心功能不全大鼠心肌诱生型一氧化氮合酶基因的表达

目的 探讨心功能不全大鼠心肌一氧化氮合酶（ｍｉｔｒｉｃ ｏｘｉｄｅ ｓｙｎｔｈａｓｅ,ＮＯＳ）活性变化的机制。方法 复制容量超负荷心功能不全大鼠模型,用原位核酸分子杂交技术检测心肌诱生型一氧化氮合酶（ｉｎｄｕｃｉｂｌｅ ｎｉｔｒｉｃ ｏｘｉｄｅ ｓｙｎｔｈａｓｅ,ｉＮＯＳ）ｍＲＮＡ的表达,用免疫组化技术检测心肌ｉＮＯＳ。结果 容量超负荷心功能不全大鼠心肌ｉＮＯＳ基因有达。结论 心功能不全心肌一氧化     

诱生型一氧化氮合酶与狼疮肾炎

诱生型一氧化氮合酶 (induciblenitricoxidesynthase,iN OS)是体内合成内源性一氧化氮 (nitricoxide ,NO)的三种同工酶之一 ,在某些细胞受到免疫或致炎因子刺激时被诱导表达 ,其催化合成的NO量多且维持时间较长 ,在参与机体免疫防御的同时可能对组织细胞造成一定的免疫损伤。近年来许多研究表明 ,iNOS及其催化合成的NO在狼疮肾炎 (lu pusnephritis,LN)的发生、发展中发挥着某些重要作用。本文拟对这方面的研究作一简要综述。1　iNOS分子生物学特性体内发挥生物学效应的NO分子由一氧化氮合酶 (nitricoxidesynthase,NOS)催化合成。迄…     

原发性肝细胞癌和癌旁组织中诱生型一氧化氮合酶的表达

目的 通过对原发生肝细胞癌（ＨＣＣ）和癌旁肝组织（ＰＣＨＴ）中诱生型一氧化氮合酶（ｉＮＯＳ）的定位、半定量研究，分析一氧化氮（ＮＯ）在这些组织中的生成情况及意义。方法 ＨＣＣ分级采用Ｅｄｍｏｎｄｓｏｎ′ｓ分级法。用免疫组化的方法对ｉＨＯＳ进行定位和半定量测定。采用秩和检验和ＳＡＳ软件进行统计学分析。结果 ｉＮＯＳ位于细胞浆／膜组化的方法对ｉＮＯＳ进行定位和半定量研究。采用秩和检验和ＳＡＳ软件进行统     

褪黑激素对应激性溃疡大鼠胃黏膜诱生型一氧化氮合酶表达的影响

背景胃黏膜诱生型一氧化氮合酶(iNOS)的过度表达在应激性溃疡的发生中起重要作用。目的研究褪黑激素(MT)对水浸鄄束缚应激大鼠胃黏膜iNOS表达的影响及其对胃黏膜的保护作用,以进一步阐明MT的作用机制。方法正常对照组不予水浸鄄束缚应激和MT预防,模型组和MT低剂量预防组、MT高剂量预防组于应激前30min分别腹腔注射含1%二甲基亚砜(DMSO)或MT5mg/kg、20mg/kg的等体积生理盐水。应激6h后处死动物,检测各组大鼠胃黏膜一氧化氮(NO)水平、iNOS蛋白和iNOSmRNA的表达,并评估胃黏膜损伤程度。结果水浸鄄束缚应激6h后,大鼠胃黏膜NO水平、iNOS蛋白和iNOSmRNA表达显著增加,胃黏膜病变明显。MT预防组大鼠胃黏膜NO水平、iNOS蛋白和iNOSmRNA表达均显著低于模型组(P<0.01),且溃疡指数(UI)显著下降(P<0.01)。MT高剂量预防组大鼠各检测指标均显著低于MT低剂量预防组(P<0.05),作用呈剂量依赖性。结论MT可预防水浸鄄束缚应激诱导的大鼠胃黏膜损伤,其机制可能与其抑制胃黏膜iNOS过度表达有关。     

