一氧化氮对术后腹膜粘连作用的实验研究

目的研究一氧化氮 (NO)在预防大鼠术后腹膜粘连中的作用。方法 40只大鼠统一制作腹膜粘连模型 ,随机分为对照组和左旋精氨酸组。术后分别腹腔内注射 0 9%NaCl和左旋精氨酸 ,连续 3d。术后 3d随机抽取部分大鼠血样测定NO ,同时取材作病理检查。其余大鼠 2周后乙醚处死开腹观察并记录粘连情况。结果对照组的粘连分级 (3 7± 0 7)重于左旋精氨酸组 (0 9±1 1) ,t=8 6 ,P <0 0 1。对照组血中NO的水平为 (13 9± 1 1) μmol/L ,低于左旋精氨酸组 (32 2± 2 8)μmol/L ,t=2 0 4,P <0 0 1。左旋精氨酸组粘连组织中诱导型一氧化氮合酶 (iNOS)的免疫组化染色分级为 2 5± 0 7强度高于对照组 (0 8± 0 4) ,t=11 1,P <0 0 1。结论一氧化氮在腹膜粘连的预防中起重要作用     

Caspase抑制剂对小鼠心脏移植物细胞凋亡的影响

目的　探讨Caspase抑制剂对同种异体心脏移植物细胞凋亡的影响。方法　以BALB/c小鼠为供者 ,C5 7BL/6J小鼠为受者建立异位 (颈部 )心脏移植模型 ,治疗组受者术中、术后分别给Caspase抑制剂 (Z Asp cmk) 0 .2 5mg ,对照组受者相应时间给等量的溶媒。术后观察移植心脏的存活时间 ,术后 5d处死部分受者 ,切取移植心及受者自身心脏组织 ,检测心脏组织中Caspase酶的活性及心肌细胞凋亡情况。结果　对照组移植心脏的中位存活时间为 7d ,治疗组为 13d ,二者比较 ,差异有高度显著性 (P <0 .0 1) ;移植心脏组织的Caspase 3活性 ,对照组为 (310± 83)nmolAFC·min-1·mg-1,治疗组为 (6 5± 19)nmolAFC·min-1·mg-1,受者自身心脏为 (47± 11)nmolAFC·min-1·mg-1,治疗组与受者自身心脏比较 ,差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ,与对照组比较 ,差异有高度显著性 (P <0 .0 1) ;治疗组与对照组心肌细胞的凋亡指数分别为 7.95± 1.71及 0 .5 6± 0 .2 0 ,二者比较 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 )。结论　Caspase抑制剂能够有效抑制小鼠心脏移植物的心肌细胞凋亡。     

阻断B7诱导大鼠心脏移植免疫耐受的实验研究

目的　研究阻断B7方法诱导大鼠心脏异位移植的免疫耐受。　方法　采用Ono法建立大鼠异位心脏移植模型 ,实验组腹腔注射B7阻断剂CTLA 4Ig,观察大鼠移植的心脏存活天数 ,病理改变和术后IL 2 ,IgG以及IgM含量的变化。　结果　实验组移植的心脏存活时间为 :(31 6 0± 1 82 )d ,对照组 (7 2 5± 0 71)d ,差异有显著性意义 (P <0 0 1)。组织学改变 :实验组见局灶性血管周围或间质内淋巴细胞浸润和局灶性心肌损伤 ,病理分级Ⅰ～Ⅱ级。对照组可见大量淋巴细胞浸润 ,心肌细胞损伤和坏死 ,间质内出血水肿 ,病理分级Ⅳ级。术后IL 2含量实验组比对照组明显下降 ,有显著性差异 ,P <0 0 1。IgG和IgM含量差异无显著性意义 (P >0 0 5 )。　结论　阻断B7能诱导大鼠心脏移植免疫耐受 ,为移植排斥反应提供了新的治疗方法     

