低氧对肺动脉平滑肌细胞PDGFmRNA表达的影响

应用原位杂交技术．研究了低氧对单层培养的猪肺动脉平滑肌细胞血小板源性生长因子（ＰＤＧＦ）－Ａ和Ｂ链ｍＲＮＡ表达的影响。用全自动图像分析仪检测两组细胞ＰＤＧＦ－Ａ和Ｂ链杂交产物的平均光密度值。结果表明：常氧条件下无血清培养的肺动脉平滑肌细胞ＰＤＧＦ－Ａ...     

低氧、血管紧张素Ⅱ对肺内小动脉平滑肌细胞膜Ca~(2+)-ATPase活力的影响

作者观察了低氧及血管紧张素Ⅱ（ＡｎｇⅡ）对分离培养家兔肺内小动脉平滑肌细胞（ＰＡＳＭ－Ｃｓ）膜Ｃａ２＋－ＡＴＰａｓｅ活力的影响,同时用钙通道阻断剂维拉帕米（ＶＰ）进行干预,进一步了解细胞内钙与Ｃａ２＋－ＡＴＰａｓｅ活力的关系。结果表明：ＰＡＳＭ－Ｃｓ...     

慢性缺氧改变肺内动脉平滑肌细胞环氧合酶基因的表达

作者研究了慢性缺氧对肺动脉平滑肌细胞环氧合酶基因表达的影响。根据常氧 (ＰａＯ2 2 0 .3ｋＰａ)及慢性缺氧(ＰａＯ2 5 .3ｋＰａ± 0 .7ｋＰａ)的不同培养条件 ,将平滑肌细胞分为常氧组和慢性缺氧组 ,采用半定量ＲＴ -ＰＣＲ技术检测大鼠肺内动脉平滑肌细胞环氧合酶 (ＣＯＸ)基因的表达及其对急性缺氧刺激的反应。结果显示 :ＣＯＸ -1ｍＲＮＡ的表达不受缺氧及传代的影响 ,而ＣＯＸ -2ｍＲＮＡ的表达随慢性缺氧时间延长而增加 ,在 4、6代慢性缺氧培养组均高于同代常氧组水平 (Ｐ <0 .0 5 )。急性缺氧后ＣＯＸ -2ｍＲＮＡ增加的幅度在慢性…     

高压氧对Lewis肺癌小鼠免疫功能影响的研究

目的探讨高压氧（ＨＢＯ）暴露对Ｌｅｗｉｓ肺癌小鼠抗肿瘤免疫功能的影响。方法９０只患Ｌｅｗｉｓ肺癌的Ｃ５７小鼠被随机分为常压空气组（ＮＡ）、高压常氧氮（Ｎ２－Ｏ２）组和ＨＢＯ组。ＮＡ组置于舱内常压空气下,Ｎ２－Ｏ２组和ＨＢＯ组则分别暴露在含１０％氧的高压常氧氮和医用纯氧环境下,暴露的压力时程为绝对压２５０ｋＰａ－９０分钟,每日１次,每周暴露６天,共暴露两周;加压速度为１００ｋＰａ／ｍｉｎ,减压采用匀速减压法,以１０分钟减至常压。实验中检测了各组小鼠的自然杀伤细胞（ＮＫ）、非特异杀肿瘤细胞（ＬＡＫ）、细胞毒性Ｔ淋巴细胞（ＣＴＬ）水平和巨噬细胞（Ｍφ）杀伤活性;同时还对各组小鼠荷瘤的体积、溃破率及动物致死率进行了观察。结果与ＮＡ组相比,ＨＢＯ组小鼠体内ＮＫ、ＬＡＫ、ＣＴＬ及Ｍφ活性显著升高（Ｐ＜０．０１）;实验动物肿瘤体积显著减小,荷瘤溃破率则明显增高（Ｐ＜０．０１）;且实验组小鼠的存活时间显著延长（Ｐ＜０．０５）。结论ＨＢＯ暴露显著提高了Ｌｅｗｉｓ肺癌小鼠体内ＮＫ、ＬＡＫ、ＣＴＬ的活性和增强Ｍφ细胞杀伤效率,从而解释了ＨＢＯ能抑制Ｌｅｗｉｓ肺癌生长的原因     

