,用荧光原位杂交技术(FISH)检测25例CLL,并和常规细胞遗传学(Conventional cytogenetics,CC)检测方法即R显带法进行比较,以明确何种方法对CLL染色体异常检出更敏感可靠.结果 25例CLL患者中,常规细胞遗传学检出 3, 12, 18 5例,检出率为20%;其中: 12 3例, 3、 12 1例, 3、 12、 18 1例; FISH方法检出8例异常(32%), 3 4例; 12 6例; 18 1例.CC可检出不确定异常:t(5;15) 1例;3q-,18p 1例;4q 13q-1例; 19,-22 1例.结论 FISH方法是检测CLL患者染色体异常的有效技术,可提高染色体异常检出率,明显优于常规显带法.     

累及11p15上NUP98基因的急性杂合性白血病的临床遗传学分析

目的运用细胞遗传学和分子遗传学方法,阐明1例与NUP98基因相关的急性杂合性白血病的临床遗传学特点。方法采用骨髓直接法和短期培养法制备染色体,应用R显带技术进行核型分析;采用3号和11号整条染色体涂染探针进行染色体涂染;用地高辛标记的跨越NUP98基因的BACRP11-120E20探针进行间期和中期荧光原位杂交（FISH）检测。结果R显带分析显示47,XX,t（3;11）（q13;p15）,＋21;染色体涂抹证实3号和11号染色体之间发生了相互易位;间期和中期FISH均显示该染色体异常累及NUP98基因。结论识别一种累及NUP98基因的新的染色体易位,为下一步研究NUP98基因新的对手基因及其在白血病发病中的作用机制打下基础。     

8号染色体异倍体与FAK蛋白表达在胃肠道间质瘤中的研究及意义

目的探讨8号染色体数目异常与FAK蛋白表达在胃肠道间质瘤(GIST)中的关系及其与胃肠道间质瘤预后的关系。方法应用荧光原位杂交(FISH)技术检测石蜡包埋39例GIST中8号染色体的异常情况;免疫组织化学方法检测39例GIST中FAK蛋白的表达情况,结合GIST危险度分级方案进行分析。结果8号染色体发生多倍体者17例,单倍体4例,8号染色体异倍体与GIST复发和转移之间差异有统计学意义(P<0.05);8号染色体异倍体在高级别与低级别GIST间差异有统计学意义(P<0.05)。FAK阳性表达率为49%,与复发和转移之间分别比较差异有统计学意义(P<0.05),高级别GIST中FAK表达高于低级别GIST(P<0.05)。8号染色体多倍体与FAK蛋白阳性表达之间有相关性(r=0.385,P=0.016)。结论GIST中存在8号染色体的数目异常,多倍体多于单倍体,并且与GIST复发转移有关;8号染色体多倍体可能存在靶向基因FAK的位点,8号染色体异倍体与FAK蛋白表达可能是预测GIST复发转移的有用指标。     

高危骨髓增生异常综合征PTEN基因异常表达的临床意义

目的观察高危骨髓增生异常综合征（MDS）患者骨髓细胞中PTEN表达情况,探讨其在高危MDS患者临床病理意义以及与疾病转归的关系（相关性）,初步评价其对高危MDS的临床意义和判断预后的指导作用。方法采用免疫组化方法（S-P法）检测高危MDS 25例、良性血液病24例（对照组）患者的骨髓（病理石蜡切片）细胞中PTEN表达情况,并对25例高危MDS的治疗反应及疾病转归进行随访。结果高危MDS的PTEN阳性表达率为56.00%;对照组为90%;两者间差异有非常显著性（P〈0.01）。以PTEN表达水平标本积分判定≥3分为标准,设高表达组和低表达组：高表达组8例,低表达组17例。高表达组治疗反应率（有效率）62.50%（5/8例）;低表达组治疗反应率（有效率）47.06%（8/17例）,两者之间差异有显著性（P〈0.05）。25例高危MDS均行染色体核型分析,其中异常9例;正常16例;PTEN的表达水平与染色体核型异常无相关性。转急性白血病（MDS-AL）高表达组3/8例（37.50%）;低表达组11/17例（64.71%）。结论高危MDS存在PTEN基因表达的异常,PTEN表达与治疗反应有相关性,PTEN对于高危MDS的预后判断有一定的意义。     

