成人急性髓细胞性白血病细胞遗传学和分子遗传学的初步研究

目的：了解成人急性髓细胞性白血病（AML）染色体及相关融合基因的变化和意义。方法：95例AML患者采用直接法及24h培养法制备染色体,同时实时定量逆转录聚合酶链反应技术（RQ—PCR）检测t（8;21）易位的AMl。1／ETO融合基因及t（15;17）易位的PML／RAR~融合基因。结果：95例AMI。患者中异常核型48例（50．5％）,各亚型的异常率为：M3 88．5％,M2 44．7％,M4 21．4％,M1 50．0％,M5 16．7％。最常见的数目异常为＋8染色体4例（8．3％）,最常见的结构异常为t（15;17）21例（45．9％）,t（8;21）16例（33．3％）,QT—PCR检测M2、M3相关的融合基因AML1／ETO及PML／RARa均发现了隐匿易位及变异易位。结论：成人AML进行染色体分析及融合基因的检测,有助于AML诊断及亚型之间的鉴别诊断,有助于判断预后及治疗选择。     

成人急性淋巴细胞白血病的MIC分型与临床预后分析

分析成人急性淋巴细胞白血病（ALL）的MIC：分型与临床及预后的关系。方法：40例ALL。患者按常规骨髓涂片及细胞化学染色进行形态学分析，并用单克隆抗体间接免疫荧光法检测细胞免疫表型，用R显带技术分析13例的细胞遗传学。结果：FAB分型ALL-LI型3例，L2型35例，L3型2例。细胞免疫表型符合T细胞系ALL13例（伴髓系表达2例），B细胞系ALL21例（伴髓系表达4例），T／B细胞系共同表达ALL5例（伴髓系表达1例），未分化型急性白血病1例。13例中有8例核型异常。结论：ALL患者形态学检查结合免疫学和细胞遗传学综合分析，有利于明确白血病细胞克隆的来源，有利于估计预后，并指导治疗。     

t(8,21)易位急性髓细胞性白血病免疫学表型分析

用流式细胞仪检测21例t（8；21）易位急性髓细胞性白血病细胞的免疫学表型，并与无t（8；21）易位急性髓细胞白血病（M2）病人比较．结果：t（8；21） 组与t（8；21）-组CD1，阳性率分别为62％、9％（P＜0．01）．CD34阳性率分别为76.2％、36％（P＜0．05），t（8；21） 组中皆无表达CD7，而t（8；21）-组中CD7阳性率为27．2％（P＜0．05）；两组间CD15、CD13、CD33、CD10表达无显著差异．提示t（8；21）急性髓细胞白血病有独特的免疫学表型特点，对形态学分类法难以分类的急性白血病诊断有一定的价值．     

急性髓细胞白血病M2型AML1-ETO融合转录本的检测

目的：探讨检测AML1－ETO融合转录本在t（8;21）急性髓细胞白血病M2型M2／t（8;21）的临床诊断和预后判断中的意义。方法：用G显带技术对初治M2患者作染色体核型分析,用半筑巢式逆转录聚合酶链反应（RT／PCR）技术检测AML1－ETO融合基因转录本。结果：14例初治M2中共检出9例存在AMLI-ETO融合基因转录本,阳性率为64．3％。细胞遗传学技术证实9例均有t（8;21）易位;5例为阴性,均无t（8;21）易位;4例伴t（8;21）易位患者在处于完全缓解后5～72月,RT／PCR结果仍持续阳性。结论：应用筑巢式RT／PCR技术近似半定量检测AMLI－ETO融合转录本,对M2／t（8;21）的诊断和预后判断具有重要临床价值。     