低氧预处理脐带间充质干细胞的旁分泌对成骨细胞功能的影响

目的：研究低氧预处理人脐带间充质干细胞（ umbilical cord mesenchymal stem cells,UCMSC）旁分泌作用对人成骨细胞（ MG－63）增殖、迁移及成骨的影响。方法分别于低氧及常氧条件下培养UCMSC,获取两种UCMSC条件培养基。实验分为3组：低氧培养基组、常氧培养基组、DMEM对照组,分别用3种不同的培养基常温培养MG－63。于培养1、3、5 d后用四氮唑盐（ mosmann tetrazoline colorimetry, MTT）比色法检测细胞增殖情况,记录各组的光密度值进行统计学分析;用划痕法检测细胞在不同培养条件下的迁移能力;于培养21 d后进行茜素红染色检测各组成骨钙结节的形成。酶联免疫吸附法（ ELISA）检测低氧及常氧条件培养基中血管内皮生长因子（ vascular endothelial growth factor,VEGF）的含量。结果 MTT法检测结果表明,低氧及常氧培养基组的MG－63细胞在培养1、3、5 d后的增殖能力均大于DMEM对照组,差异有统计学意义（P＜0．05）,且低氧组大于常氧组,差异有统计学意义（P＜0．05）;划痕法结果为此两组细胞迁移能力大于DMEM对照组,且低氧组细胞迁移能力大于常氧组;钙结节染色结果显示低氧组成骨钙结节形成最多,常氧组次之,DMEM对照组最少。 ELISA法检测低氧组VEGF含量高于常氧组,差异有统计学意义（P＜0．01）。结论低氧预处理UCMSC可增强其旁分泌功能,促进成骨细胞MG－63的增殖、迁移及成骨。     

中美联合25m氮氧饱和─80m氦氮氧巡回潜水实验的医学保障

中美联合２５ｍ氮氧饱和－８０ｍ氦氮氧巡回潜水实验的医学保障袁洪昌，荆岩林，周述尧，曲青林关键词潜水，氮氧饱和，巡回潜水，氦氮氧，减压，医学保障ＴｈｅｍｅｄｉｃａｌｓｕｐｐｏｒｔｏｆｔｈｅＣｈｉｎａ－ＵＳＡｊｏｉｎｔＣｈｉｓａｔ－Ⅱｓｉｍｕｌａｔｅｄ２...     

99Tcm-PnAO-硝基咪唑和99Tcm-HL91对乏氧心肌的实验研究

目的 探讨＾９９Ｔｃ＾ｍ－ＰｎＡＯ－硝基咪唑和＾９９Ｔｃ＾ｍ－ＨＬ９１２种乏氧心肌显像剂用于实验性心肌缺血、缺氧的作用。方法 进行小鼠体内分布与离体大鼠心脏模型研究,以９５％Ｏ２和５％ＣＯ２平衡的Ｋｒｅｂｓ－Ｈｅｎｓｅｌｅｉｔ缓冲液进行主动脉逆行灌注为对照组;以Ｎ２取代Ｏ２和ＣＯ２平衡的Ｋｒｅｂｓ－Ｈｅｎｓｅｌｅｉｔ缓冲液进行逆行灌注为乏氧组;以９５％Ｏ２和５％ＣＯ２平衡的Ｋｅｒｂｓ－Ｈｅｎｓｅｌ     

人皮肤慢性放射性溃疡c—fos,Rb蛋白异常高表达病理…

作者应用ｃ－ｆｏｓ、Ｒｂ蛋白抗体和微波炉抗原修复法对人慢性放射性皮肤溃疡进行免疫组织化学研究。结果显示：①ｃ－ｆｏｓ蛋白在人放射性皮肤溃疡阳性率为８４．０％。阳性部位主要见于增生的鳞状上皮细胞核、增生的纤维母细胞以及小血管内皮细胞、小动脉中层平滑肌细胞核，部分细胞浆内有阳性反应。②将ｃ－ｆｏｓ蛋白在表皮的检出情况及反应强度与表皮的增生程度列表分析，提示ｃ－ｆｏｓ蛋白在各增生表皮以至癌变组织阳性率有     

