蛴螬提取物对人乳腺癌MCF-7细胞增殖的影响及其机制探讨

目的 观察蛴螬提取物对人乳腺癌MCF-7细胞增殖的影响及其机制。方法 采用MTT法检测蛴螬提取物处理过的人乳腺癌MCF-7细胞的生长抑制率，用免疫组化SP法检测用药前后增殖细胞核抗原（PCNA）、Ki-67、细胞周期蛋白D1（CyclinD1）的表达改变，用流式细胞仪检测细胞周期的变化。结果 用蛴螬提取物处理后的MCF-7细胞生长抑制率明显高于对照组，这种抑制作用呈浓度和时间依赖性；MCF-7细胞经蛴螬提取物处理后Ki-67、PCNA、CyclinD1表达均下降，且随着蛴螬提取物作用时间的延长，S期细胞比例明显升高。结论 蛴螬提取物在体外对人乳腺癌MCF-7细胞株有显著的增殖抑制作用，其机制可能与下调CyclinD1、Ki-67、PCNA的表达有关。     

香蕉皮多糖对人乳腺癌细胞Caspase-3蛋白表达的影响

目的观察香蕉皮多糖对人乳腺癌细胞（MCF-7）增殖的抑制作用及机制。方法将MCF-7细胞分为两组,实验组加入0.51、.52、.5、3.5 mg/ml的香蕉皮多糖溶液,对照组加入等量的DMEM培养液。均于37℃孵箱中培养244、8、72 h。采用MTT法测定各组MCF-7细胞增殖抑制率,Western blot法测定Caspase-3蛋白表达变化。结果香蕉皮多糖干预后MCF-7细胞增殖抑制率增加,且呈时间和剂量依赖性;干预48 h后Caspase-3原酶出现降解,其活性成分Caspase-3表达随药物浓度增加而明显增强。结论香蕉皮多糖可诱导MCF-7细胞凋亡,其作用机制可能与激活Caspase-3有关。     

中药复方“益肾固冲汤”对人乳腺癌细胞株MCF-7增殖及凋亡的影响

目的探讨益肾固冲汤抑制乳腺癌细胞增殖,促进其凋亡的作用和抗癌分子的机制。方法体外培养人乳腺细胞株(MCF)-7细胞利用MTT法观察益肾固冲汤对人乳腺癌MCF-7细胞增殖的抑制作用,用流式细胞仪检测益肾固冲汤对人乳腺癌MCF-7凋亡及细胞周期的影响。结果益肾固冲汤对人乳腺癌MCF-7细胞增殖具有抑制作用,都具有明显的时-效和量-效关系。人乳腺癌细胞MCF-7细胞经过不同浓度的益肾固冲汤处理24、48、72 h后,各组均呈现不同程度的凋亡,且凋亡率随着计量的增加、时间的延长而逐渐增加。益肾固冲汤在40μg/ml量、作用72 h时具有统计学差异,细胞凋亡率最高,达17.93%,与正常对照组相比,G0/G1期细胞比率随作用时间延长在逐渐减少,G2/M期的细胞比率随作用时间延长在逐渐增加,细胞生长周期较明显停滞在G2/M期,具有明显时间依赖性。结论益肾固冲汤可以抑制人乳腺癌MCF-7细胞的增殖,诱导细胞凋亡,具有明显的量效和时效关系。细胞的增殖抑制与诱导凋亡作用与G2/M期有关。     