慢性髓细胞白血病急变期细胞遗传学及分子遗传学研究

目的 研究慢性髓细胞白血病急变期（CML-BC）细胞遗传学及分子遗传学改变。方法 随机选取25例CML-BC病例,进行常规细胞遗传学分析,并同时以双色双融合荧光原位杂交（FISH）技术检测其染色体标本。对于FISH技术检测到的间期细胞中只有单个融合信号的标本,则观察其中期细胞,以明确是否为衍生9号染色体[der（9）]缺失。结果 在随机选取的25例CML-BC病例中有5例以检测存在der（9）缺失,而R显带在25例中均未发现der（9）的缺失。der（9）缺失的病例未显示出细胞遗传学上的不稳定趋势。CML-BC中具有新遗传学异常的病例其CML-BC较短。CML-BC急淋变与急非淋变病例中der（9）缺失概率无差异。结论 FISH技术可有效检测der（9）缺失。der（9）缺失与CML-BC中细胞遗传学上不稳定性无相关性,同时不导致CML向某一特定类型转化。     

骨髓增生异常综合征异常克隆分布及与外周血细胞变化的关系

目的探讨不同染色体异常的骨髓增生异常综合征（MDS）患者异常克隆在骨髓各细胞系列中的分布及其与外周血细胞变化的关系。方法对del（20q）,8号染色体三体和含有5q-复杂核型的MDS患者和核型正常者的骨髓涂片进行Wright-Giemsa染色,并行荧光原位杂交检测,统计其红系、粒系、淋巴系细胞的荧光信号后与临床指标相比较。结果异常克隆在MDS患者红系中的比例分别为92.4%、56.4%、57.6%、63.2%、60.2%;粒系中的比例分别为71.2%、68.1%、72.4%、44.4%和49.3%,均高于对照组;异常克隆在淋巴系中的比例除在病例2三体8的患者中高于对照组,其余均低于对照组。异常克隆分布在红系和粒系的患者,外周血细胞水平可表现为正常或降低（Hb48～132g/L,ANC0.38×109/L～2.60×109/L）。病例2三体8的患者外周血淋巴细胞比例较高。结论 MDS异常克隆主要分布于骨髓粒系和红系细胞,个别患者分布于淋巴细胞。异常克隆在骨髓细胞系列中的分布与外周血细胞变化无明显相关性。     

胃癌组织HER-2基因的检测用于靶向治疗

目的 荧光原位杂交（FISH）法与免疫组织化学（IHC）染色法检测胃癌组织HER-2基因状态,用于靶向治疗。方法 应用FISH法检测77例IHC染色法CerbB-2蛋白表达为（2＋）及（3＋）的胃腺癌标本中HER-2基因扩增情况。结果 FISH结果,22例HER（3＋）标本中,17例存在HER-2基因扩增,符合率77.3%：5例阴性病例中2例为多倍体,占40%。55例HER-2（2＋）的病例中,9例（16.3%）存在HER-2基因扩增,46例阴性病例中19例为多倍体,占41.3%。结论 对于IHC筛查HER-2（3＋）及HER-2（2＋）拟行靶向治疗的病例明确HER2基因状态,需进一步行FISH检测,同时要考虑l7号染色体多体的影响。     

hTERC基因在宫颈腺癌中的表达及临床意义

目的检测人类染色体端粒酶基因（hTERC）在宫颈腺癌组织中的表达情况,并进一步探讨hTERC基因在宫颈腺癌中异常扩增的临床意义。方法回顾性分析2000—2010年我院收治的15例宫颈腺癌患者的临床资料。应用荧光原位杂交技术（FISH）检测15例患者存档的病理石蜡切片标本中hTERC基因的扩增情况。同时取15例慢性宫颈炎组织作为正常对照,FISH检测其病理石蜡切片标本中hTERC基因的扩增情况。结果15例腺癌患者中有4例高危HPV病毒检测阴性。FISH检测15例宫颈腺癌的石蜡标本中的3号染色体hTERC基因15例均呈阳性表达,异常扩增阳性率为100％。宫颈炎对照组中未检测到hTERC基因异常扩增,异常扩增阳性率为0％。两组hTERC基因异常扩增阳性率相比差异有极显著性（尸〈0．01）。结论hTERC基因在宫颈腺癌组织中异常扩增,应用FISH技术检测宫颈腺癌中hTERC基因的表达,有助于临床早期诊断宫颈腺癌。     

66例成人骨髓增生异常综合征的诊断分析

目的进一步认识骨髓增生异常综合征（MDS）的临床和实验室诊断特点,提高诊断率。方法回顾性分析了本院收治的66例成人MDS患者的临床和实验室检查资料。结果66例患者中,3系均减少者36例、2系减少者21例,1系减少者9例。其中WBC增加者4例,PLT增加者6例,WBC和PLT均增加者1例。骨髓细胞学检查示增生活跃为51例,均有不同程度的病态造血表现,增生减低型MDS骨髓病理学较骨髓细胞学检测诊断率高。染色体核型异常检出4例（25％）,以RAEB居多。结论完善细胞学、骨髓涂片、病理学及遗传学的检查,对MDS的诊断、治疗方案和预后评估均具有重要的作用。     

