从生产胰岛素的胰渣中制备胰酶、胰蛋白酶及糜蛋白酶

目的 从中性乙醇提取胰岛素后的残渣中提取制备高活性的胰酶,并从中分离纯化出胰蛋白酶(T)、糜蛋白酶(CT).方法 在胰渣中加入活化剂活化后,用PEG-6000沉淀、丙酮脱脂干燥得到胰酶;胰酶经CM-纤维素纯化得到胰糜蛋白酶混合制剂,再经CM-sepharose FF层析分离得胰蛋白酶和糜蛋白酶.结果 胰酶回收率为12.1％,胰蛋白酶、胰脂肪酶、胰淀粉酶的活性分别为5.40、39.72、76.72 U·mg-1,3种酶的活性比例达1∶7.4∶14.2.胰蛋白酶、糜蛋白酶的效价分别为2505、1003 U·mg-1;相对于胰酶,二者的活性回收分别为48.93％、61.73％.结论 从胰渣中制得的胰酶活性较高(约9倍于《中国药典》2010年版中的标准);制得的T及CT的活力也达到《中国药典》2010年版中的标准.     

从猪胰中直接提取分离糜蛋白酶和胰蛋白酶

从猪胰中提取糜蛋白酶和胰蛋白酶的制备方法,在实验室中曾有报道,但还未用于生产。1981年,我们试用CM纤维素从猪胰中直接提取分离出糜蛋白酶和胰蛋白酶,收率和活力都较满意。收率均在0.05％以上,不低于牛胰中提取的糜、胰蛋白酶收率。猪糜蛋白酶水解NTH(烟酰-L-酪氨酰肼)的活力高于牛糜蛋白酶2～3倍,猪胰蛋白酶水解BANA(N-苯甲酰-L-精氨酸-β-萘胺)的活力与牛胰蛋白酶相近。猪糜、胰蛋白酶水解酪蛋白的活力符合     

从提取胰岛素后的猪胰残渣生产核酸氨基酸糖衣片

核酸氨基酸糖衣片是以提取胰岛素后的猪胰脏为原料,用酶解法获得的核酸降解物和氨基酸为主要成份,加上其他原料配制而成的,为治疗慢性气管炎、神经衰弱、过敏性鼻炎等疾病的一种生化新药。临床试用疗效良好,副作用少。经天津市卫生局批准,于1977年初由天津第二生化制药厂(即天津第二食品加工厂制药车间)投产。本文着重介绍由提取胰岛素后的猪胰脏制备核酸氨基酸糖衣片的生产工艺及成份分析,并扼要介绍初步药理实验结果和临床试验情况。     

猪胰酶、胰岛素与胰蛋白酶抑制剂的联产

目的 以猪胰浆为原料,联产胰酶、胰岛素(INS)与胰蛋白酶抑制剂(TI).方法 猪胰浆用中性醇处理,得到胰渣和上清液(Ⅰ);胰渣经过聚乙二醇-6000沉淀得到胰酶;Ⅰ用酸沉淀去掉杂质后再沉淀得到INS粗品和上清液(Ⅱ);INS粗品经DE-AE-Sepharose FF层析纯化;Ⅱ经Trypsin一壳聚糖多孔珠亲和吸附得到TI.结果 胰酶的回收率为15.1%4±0.6%,主要成分胰蛋白酶、胰脂肪酶和胰淀粉酶的含量分别为(5.13±0.17)×103、(38.47±1.16)×103、(58.27±2.49)×103U·g-1;INS的回收率为73.7±9.0 mg·kg-1(n=3),效价为27.25±0.34U·mg-1,并具有完整的生物学活性;TI比活为102.59 U·mg,-1,产率为33.86 U·g-1.结论 胰酶、INS与TI的联产极大地提高了胰脏的利用率.     

从生产胰岛素的副产物中制备胰多肽和胰高血糖素

<正> 胰多肽(Pancreatic Polypeptide)、胰高血糖素(Glucagon)和胰岛素一样,也产生于胰腺内分泌细胞。胰多肽具有多种药理作用,如分解糖原,促进胃液分泌,抑制胰腺水、重碳酸盐和蛋白质分泌。胰高血糖素主要具有抑制胃液和胰液分泌,促进胆汁分泌,增强心肌收缩力等生物学效应,临床上可用于治疗低血糖、心源性休克、心力衰竭和食道痉挛等。这两种多肽激素已引起人们广泛重视。1968年,Kimmel等首先从制备胰岛素的副产物中分离了胰多肽,随后,Pollock及其同     

