人参皂苷Rg2对脑缺血再灌注大鼠学习记忆及中枢单胺类递质的影响

目的 观察人参皂苷Rg2对脑缺血再灌注大鼠学习记忆及额叶皮层单胺类递质的影响.方法 将健康SD大鼠48只,随机分为:假手术组、模型组、尼莫地平组及人参皂苷Rg2不同剂量组.采用大脑中动脉栓塞(MCAO)再灌注方法制备拟血管性痴呆(VD)模型大鼠,Y-型电迷宫检测学习记忆能力,高效液相色谱电化学方法测定额叶皮层NE、DA、5-HT含量.结果 人参皂苷Rg2中剂量组大鼠学习尝试次数和记忆尝试次数[分别为(12.4±3.0)次,(8.9±2.4)次]少于模型组[分别为(28.3±2.2)次,(26.0±2.7)次],P＜0.01); 人参皂苷Rg2中剂量组额叶皮层NE、DA、5-HT含量均高于模型组(P＜0.01).结论 人参皂苷Rg2可改善拟VD模型大鼠学习记忆能力,提高额叶皮层单胺类递质含量.     

人参皂苷Rg2对脑缺血再灌注大鼠学习记忆及海马神经元Glu和NMDA受体亚单位表达的影响

目的观察全脑缺血再灌注对大鼠空间学习记忆和海马神经元Glu、N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDAR)亚单位NR1、NR2B表达的影响,探讨人参皂苷Rg2的干预作用。方法SD大鼠56只,采用四血管阻断法制备大鼠全脑缺血再灌注模型(假手术组除外),随机分为7组(各8只):假手术组、模型组、溶酶组(注射2.5 mL/kg的1,2-丙二醇和聚乙二醇400混合液)、人参皂苷Rg2高剂量组(注射10.0 mg/kg人参皂苷Rg2)、中剂量组(注射5.0 mg/kg人参皂苷Rg2)、低剂量组(注射2.5 mg/kg人参皂苷Rg2)、尼莫地平组(注射50μg/kg尼莫地平),MORRIS水迷宫试验检测大鼠学习记忆能力的改变,免疫组织化学和图像分析方法观察Glu、NR1、NR2免疫阳性神经元的表达。结果缺血再灌注模型组大鼠海马Glu、NR1、NR2B免疫阳性神经元的表达与假手术组比较明显增加,人参皂苷Rg2高剂量组Glu、NR1、NR2B神经元的表达与模型组比较明显降低,差异均有显著意义(F=155.249~268.228,q=2.934~5.259,P<0.01)。人参皂苷Rg2高剂量组大鼠逃避潜伏期较模型组明显缩短(F=22.063,q=4.59,P<0.01)。结论人参皂苷Rg2能降低Glu、NR1、NR2B在脑缺血再灌注损伤大鼠海马神经元的表达,并改善学习记忆能力。     

人参皂苷Rg2对大鼠心肌缺血再灌注后SOD、MDA影响

目的:探讨人参皂苷Rg2对大鼠心肌缺血再灌注后的心肌保护机制。方法:选择30只大鼠作为研究对象,并且将这30只大鼠随机的分为三组:假手术组、缺血再灌注组和人参皂苷Rg2组,在手术后第5天将大鼠处死,HE染色观察心肌细胞形态特征和基本结构,检测MDA含量、SOD活性。结果:缺血再灌注组和人参皂苷Rg2治疗组的心肌梗死面积、MDA含量、SOD活性差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:人参皂苷Rg2提高了大鼠心肌缺血再灌注损伤的抗氧化活性,减轻自由基氧化损伤。     

人参皂甙Rg1对脑缺血再灌注大鼠pJNK表达的影响

目的 探讨人参皂甙Rg1对脑缺血再灌注大鼠脑组织c-jun N-末端激酶(pJNK)表达的影响及其意义.方法 将大鼠随机分为假手术组、单纯缺血再灌注组、人参皂甙Rg1 10、20、40 mg/kg组、尼莫地平1 mg/kg组,采用大脑中动脉闭塞法建立脑缺血再灌注模型,应用免疫组织化学方法检测脑组织缺血再灌注4h后pJNK的表达.结果 人参皂甙Rg1各剂量组大鼠脑组织pJNK表达阳性率分别为(23.89±6.77),(15.19±4.59),(9.15±4.77),均低于单纯缺血再灌注组(27.15±8.46).结论 人参皂甙Rg1防治大鼠脑缺血再灌注损伤的机制可能与抑制脑组织pJNK表达有关,且以高剂量效果较好.     

