单纯疱疹病毒性角膜炎淋巴细胞活化状态与γ-干扰素、白细胞介素2水平关系的研究

目的检测复发性单纯疱疹病毒性角膜炎(HSK)患者外周血淋巴细胞亚群及淋巴细胞CD4/HLA-DR+、CD8+/HLA-DR+的表达,测定HSK患者血清中γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素2(IL-2)水平,研究HSK患者外周血淋巴细胞活化状态与血清中IFN-γ、IL-2水平的关系,探寻HSK复发的分子免疫机理,为临床治疗提供新思路。方法收集复发性单纯疱疹病毒性角膜炎病例22例,设置体检合格的健康人为正常对照组。取患者及正常对照组外周血,应用流式细胞技术对淋巴细胞亚群、淋巴细胞CD4+/HLA-DR+、CD8+/ULA-DR+的表达进行检测;ELISA双抗体夹心法检测患者血清IFN-γ、IL-2水平。结果(1)复发性单疱病毒性角膜炎患者外周血CD3+、CD4+细胞降低,CD8+、CD19+、CD16+56+细胞无明显变化,CD4/CD8降低,CD4+/HLA-DR+降低,CD8+/HLA-DR+升高,血清IFN-γ、IL-2水平降低,与正常对照组比较,差异有显著性意义(P<0.05)。(2)HSK患者CD4+细胞、CD4+/HLA-DR+表达的降低与血清IFN-γ、IL-2水平的改变呈正相关。结论复发性单纯疱疹病毒性角膜炎患者CD4+细胞、CD4+/HLA-DR+表达降低;IFN-γ、IL-2水平降低;CD4+细胞、CD4+/HLA-DR+、IFN-γ、IL-2与单纯疱疹病毒性角膜炎病情的发展、复发关系密切。     

CD4+CD25+T淋巴细胞在支气管哮喘患者外周血的表达及意义

目的 探讨外周血CD4+CD25+T淋巴细胞与支气管哮喘的关系.方法 用流式细胞术分别检测支气管哮喘患者34例(A组)和健康人25例(B组)外周血CD4+CD25+T淋巴细胞的百分率,采用ELISA法检测外周血血清白细胞介素10(IL-10)水平,用化学发光法检测外周血IgE水平,并分析CD4+CD25+T淋巴细胞与外周血IgE及IL-10水平的相关性.结果 A组外周血CD4+CD25+T淋巴细胞百分率显著低于B组[(5.90±1.10)%vs.(7.13±1.48)%](P<0.05),且与血IL-10呈正相关,与IgE呈负相关(P<0.05).结论 CD4+CD25+T淋巴细胞在支气管哮喘患者中高表达,与IL-10及IgE有一定的相关性,是参与支气管哮喘的发生、发展的重要T淋巴细胞.     

输血相关性肺损伤CD4+CD25+Treg细胞和IL-10表达与预后的关系

目的探讨输血相关性肺损伤CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)和白细胞介素-10(IL-10)表达与预后的关系。方法 60例急性脑梗死患者作为研究组,同时期健康体检者60例作为对照组,检测CD44+CD25+Treg表面分子T淋巴细胞毒性相关抗原4(CTLA-4)表达;CD4+CD25+Treg孵育液上清中IL-10水平。结果研究组CD4+CD25+Treg表面分子CTLA-4表达率、IL-10水平均高于对照组(P<0.05);多器官功能障碍综合征(MODS)组患者CTLA-4表达率、IL-10水平高于非MODS组(P<0.05);死亡组CTLA-4表达率、IL-10水平明显高于生存组(P<0.05)。结论急性脑梗死患者能够加强CD4+CD25+Treg表面分子表达,其大量分泌能够抑制细胞因子发挥相关,使得免疫功能发生障碍,还会影响免疫紊乱的发生及发展,与预后存在密切关系。     

肺癌患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞的检测及其临床意义

目的 探讨检测肺癌患者手术前后外周血CD4+CD25+调节性T细胞的临床意义.方法 原发性肺癌患者43例(肺癌组),健康体检者20例(健康对照组).应用流式细胞术检测其外周血CD4+CD25+调节性T细胞的水平.结果 肺癌组患者手术前外周血CD4+CD25+调节性T细胞表达高于健康对照组(P<0.01);肺癌组患者术后30 d时外周血CD4+CD25+调节性T细胞水平较术前明显下降(P<0.05).结论 肺癌患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞的水平增高;肺癌患者术后外周血CD4+CD25+调节性T细胞的水平下调,提示术后机体抗肿瘤免疫功能有了一定程度恢复.     