伴t（8；21）（q22；q22）易位的儿童急性双表型白血病的生物学特征

目的探讨伴t（8;21）（q22;q22）易位的儿童急性双表型白血病（BAL）的生物学特征。方法分析7例伴t（8;21）（q22;q22）易位的儿童BAL,取同期诊断的30例t（8;21）阴性的急性髓细胞性白血病（AML）患儿作为对照组,分析其骨髓细胞形态学、细胞免疫学表型、细胞遗传学、分子生物学（MICM）特征。结果7例伴t（8;21）（q22;q22）易位的儿童BAL占同期连续190例急性髓细胞性白血病（AML）的3．7％。骨髓细胞形态学均显示为AML-M2,分类中原始细胞均显著增多（均P〈0．01）;免疫表型均为髓细胞系伴B淋巴细胞系表达;CD34为高表达阳性;均有t（8;21）（q22;q22）染色体改变,且常伴有染色体复杂易位或缺失等改变;融合基因AMLl／ETO检测均为阳性;7例患儿经治疗后完全缓解（CR）率71．4％,对兼顾AML和急性淋巴细胞白血病（AIJL）的联合治疗方案效果较好。结论BAL是急性白血病的一种亚型,其预后不良可能与染色体异常发生率高、CD34高表达阳性有关,对于BAL采用兼顾AML和ALL的联合治疗方案可提高其疗效。     

慢性和急性髓细胞白血病伴特异性染色体患者的细胞形态学特征

目的 分析174例初发急性和慢性髓细胞白血病,包括急性原始粒细胞白血病部分分化型（M2b）,急性早幼粒细胞白血病（M3）和慢性粒细胞性白血病（CML）患者细胞形态学特征。方法 采用细胞形态学（M）结合细胞遗传学（C）和分子生物学（M）检查方法检测患者骨髓标本。结果 细胞形态学特征：25例M2b为异常中幼粒细胞增生,28例M3为异常早幼粒细胞增生,121例CML为粒系细胞增生。染色体及融合基因检测表明：M2b、M3、CML分别与各自特异性染色体及融合基因t（8;21）（q22;q22）／AML1-ETO、t（15;17）（q22;q21）／PML-RARd、t（9;22）（q34;q11）／BCR—ABL密切相关。结论 ①M2b、M3、CML这3种白血病患者在细胞形态学上都有各自一定的特征。②3种白血病分别与特定的染色体及融合基因具有一定的相关性。③特定的染色体和融合基因作为白血病的标记物,对白血病的诊断、预后估计、监测治疗和微小残留白血病等都具有一定价值。     

53例急性白血病的免疫表型分析

目的 探讨急性白血病（AL）的免疫表型特征。方法 采用流式细胞仪对53例初治急性白血病进行免疫表型分析。结果 20例急性髓细胞白血病（AML）患者均表达两种以上髓系抗原,其中7例伴有淋系抗原（CD19、CD7）表达。32例急性淋巴细胞白血病（ALL）患者中28例表达淋系抗原,16例表达伴有髓系抗原（CD13、CD33、CD15）;4例ALL患者为纯髓系表达（ALL23例,ALL31例）。2例混合型白血病（AMLL）同时表达两种以上淋系和髓系抗原标志。结论 白血病细胞具有高度异质性;免疫分型能确诊一些特殊类型的白血病（Mo,AMLL）,在急性白血病的诊断分型、治疗、预后判断具有重要价值;免疫分型是对细胞形态学诊断急性白血病的重要补充。     

舟山地区94例急性白血病免疫分型分析

目的研究舟山海岛地区急性白血病表面抗原表达和免疫亚型分布情况。方法采用CD25侧散射（SSC）设门方法对94例白血病患者进行白血病细胞表面分化抗原分析。结果94例急性白血病分型可分为3型：急性淋巴细胞白血病（ALL）占31．91％（30例）,急性髓细胞白血病（AML）占65．96％（62例）,急性杂合型白血病占2．13％（2例）。在62例AML中CD13和/或CD33最常见,有20例表达淋系标记：30例ALL中CD3、CD19最常见,有15例表达髓系标记。结论免疫分型能提高急性白血病诊断的准确性,对急性白血病的治疗和判断预后有重要作用。     