人参总皂苷对大鼠脑缺血再灌注的神经保护研究

目的:了解人参总皂苷对MCAO再灌注大鼠的神经保护作用。方法:采用神经行为学评分,Nissl染色法了解人参总皂苷的抗缺血损伤作用。结果:总皂甙20mg/kg和60mg/kg治疗组可改善缺血再灌注后24h神经行为学评分,以20mg/kg效果更为显著。总皂甙20mg/kg和60mg/kg治疗组大鼠顶叶皮层缺血半暗带区神经元存活较多,其中以20mg/kg组神经元存活率最高。结论:人参总皂苷对MCAO后再灌注的大鼠脑组织具有保护作用。     

人参皂苷Rbl对大鼠脑缺血再灌注JAK2/STAT3信号转导通路的影响

目的探讨人参皂苷Rbl对脑缺血再灌注损伤JAK2/STAT3胞内信号通路的影响,明确其保护机制。方法建立大脑中动脉缺血再灌注(MCAO/R)模型,将大鼠随机分为假手术组、溶媒组、人参皂苷Rbl低剂量组、人参皂苷Rb1高剂量组,观察大鼠神经行为学障碍程度,ELISA检测脑组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)的含量,免疫组织化学染色法观察缺血侧大脑p-JAK2和p-STAT3的表达。结果 (1)与溶媒组比较,人参皂苷Rbl高剂量组显著降低大鼠神经行为学评分(P<0.05)。(2)人参皂苷Rbl高剂量组明显减少TNF-α、IL-6的含量(P<0.05或P<0.01),而在低剂量组,TNF-α含量显著减少(P<0.05),IL-6的含量也有所降低但差异无统计学意义(P>0.05)。(3)人参皂苷Rbl高剂量组、低剂量组显著降低p-JAK2和p-STAT3的表达(P<0.05或P<0.01)。结论人参皂苷Rbl可能通过调控细胞因子介导的JAK2/STAT3信号途径保护脑缺血再灌注损伤。     

三七皂苷Rg1对脑缺血再灌注大鼠小脑和延髓中BDNF表达的影响

目的：探讨三七皂苷Rg1对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤小脑和延髓的BDNF阳性蛋白的含量和阳性神经元数是否具有上调作用．方法：选取成年雄性SD大鼠60只，随机分为脑缺血再灌注模型组、药物（高、中、低剂量）干预组和阳性对照组，采用线栓法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注模型，各组分别于给药后1、3、7d随机取4只大鼠处死取材。冰冻法切片，免疫组化ABC法染色，用高清晰度彩色病理图文报告分析系统测量分析各组大鼠小脑和延髓的BDNF阳性蛋白的含量和阳性神经元数目的变化，并观察大鼠脑缺血后的神经缺失症状，数据用方差分析和q检验进行统计学处理．结果：与模型组相比，三七皂苷Rg1高、中、低剂量组在给药1、3、7d后均能明显改善脑缺血的神经缺失症状，并能上调大鼠脑缺血再灌注损伤小脑和延髓的BDNF阳性蛋白的含量和阳性神经元数量p〈0．05）；与阳性对照组相比，在不同组别中，作用上强于或类似于阳性对照药尼莫地平．结论：三七皂苷Rg1能上调BDNF阳性蛋白的表达，通过BDNF对脑缺血再灌注神经元损伤所起的保护作用，从而发挥其对脑缺血的治疗作用，这可能是三七皂苷Rg1对脑缺血保护作用的机制之一。     

人参皂苷Rg1对脑缺血影响的行为指标分析

目的　研究人参皂苷Rg1 对实验性脑缺血的影响 ,并对大鼠脑缺血的行为指标进行分析 ,以期初步了解Rg1 对脑缺血的保护和治疗作用。方法　制作大鼠大脑中动脉供血区梗塞模型 ,腹腔给予不同组别不同剂量的Rg1 ,根据神经功能缺失症状指标进行评分。结果　 1d组Rg1 各剂量 (5 0、10 0、2 0 0mg kg)与阳性对照组 (尼莫地平 1mg kg)和模型对照组 (0 9%生理盐水 5ml kg)之间相比 ,差异均无显著性 (P >0 0 5 ) ;3d组Rg1 各剂量与阳性对照组相比 ,差异也无显著性 (P >0 0 5 ) ,而与模型对照组相比 ,只有 10 0mg kg中剂量Rg1 差异有显著性 (P <0 0 5 ) ;7d组Rg1 各剂量与阳性对照组和模型组之间相比 ,差异均有显著性P <0 0 5。结论　人参皂苷Rg1 对脑缺血有一定的治疗和保护作用 ,但从实验来看无量效关系 ,却有明显的时效关系 ,用药时间不能过短 ,(7d为宜 )。     