静脉注射血管内皮细胞对异种心脏移植的影响

目的　探讨诱导非协调性异种移植免疫耐受的新方法。方法　移植前 1 4d外周静脉注射抗原量 1 0× 1 0 6 个豚鼠血管内皮细胞或联合腹腔注射环磷酰胺 (2 0mg·kg- 1 ·d- 1 × 1 4d)诱导豚鼠 大鼠异种心脏移植免疫耐受 ,观察供心存活时间。结果　外周静脉注射豚鼠血管内皮细胞联合使用环磷酰胺能够延长豚鼠 大鼠异种心脏移植存活时间 ,其平均存活时间为 (67.5± 6 .4)min ,与其余各组相比 ,差异有显著性 (P <0 .0 5)。供心标本免疫组织化学检测显示豚鼠血管内皮细胞外周静脉注射联合使用环磷酰胺组抗体IgM及补体C3沉积均较其余组少 ,定量测定分别为40 .5± 3 .9,46 .8± 5 .2 ,与其余各组相比 ,差异有显著性 (P <0 .0 5)。结论　移植术前外周静脉注射血管内皮细胞联合使用免疫抑制剂能够延长非协调性异种心脏移植存活时间 ,血管内皮细胞可以作为新的耐受原诱导免疫耐受     

心脏移植患者血浆同型半胱氨酸含量的变化及临床意义

目的　了解心脏移植患者血浆同型半胱氨酸含量的变化及临床意义。方法　利用高压液相方法测定 1 4例心脏移植患者的血浆同型半胱氨酸的浓度 ;以肱动脉充血内径变化百分率为血管内皮功能的指标 ;同时对其中的 7例进行冠状动脉造影。采用单因素直线相关分析 ,观察心脏移植患者血浆同型半胱氨酸的浓度与血管内皮功能以及移植血管病变的关系。结果　心脏移植组患者的血浆同型半胱氨酸浓度明显高于健康对照组 [(1 3.4 7± 2 .78) μmol/Lvs (9.2 6± 3.5 7) μmol/L];肱动脉充血内径变化百分率明显低于对照组 [(8.2± 3.7) %vs(1 2 .5± 1 .6 ) %];直线相关分析 ,两者呈负相关 ,γ =- 0 .80 4 ;冠脉造影 2例出现单支冠状动脉病变 ,其血浆的同型半胱氨酸的浓度均升高。结论　心脏移植患者血浆同型半胱氨酸浓度的升高 ,与心脏移植患者血管内皮功能下降密切相关 ,可能与移植血管病变有关。     

FK506对大鼠心脏移植细胞凋亡的作用

目的　观察大鼠心脏移植急性排斥反应中的细胞凋亡现象及FK5 0 6对它的影响。方法　进行 48次SD→Wistar的大鼠颈部心脏移植 ,用苏木素 伊红 (HE)染色和原位末端标记(TUNEL)技术检测移植心切片 ,进行排斥反应的病理分级并计算凋亡指数 (AI)。结果　移植心的细胞凋亡主要发生于心肌细胞 ;FK5 0 6能明显减少心肌细胞的凋亡 ,减轻移植心的组织损伤。移植后第 3、5、7天AI对照组分别为 3.73± 2 .32、8.30± 2 .97、10 .2 2± 5 .5 2 ;FK5 0 6治疗组为 1.2 7± 1.2 0、2 .89± 2 .18、3.11± 1.6 8;两组比较差异有非常显著性 (P <0 .0 1)。结论　细胞凋亡是心脏移植急性排斥中组织损伤的重要机制 ;FK5 0 6能明显抑制心肌细胞凋亡 ,这可能是FK5 0 6发挥免疫抑制作用的重要方面。     

诱生型一氧化氮合酶选择性抑制剂对急性胰腺炎大鼠胰腺组织的影响

目的　探讨急性胰腺炎大鼠胰腺组织中诱生型一氧化氮合酶 (iNOS)选择性抑制剂(氨基胍 )对胰腺组织的影响。方法　分别测定各组胰腺组织中原生型一氧化氮合酶 (cNOS)和iN OS活性、一氧化氮 (NO)含量 ;观察各组胰腺组织病理变化 ,并对胰腺组织损伤进行评分。结果　与胰腺炎组比较 ,单用氨基胍可明显降低NO含量 [( 2 2 .4± 0 .3) μmol/g ,P <0 .0 5 ] ,而胰腺病理评分无降低 ( 8.8± 0 .6 ,P >0 .0 5 ) ,联合应用L 精氨酸不但可明显降低NO含量 [( 2 5 .6± 0 .4) μmol/g ,P <0 .0 5 ] ,并且胰腺病理评分明显降低 ( 6 .3± 1.4,P <0 .0 5 )。 结论　联合应用选择性iNOS抑制剂和NO供体 ,可降低胰腺组织中NO含量 ,并能改善胰腺组织病理损伤。     