从核型演变探讨骨髓增生异常综合征的发病机制

目的：探讨骨髓增生异常综合征（MDS）的染色体异常及其演变在揭示MDS的发病机制、白血病转化和评估MDS预后中的意义。方法；77例MDS核型分析应用骨髓细胞短期培养方法和染色体G显带技术。结果：77例中，40例（52％）有克隆性染色体异常。RAEB和RAEB－T的模型异常发生率分别为12／20、10／14，明显高于RA和RAS（分别为15／37、2／5，P＜0．05）。按染色体异常发生频率的多少依次为：＋8、－7／7q-、5q-、-Y、20q-、＋9、＋21、dup（1q）、i（17q）和＋19。核型异常者进展为白血病的危险性明显高于核型正常者，生存期也明显缩短（P＜0．05）。复杂异常核型者预后最差。结论：MDS的骨髓染色体分析对研究其病因、明确诊断、分型和预后评价有重要的价值。     

1O例急性混合性白血病实验室诊断分析

目的评价细胞形态、细胞化学染色、细胞染色体核型、免疫分型等实验室指标在急性混合性白血病（HAL）中应用。方法回顾性分析10例急性粒淋混合性白血病患者资料,并对其细胞化学染色、免疫分型、染色体核型等结果进行分析。结果按细胞形态及细胞化学染色可将10例患者分为HAL4例,ALL3例,M12例,M2／M41例;染色体核型分析中,有4例发生核型异常,其中染色体易位3例,染色体丢失1例;免疫表型分析中,同时表达My＋／B—Ly＋者6例,My＋/T-Ly＋双表达4例。结论细胞形态、细胞化学染色、染色体分型作为HAL诊断的常用实验室指标,其特异性较低;而免疫分型是以细胞分化抗原作为检测导向,具有很高的特异性,可作为HAL的诊断和鉴别诊断的主要检测手段。     

Terminal deoxynucleotidyl transferase in various immunophenotypic cells in leukemia]

The staining results of terminal deoxynucleotidyl transferase (TdT) in leukemic cells of peripheral blood or bone marrow in 55 patients showed that 22 (40%) patients were found positive for TdT staining: 17 patients with acute lymphoblastic leukemia (ALL), 2 acute non-lymphocytic leukemia (ANLL) and 3 hybrid acute leukemia (HAL). The positive rate of ALL (17/21) was significantly higher than that of ANLL (2/21, P < 0.005). The leukemic cells of HLA-DR+CD19+TdT- were demonstrated to express some of myeloid restricted antigens (HI98, HIM 4, HIM 5) (3/3), which suggested that these cases were leukemias of myeloid origin. None of the 8 patients with M 0/M 1 ANLL was positively stained for the enzyme. Our results showed that TdT detection is of great value in the diagnosis and differentiation of both poorly differentiated and hybrid acute leukemia.     

累及单核细胞系急性白血病的免疫表型和遗传学研究

目的　探讨急性髓系白血病-M4、M5亚型的细胞遗传学、免疫表型特征。方法　应用染色体G显带、间期荧光原位杂交技术和流式细胞术对30例M4、M5患者进行遗传学分析和免疫表型检测。结果　染色体分析:30例M4、M5中共发现13例伴有11q2 3染色体异常,总发生率为4 3 3% ,其中M5a 1例、M5b 8例、M4b 4例,异常核型有6种:t (11;19) 4例;t(11;17) 2例;t(9;11) 2例;t(10 ;11) 1例;t(6 ;11) 1例;t(11;?) (q2 3;?) 1例;del(11)(q2 3) 2例。I-FISH检测MLL基因异常共13例阳性,其中M5 8例,M4 5例。免疫表型检测各种抗原阳性率依次为HLADR(92 % ) ,CD33(92 % ) ,CD6 4 (85 % ) ,CD11b(80 % ) ,CD15 (79% ) ,CD117(79% ) ,CD13(6 9% ) ,CD34(6 1% ) ,CD5 6 (38 5 % ) ,CD14 (31% ) ,CD3(14 % ) ,CD2 (7% ) ,CD7(7% )。结论　11q2 3异常在AML -M5 /M4中发生率高,该组患者高表达早期干祖细胞标志CD34、CD117、HLA -DR ,具有独特的遗传学、免疫学特点。     

