跨膜丝氨酸蛋白酶4诱导放疗后肝细胞癌转移的机制研究

目的 探讨跨膜丝氨酸蛋白酶4(transmembrane protease serine 4,TMPRSS4)在放疗后残余肝细胞癌转移中的作用及机制.方法 建立具有肺转移潜能的人肝癌裸鼠原位模型,模拟临床分割放射治疗.将放疗后残余肝癌组织切除后再种植于正常裸鼠肝脏.6周后处死,测量放疗后再种植肝癌体积,计算其肝内移灶数目及肺转移率.HE染色观察放疗后肝癌组织学形态.Westernblot及RT-PCR检测放疗前后肝癌组织内上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关基因及TMPRSS4的表达.结果 对照组肝癌切除再种植后42 d,其肿瘤大小及肺转移率分别为(2.25士0.52)cm3和66.7％,而放疗后2d和放疗后30 d残癌切除再种植组,肿瘤大小分别为(1.61±0.51)cm3 (P＜0.05)和(2.60±0.61)cm3 (P＞0.05),肺转移率分别为12.5％ (P＜0.05)和100％ (P＜0.05).对照组及放疗后2d残癌切除再种植组无肝内转移灶,放疗后30 d残癌切除再种植组肝内转移灶数为18±8.05(P＜0.05).放疗后30 d残癌组织EMT相关蛋白N-cadherin、Vim-entin及TMPRSS4、SIP1的表达显著高于对照组及放疗结束后2d残癌组织,而E-cadherin表达则显著降低.结论 放疗后残癌的转移潜能先降低后增强.放疗后残癌TMPRSS4表达增加进而诱导EMT的发生可能是后期转移潜能增强重要原因之一.     

上皮间质转化与肿瘤转移研究进展

上皮细胞间质转化是一种基本的生理病理变化,其在胚胎发育、慢性炎症、纤维化和肿瘤浸润转移中发挥重要作用。近年来,人们发现EMT与肿瘤的发生及转移可能存在关联,使其迅速成为肿瘤研究的焦点。对于EMT的研究不但能进一步了解其影响肿瘤的机制,而且可促进EMT生物标记物及靶向治疗的研究,这对侵袭性肿瘤的诊治具有重大意义。1 EMT概述     

E—cd与泌尿系肿瘤侵袭转移的关系

Ｅ－ｃｄ基因是新近发现的肿瘤抑制基因，其蛋白寥落写癌的侵袭转移密切相关。本文简要要综述Ｅ－ｃｄ在泌尿系肿瘤中研究进展 。     

TMPRSS4在结肠直肠癌中高表达并影响结肠癌细胞的增殖及迁移能力

目的:探讨TMPRSS4基因对结肠癌细胞增殖及迁移的影响。方法 :采用免疫组化方法检测结肠直肠癌组织和正常肠上皮中TMPRSS4的表达,并应用RT-PCR和Western印迹法检测结肠癌细胞株中TMPRSS4的表达,通过RNAi方法下调结肠癌细胞SW480中TMPRSS4的表达后,进一步采用CCK-8法、细胞划痕和transwell迁移试验检测细胞增殖、运动及迁移能力的改变。通过流式细胞仪检测TMPRSS4下调后对细胞凋亡的影响。结果:结肠直肠癌高表达TMPRSS4;肠癌细胞株SW480在mRNA及蛋白水平均高表达TMPRSS4。下调TMPRSS4能抑制SW480的增殖能力(P<0.05),并诱导细胞凋亡增加(P<0.05)。此外,下调TMPRSS4降低SW480细胞的迁移能力(P<0.05)。结论:在高表达细胞株中下调TMPRSS4有助于抑制肠癌细胞增殖,增加细胞凋亡并降低细胞的迁移能力。     