人参二醇组皂苷对人胶质瘤U251细胞增殖与凋亡的影响

目的 观察人参二醇组皂苷(PDS)体外对U251细胞增殖及凋亡的影响.方法 采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测不同浓度PDS对U251细胞增殖活力的影响;吖啶橙染色观察PDS诱导细胞凋亡情况;流式细胞仪分析细胞周期并计算细胞平均凋亡率;免疫细胞化学技术观察细胞内半胱氨酸蛋白水解酶(caspase)9的表达.结果 经中(100 mg/L)、高(200 mg/L)剂量的PDS处理后,U251细胞生长受到不同程度抑制,且呈现剂量依赖性;吖啶橙荧光染色可见经中、高剂量PDS处理后的细胞呈现凋亡形态,并随药物剂量增加凋亡细胞数增多;流式细胞术结果显示,PDS可明显提高细胞的凋亡率,呈剂量依赖关系;免疫细胞化学染色结果表明,随着PDS剂量增加,细胞内激活的caspase 9的表达上调.结论 PDS体外对U251细胞增殖具有明显的抑制作用,其机制可能与诱导细胞凋亡有关.     

FTY720对乳腺癌MCF-7细胞增殖及Bax/Bcl-2基因表达的影响

目的探讨FTY720对人乳腺癌MCF-7细胞增殖及Bax/Bcl-2基因表达的影响。方法 FTY720作用人乳腺癌细胞29 h,观察细胞形态,应用Western印迹检测细胞Bax/Bcl-2基因表达;FTY720作用人乳腺癌细胞48 h,应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖抑制率,通过流式细胞术(FCM)检测细胞周期、凋亡率。结果镜下可见FTY720作用组细胞生长不良;MTT法检测到该细胞的增殖受到不同程度的抑制,当FTY720浓度为6 400 ng/ml时,体外培养MCF-7细胞抑制率为62.0%,抑制率呈浓度依赖性(P0.05);流式细胞术检测分析显示,FTY720可将该细胞周期阻滞于G1期,细胞凋亡率也较对照组明显增加(P0.05);Western印迹法检测分析显示,实验组细胞中Bax/Bcl-2蛋白表达水平比值均较对照组明显增高(P0.01)。结论一定浓度的FTY720可抑制人乳腺癌MCF-7细胞增殖,诱导其发生凋亡,激活细胞凋亡基因Bax、抑制原癌基因Bcl-2表达。     

Let-7a对人乳腺癌MCF-7细胞的作用及机制探讨

目的观察Let-7a对体外生长的人乳腺癌MCF-7细胞株的抑制作用,并探讨其作用机制。方法分别用Lipofectamine^TM2000介导的Let-7a和siRNA转染人乳腺癌细胞株MCF-7（分别为Let-7a组、空白对照组和阴性对照组）,半定量RT—PCR法检测两组C—myc mRNA表达;Western blot法测定转染24h后C-myc蛋白的表达水平;CCK-8法检测细胞增殖抑制率。结果Let-7a组的C-myc mRNA表达水平明显低于空白对照组和阴性对照组,P均〈0．01;在MCF-7细胞中存在相对分子质量62kD的特异性条带,与C-myc相对分子质量相符,Let-7a组特异性条带明显弱于对照组;Let-7a组细胞增殖抑制率明显高于阴性对照组（P〈0．05）,且具有时间和浓度依赖性。转染24h后,Let-7a组凋亡率明显高于对照组（P〈0．05）。结论Let-7a对体外生长的人乳腺癌MCF-7细胞增殖有抑制作用;其机制可能为抑制C-myc基因的表达。     

5-氟尿嘧啶对人乳腺癌MCF-7细胞增殖的影响及其机制探讨

目的 观察5-氟尿嘧啶（5-FU）对人乳腺癌MCF-7细胞增殖的影响,并探讨其可能的机制.方法 将对数生长期的MCF-7细胞随机分为观察组和对照组,观察组分别加入终质量浓度为20、10、1、0.1μg/mL的5-FU,对照组加入100 mL的RPMI-1640完全培养液.培养24、48、72 h后,采用MTT法测定MCF-7细胞的吸光度并计算细胞抑制率,显微镜下观察细胞形态变化,流式细胞术检测细胞周期,Western blot法检测Bcl-2、Bax蛋白.结果 与对照组比较,随着5-FU浓度增加以及用药时间的延长,细胞增殖抑制率逐渐增加（P均＜0.05）;细胞数量逐渐减少,凋亡现象更加明显;G1期细胞比例明显升高、S期细胞比例逐步降低（P均＜0.05）,但G2期细胞比例变化不明显;Bax蛋白相对表达量逐渐增加,Bcl-2蛋白相对表达量逐步减少（P均＜0.05）.结论 5-FU对人乳腺癌MCF-7细胞增殖有明显的抑制作用,并呈现时间和剂量依赖性;该作用与其促进细胞凋亡,上调Bax蛋白、下调Bcl-2蛋白表达有关.     