多重荧光原位杂交检测多发性骨髓瘤复杂核型异常

目的探讨多重荧光原位杂交（M-FISH）技术在多发性骨髓瘤（MM）复杂核型异常（CCAs）检测中的价值。方法对5例常规R显带具有CCAs的MM患者应用MFISH确定复杂染色体的重排及标记染色体的组成。结粜明确了常规核型（CC）分析中的所有异常,共检出20种结构异常,其中缺失2种,易位18种,均为不平衡易位。最常累及的为14号染色体、1q的不平衡易位及6号染色体。结论对伴有CCAs的MM患者,M-FISH技术可以明确CC分析中复杂染色体异常,并发现和纠正CC分析中漏检及误检的异常,为MM的染色体异常研究提供了一种理想的方法。     

胃黏膜相关淋巴组织结外边缘区淋巴瘤t（11;18）（q21;q21）染色体易位分析

目的探讨胃黏膜相关淋巴组织（MALT）结外边缘区淋巴瘤t（11;18）（q21;q21）染色体易位的发生情况及相关临床意义。方法采用间期荧光原位杂交（FISH）方法对18例胃MALT淋巴瘤进行检测。结果 3例检测到t（11;18）（q21;q21）,发生率16.7%（3/18）。1例黏膜相关淋巴组织淋巴瘤易位基因1（MALT1）拷贝数增加,发生率5.6%（1/18）。结论 t（11;18）（q21;q21）是胃MALT淋巴瘤具有特异性的诊断指标,而间期FISH是检测t（11;18）（q21;q21）有效而可靠的方法。评估MALT1基因数目可能有利于预测胃MALT淋巴瘤患者的临床过程。     

应用荧光原位杂交技术进行产前诊断的可行性探讨

目的：探讨荧光原位杂交技术（FISH）应用于绒毛及羊水间期细胞进行产前诊断的可行性。方法 应用18、X号染色体着丝粒探针及21号染色体特定区域探针,分别对绒毛及羊水间期细胞进行荧光原位杂交,并与中期分裂相进行比较分析。结果 绒毛及羊水间期细胞均出现了杂交信号,万以绒毛细胞杂交比率高,信号强;常染色体探针出现3个及1个杂交点的比率约为1％和6％,X染色体探针出现3点的比例也在1％左右。结论 荧光原位杂交技术对检出染色体非整倍体有较强的特异性,同时也为染色体非整倍体的检出提供了诊断依据。FISH技术应用于产前诊断具有快速、简便、灵敏的优点,有较大的临床应用价值。     

PRINS技术在产前诊断21、18、13号染色体数目异常的研究及与FISH技术、羊水细胞培养技术的比较

目的：探讨引物原位标记（PRINS）技术在产前诊断21、18、13号染色体数目异常中的价值,并与FISH技术、羊水细胞培养技术进行比较。方法选择本院2008年1月~2010年12月期间收治的263例唐氏筛查高危和高龄孕妇为研究对象,所有孕妇均行PRINS技术、FISH技术检测和羊水细胞培养染色体核型分析。统计并比较两种技术在产前21、18、13号染色体数目异常中的检出率及检出时间。结果 PRINS技术检测产前21、18、13号染色体数目异常中的检出率为100%,与FISH技术检测和羊水细胞培养染色体核型分析相符合率100%,两组比较,且PRINS技术的平均检出时间均短于FISH技术（P〈0.05）。结论 PRINS技术在产前21、18、13号染色体数目异常中的检出率较高,且检出时间短,具有良好的应用价值。     

多发性骨髓瘤细胞遗传学研究

目的探讨传统的细胞遗传学检测方法与荧光原位杂交(FISH)技术在多发性骨髓瘤(MM染色体异常检测中的应用价值。方法应用RHG显带技术对MM患者的骨髓标本进行染色体核型分析,观察MM患者细胞遗传学异常的检测率;应用一组探针(P53、RB1、D13S319、IGH、1q21)和FISH技术检测MM患者的染色体异常,观察异常检出率。结果对108例患者采用常规法检出20例染色体异常(18.5%),应用FISH技术检测出51例异常(47.2%),其中P53阳性6例(5.6%),RB1阳性的34例(31.5%),D13S319阳性的32例(29.6%),IGH阳性的22例(20.4%),1q21阳性的36例(33.3%),复杂核型的35例(32.4%)。结论 FISH在分析MM染色体异常方面是一种较为快速、准确和敏感的方法。