跨膜丝氨酸蛋白酶4对肝细胞癌增殖侵袭作用的影响

目的 探讨跨膜丝氨酸蛋白酶4 (transmembrane protease serine 4,TMPRSS4)对肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)增殖侵袭的作用.方法 构建并鉴定慢病毒转染TMPRSS4过表达的人肝细胞癌细胞系BEL-7402.Western blot及RT-PCR检测TMPRSS4的表达.MTT实验检测TMPRSS4对BEL-7402细胞增殖能力的影响.Transwell实验检测TMPRSS4对细胞侵袭性的影响.结果 RT-PCR及Western blot结果显示TMPRSS4过表达组细胞TMPRSS4蛋白及mRNA表达均显著高于对照组及空白载体转染组.MTT实验结果显示,慢病毒转染后,对照组、空白载体转染组和TMPRSS4过表达组细胞增殖能力无显著差异(P＞0.05).侵袭实验显示TMPRSS4过表达组细胞穿过Matrigel胶到达Transwell小室膜背面的细胞数为49.3±7.4,显著高于对照组(23.3±5.0)和空白载体转染组(19.3±3.2)(P＜0.05).结论 HCC细胞表达TMPRSS4.TMPRSS4过表达可促进HCC细胞的侵袭能力,但是不影响HCC细胞增殖.     

上皮-间质转化在肝癌非手术治疗后促进残癌侵袭、转移的研究进展

上皮-间质转化(EMT)以上皮表型的缺失伴随上皮间质特性的获得为主要特征。上皮-间质转化现象与肝癌非手术治疗后残癌的侵袭、转移能力增加关系密切。本文对近年来有关EMT在各种肝癌非手术治疗后,促进残癌侵袭、转移的研究进展进行综述。     

S100A4蛋白与肿瘤转移和侵袭的研究进展

S100A4蛋白是由101个氨基酸组成的多肽，属于钙离子结合蛋白，最近研究发现S100A4蛋白在各种肿瘤的转移和侵袭性中充当着重要的角色，可以作为很多肿瘤判断预后的指标。本文综述了S100A4蛋白的生物学特性、在肿瘤中的作用及其与肿瘤预后的关系，并探讨了其可能的机制。     

CD133通过上皮间质转化促进胃癌侵袭和转移的研究

目的观察胃癌细胞CDl33表达与胃癌侵袭的关系,进而探讨其是否通过上皮间质转化（EMT）促进胃癌侵袭和转移。方法通过免疫磁珠分选技术,将KATO-Ⅲ细胞分为CDl33阳性细胞和CDl33阴性细胞,利用Transwell小室法检测其侵袭能力,并通过Western blot和RT-PCR方法检测siRNA干扰CDl33基因沉默前后其EMT相关因子的表达差异。Western blot法检测50例胃癌组织及癌旁组织CDl33和EMT相关因子的表达．并分析其相关性。结果CDl33阳性组穿膜细胞数（67．7±10．5）显著高于CDl33阴性组（13．3±6．8,P=0．001）。CDl33阳性细胞中Snail和N-cadherinmRNA及蛋白表达显著高于CDl33阴性细胞．而E-cadherin表达则明显低于CDl33阴性细胞（均P〈0．05）。siRNA干扰后,Snail和N-cadherinmRNA及蛋白表达明显下调,而E-cadherin表达则显著上升（均P〈0．05）。胃癌组织中CDl33、Snail及N-cadherin蛋白相对表达为0．635±0．119、0．599±0．114及0．754±0．154,明显高于癌旁组织的0．485±0．116（P=0．029）、0．259±0．108（P=0．020）和0．329±0．134（P=0．001）,而E-cadherin蛋白表达相对表达为0．378±0．123,明显低于癌旁组织的0．752±0．156（P=O．003）。相关分析显示,Snail及N-cadherin的表达与CDl33表达呈正相关（P〈0．05）,而E-cadherin的表达则与CDl33表达呈负相关（P〈O．05）。结论CDl33阳性胃癌细胞具有更强的侵袭能力,并可能通过EMT促进胃癌的侵袭和转移。     

肿瘤干细胞与肿瘤转移的关系

肿瘤干细胞（CSCs）对细胞毒性药物具有先天性的抵抗能力,与肿瘤细胞的运动性,侵袭性和抗凋亡能力密切相关。上皮/间质转化（EMT）是指在各种因素作用下上皮细胞转变为具有高侵袭、转移能力间质表型的过程,与CSCs关系密切。笔者就CSCs的EMT现象与肿瘤转移,CSCs定植和趋化作用与转移瘤形成,CSCs与临床治疗的关系研究进展作一综述。

     

肿瘤转移机制的研究进展

肿瘤转移是恶性肿瘤的基本特征和重要标志,也是大多数癌症患者的主要致死原因.肿瘤转移是多因素、多基因相互协调作用以及与外界环境相互作用的多阶段过程.对肿瘤转移机制进行研究,将有助于我们深入了解肿瘤转移的本质,为探寻能应用于临床诊断和治疗的靶标提供帮助.     