雷帕霉素诱导大鼠体内CD4+CD25+FoxP3+调节性T细胞的增殖

目的 探讨雷帕霉素(RPM)对大鼠CD4+CD25+FoxP3调节性T细胞的影响.方法 大鼠20只随机均分为两组:实验组RPM 2 mg·kg-1·d-1灌胃2周;对照组用生理盐水替代.无菌件下下腔静脉采血,并分离脾脏及胸腺,制备单个核细胞悬液.采用流式细胞术检测大鼠外周血、脾脏及胸腺内CD4+CD25+T细胞的占单个核细胞的比例,实时定量-PCR检测脾脏细胞FoxP3 mRNA表达,ELISA检测外周血血清转化生长因子β(TGF-13)和白细胞介素10(IL-10)含量.结果 实验组外周血、脾脏和胸腺中CD4+CD25+T细胞的比例明显高于对照组(P＜0.05).实验组大鼠脾脏细胞FoxP3 mRNA表达为对照组的4.1倍.实验组TGF-β和IL-10显著高于对照组(P＜0.05).结论 RPM能诱导大鼠体内CD4+CD25+FoxP3+调节性T细胞增殖,且增加体内免疫抑制性细胞因子TGF-β和IL-10的分泌.     

红芪总多糖对荷S180瘤小鼠的抑瘤作用及其机制的研究

目的研究红芪总多糖(THPS)单用及与环磷酰胺(CTX)合用对荷瘤小鼠的抑瘤作用,并探讨其机制。方法昆明种小鼠90只,随机分10只为正常对照组,其余80只小鼠接种S180瘤株后随机分为荷瘤对照组、CTX组、THPS高、中、低剂量[400、200、100mg/(kg.d)]组及各与CTX合用组共8组。正常对照组和荷瘤对照组给予生理盐水,其余各组给予相应剂量THPS及CTX治疗,观察肿瘤的体积变化。14d后处死小鼠,观察瘤质量、抑瘤率;血球计数仪检测外周血白细胞、血小板、红细胞及血红蛋白;流式细胞仪检测CD3+T细胞和NK细胞。结果与荷瘤对照组相比,中剂量THPS明显抑制小鼠S180瘤质量增长(P<0.01)及体积增加(P<0.05),提高NK细胞水平(P<0.05)。与CTX组相比,THPS与CTX合用后,各剂量组均能明显抑制CTX所致的白细胞数量下降(P<0.01);而只有中剂量的THPS与CTX合用能够降低肿瘤的质量(P<0.05),并能明显抑制CTX所致的CD3+T细胞(P<0.01)和NK细胞(P<0.05)数量下降。结论中剂量的THPS能抑制S180瘤生长,具有降低CTX免疫抑制和骨髓抑制的作用,其机制与提高T细胞和NK细胞介导的免疫应答有关。     

辅助性T细胞9在类风湿关节炎发病中的作用探讨

目的 探讨Th9细胞及相关细胞因子在类风湿关节炎(RA)中表达的改变及可能的机制.方法 采集20例健康人(HC)和20例RA患者(RA组)的外周血,用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清白细胞介素(IL)-9、IL-4、转化生长因子(TGF)-β和干扰素(IFN)-γ水平;流式细胞术检测Th9细胞数;实时定量PCR检测IL-9 mRNA、转录因子PU.1 mRNA,分析这些指标可能的相互关系.结果 RA组患者外周血中CD4+ IL-9+T细胞、CD4+ PU.1 +T细胞、CD4+ IL-9+ PU.1 +T细胞均缺如.细胞因子检测:IL-9水平在HC组为(1.24±0.44)×10-9 g/L,RA组为(1.33 ±0.53)×10-9 g/L(P =0.558);IL-4水平在HC组为(8.59±4.07) ×10-9 g/L,RA组为(5.95±5.73) ×10-9 g/L(P =0.101);TGF-β水平在HC组为(1238±329) μg/L,RA组(712±254) μg/L,(P=0.00);IFN-γ水平在HC组均低于检测水平,RA患者中5例IFN-γ水平升高.HC组IL-9 mRNA表达为(0.24±0.04),RA组为(0.24±0.02) (P =0.764);HC组PU.1 mRNA表达为(0.38 ±0.02),RA组(0.13±0.02) (P =0.000).结论 RA组患者外周血促Th9分化关键细胞因子水平降低.抑制其分化关键细胞因子平有所升高,导致PU.1 mRNA表达受抑,PU.1蛋白无法合成不能支持IL-9mRNA表达.RA患者外周血不存在Th9细胞分化条件,推测循环血Th9细胞可能不参与RA发病机制.     