诱生型一氧化氮合酶抑制剂对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的　探讨诱生型一氧化氮合酶抑制剂 (iNOSI)氨基胍 (aminoguanidine ,AG)对大鼠脑缺血 再灌注 (ischemia reperfusion ,IR)后期的保护作用。方法　采用Longa改良法 ,建立局灶缺血 再灌注模型。于再灌注即刻给予AG(10 0mg/kg ,每天两次 ) ,测定再灌注后不同时点 (6h ,12h ,2 4h ,48h ,72h ,7d)脑内NOS活性的动态变化及脑梗死体积 ,并对顶叶皮层半暗带区进行光镜下观察。结果　再灌注后 12h～ 72h ,AG治疗组NOS活性明显降低 ,梗死体积减小 ,光镜下病理学观察也表明 ,各时点AG治疗组顶叶皮层神经元变性数目及变性程度均减轻 ,微循环障碍也有不同程度缓解。结论　大鼠大脑中动脉闭塞 3h ,于再灌注即刻给予AG ,可使脑梗死体积缩少 ,使半暗带区神经元变性、微循环障碍程度减轻 ,起到对脑保护的作用。     

去甲肾上腺素预处理对大鼠供心热休克蛋白70、一氧化氮及一氧化氮合酶表达的影响

目的:探讨去甲肾上腺素预处理是否可诱导心肌热休克蛋白70(HSP70)的合成,并研究其对供心一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)的影响,探讨去甲肾上腺素预处理心肌保护作用机制。方法:Wistar大鼠18只,分为2组:对照组(C,n=9),腹腔注射0.9%氧化钠注射液0.5 mL,24 h后取离体心脏灌注(Histidine-tryptophan-ketoglutarte,HTK)心脏保护液,4℃保存3 h后建立Langendorff离体心脏灌注模型,灌注(Krebs-Henseleit,K-H)液2 h;实验组(E,n=9)腹腔注射重酒石酸去甲肾上腺素(溶于0.9%氯化钠液中)3.1μmol/kg(0.53 mg/kg),腹腔注射24 h后取离体心脏,处理方法同C组。测定心肌HSP70、NO、NOS的含量以及相关生化指标并做统计学处理比较。结果:HSP70含量E组较C组明显增高(P<0.01),NO、NOS的含量E组较C组明显增多(P<0.01),生化指标E组明显优于C组。结论:去甲肾上腺素预处理能诱导供心心肌组织HSP70、NO、NOS高表达,其对供心具有明显的保护效应,并且其促进心肌NO、NOS的表达,这可能是去甲肾上腺素预处理发挥供心保护作用的机制之一。     

急性心肌缺血大鼠诱生型一氧化氮合酶的检测

目的 观察诱生型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide sythase,iNOS)蛋白在心肌梗死后早期大鼠心脏的表达变化.方法 将12只大鼠随机分为心肌梗死组和假手术组.采用开胸结扎冠状动脉左前降支的方法建立心肌缺血模型,用免疫组织化学方法检测大鼠心肌梗死后24 h缺血心脏iNOS蛋白颗粒的表达.结果 在大鼠冠状动脉结扎后24h,梗死周围区心肌组织细胞出现大量iNOS蛋白表达,与假手术组相比差异有统计学意义(P＜0.01)假手术组未见iNOS蛋白表达.结论 正常心肌组织无iNOS蛋白表达,心肌梗死后早期缺血心肌组织检测到大量iNOS蛋白表达.     

热休克预处理对大鼠烧伤后急性胃黏膜损伤的保护作用

目的观察热休克预处理对严重烧伤大鼠胃黏膜的影响。方法热休克预处理诱导热休克蛋白产生,然后制作烧伤大鼠急性胃黏膜损伤模型,进行胃黏膜损伤指数评分。运用免疫组化方法,检测胃黏膜热休克蛋白的表达,并进行图像分析。结果热休克预处理组胃黏膜损伤积分显著低于对照组(P<0.01)。免疫组化分析显示其胃黏膜热休克蛋白表达较对照组明显增强(P<0.01)。结论热休克预处理对烧伤大鼠胃黏膜具有保护作用,其保护机制可能与热休克蛋白诱导表达增强有关。     