心痛定抑制激光血管成形术后体外培养的平滑肌细胞增殖和癌基因c-fos的表达

本文在兔腹主动脉粥样硬化模型上，行激光血管成形术（ｌａｓｅｒａｎｇｉｏｐｌａｓｔｙ，ＬＡ），用体外培养的血管平滑肌细胞（ｖａｓｃｕｌａｒｓｍｏｏｔｈｍｕｓｃｌｅｃｅｌ，ＶＳＭＣ）３Ｈ－ＴｄＲ掺入和癌基因ｃ－ｆｏｓ表达的测定观察了心痛定对血管损伤后腹主动脉ＶＳＭＣ增殖的影响。结果显示：心痛定（１０－７－１０－４ｍｏｌ／Ｌ）能抑制体外培养ＶＳＭＣ３Ｈ－ＴｄＲ掺入，呈剂量依赖关系，１０－５ｍｏｌ／Ｌ抑制血清诱导ＶＳＭＣ中的ｃ－ｆｏｓ基因表达。     

红细胞生成素3′—增强子调节缺氧时内皮细胞血栓素合酶基因表达

目的：研究缺氧对人脐静脉内皮细胞珠ＥＣ－３０４ＴＸＳ基因的影响及ＥＰＯ３′增强子在其中的作用。方法：将红细胞生成素（ＥＰＯ）３′－增强子野生片断及点突变片断，借脂质体转入人脐静脉内皮细胞株ＥＣ－３０４，用半定量ＲＴ－ＰＣＲ测定常氧与缺氧条件下培养６小时细胞血栓素合酶（ＴＸＳ）ｍＲＮＡ。结果：ＥＣ－３０４常氧培养有ＴＸＳ基因表达缺氧６小时ＴＸＳ基因表达明显增强；而细胞导入野生ＥＰＯ３′－增强子片断可     

siRNA沉默EPAS1基因对低氧条件下大鼠PASMCs增殖的影响

目的 探讨应用siRNA技术沉默EPAS1 (HIF-2α)基因表达对低氧条件下培养的大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)增殖的影响.方法 原代培养大鼠PASMCs共采用免疫荧光法进行鉴定.构建特异性EPAS1 siRNA脂质体,转染PASMCs,从3个干扰靶点中选取效果最好的靶点进行干扰;在常氧(37℃、5％CO2、20％O2)和低氧(37℃、5％CO2、2％O2)条件下分别培养24、48、72h,采用Western blotting检测PASMCs中EPAS1、VEGF蛋白的表达水平,CCK-8法检测细胞增殖情况.结果 成功分离培养原代大鼠PASMCs并经免疫荧光鉴定证实.将特异性的EPAS1 siRNA脂质体转染到PASMCs,选择干扰效果最好的靶点2进行干扰.与常氧条件比较,低氧条件下PASMCs中VEGF蛋白的表达及细胞增殖水平均明显升高;沉默EPAS1后,无论低氧还是常氧条件下,PASMCs中VEGF蛋白的表达及细胞增殖水平均明显降低.结论 EPAS1基因参与了低氧条件下大鼠PASMCs增殖的调控,其调节可能是通过VEGF介导完成的.     

载有匹伐他汀的纳米涂层支架的研究

目的探讨新型载有他汀药物的纳米涂层支架的有效性及安全性。方法选用生物可吸收性高分子聚合物聚乳酸-羧基乙酸共聚体(PLGA)为原料制作纳米粒子,并用自行研发的阳离子电镀涂层技术将载有荧光标记物异硫氰酸荧光素(FITC)的PLGA纳米粒子均匀涂层于支架表面。先在体外培养人冠状动脉平滑肌细胞及人脐带静脉内皮细胞,比较研究他汀类药物、雷帕霉素和紫杉醇对平滑肌细胞和内皮细胞增殖能力的影响。同时,选择猪作为实验动物行冠状动脉支架植入术,观察载有他汀的纳米涂层支架对内膜增生及内皮再生的影响。结果体外实验发现,在24 h内FITC从纳米粒子内释放出约40%,在30 d后完全释放。FITC纳米粒子56 d以后从涂层支架完全释放。与其他他汀类药物相比,匹伐他汀对平滑肌细胞增殖有明显的抑制作用(P<0.001),并对内皮细胞再生有促进作用(p<0.05)。尽管雷帕霉素和紫杉醇也都能抑制平滑肌细胞的增殖,但匹伐他汀可在最低浓度(0.01μmol/L)即可达到抑制效果(P<0.05)。匹伐他汀纳米粒子涂层支架组与非药物涂层支架组相比内膜增生明显减少(P<0.01)。与雷帕霉素支架组相比,匹伐他汀纳米粒子涂层支架组的内膜增生程度相近(P>0.05),且炎症、纤维沉积及内皮再生延迟作用均明显减少(P值均<0.01)。结论成功开发载有匹伐他汀纳米粒子涂层支架,初步结果显示该支架既可抑制支架内再狭窄,也可减少支架内血栓形成。     