老年急性白血病的临床特点与疗效观察

目的：研究老年急性白血病的临床特征，寻求治疗老年急性白血病的有效策略，提高老年急性白血病患者的生活质量。方法：回顾性分析69例老年急性白血病的临床表现，实验室检查特征和不同化疗方案的疗效。结果：联合化疗35例，总完全缓解（CR）率42．9％（15／35），其中急性非淋巴细胞性白血病（ANLL）26例，CR率42．3％（11／26）；急性淋巴细胞性白血病（ALL）9例，CR率44．4％（4／9）。小剂量阿糖胞苷（Ara-C)或三尖杉脂碱（H）化疗18例，CR率22．2％（4／18）。全反式维甲酸（ATRA）治疗4例，4例CR。姑息治疗12例。结论：老年急性白血病临床上有其特殊性，对化疗反应差，CR率低。对老年急性白血病应选择积极、合理、个体化的化疗方案，并进行综合治疗，有利于提高老年急性白血病的疗效。     

双表型急性白血病临床治疗分析

目的:探究双表型急性白血病临床治疗效果的分析。方法:对我院66例急性白血病患者进行MIC分型,采取流式细胞仪分析急性白血病的免疫表型,根据EGIL标准诊断为双表型急性白血病。结果:①双表型急性白血病较成年男性为多见,平均WBC为(48.0±75.6)×10~9L;②BAL以同时表达出髓系和B系抗原者最常见,占68.2%;③正常核型24例(36.4%),异常核型42例(63.6%),主要为Rh阳性异常④51例患者行联合化疗法,完全缓解(CR)35例(68.6%)。讨论:双表型急性白血病发病率较小,但是一旦发病,治疗效果差,生存期短。     

间期荧光原位杂交检测核心结合因子相关急性白血病的初步研究

目的 应用间期荧光原位杂交技术(I-FISH)检测初诊急性白血病患者中核心结合因子(CBF)受累的染色体异常情况并对治疗后患者的微小残留病(MRD)进行监测，同时对I-FISH与常规染色体G显带的灵敏度进行比较。方法在骨髓形态学初筛的基础上，应用常规染色体G显带技术对15例急性髓系白血病(AML)进行核型分析，应用I-FISH对患者可能受累的CBF相关靶基因进行检测，其中7例患者治疗后进行了MRD监测。结果(1)正常对照组中，CYTOCELL公司提供的3种探针(AML1／ETO易位探针、MYH11基因断裂点双色探针和ETV6／AML1易位探针)的正常分界值分别为4．13％、1．95％和2．12％。(2)常规染色体G显带分析，15例患者中有6例伴有潜在累及CBF基因的染色体异常，其中8例AML-M2中5例伴t(18；21)，2例AML-M4EO中1例伴inv(16)，5例儿童B系急性淋巴细胞白血病(B—ALL)未检出相应的异常。I-FISH检测15例患者发现有12例累及CBF基因，其中8例AML-M2患者均为AML1/ETO融合基因( )，2例．AML-M4EO病人CBFμ／MYH11融合基因均为( )，5例儿童B-ALL，中2例ETV6／AML融合基因( )。(3)3例AML-M2患者中2例MRD阳性；2例M4EO患者治疗后MRD监测结果均阴性；2例B-ALL患者l例阴性m1例阳性。结论 I-FISH较常规染色体G显带技术能够更灵敏地检测出累及CBF的急性白血病。在初诊时联合应用这两种方法能使结果更趋全面和准确。     