从猪胰脏制备胰岛素和胰酶的方法

1.从新鲜或冰冻的猪胰脏(通过在丙酮存在下提取胰腺)同时制备胰岛素和胰酶。这个方法的特点在于为了提取一个混合反应物,最少用40％的丙酮,在PH大约5～7提取。根据需要在提取以后进一步加丙酮,然后分出固体和提取液,这个提取液用关于胰岛素的制备方法来处理。分出的固体物质立刻用缓冲液使PH到 5～6,用一个已知的方法得胰酶。 2.按照例1操作,其特点是在提取胰岛素时用阳离子的水溶液调节PH。在提取的条件下,这个阳离子和胰岛素同时存立的酸性物质作用形成不离解(不溶解)的化合物。 3.按照例一操作:加多元酸的可溶性的酸式盐到提取混合物中。为了调节PH应用可溶性的盐。可熔性盐中的阳离子和加入的酸式盐的阴离子形成不溶解的盐。 3CaCl_2+2NaH_2Po_4→Ca_3(Po_4)_2↓+2NaCl+4HCl(译者加注)。 4.按照例一操作,提取胰岛素时,在提取混合物中丙酮的含量为50～60％,固体和提取物分离时,丙酮的含量为60～70％。     

猪胰激肽释放酶和胰酶联产的研究

前言胰脏是生物体内唯一具有内、外分泌腺功能的腺体。既分泌胰岛素、胰高血糖素等激素,也分泌各种蛋白酶,如胰蛋白酶、糜蛋白酶、弹性蛋白酶、激肽释放酶、羧肽酶等,以及淀粉酶、脂肪酶等消化酶,是动物生化制药     

从提取胆红素后的残渣中提取胆红素

<正> 胆红素生产工艺中,将胆红素粗品用氯仿提取2～3遍,或用氯仿提取至无色为止。由于胆红素粗品含有一定量的杂质,在氯仿中并不是完全溶解的,提取后的残渣含有少量的胆红素,应集中起来,再处理,可得到一定数量的胆红素精品。一.技术路线胆红素残渣     

猪胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶的分离和纯化

<正> 猪胰综合利用正受到越来越多的关注,其中蛋白水解酶的综合分离、纯化更是受到青睐。本文在猪胰激肽释放酶、弹性蛋白酶、胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶提取和分离的基础上,对其中的胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶的分离、纯化作一介绍。一、材料和检测方法 1.胰酶为长沙生化制药厂产品;结晶纯牛胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、N-乙酰-L-酪氨酸乙酯(ATEE)、N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯(BAEE)均由上海生化制药厂提供。     

由胰腺提取胰岛素及胰酶的方法

<正> 按照惯常的制备胰岛素所用的方法,是用酸化乙醇处理胰脏使胰岛素得以溶解,使用的乙醇浓度通常是60～80％(按重量计),由于胰腺含有水份故对乙醇进一步产生相当大的稀释作用。通过这种处理,不管怎样,一些现存的酶要受到破坏,胰脂肪酶和胰淀粉酶几乎完全被破坏,而在胰蛋白酶和其他蛋白消化酶方面,酶的一部份要和胰岛素一起溶解,以致使随后的分离将陷入很大的困难,并且酶的一部份会失活。提取后的残渣仅仅含很少量的蛋白消化酶,几乎没有胰脂肪酶或胰淀粉酶。     

高活性猪胰激肽释放酶的制备及性质研究

本文介绍用离子交换树脂、DEAE-纤维素和DEAE-Sephadex A50三步串联,从胰脏生产弹性酶废液中提取、纯化高活性猪胰激肽释放酶(Pig pancreatic kallikrei简称PPK)的方法;制得的PPK具有二个活性组分,命名为K_1和K_2 ,其比活分别为:805.5,698.5u/mg蛋白。经聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定,二者均为单一区带;分子量分别为;36,000、50,000;在280um处都有典型的蛋白吸收峰,A280/A260之比值分别为1.30和1.20; K1_、K_2都含有:氨基葡萄糖、半乳糖、岩藻糖和甘露糖四种单精,总精含量分别为:5.2％、4.1％;另外对K_1的氨基酸组成也进行了初步分析。     

胰酶中脂肪酶、淀粉酶、蛋白酶活力测定方法的研究

<正> 胰酶是指从猪、牛羊等动物胰脏提取得到的一种混合物,主要含胰蛋白酶、糜蛋白酶、羧肽酶、淀粉酶、脂肪酶和RNA酶。临床上广泛应用于腹外分泌障碍,消化不良等疾患。目前,各国药典对胰酶制剂质量标准不一致,胰酶中胰蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶直接影响人体的消化吸收和营养状态。外国药典(B.P、USP、J.P等)胰酶制剂大都是规定胰蛋白酶、胰淀粉酶,胰脂肪酶三酶的含量指标和三酶比例,而中国药典(77)对此品种仅作胰蛋白酶的半     

缬沙坦和胰激肽原酶联用改善高血压胰岛素抵抗的研究

目的:观察缬沙坦联用胰激肽原酶对改善高血压胰岛素抵抗的作用是否优于贝那普利。方法:128例伴有空腹胰岛素增高的轻中度高血压病患者随机分为贝那普利组、缬沙坦组、贝那普利 胰激肽原酶组、缬沙坦 胰激肽原酶组4个治疗组。另设对照组30例。随访期4个月。治疗前后测定体质量指数(BMI)、血压、空腹及餐后2h血糖和胰岛素、胰岛素敏感指数(ISI),进行治疗前后及组间比较。结果:治疗前后各治疗组血压水平及BMI相似。与对照组相比,各治疗组治疗前空腹及餐后2h血糖和空腹胰岛素均显著升高(P<0.01),ISI显著降低(P<0.01),治疗后这些指标均显著改善(P<0.05或P<0.01),其中缬沙坦 胰激肽原酶组改善幅度最为明显(P<0.01),显著优于其他各组(P<0.05或P<0.01)。结论:缬沙坦联用胰激肽原酶改善胰岛素抵抗的作用显著优于贝那普利或贝那普利和胰激肽原酶联用。     