血清糖皮质激素调节蛋白激酶3过表达对乳腺癌细胞凋亡的影响

目的探讨血清糖皮质激素调节蛋白激酶3(SGK3)基因过表达对乳腺癌细胞凋亡的影响。方法构建pEGFP-N1-SGK3重组质粒,用载体质粒pEGFP-N1和重组质粒pEGFP-N1-SGK3转染乳腺癌MCF7细胞;MTT法观察转染细胞的增殖情况,流式细胞术分析细胞凋亡情况,RT-PCR检测凋亡相关基因表达。结果利用pEGFP-N1-SGK3质粒转染乳腺癌MCF7细胞,建立表达SGK3蛋白的细胞系;通过细胞增殖实验发现,SGK3的过表达可促进MCF7细胞增殖;流式细胞术分析显示,外源性SGK3可抑制MCF7细胞凋亡的发生,并影响凋亡相关基因bad、bcl-xl的表达。结论 SGK3的过表达可抑制乳腺癌MCF7细胞凋亡。     

藤黄酸对乳腺癌细胞MCF-7细胞端粒酶活性及其逆转录酶hTERT mRNA表达的抑制作用研究

目的研究藤黄酸对人乳腺癌细胞MCF-7端粒酶活性和端粒酶逆转录酶(hTERT)mRNA表达及其转录调控基因C-myc的影响,以探讨藤黄酸对人乳腺癌细胞端粒酶活性的调控机制。方法藤黄酸作用于人乳腺癌细胞24h、48h、72h后,收集细胞,四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测MCF-7细胞生长抑制率,同时采用PCR-ELISA法检测端粒酶活性、RT-PCR法检测hTERT mRNA的表达、Western blot技术检测C-myc蛋白的表达。结果藤黄酸能明显抑制人乳腺癌细胞MCF-7生长和增埴,对端粒酶活性、hTERT mRNA及转录调控基因C-myc的表达具有抑制作用,并呈明显的时效和量效相关性。结论藤黄酸能够明显抑制人乳腺癌细胞MCF-7增殖,其机制可能是对MCF-7细胞的端粒酶活性及其端粒酶转录调控基因C-myc有较好的抑制作用,提示藤黄酸有可能成为高效低毒的抗肿瘤天然药物。     

复方甘草甜素脂质体对人肝星状细胞增殖的影响

目的 观察复方甘草甜素脂质体对体外培养人肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSCs)增殖的影响,以探讨抗肝纤维化新药物剂型.方法 体外培养人HSCs,分组:HSCs对照组;脂质体对照组;复方甘草甜素对照组和对应浓度的复方甘草甜素脂质体组,培养24 h后,用MTT法检测细胞增殖抑制率和Giemsa染色镜下观察细胞生长情况并用计算机图文分析各组细胞占每视野的面积百分比(C%).结果 MTT法显示,复方甘草甜素及其脂质体作用于HSCs后,细胞增殖抑制率明显高于脂质体对照组和HSCs对照组,抑制率的递增呈浓度依赖性;复方甘草甜素脂质体组高于复方甘草甜素对照组(P＜0.05),HSCs对照组和脂质体对照组无明显差异(P＞0.05);Giemsa染色镜下观察各组细胞数及计算机图文分析结果与MTT结果一致.结论 复方甘草甜素脂质体较复方甘草甜素对HSCs增殖的抑制作用明显增强,单纯脂质体对体外培养的HSCs增殖无明显影响.