热休克蛋白72和诱导型一氧化氮合酶基因在体外循环术前后先天性心脏病患儿心肌的表达及其作用

目的研究热休克蛋白72(HSP72)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)在慢性缺氧型及非缺氧型先天性心脏病患儿体外循环术(CPB)前后的表达及其相关性;探讨HSP72和一氧化氮(NO)对缺血缺氧心肌的作用。方法在已确诊先天性心脏病(房间隔缺损、室间隔缺损、法洛四联症)住院患儿中,随机抽取18例分为慢性缺氧组[动脉氧饱和度(SaO2)<85%]及非缺氧组(SaO2>95%),每组9例。两组分别于CPB中主动脉交叉钳夹(ACC)前、CPB结束时收集患儿心肌标本保存在液氮中。试验采用半定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术测定心肌细胞中HSP72和iNOSmRNA的相对含量,比较两组心肌CPB前后HSP72和iNOSmRNA水平,并分析其临床意义。结果①与CPB术前相比,非缺氧组及慢性缺氧组HSP72mRNA水平均明显增高(P<0.05);CPB术前及术后,慢性缺氧组HSP72mRNA水平均明显高于非缺氧组(P<0.05)。②与CPB前相比,非缺氧组iNOSmRNA水平明显增高(P<0.05),而慢性缺氧组iNOSmRNA水平无明显变化(P=0.795);CPB术前及术后,慢性缺氧组iNOSmRNA水平均明显高于非缺氧组(P<0.05)。结论缺血应激上调了非缺氧型先天性心脏病患儿心肌组织HSP72、iNOS及慢性缺氧型先天性心脏病患儿心肌组织HSP72的基因表达,慢性缺氧应激也上调了慢性缺氧型先天性心脏病患儿心肌组织HSP72、iNOS的基因     

诱生型一氧化合酶在肝癌中表达的意义

为证实诱生型一氧化氮合酶（iNOS）在肝癌发生、发展中的作用,采用免疫组化方法对50例原发性肝细胞癌（HCC）及癌旁组织（PCHT）中的iNOS表达情况进行了检测。结果显示,iNOS位于肝细胞细胞浆／膜中,在HCC中的表达强度变化较大,在PCHT中呈强表达;正常肝组织中呈弱表达;淋巴细胞中无表达。证实iNOS的异常表达可导致HCC患者体内NO生成异常及机体对癌细胞的免疫异常。提示提高体内NO合成,可望提高HCC患者的抗癌能力。     

急性心肌梗死大鼠心脏一氧化氮合酶表达的改变

目的 通过建立大鼠心肌梗死模型，观察急性心肌梗死对大鼠心脏内皮型一氧化氮合酶mRNA和诱导型一氧化氮合酶蛋白表达的影响。方法48只健康成年SD大鼠（体重200～250g）随机分为假手术组和缺血组，取1、2、8和24h四个不同时间点观察。采用开胸结扎冠状动脉左前降支建立心肌缺血模型，逆转录聚合酶链反应检测大鼠心肌梗死后1、2及24h三个时段缺血心肌内皮型一氧化氮合酶mRNA的表达；免疫组织化学染色检测冠状动脉结扎后8h缺血心肌诱导型一氧化氮合酶蛋白的表达。结果冠状动脉结扎后2h，缺血组大鼠缺血心肌组织内皮型一氧化氮合酶mRNA表达下降（P〈0．05），并持续至结扎后24h；结扎后24h组内皮型一氧化氮mRNA的表达与结扎后2h组相比无显著性差异（P〉0．05）。冠状动脉结扎后8h，梗死区存活心肌组织细胞诱导型一氧化氮合酶蛋白大量表达，而假手术组未见诱导型一氧化氮合酶蛋白表达。结论正常大鼠心肌组织有内皮型一氧化氮合酶基因表达，无诱导型一氧化氮合酶蛋白表达。在心肌梗死早期缺血心肌内皮型一氧化氮合酶mRNA表达减少。心肌急性缺血刺激早期诱导大鼠缺血心肌组织诱导型一氧化氮合酶蛋白大量表达。     