白芍总苷对慢性非细菌性前列腺炎大鼠CD4+T淋巴细胞及IL-6的影响研究

目的:研究白芍总苷(TGP)对慢性非细菌性前列腺炎(CAP)大鼠前列腺组织中CD4+T淋巴细胞及白细胞介素-6 (IL-6)的影响及其对CAP的作用和机制。方法:将36只SD大鼠随机分为CAP对照组、TGP低剂量组、TGP高剂量组,每组12只。给药后观察大鼠前列腺组织的病理形态学变化;免疫组化法检测CD4+T淋巴细胞及IL-6在各组大鼠前列腺中的表达。结果:CAP对照组大鼠前列腺组织呈明显炎症状态,TGP低剂量组腺体结构改善,有少量炎症细胞浸润,TGP高剂量组炎症状态明显消退,只有极少量炎症细胞散在分布;与CAP对照组比较,TGP低、高剂量组CD4+T淋巴细胞及IL-6的表达均显著降低(P<0.05)。结论:TGP对CAP具有治疗作用,其机制可能是抑制前列腺组织中CD4+T淋巴细胞等炎症细胞的浸润,降低IL-6等促炎症细胞因子的过高表达。     

哮喘患者外周血单个核细胞CD4~+CD25~+调节性T细胞及IL-4分泌水平的检测

目的:探讨CD4+CD25+调节性T细胞在哮喘发病机制中的作用,为哮喘的临床治疗提供新的思路和方法。方法:分离哮喘患者和正常人外周血单个核细胞(PBMC),用流式细胞仪分析CD4+CD25+调节性T细胞在外周血单个核细胞中的比例;酶联免疫吸附法(ELASA)检测外周血PBMC培养上清IL-4的分泌状况。结果:哮喘组外周血CD4+CD25+调节性T细胞的百分率为(3.2±1.5)%,健康对照组为(6.5±2.5)%,哮喘组明显低于对照组(P<0.05);哮喘组外周血PBMC培养上清IL-4分泌水平为(57.3±13.5)ng/L,健康对照组为(28.6±7.2)ng/L,哮喘组明显高于对照组(P<0.05)。结论:CD4+CD25+调节性T细胞可能参与了哮喘的发生与发展。     

急性白血病患者CD4+CD25+FoxP3+调节性T细胞、IL-17和IL-23的表达及临床意义

目的观察急性白血病(AL)患者外周血中CD4+CD25+FoxP3+调节性T细胞比例、血清白细胞介素(IL)17和IL-23的表达及其临床意义。方法用流式细胞术测定25例AL患者[急性髓系白血病(AML)15例,急性淋巴细胞白血病(ALL)10例]和10例健康体检者(对照组)外周血中CD4+CD25+FoxP3+调节性T细胞比例,ELISA法测定血清中IL-17和IL-23的表达,分析其间的相关性。结果 AML患者组CD4+CD25+FoxP3+调节性T细胞比例显著高于对照组[(6.52±3.25)vs.(3.58±1.02)](P<0.05);AML和ALL组血清IL-17水平显著高于对照组[(7.21±2.00),(7.47±1.63)vs.(4.52±1.62)](P<0.05)。AL患者血清IL-17和IL-23水平显著正相关(P<0.05)。结论 CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞和IL-17细胞在AML的免疫功能抑制中可能有重要作用,而IL-17细胞在ALL的免疫功能抑制中可能产生作用。     

CD4^＋CD25^＋调节性T淋巴细胞在急性脑梗死患者外周血中表达的初步研究

目的初步探讨CD4^＋CD25^＋调节性T淋巴细胞在急性脑梗死患者外周血中的表达情况。方法采用流式细胞术分别检测取98例急性脑梗死患者和50名健康体检者外周血中CD4^＋CD25^＋T细胞所占比例,并用双抗体夹心法检测各组血清TGF-B、IL-10和IL-2。结果急性脑梗死患者外周血中CD4^＋CD25^＋T细胞水平显著高于对照组（P〈O．01）,血清中TGF-β、IL-10和IL-2显著高于对照组,差异有统计学意义（P〈0．01）。结论CD4^＋CD25^＋T细胞在急性脑梗死患者外周血中表达显著升高,血清中的相关细胞因子参与诱导CD4^＋CD25^＋T细胞的生成,提示CD4^＋CD25^＋T细胞可能参与了急性脑梗死的发生、发展。     