小睾丸组织超微结构变化与性激素相关性研究

目的 :探讨小睾丸组织超微结构变化和性激素改变及其相关性。　方法 :对 8例小睾丸病人和 12例健康成人血清进行性激素测定 ,光镜及电镜观察小睾丸组织的超微结构变化。　结果 :小睾丸病人和正常对照组血清性激素FSH、LH、T分别为 (2 1.0 5± 9.15 )IU/Lvs (6 74± 3 5 2 )IU/L、(2 2 .88± 6 .2 5 )IU/Lvs (6 6 0± 1 4 8)IU/L、(0 .30± 0 .0 4 )nmol/Lvs (17 5 5± 9 2 5 )nmol/L ,两者相比差异有显著性 (P <0 .0 1) ;精曲小管直径和管壁厚度分别为 (37.33± 6 .80 )、(10 .30± 1.82 ) μm ,与正常组的 (198 4 6± 2 9 84 )、(2 95± 0 2 0 ) μm相比 ,差异有极显著性 (P <0 .0 1) ;组织超微结构变化显著。　结论 :小睾丸组织精曲小管、生精上皮、支持细胞、界膜、间质细胞及血管均发生严重的病理改变 ,其形成可能与遗传和免疫反应有关     

缺血预处理对大鼠移植肝脏保存再灌注损伤的保护及机制探讨

目的探讨缺血预处理 (ischemicpreconditioning ,IP)对大鼠移植肝脏保存再灌注损伤的保护作用及机理。方法采用SD大鼠原位肝移植动物模型 ,12 8只大鼠随机分成A(对照组 )、B(IP组 )、C(腺苷 ,Ado组 )、D(NO合成抑制剂 ,NAME组 )组 ,每组 32只。其中各组的半数用于观察存活率 ,另一半用于移植肝脏再灌注 2h后取血及肝脏检测。结果IP组和Ado组的 1周存活率、血清NO水平及肝组织腺苷含量分别为 88% (7/ 8)和 88% (7/ 8) ,(33 0± 6 1) μmol/l和 (2 9 1± 6 5 ) μmol/l,(7 2± 1 8) μmol/g和 (5 7± 1 3) μmol/g ,均高于对照组的 38% (3/ 8) ,(15 4± 3 0 )mol/L和 (3 6 9±0 5 4 ) μmol/g (P <0 0 5 ) ,血清ALT及TNF含量分别为 (2 87± 82 )IU/L和 (35 7± 93)IU/L ,(1 15± 0 2 3)ng/ml和 (1 14± 0 2 7)ng/ml,均低于对照组的 (5 88± 5 8)IU/L及 (1 5 9± 0 35 )ng/ml(P <0 0 5 ) ,组织的病理学改变也轻于对照组 ;NAME组的 1周存活率、血清NO及ALT含量等分别为 2 5 % (2 / 8)、(13 74± 3 11) μmol/l及 (6 34± 6 5 )IU/L ,与对照组相近 (P >0 0 5 ) ,而肝组织腺苷含量为 (5 5 6± 1 19)μmol/g ,与对照组差异有显著意义 (P <0 0 5 )。 结论IP对大鼠移植肝脏的保存再灌注损伤具有保护     

血管紧张素转换酶抑制剂对心脏移植后冠状血管增殖病变的影响

目的通过建立大鼠心脏移植后冠状血管增殖病变的模型,观察血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)对心脏移植后冠状血管增殖病变的影响。方法设立对照组、结扎组、ACEI+结扎组,观察2周后各组大鼠血液、心肌AngⅡ含量,心肌AngⅡ受体密度,及血管病理学结果。结果各组血液AngⅡ含量差异无统计学意义,结扎组心肌AngⅡ含量明显增高(17．42±5．49)fmol／mg．蛋白P<0．001比对照组,ACEI+结扎组AngⅡ含量明显下降(5．35±1．95)fmol／mg。蛋白P< 0．01比结扎组,结扎组AngⅡ受体密度增高(48．80±4．32)fmol／mg蛋白P<0．01比对照组,ACEI +结扎组内膜增生比结扎组明显减轻[内膜厚度(21．01±4．55)μm比(60．34±9．32)μm,P< 0．01)。结论心脏局部肾素-血管紧张素系统,AngⅡ及AngⅡ受体参与移植后冠状血管病变,A- CEI明显抑制移植后冠状血管病增殖变。     