重组人survivin腺病毒的构建与鉴定

目的构建人survivin基因shRNA重组腺病毒载体,为缺氧性肺动脉高压（Hypoxic pulmonary hypertension, HPH）的基因治疗研究提供实验基础。方法构建survivin-siRNA表达质粒,测序鉴定正确后,将survivin-siRNA表达质粒与含有腺病毒右臂的骨架质粒pBHGE3共转染至人293A细胞,包装成腺病毒Ad-survivin并扩增,TCID50法测定病毒滴度。将人肺动脉平滑肌细胞缺氧培养24 h,并将细胞分为空白对照组（Con组）,阴性对照组（Ad-LacZ组）,不同Ad-survivin序列的干扰组（sh1组、sh2组、sh3组）。Ad-survivin感染缺氧人肺动脉平滑肌细胞,Western blot检测survivin蛋白,验证重组腺病毒干扰效果。结果①将shRNA片段与pAd-U6-CMV连接后的质粒进行测序,结果提示目的基因片段插入成功;②TCID50法测定病毒Ad-survivin-shRNA1、Ad-survivin-shRNA2和Ad-survivin-shRNA3的滴度分别是1×1010,1.2×1010,1×1010;③sh2组缺氧人肺动脉平滑肌细胞内survivin蛋白表达明显低于其他4组(P＜0.05)。结论本研究成功构建人survivin腺病毒载体,为研究survivin基因在缺氧性肺动脉高压中的作用提供了实验基础。     

多层螺旋CT在评价冠状动脉支架中的价值

目的：探讨多层螺旋CT冠状动脉造影（multi slice spiral computed tomographic angiog raphy,MSCTA）在冠状动脉支架评价中的价值.方法：对 28例冠状动脉支架患者行冠状动脉M SCTA检查,利用MSCT的各种先进的后处理功能对冠状动脉进行重建,以显示冠状动脉支架的形态、位置及有无支架术后的再狭窄.结果：在28 例多层螺旋CT冠状动脉造影中2例由于患者有严重的窦性心率不齐,多层螺旋CT检查重建图像质量欠佳,其余患者多层螺旋CT冠状造影检查均成功的显示冠状动脉各主支 （左主支、回旋支、前降支右支冠状动脉）,且可显示所有冠状动脉支架的形态、位置,其中9例患者的10个支架术后出现再狭窄,所有患者行MSC T冠脉造影检查无1例患者出现并发征,所有MSCT冠脉造影检查怀疑支架再狭窄的患者均同时行选择性血管造影检查,其中8例患者的8个支架诊断与MSCT冠脉造影检查结果相一致,其符合率为88.89%.结论：冠状MSCTA是一种安全可靠的检查方法,可作为冠状动脉一种无创检查方法,是评价冠状动脉支架有无再狭窄的重要检查手段之一.     

血管钠肽对低氧性肺动脉高压和肺动脉平滑肌细胞增殖的影响

目的：研究血管钠肽（VNP）对慢性低氧性肺动脉高压（HPH）大鼠的治疗作用和肺动脉平滑肌细胞（PASMC）增殖的影响,并与C型钠尿肽（CNP）和心房钠尿肽（ANP）作比较。方法：采用整体静脉给药、离体血管灌流和PASMC培养等方法,测定肺血流动力学参数、离体肺动脉的等长张力和PASMC增殖的变化。结果：（1）VNP、CNP和ANP都能有效降低HPH大鼠的平均肺动脉压（mPAP),P＜0．05－0．01,除CNP外,VNP和ANP并能明显降低肺血管阻力（PVR）,P＜0．05－0．01,其中VNP降低mPAP和PVR的作用明显大于CNP和ANP。（2）VNP对离体肺支 浓度依赖性舒张作用,该作用不受内皮细胞的影响;但在浴槽内预先加入格列苯脲或普萘洛尔可显著降低肺动脉对VNP和CNP的最大舒张反应（Rmax),P＜0．05－0．01,而对ANP却无明显影响 。（3）VNP能明显抑制低氧介导的PASMC的增殖及DNA合成,其作用明显大于CNP和ANP。结论：VNP对HPH具有显著的治疗作用,它是一个新型、强效、非内皮依赖性的血管松弛多肽和细胞增殖负调控因子。     