TF3-H4对CD4~+CD25~+调节性T细胞和CD4~+CD25~-效应性T细胞早期活化的影响

目的观察1',2',3',7'-四氢茶黄素-3,3'-双没食子酸酯(TF3-H4)对CD4+CD25+调节性T细胞和CD4+CD25-效应性T细胞早期活化的影响,分析TF3-H4对两群功能相反的CD4+T细胞的作用。方法免疫磁珠分离BALB/c小鼠脾脏CD4+CD25+调节性T细胞和CD4+CD25-效应性T细胞,加入ConA或PDB,和TF3-H4共同孵育12 h后收集细胞,流式细胞仪分析细胞表面早期活化标志CD69的表达。结果在ConA和PDB的作用下,两群细胞早期活化标志CD69的表达均升高。TF3-H4(20 mg.L-1)不能抑制PKC激动剂PDB激活的CD4+CD25-效应性T细胞CD69的表达,却能抑制ConA激活的CD4+CD25-效应性T细胞CD69表达;同时,TF3-H4也能明显抑制ConA激活的CD4+CD25+调节性T细胞的CD69表达。结论茶黄素衍生物TF3-H4可能经由TCR活化途径的上游抑制CD4+CD25-效应性T细胞活化;TF3-H4对CD4+CD25+调节性T细胞和CD4+CD25-效应性T细胞早期活化的抑制作用,可能是该类化合物发挥抗炎、抗肿瘤作用的机制之一。     

Deferiprone modulates in vitro responses by peripheral blood T cells from control and relapsing-remitting multiple sclerosis subjects

T cells are important mediators of autoimmune inflammation in relapsing–remitting multiple sclerosis (RRMS). Previous studies found that deferiprone, an iron chelator, suppressed disease activity in a mouse model of multiple sclerosis, and inhibition of T cell proliferation was implicated as a putative mechanism. The objective of the present study was to examine the effects of deferiprone on suppressing in vitro responses of T cells from control and RRMS subjects. Peripheral blood T cells were co-stimulated with anti-CD3+anti-CD28 and cultured with or without interleukin 2 (IL-2). Proliferating CD4+ T cells from control and RRMS subjects, cultured with or without IL-2, decreased in response to 75 μM deferiprone, although the extent of decreased proliferation of CD4+ T cells from RRMS subjects was less than for control subjects. Proliferating CD8+ T cells from control subjects, cultured with or without IL-2, also decreased in response to 75 μM deferiprone, and this decrease was seen in proliferating CD8+ T cells from RRMS cultured with IL-2. CD4+CD25+ and CD8+CD25+ cells from control subjects, cultured with or without IL-2, declined in 75 μM deferiprone, but the decrease was smaller than for the CD4+ and CD8+ proliferative responses. CD4+CD25+ and CD8+CD25+ cells from RRMS subjects showed more variability than for control subjects, but CD4+CD25+ cultured with IL-2 and CD8+CD25+ cells cultured without IL-2 significantly declined in 75 μM deferiprone. CD4+FoxP3+ and CD4+CD25+FoxP3+ cells tended to remain constant or increase. In summary, deferiprone induced declines in proliferative responses at a dosage that is within peak serum pharmacological concentrations.     

单子叶植物内生菌多糖抗肿瘤免疫机制的研究

目的:研究单子叶植物内生菌多糖抗肿瘤活性免疫机制。方法:用MTT法检测单子叶内生菌多糖对荷瘤小鼠淋巴细胞上清中TNF-α、IL-2、IL-3活性的影响;用RT-PCR和凝胶图像吸收度分析系统检测IL-2mRNA、IL-3mRNA、TNFmRNA表达的影响。结果:单子叶植物内生菌多糖可提高荷瘤小鼠体内中的TNF、IL-2、IL-3含量显著明显增高(P<0.01或P<0.05)并使荷瘤小鼠巨噬细胞TNFmRNA和淋巴细胞IL-2、IL-3mRNA表达水平明显增强(P<0.05)。结论:单子叶植物内生菌多糖抗肿瘤活性机制可能与增强机体抗肿瘤免疫功能密切相关。     

木瓜苷对环磷酰胺增强的小鼠接触性超敏反应的影响(英文)