阿霉素对大鼠心肌诱导型一氧化氮合酶mRNA表达的影响

目的研究阿霉素(ADM)对大鼠心肌诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA表达的影响。方法将雄性wistar大鼠24只,随机分为ADM组和对照组,每组12只,ADM组按每次给ADM 2 mg/kg腹腔注射,隔日一次共6次;对照组给等体积的生理盐水腹腔注射。于实验第30 天,应用生化方法测定心肌组织中的一氧化氮(NO)水平及iNOS的活性;用TUNEL法检测心肌细胞的凋亡指数;用RT—PCR方法检测心肌组织iNOS mRNA的表达。结果与对照组比较ADM组大鼠心肌组织NO、iNOS活性增加(P< 0.01),心肌细胞凋亡指数及iNOS mRNA的表达均显著增高(P< 0.01)。结论ADM能诱导大鼠心肌细胞iNOS mRNA表达增加,使NO合成增多,引起细胞凋亡而参与对心肌的损害。     

高碘对大鼠海马一氧化氮合酶蛋白表达的影响

目的：探讨高碘对大鼠学习记忆功能的影响和海马一氧化氮合酶（NOS）活性变化的关系。方法：采用Y－迷宫试验和免疫组化ABC方法对高碘大鼠海马内神经型一氧化氮合酶（nNOS)的变化进行研究。结果：高碘大鼠学习能力比对照组明显降低（P＜0．05）,高碘大鼠海马nmNOS阳性神经细胞数目较对照组明显减少（P＜0．05）,结论：高碘对大鼠学习记忆能力的影响与其海马nNOS阳性神经细胞数目减少有关。     

诱生型一氧化氮合酶在腹腔感染大鼠肝细胞中的表达

１　材料和方法１．１　材料　♂Ｗｉｓｔａｒ大鼠３０只（体质量２２０ｇ±２０ｇ）,１０周龄～１２周龄,由同济医科大学实验动物中心提供．标准致病菌（大肠杆菌ＡＴＣＣ２５９２２）,由美国菌种保藏中心提供．还原型辅酶Ⅱ（βＮＡＤＰＨ）与硝基四唑氮蓝（ＮＢＴ）为美国Ｓｉｇｍａ公司产品,多聚甲醛与ＴｒｉｔｏｎＸ１００为德国ＭＥＲＣＫ公司产品,余试剂为国产分析纯．１．２　方法　大鼠随机分为５组（每组６只）,其中正常对照组１组（组Ⅰ）,实验组４组,分别于术后２ｈ（组Ⅱ）,８ｈ（组Ⅲ）,２４ｈ（组Ⅳ）,４８…     

抑制诱生型一氧化氮合酶对大鼠心肌梗死后左心室形态及心功能的影响

目的 :探讨抑制诱生型一氧化氮合酶 (iNOS)对大鼠心肌梗死后左心室形态及心功能的影响。方法 :结扎大鼠左冠状动脉建立心肌梗死模型。免疫组化检测心肌iNOS表达水平。分别于心肌梗死发生前、心肌梗死 7d后开始iNOS抑制剂S methylisothiourea (SMT)干预 ,于心肌梗死 6周后测定血浆一氧化氮 (NO)、心肌iNOS表达、左心室形态变化和心功能。结果 :心肌梗死 6周后心肌iNOS表达增加 ,血浆NO水平上升。于心肌梗死发生前、心肌梗死 7d后开始SMT干预均可降低血浆NO水平 ,减轻心室扩张 ,减轻心室重量 ,改善心功能。心肌梗死发生前开始SMT干预尚可提高存活率。结论 :iNOS在心肌梗死后心功能障碍的发生发展过程中起促进作用 ,抑制iNOS可以改善左心室功能 ,其机制与减轻心肌梗死后左心室重构有关。     