支架内再狭窄的发病机制研究

介入术后支架内再狭窄是重要的尚未解决的临床问题。血管平滑肌细胞的增殖和迁移是血管成形术后再狭窄发生的关键因素。血管内炎症反应也可能起着重要作用。对再狭窄病因的研究有助于找到一些新的治疗方法。     

Percutaneous transluminal angioplasty and stenting of the proximal vertebral artery for symptomatic stenosis

BACKGROUND AND PURPOSE: Percutaneous transluminal angioplasty (PTA) for significant stenosis involving the origin of the vertebral artery is now a well established treatment for selected patients when posterior cerebral arterial circulation is compromised. Arterial spasm, dissection, and restenosis may occur in some instances, with subsequent hemodynamic compromise. To prevent these potential complications, we combined PTA of the vertebral artery with primary stenting, using coronary stents, in seven patients. We herein present our short- and intermediate-term results. METHODS: A total of seven lesions affecting the origin of the vertebral artery were treated by primary trans-stenotic coronary stent placement. All patients were symptomatic, fulfilling the general criteria for vertebral artery angioplasty. Patients were followed for up to 36 months after treatment. RESULTS: All seven lesions were successfully dilated. Residual stenosis was never greater than 20% in diameter. No perioperative complications occurred. Clinical follow-up showed immediate resolution or improvement of symptoms in all patients. One patient's condition deteriorated 15 months after stent placement because of atheromatous stenosis of the prevertebral segment in the ipsilateral subclavian artery. CONCLUSION: Stent placement to treat significant stenosis involving the origin of the vertebral artery is safe and effective for alleviating symptoms and improving blood flow to the posterior cerebral circulation. Coronary stent design seems to be particularly well suited to cover atherosclerotic lesions of the origin of the vertebral artery. The stent mesh probably prevents elastic recoil and early restenosis after PTA, as it does in coronary arteries.     

紫杉醇药物涂层球囊扩张冠状动脉支架内再狭窄病变增加远期管腔面积

目的 探讨以单纯紫杉醇药物涂层球囊(DCB)扩张冠状动脉介入治疗术后支架内再狭窄(ISR)病变段,观察远期靶血管管腔面积,从而证实DCB在ISR病变中的作用.方法 选取4例符合DCB适应证ISR患者,按照标准流程在充分预扩张基础上予以紫杉醇DCB扩张病变段,不植入支架.术后即刻及术后9个月采用冠状动脉造影和血管内超声检测患者最小管腔横截面积(MLA)、支架横截面积(SA)和血管内膜增生状况.结果 4例患者单纯紫杉醇DCB治疗后即刻造影显示靶血管扩张段无夹层,无明显残余狭窄.术后9个月造影显示所有患者靶血管扩张段管腔通畅,病变段未见明显再狭窄,TIMI血流3级;血管内超声检测显示MLA均较术后即刻显著增加,SA呈增加趋势,内膜增生呈抑制趋势.结论 单纯DCB扩张ISR病变可增加远期管腔面积,避免二次支架植入,降低再次ISR风险,并通过局部释放紫杉醇作用于管壁,抑制内膜过度增生.     

^99Tc^m-MIBI运动负荷-静息心肌灌注显像对冠心病患者经皮腔内冠状动脉血管成形术的疗效评价

目的 用^99Tc^m-甲氧基异丁基异腈（^99Tc^m-MIBI）运动-静息心肌灌注显像评价经皮腔内冠状动脉成形术（PTCA）的疗效。方法20例冠心病患者在PTCA术前和术后应用^99Tc^m-MIBI行运动负荷．静息心肌灌注显像,并对图像进行半定量分析。其中8例患者于术后6个月再次心肌灌注显像。结果对20例患者的27支冠状动脉呈狭窄病变进行PTCA,术前血管的平均狭窄为（84．3±9．2）％,术后平均残留狭窄减为（31．2±9．1）％。运动负荷-静息显像显示可逆性缺损（心肌缺血）的心肌节段数由术前的55个（30．6％）减为术后的10个（5．6％）,差异有显著性（x^2=38．02,P〈0．005）。术后心肌灌注的改善率为81．8％,8例患者术后6个月心肌显像显示3例出现缺血节段,冠状血管造影证实为再狭窄。结论^99Tc^m-MIBI运动负荷-静息心肌灌注显像是一种有效的无创性的判断PTCA术后疗效及再狭窄的方法。