人参皂苷Rg1对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后脑皮层内泛素修饰蛋白聚集的影响

目的：探讨人参皂苷Rg1在大鼠脑缺血再灌注（I/R）损伤后皮层内泛素修饰蛋白聚集过程中的作用,进一步阐明人参皂苷Rg1对脑I/R损伤的治疗机制。方法：将大鼠采用线栓法栓塞1.5 h制作大脑中动脉缺血（MCAO）模型。72只健康雄性SD大鼠分为假手术组,I/R模型组,阳性药物对照（尼莫地平）组,低、中和高剂量（10、20和40 mg·kg^-1）人参皂苷Rg1组,每组12只大鼠,均采用腹腔注射给药。在建模24h后采用TTC染色法和Longa法测量各组大鼠脑梗死面积和神经功能缺损评分,HE染色观察各组大鼠脑缺血后皮层和海马内的神经元死亡情况,免疫组织化学和Western blotting法检测各组大鼠皮层内泛素修饰蛋白聚集物的表达情况。结果：与I/R模型组比较,尼莫地平和剂量人参皂苷Rg1组大鼠脑梗死面积百分比明显减小（P<0.05）,神经功能缺损评分明显降低（P<0.05）。HE染色,与假手术组比较,I/R模型组大鼠神经元稀疏,出现碎裂、溶解现象;与I/R模型组比较,尼莫地平组和各剂量人参皂苷Rg1大鼠神经元核碎裂、溶解、粉染等现象均有不同程度改善。免疫组织化学检测,与假手术组比较,I/R模型组大鼠泛素修饰蛋白表达水平明显增多（P<0.05）;与I/R模型组比较,尼莫地平和各剂量人参皂苷Rg1组大鼠泛素修饰蛋白阳性表达水平均明显降低（P<0.05）,以高剂量人参皂苷Rg1组效果最明显。Western blotting法检测,与假手术组比较,I/R模型组大鼠泛素修饰蛋白聚集物水平明显升高（P<0.05）;与I/R模型组比较,尼莫地平和各剂量人参皂苷Rg1组大鼠泛素修饰蛋白聚集物水平明显降低（P<0.05）,且以高剂量人参皂苷Rg1组效果最为明显。结论：人参皂苷Rg1可抑制大鼠脑皮层内I/R损伤所诱导的泛素修饰蛋白聚集物形成,进而减轻大鼠脑I/R损伤。     

全脑缺血再灌注对大鼠空间分辨学习和记忆的影响

目的：探讨全脑缺血再灌注后不同时间对大鼠空间分辨学习和记忆能力的影响。方法：采用改良的Pulsinelli 4-血管阻断（4－vo)方法建立SD大鼠急性全脑缺血模型，缺血前后分别采用Y型迷宫试验对各组进行行为学定量测定。结果：全脑缺血再灌注后3天、7天学习记忆能力明显下降。结论：急性全脑缺血再灌注使大鼠学习、记忆功能受到损害。     

不同脑缺血方式对大鼠学习记忆能力的影响

目的建立一种合适的脑缺血动物模型对于探寻疾病的发生以及防治至关重要。方法本研究采用双侧颈总动脉(CCA)永久性结扎法、双侧椎动脉(VA)电凝并双侧颈总动脉反复夹闭法、双侧颈总动脉反复夹闭并全身低血压3种不同的脑缺血模型制作方法处理大鼠,并于术后15d、30d、60d、90d4个不同时间点进行Morris水迷宫测试,应用SPSS11.0统计软件分析各组大鼠的行为学检测结果,采用平均逃避潜伏期和搜索策略两个指标评价大鼠学习记忆能力。结果脑缺血30d以内,大鼠的学习记忆能力以双侧VA电凝并双侧CCA反复夹闭法和双侧CCA反复夹闭并全身低血压制作的模型组最差[术后30d,逃避潜伏期分别为:(29.23±5.39)s,(30.03±8.84)s;综合得分:(766.20±173.55)分,(610.20±73.81)分];脑缺血30~60d,以双侧CCA永久性结扎法和双侧VA电凝合并双侧CCA反复夹闭法制作的模型组最差[术后60d,逃避潜伏期为:(18.56±4.15)s,(20.61±4.87)s,综合得分:(449.4±95.45)分,(437.4±80.22)分];60d以上,以双侧CCA永久性结扎法制作的模型组成绩最差[术后90d该组的逃避潜伏期:(16.63±3.00)s;综合得分:(410.8±92.37)分]。结论不同脑缺血方式对大鼠学习记忆能力的影响和不同的缺血时间密切相关,适合于不同病因诱发的脑缺血梗死疾病的研究。     