目的　探讨胸腺在环磷酰胺 (Cy)增强的小鼠接触性超敏反应 (CHS)中的作用及木瓜苷 (GCS)对胸腺T淋巴细胞亚型的影响。方法　采用了 2 ,4 二硝基氟苯 (DNFB)诱导小鼠CHS模型及Cy诱导小鼠增强CHS模型 ,检测ConA诱导的小鼠脾脏T淋巴细胞增殖、胸腺T淋巴细胞亚型和ConA诱导的胸腺T淋巴细胞培养上清中TGF β1,IL 4和IL 2水平。结果　小鼠CHS模型中 ,ConA诱导的脾淋巴细胞增殖增强 ,CD4 +CD8+双阳性胸腺T淋巴细胞比例增加 ,胸腺细胞产生的Th1和Th3型细胞因子IL 2和TGF β1水平增高而Th2型细胞因子IL 4水平降低。DNFB初次致敏前 3d腹腔注射Cy (2 5 0mg·kg- 1)可以增强CHS反应。GCS(12 0和 2 4 0mg·kg- 1)连续灌胃 12d可以提升Cy增强的小鼠CHS胸腺T淋巴细胞中CD4 - CD8- 和CD4 +CD8- 细胞比例 ,降低CD4 +CD8+细胞比例 ;并提高胸腺淋巴细胞培养上清中IL 4水平 ,降低IL 2和TGF β1水平。结论　GCS对Cy增强的小鼠CHS有明显抑制作用 ;可有效调节小鼠胸腺CD4 /CD8和Th 淋巴细胞亚群及细胞因子产生平衡。     

IL-2对复发性口腔溃疡患者细胞免疫功能的调节作用

目的　探讨复发性口腔溃疡 (RAU)中的免疫学机制和小剂量IL 2的治疗效果。方法　采用FACS行外周血淋巴细胞表面白细胞介素 2受体 (interleukin 2receptor ,IL 2R)及表型分析 ,以MTT法检测T淋巴细胞的增殖能力 ,用ELISA法检测T淋巴细胞分泌细胞因子的水平 ,重组人IL 2 (rhIL 2 )隔日皮下注射 ,并观察其治疗效果。结果　发现RAU患者外周血中的CD3+、CD4+淋巴细胞和NK细胞数量减少 ,CD8+淋巴细胞数量正常 ;T细胞对其丝裂原诱导的增殖能力和分泌IL 2、IFN γ的水平均降低 ,T细胞表面IL 2R也减少 ,经IL 2治疗一疗程后 ,能显著改善上述免疫指标。结论　T细胞免疫功能低下可能是RAU发病和影响创面愈合的关键因素 ,小剂量IL 2治疗能调节机体免疫功能 ,有效地治疗RAU。     

翡翠贻贝多糖对荷瘤小鼠的抗肿瘤和免疫功能调节作用

目的观察翡翠贻贝多糖（PVPS）对荷瘤小鼠肿瘤生长及免疫功能的影响。方法建立小鼠移植性S180实体瘤模型,观察PVPS对荷瘤小鼠的抑瘤率及对T淋巴细胞增殖能力、白介素2（IL-2）等指标的影响。结果PVPS可明显抑制荷瘤小鼠S180实体瘤的生长（P〈0．05orP〈0．01）,提高T淋巴细胞增殖能力和IL-2的产生（P〈0．01）。结论PVPS可显著抑制荷瘤小鼠肿瘤的生长,并能增强荷瘤小鼠的免疫功能。     

同种移植排斥反应中T细胞间接识别途径作用的研究

目的　CD+ 4T细胞通过间接识别途径识别MHC Ⅰ类移植抗原而活化已在离体实验中得到证实 ,但体内实验尚未见报道。方法　bml小鼠 (H 2Kbm1∶Kbm1,Db,Ⅰ Ab)的皮肤片分别移植到①B6小鼠 (H 2 b∶Kb,Db,Ⅰ Ab,n =8) ;②B6CD / 8小鼠 (H 2 b∶Kb,Db,Ⅰ Ab,CD / 8,n =8) ;③用抗CD4 抗体处理的B6CD / 8小鼠体上 (n =8)。观察移植皮肤的生长时间 ;用流式细胞仪 (FACScan)观察各组小鼠内T细胞亚群的变化。各组数据用分组或配对t检验进行数据统计。结果　尽管CD / 8小鼠体内未发现CD+ 8T细胞存在 ,但很快排斥了bm1皮肤移植片 (2 1 9d± 1 9d) ;而用抗CD4 抗体处理的B6CD / 8小鼠却长时间接受bm1皮肤移植片 (>47 5d± 3 8d) ;用流式细胞仪发现CD+ 4T细胞明显增殖活化并被抗CD4 抗体抑制。结论　CD+ 4T细胞通过间接识别途径活化并导致同种相异MHC Ⅰ类移植物的排斥。