食管腺癌淋巴结转移与肿瘤侵及食管壁深度的关系

目的 对腺癌侵及食管壁深度与淋巴结转移的关系以及淋巴结转移对预后的影响进行分析研究.方法 澳大利亚弗林德斯大学医学中心自1985年～2003年,手术治疗食管腺癌121例.其中男101例,女20例.年龄36～80岁,平均62岁.本组手术切除率为96.7%（117/121例）.手术清扫淋巴结的数目每例为2～30个,平均8个.无淋巴结转移59例（48.8%）、有淋巴结转移62例（51.2%）.本组病例全部得到随访.结果 当肿瘤位于黏膜层或黏膜下层（T1）时,淋巴结转移的发生率为22.2%（10/45例）、平均淋巴结转移的个数为0.3个、＞4个淋巴结转移的比例为0（0/45例）;当肿瘤侵及食管周围组织（T4）时,淋巴结转移的发生率为85.7%（6/7例）、平均淋巴结转移的个数为5.1个、＞4个淋巴结转移的比例为71.4%（5/7例）,P＜0.05.无淋巴结转移组的5年生存率为52.9%、1～4个淋巴结转移组的5年生存率为11.5%、＞4个淋巴结转移组的5年生存率为0,P＜0.01.结论 肿瘤对食管壁侵及深度和淋巴结转移的发生率及淋巴结转移的数量之间存在正相关性.随着肿瘤对食管壁侵及深度的增加,淋巴结转移的发生率、平均淋巴结转移的数量和＞4个淋巴结转移的比例均增加.有无淋巴结转移和淋巴结转移的数量是影响远期生存率的一个重要因素.     

Twist蛋白和表皮-钙黏附素的表达与大肠癌浸润转移及预后的关系

目的 研究Twist蛋白和表皮-钙黏附素在大肠癌组织中的表达及其与大肠癌侵袭、转移和预后之间的关系. 方法 采用免疫组化EnVision法,检测Twist蛋白和表皮-钙黏附素(E-CD)在30例正常大肠黏膜、30例大肠腺瘤及142例大肠癌组织中的表达.统计采用x2检验、Fisher's确切概率法及Spearman等级相关分析.生存分析采用Kaplan-Meier检验及Cox回归模型,P＜0.05为差异有统计学意义.结果 E-CD蛋白在正常大肠黏膜组织中的强阳性表达率为90％,明显高于其在大肠腺瘤和大肠癌组织中的强阳性表达率(63％和42％,P=0.046,P=0.000).Twist蛋白在大肠癌组织中的阳性表达率为68％,明显高于其在正常大肠黏膜和大肠腺瘤组织中的阳性表达率(20％和30％,P=0.000,P=0.000).E-CD蛋白的表达与肿瘤的分化程度(P =0.048)、浸润深度(P=0.000)、静脉侵犯(P=0.000)、淋巴管侵犯(P =0.030)、淋巴结转移(P =0.001)以及Dukes分期(P =0.016)有关,而与患者的年龄(P =0.174)、性别(P =0.159)、肿瘤大小(P =0.628)以及病理组织学类型(P =0.153)无关.Twist蛋白表达与肿瘤的分化程度(P =0.000)、浸润深度(P=0.000)、静脉侵犯(P =0.000)、淋巴管侵犯(P=0.000)、淋巴结转移(P=0.000)、病理组织学类型(P=0.010)以及Dukes分期(P=0.000)有关,而与患者的年龄(P=0.866)、性别(P =0.254)以及肿瘤大小(P=0.972)无关.E-CD蛋白与Twist蛋白在大肠癌组织中的表达呈负相关(r=-0.530,P=0.000).E-CD阳性表达者的术后1、3和5年的生存率明显高于阴性表达者(P=0.000),Twist阴性表达者的术后1、3和5年的生存率明显高于阳性表达者(P =0.000).静脉侵犯(P =0.045)、淋巴结转移(P=0.040)、Dukes分期(P =0.000)、E-CD(P =0.003)和Twist蛋白的表达(P =0.031)与大肠癌的预后密切相关.结论 大肠癌组织中E-CD蛋白表达降低和Twist蛋白表达增强的患者病期晚、预后差.     