脑缺血再灌致小鼠学习记忆障碍模型的建立

目的:建立一种新的脑缺血再灌致小鼠学习记忆障碍模型.方法:采用双侧颈总动脉夹闭合并取血降压再回输的方法建立小鼠学习记忆障碍模型,进行自发活动、跳台和水迷宫实验、病理学检测及总抗氧化能力、超氧化物歧化酶(superoxidedismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)的检测.结果:与假手术组比较,模型组小鼠神经元损伤明显,小鼠自发活动明显减少,跳台实验的上台潜伏期、电击时间明显上升,记忆成绩中的错误次数明显增多,下台潜伏期、台上总停留时间显著下降.与假手术组比较,模型组小鼠空间分辨学习记忆成绩明显降低,D3、D4、D5的错误次数明显增加,潜伏期显著上升.模型组总抗氧化能力和SOD活性显著下降,MDA含量明显升高.结论:双侧颈总动脉夹闭合并取血降压再灌注方法建立的小鼠模型可作为脑缺血再灌致学习记忆障碍的动物模型用于基础实验研究.     

针刺对缺血再灌注大鼠脑细胞凋亡的保护作用及机制

目的 探讨脑缺血再灌注后针刺对脑细胞线粒体跨膜电位的保护作用及保护机制.方法 采用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,针刺水沟、百会二穴,通过Rhodamin123荧光染色、TUNEL原位标记及电镜观察,分别于脑缺血再灌注后24h及48h检测脑细胞线粒体跨膜电位、线粒体超微结构及脑凋亡细胞的变化.结果 脑缺血再灌注后Rhodamin123的荧光强度增强,术后24h是(961.27±34.22),48h是(1231.23±121.54),与假手术组(782.82±57.24)比较明显增高(P<0.05);针刺干预后Rhodamin123的荧光强度术后24h是(808.44±56.23),48 h是(954.25±35.11),与脑缺血再灌注组比较明显下降(P<0.05);脑缺血再灌注后24h凋亡细胞是[(26.12±2.75)个/视野],48 h凋亡细胞是[(41.24±4.73)个/视野],与假手术组[(3.56±0.92)个/视野]比较明显增加(P<0.05),针刺干预后24h[(19.88±3.32)个/视野]与48 h[(33.23±3.81)个/视野]凋亡细胞数量与脑缺血再灌注组比较明显减少(P< 0.05);脑缺血再灌注后线粒体膜肿胀、崩解,内嵴断裂,中毒颗粒增加,针刺干预后线粒体的非特异性改变明显减轻.结论 针刺能够稳定线粒体膜的通透性,减少线粒体跨膜电位的耗散,减少缺血再灌注后脑细胞凋亡,增加脑组织对缺血缺氧的耐受性.     