落新妇甙对小鼠心脏移植后移植物血管病的抑制作用

目的探讨落新妇甙对小鼠心脏移植后移植物血管病的抑制作用。方法建立小鼠颈部心脏移植模型,将受鼠随机分为环孢素A(CsA)组(术后每天用CsA5mg/kg灌胃)和落新妇甙组(术后每天用落新妇甙5mg/kg灌胃)。术后第60d切取移植心,观察移植心脏组织学变化,以HPIAS-1000图像分析仪测量冠状动脉管壁厚度与动脉直径的比值,根据平均内膜厚度和管腔狭窄程度对CAV病变进行评分。结果CsA组移植心脏可见明显的纤维化,大量单核细胞浸润,动脉硬化明显,冠状动脉管壁厚度与血管直径的比值为0.63±0.20,明显高于落新妇甙组的0.22±0.04(P<0.01);CsA组心脏移植物血管病变评分为(2.3±0.6)分,高于落新妇甙组的(1.1±0.3)分(P<0.05)。落新妇甙组心脏移植物的冠状动脉内膜病变轻微,内皮和内弹力层基本保持完整,平滑肌细胞增殖不明显。结论落新妇甙能减缓移植心冠状动脉硬化,对小鼠心脏移植后移植物血管病有明显的抑制作用。     

Edema treatment during cardiac allograft rejection

BACKGROUND: Interstitial edema of rejecting organs can be correlated with the accumulation of hyaluronan in the transplant; since hyaluronan has strong water-binding capacity, treatment with the hyaluronan-degrading enzyme hyaluronidase reduces not only the hyaluronan content but also the water content of the graft. The aim of the present study was to investigate whether a further reduction of the water content would be the result if hyaluronidase was used in conjunction with classic diuretic substances. METHODS: Five days after heterotopic heart transplantation (PVG to Wistar/Kyoto), recipient rats received hyaluronidase as a continuous intravenous infusion over 2 hours together with either a loop-diuretic (furosemide) or an osmotic diuretic (mannitol). RESULTS: Hyaluronidase was found to reduce the hyaluronan contents of the grafts from 586+/-52 microg/g in control animals receiving vehicle infusion to 161+/-48 microg/g (p < 0.001) and the water contents from 81.3+/-0.4 x 10(-2) U to 79.7+/-0.4 x 10(-2) U (p < 0.05). Combined treatment with furosemide or mannitol did not affect the results and neither furosemide nor mannitol had any intrinsic capacity to affect the water or hyaluronan contents of the cardiac grafts. CONCLUSION: This experiment confirms our previous findings of hyaluronidase as an effective edema-reducing drug and indicate that no additive effect is obtained by a combined therapy with diuretics and hyaluronidase.     

Innate immunity and cardiac allograft rejection

The development of immunosuppressive drugs to control adaptive immune responses has led to the success of heart transplantation as a therapy for end-stage heart failure. However, these agents are largely ineffective in suppressing components of the innate immune system. This distinction has gained clinical significance as mounting evidence now indicates that innate immune responses have important roles in the acute and chronic rejection of cardiac allografts including cardiac allograft vasculopathy (CAV). Whereas clinical interest in natural killer (NK) cells was once largely confined to the field of bone marrow transplantation, recent findings suggest that these cells can also participate in the acute rejection of cardiac allografts and in the development of CAV. Stimulation of Toll-like receptors (TLRs), another important component of innate immunity, by endogenous ligands released in response to ischemia/reperfusion is now known to cause an inflammatory milieu favorable to graft rejection. Finally, new data indicate that activation of complement is linked to acute rejection and CAV. In summary, the conventional wisdom that the innate immune system is of little importance in whole-organ transplantation is no longer tenable. The addition of strategies that target TLRs, NK cells, and complement will be necessary to prevent CAV completely and to eventually achieve long-term tolerance to cardiac allografts.