原发性肝细胞癌肝外转移与循环肿瘤细胞的关系

目的 研究原发性肝细胞癌肝外转移与外周血肝癌细胞的关系.方法 收集2005年10月至2006年12月收治的30例原发性肝细胞癌患者术前及手术结束时的外周血标本.并收集10名健康志愿者的外周血作为对照.采用免疫磁珠的方法,富集、分离肝癌患者术前、术后外周血中的癌细胞;随访观察术后患者肝外转移与外周血肝癌细胞的关系.结果 免疫磁珠技术可以富集分离到肝癌患者外周血中游离癌细胞,经甲胎蛋白免疫组化证实为肝细胞癌细胞.30例肝癌患者术前和术后外周血肝癌细胞阳性率分别是53.3%和83.3%,两者差异有统计学意义(P<0.05);术前外周血肝癌细胞阳性与肝外转移发生密切相关;外周血癌肝细胞浓度低于1×10~3个/L者未发现肝外转移.结论 原发性肝细胞癌患者肝外转移与术前外周血肝癌细胞阳性率及肝癌细胞浓度有关.     

MMP-10在食管癌中的表达及与食管癌侵袭转移的研究

目的研究基质金属蛋白酶-10（MMP-10）在食管癌中的表达及与食管癌浸润转移的关系。方法用免疫组化法（S-P法）检测54例食管癌组织中MMP-10的表达和平均血管密度（MVD）。结果食管癌组织中MMP-10的表达明显高于癌旁正常组织，且与食管癌肿瘤外侵、淋巴结转移及临床分期密切相关（P〈0．01）。MMP-10的表达与食管癌组织微血管密度呈正相关（P〈0．05）。结论MMP-10的表达和微血管密度在食管癌的侵袭转移中起重要作用。     

肾细胞癌血管生成与癌细胞转移的关系

目的：探讨肾细胞癌血管生成及其与肿瘤转移的关系。方法：采用免疫组织化学ＬＳＡＢ法检测肾细胞癌血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）的表达及微血管数（ＭＶＣ）。结果：癌组织中ＶＥＧＦ的表达与ＭＶＣ有关;有肿瘤转移者ＶＥＧＦ表达和ＭＶＣ的等级分布显著高于无肿瘤转移者。结论：肾细胞癌血管生成可能有赖于癌细胞合成分泌的ＶＥＧＦ来调节;ＶＥＧＦ表达和ＭＶＣ均与肿瘤转移有关,有可能作为判断肾细胞癌转移潜能的预后指标。     

乳腺癌血管生成与淋巴结转移的关系

为探讨乳腺癌血管生成与淋巴结转移的关系,作者采用免疫组织化学方法检测了１９８４年至１９８５年手术切除的７０例原发性乳腺癌石蜡标本组织中的微血管密度（ＭＶＤ）及血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）表达,其中有腋淋巴结转移（ＬＮ＋）者３１例,无腋淋巴结转移（ＬＮ－）者３９例。光镜下,２００倍视野计数ＭＶＤ,４００倍视野计数ＶＥＧＦ阳性细胞。结果显示：ＬＮ＋组的ＭＶＤ及ＶＥＧＦ表达显著高于ＬＮ－组;ＭＶＤ及ＶＥ     

MicroRNA功能异常与肿瘤浸润转移的关系

microRNA(miRNA)功能异常在肿瘤发生发展中具有极其重要的作用。笔者就miRNA的合成与功能,以及miRNA功能异常在肿瘤细胞的周期、凋亡和浸润转移等恶性表型中的作用进行综述,以探讨其在肿瘤早期诊断与复发监测中的意义。     

MMP-7和VEGF-A的表达与结肠直肠癌浸润转移关系的探讨

目的研究结肠直肠癌基质金属蛋白酶7(MMP-7)和血管内皮生长因子A(VEGF-A)的表达对结肠直肠癌侵袭和转移的影响。方法采用免疫组织化学法检测86例大肠癌组织和10例正常组织中MMP-7和VEGF-A的表达情况。结果在86例结肠直肠癌组织中MMP-7的阳性表达率为65.1%,VEGF-A为50%,与对照组比较有非常显著性差异(P<0.01)。VEGF-A和MMP-7的表达与结肠直肠癌淋巴结转移、分化程度、Ducks分期相关(P<0.05),与性别无关(P>0.05)。VEGF-A的表达与MMP-7的表达呈正相关(P<0.01)。结论大肠癌中MMP-7、VEGF-A的表达与肿瘤侵袭转移密切相关,可作为判断大肠癌恶性程度、转移及预后的重要参考指标。