由猪胰腺获得胰岛素和胰酶的方法

<正> 牲畜的胰腺是制备胰岛素的起始原料,而且含有药学上有用的一些酶。例如牛胰除胰岛素之外,还可以获得胰蛋白酶、糜蛋白酶和羧(基)肽酶。与此同时,可以从猪胰制备具有蛋白水解、脂肪水解、淀粉水解活性的混合酶-胰酶,因而是有用的药物。由于从胰腺中获得的不仅胰岛素而且还有这些酶都是在药学上有用的,因而人们已作了一些努力试图由同一的起始原料获得两种东西。但是,困难在于胰岛素是由提取获得的,     

从胰脏中提取胰岛素的办法

本发明是关于使用溶解岛素的酸性溶剂提取胰岛素的方法用硫酸酸化,尽可能地使提取胰脏的PH 在2.4～5.2,提取后剩下的混合物再加盐酸继续提取,PH约2.0。根据上述办法得出的蛋白质量高,另一方面,提取物很容易与组织残渣分离,而得澄清的抽取物,提取物PH调到8(?)形成的沉淀,再在很短的时间内滤去。为了达到从胰脏中提取胰岛素的目的,使用酸性的水溶性有     

高活力胰酶制备工艺的研究

本文报告了高活力胰酶的简易制备方法。本法用稀醇提取,加适量保护剂与激活剂,将酶原激活,获高活力胰酶。按干品计算,每克胰酶粉的酶活力平均含胰蛋白酶为281,000个单位、胰淀粉酶为37,400个单位、胰脂肪酶为18,300个单位;炽烧残渣为4.59％;干燥失重为3.97％;收率为10.47％;脂肪含量小于20毫克。本法工艺简单、稳定、生产周期短、易推广。     

激肽释放酶、弹性蛋白酶和糜胰蛋白酶联产研究

<正> 本文介绍了一种胰酶综合利用的方法。胰酶经提取后,用离子交换剂分离,得到了激肽释放酶和糜胰蛋白酶。从提取的残渣中回收得到弹性蛋白酶,上述联产方法操作简便,经扩大试验证明完全适应于工业化生产。胰脏是哺乳动物体内唯一内外分泌腺共体腺体,是许多生化药物的原材料,要充分利用胰脏有限的资源,胰脏综合利用是唯一适宜的途径。胰酶基木上含有胰脏中各种酶类,因此对胰酶的综合利用也是胰脏综合利用的一个重要内容。1963年戚正武从猪胰中用重结晶法,提取出糜胰蛋白酶共晶以来,我国从猪胰中提     

放射免疫法测定胰岛素制剂中猪前胰岛素、胰高糖素和胰多肽的含量

<正> 放射免疫是一种测定技术,应用日益广泛。由于此技术具有许多特点,已成为当今常用的超微量分析方法之一。为进行《胰岛索抗原性的研究》及《高纯度低抗原性胰岛素制剂的研究)等科研项目,自1982年开始,我室陆续建立了猪胰岛素、前胰岛素、胰高糖素和胰多肽的放射免疫分析法,并应用于检测胰岛素制剂中各种激素的含量。兹简介于下供参考。一、放射免疫分析的原理和条件放射免疫分析的基本原理是竞争性结合(Competitive binding)或竞争性抑制(Competitive inhibition),也称为置换(Displaccment)。本法是在试管内免疫反应系统中,引入放射性核素标记抗原,它与原型抗原(未     

胰脏激活提取对胰酶收率和活力的影响

探讨了胰脏激活提取温度和时间对胰酶的收率和活力的影响。结果表明,提取过程中的温度和时间是影响胰酶收率和活力的主要因素。选择较佳激活提取工艺条件,胰酶收率可达8～11％,胰蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶的活力比为1:30:10。     

胰高血糖素和胰岛素分离纯化的研究

<正> 胰高血糖素和胰岛素同是胰脏的内分泌产物,均作为重要的生化药物用于临床。在我国胰岛素的生产已有二十多年的历史,而胰高血糖素尚属空白。我国生产胰岛素的方法,多以猪胰脏为原料,采用酸醇抽提,调节pH以除酸、碱蛋白而后进行盐析,再由盐析物进行结晶纯化。在这种繁杂的制备过程中,胰高血糖素大量流失,难以获得。而已经报导过的胰高血糖素制备方法,往往只是着眼于分离纯化胰高血糖素本身,而未能兼顾回收胰岛素。我们以同时在胰脏中制取胰高血糖素和胰岛素为宗旨,研究了三种