促红细胞生成素对大鼠全脑缺血再灌注后海马蛋白激酶B表达的影响

目的观察促红细胞生成素(EPO)对大鼠全脑缺血再灌注后海马CA1区蛋白激酶B表达的影响,进一步探讨EPO脑保护作用的机制。方法采用改良的Pulsinelli四血管阻断方法制作大鼠全脑缺血再灌注模型。将SD大鼠随机分为4组:正常组、假手术组、缺血再灌注组和EPO治疗组。各组动物分别于缺血15min再灌注6h、24h、48h、72h、7d断头取脑。鼠脑灌注及固定后制作石蜡切片,HE染色观察海马的病理变化,用TUNEL方法检测海马CA1区神经细胞凋亡,免疫组织化学SP法观察磷酸化蛋白激酶B(p-PKB)表达。另外再取24只大鼠分为4组:正常组、假手术组、缺血再灌注组和EPO治疗组,应用Y型迷宫法对缺血再灌注7d的大鼠进行缺血后学习和记忆功能的测定。结果(1)TUNEL染色:假手术组48h、72h可见个别阳性细胞。缺血再灌注组于再灌注24h可见少量阳性细胞;再灌注48h可见较多TUNEL阳性细胞,72h出现大量TUNEL阳性细胞,7d明显减少。EPO治疗组TUNEL阳性细胞在各时间点明显少于缺血再灌注组[(948.6±91.0)个vs(502.7±97.3)个,P<0.01]。(2)认知功能变化:全脑缺血再灌注后7d大鼠学习能力降低,尝试次数明显增多(P<0.01)。EPO治疗组尝试次数减少,有显著性差异(P<0.01)。学习能力测试后24h记忆功能测定,结果发现缺血再灌注组成绩明显低下,EPO处理组可改善缺血造成的大鼠记忆功能障碍[(20.06±3.85)svs(12.93±3.04)s,P<0.01]。(3)p-PKB免疫组化染色:缺血再灌注组于再灌注6h即出现p-PKB明显表达增高,72h达高峰,7d明显下降。EPO治疗组于再灌注6h、48h、72h、7d,p-PKB蛋白表达较缺血再灌注组增高[(25.42±3.86)vs(11.64±2.13),P<0.01]。(4)相关分析:TUNEL阳性细胞与p-PKB蛋白表达则呈负相关,而大鼠学习能力与海马CA1区存活神经细胞数呈正相关趋势。结论EPO能减少大鼠脑缺血再灌注损伤后海马CA1区神经细胞的坏死和凋亡,减轻脑缺血再灌注损伤后大鼠学习、记忆功能障碍。EPO可能通过增强海马神经细胞p-PKB的表达,发挥神经细胞保护作用。     

脑梗塞对大鼠学习记忆的影响

本实验将大鼠的两侧颈动脉结扎，以大鼠暗环境被动回避试验作为学习记忆指标，发现该大鼠模型出现了持续性的学习记忆障碍，作组织切片发现８０％模型出现脑梗塞灶，本研究提示该脑梗塞模式可作为学习记忆行为检查的依据。     

二巯丙磺钠对小鼠脑缺血再灌注致学习记忆功能障碍的影响

目的：观察二巯丙磺钠（Na-DMPS)对脑缺血再灌注后小鼠记忆功能的保护作用。方法：采用暂时性阻断两侧颈总动脉的方法制备小鼠脑缺血再灌注损伤的模型，测试其被动回避能力及脑内丙二醛（MDA）含量。结果：icv Na-DMPS可延长脑缺血再灌注小鼠的避暗潜伏期，减少错误次数，并降低脑内MDA的含量。结论：Na-DMPS可通过抑制脑内的脂质过氧化反应，而明显减轻脑缺血再灌注导致的小鼠学习记忆功能障碍。     

慢性脑缺血对青年和老年大鼠学习记忆的影响

目的研究慢性脑缺血对青、老年大鼠学习记忆的影响。方法永久性结扎大鼠双侧颈总动脉，用Morris水迷宫测试大鼠逃避潜伏期和平台象限泳距百分比。结果缺血1月，青年和老年大鼠平均逃避潜伏期均大于同龄对照组，P＜0.01;缺血3月，青年鼠平均逃避潜伏期大于对照组，P＜0.01，和缺血1月组间差异不显著;老年鼠大于同龄对照组和缺血1月组，P＜0.01。青年缺血1月和3月组平台象限泳距百分比均小于对照组，P＜0.01;老年对照组、缺血1月组及缺血3月组平台象限泳距百分比间差异不显著。结论慢性脑缺血可在一定水平损害青年大鼠的学习与记忆，并进行性损害老年大鼠的学习能力，但对老年大鼠空间记忆的影响不显著。     

尼莫通对缺氧缺血新生大鼠远期学习记忆的影响

目的观察缺氧缺血性脑损伤对远期学习记忆及海马锥体神经元的影响,以及尼莫通治疗的效果。方法选择7日龄Wistar大鼠34只,行右侧颈总动脉结扎后,吸入8%氧气2小时,然后随机取13只立即给予尼莫通160μg/kg腹腔注射,共5天;对照组给予生理盐水。至生后80～90天时进行Y迷宫分辨学习和记忆保持百分率的检测,然后取脑进行神经病理学检查。结果与正常组相比,缺氧缺血显著降低大鼠Y迷宫分辨学习能力(32.86±8.22,P＜0.01)和记忆保持百分数(59.00±21.32%,P＜0.05),并且使海马CA1区锥体神经元数密度显著减少(5.25±1.3×10