BXSB小鼠肾组织诱生型一氧化氮合酶的异常表达及甲泼尼龙干预效应

目的探讨诱生型一氧化氮合酶(iNOS)是否参与介导BXSB小鼠狼疮肾炎(LN)及甲泼尼龙(MPS)是否可通过影响iNOS表达而缓解LN。方法用MPS对BXSB自发狼疮小鼠进行体内实验,利用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学技术研究了MPS对狼疮小鼠肾脏iNOS表达的影响,并观察了狼疮小鼠MPS治疗前后24h尿蛋白和NO3-/NO2-排泄量。结果BXSB狼疮小鼠肾组织检测到了iNOSmRNA的表达,而BALB/C小鼠未见表达;免疫组织化学示iNOS表达于BXSB小鼠肾小管上皮细胞、血管内皮细胞、肾间质及肾小球浸润的炎症细胞胞质内。MPS治疗组BXSB狼疮小鼠肾组织iNOSmRNA表达量显著低于未治疗组(P<0.01);治疗组24h尿蛋白及NO3-/NO2-排泄量显著低于未治疗组(P<0.01,P<0.05)。结论iNOS及其合成的一氧化氮(NO)可能参与介导了LN。MPS可能通过抑制肾组织iNOS的表达缓解LN。     

高温对老年小鼠腹腔巨噬细胞热休克蛋白及其它免疫指标表达的影响

目的　研究高温对老年小鼠腹腔巨噬细胞热休克蛋白 (HSP) 70、诱导性一氧化氮合酶 (i NOS)及其基因 (i NOS m RNA)表达的影响 ,探讨提高老年机体对缺血、缺氧及其它有害刺激的预适应能力及免疫调节能力的途径。方法　将小鼠分为实验组和对照组。采用免疫组化、组织化学、原位杂交及完整细胞斑点印迹技术检测 HSP70、i NOS及 i NOS m RNA的表达 ,对所有斑点印迹信号作薄层扫描 ,并用 t检验对扫描值进行统计学处理。结果　 HSP70、i NOS及 i NOS m RNA的表达实验组为 5.97± 2 .1 1、1 1 .0± 1 .2及 2 1 .4± 1 .8;对照组为 2 .1 4± 0 .76、7.3± 0 .7及 1 4 .4±1 .8;两组相比有显著差异 (P<0 .0 1 )。结论　高温对老年机体免疫调节及对有害刺激的预保护能力有促进作用。     

内皮型一氧化氮合酶在早期糖尿病大鼠肾组织中表达的定量研究

目的探讨早期糖尿病大鼠肾组织内N0含量变化与一氧化氮合酶（eNOS）表达之间的关系。方法健康雄性SD大鼠60只随机分成糖尿病模型（DM）组和正常对照（NC）组,每组30只。检测两组大鼠的生化指标,检测肾皮质内NO的含量用亚硝酸还原酶法,肾皮质eNOS的含量用Western blot法。结果与同期NC组比较,（1）第1、2、4周DM组大鼠血糖显著升高（P〈0．01）;（2）DM组肾组织内NO含量在第1周时下降（3．52±0．45VS4．23±0．38）,P〈0．01;第2、4周时显著升高（P〈0．01）,第4周时升高最为明显（9．82±0．54VS4．02±0．32）,P〈0．01;（3）Western blot分析显示eNOS含量在第1周时下降,第2～4周时逐渐升高。结论早期糖尿病大鼠肾组织内NO含量逐渐升高,eNOS逐渐增多,提示在糖尿病早期肾组织内N0含量升高主要由eNOS增加引起。     

替米沙坦对高糖高脂喂养大鼠一氧化氮和一氧化氮合酶的影响

目的 观察替米沙坦对高糖、高脂喂养大鼠血清一氧化氮(NO)和内皮型一氧化氮合酶(eNOS)的影响.方法 30只SD大鼠随机分为空白对照组、模型组和用药组,模型组和用药组给予高糖、高脂饲料喂养,用药组同时给予替米沙坦6 mg·kg-1·d-1灌胃10周.实验结束时测定NO、eNOS含量,取大鼠主动脉弓电镜观察.结果 模型组与空白对照组比较,NO明显降低(30.50±5.40和39.34±7.34,P＜0.01),eNOS明显降低(35.07±6.59和47.07±6.56,P＜0.01),电镜下可观察到内膜破损、内皮细胞脱落;用药组与模型组比较,NO升高(37.42±5.75和30.50±5.40,P70.05),eNOS明显升高(44.8±7.00和35.07±6.59,P＜0.01),电镜下可观察到内膜完整接近空白对照组.结论 替米沙坦可使高糖、高脂喂养大鼠NO和eNOS含量升高.