长期生存急性白血病38例临床及预后因素分析

目的:总结分析收治的长期生存38例急性白血病(AL)患者的临床情况,并探讨其影响预后的多种相关因素。方法:分析1981年~1994年958例中长期生存10年以上38例AL患者的临床及实验室资料。结果:38例生存10年以上者,ANLL26例(M2 12例,M3 13例,M4 5例,M5 5例),ALL 12例(L1 5例、L2 7例)。最大年龄47岁,30岁以上仅4例。达完全缓解时间较短,完全缓解后坚持强化,化疗时间为3~5年。结论:白血病细胞类型、达初次缓解的疗程和时间、年龄、个体化治疗是影响急性白血病患者生存的重要原因。     

CD56和CD64高表达对成人AML1/ETO+白血病患者长期生存的影响

目的 探讨CD56和CD64对成人AML1/ETO+急性髓系白血病患者长期生存的影响.方法 回顾性分析35例成人AML1/ETO+急性髓系白血病患者的临床资料,应用Log-Rank检验和Cox回归模型对患者的性别、年龄、初诊时白细胞计数、免疫表型、首疗程是否完全缓解、c-kit基因突变、复杂核型、髓外白血病进行单因素和多因素综合分析.结果 35例患者随访3~87个月,中位随访时间33个月,单因素分析显示年龄、性别、髓外白血病、复杂核型、首疗程是否完全缓解、CD19、CD9对患者3年和5年总体生存率无显著影响(P>0.05),初诊时白细胞计数、CD56+、CD64+的表达对AML1/ETO+的长期生存具有显著性差异(P=0.045,P=0.044,P=0.045).多因素分析显示,CD56表达是影响AML1/ETO+急性髓系白血病患者长期生存重要的独立预后因素.其中CD56+CD64+显著影响患者长期生存(P=0.012).结论 CD56是AML1/ETO+急性髓系白血病患者独立的预后不良因素,且CD56+、CD64+双表达预后最差.     

t(8;21)急性髓性白血病预后分析

目的:研究伴t(8;21)的急性髓性白血病(AML)患者近期疗效。方法:30例伴t(8;21)的AML患者中M01例、M226例、M52例、CML-BPI例。26例伴有t(8;21)的M2患者中简单核型异常9例,复杂核型异常17例,取28例正常核型的M2患者为对照,观察染色体核型异常与化疗后完全缓解(CR)率的关系。结果:t(8;21)的非M2患者除1例M5经治疗为CR外,余3例均为NR;t(8;21)的M2患者的CR率(84.6％(22/26))高于正常核型的M2患者(64.3％(18/28))(P>0.05);简单核型异常的M2/t(8;21)患者化疗CR率(94.1％(16/17))高于伴复杂核型异常的M2/t(8;21)患者(66.7％(6/9))(P>0.05)。结论:t(8;21)的M2患者预后较好。而伴复杂核型M2/1(8;21)患者疗效相对较差。     

急性髓细胞白血病的免疫表型异质性及治疗特点

目的探讨急性髓细胞白血病(AML)的免疫表型异质性及治疗特点。方法111例初发的成人AML,常规骨髓细胞瑞氏染色及细胞化学染色进行FAB分型,用单克隆抗体标记经流式细胞仪对骨髓细胞进行白血病细胞免疫分型。每个病例用标准方案诱导1个疗程后复查血液学缓解情况。结果111例FAB分型为AML的病例中,免疫学分型为Ly-AML79例(71.2%),Ly -AML30例(27%),急性混合细胞白血病(acute mixed-lineage leukemia,AMLL)2例(1.8%)。在Ly -T-AML中,T细胞表面抗原以CD7表达率(89.5%)最高,CD2(22.2%)次之。在Ly -B-AML中,B细胞表面抗原以CD19表达率(66.7%)最高,CD10(33.3%)次之。用标准诱导缓解方案治疗后,Ly-AML患者CR率63.3%,Ly -AML患者CR率40%,两者CR率差异有显著性(P=0.028)。结论白血病细胞免疫分型可客观反映细胞来源及分化阶段,经标准诱导缓解后,Ly-AML患者CR率高于Ly -AML患者。