女性关键生育力评价指标雌二醇、抗苗勒管激素及窦卵泡数目的拉曼光谱检测

目的 选取评价女性生育力的关键指标雌二醇（E2）、抗苗勒管激素（AMH）及窦卵泡数目（AFC）,探究其在健康女性和不孕女性血清样本中表面增强拉曼光谱（SERS）的差异性及其应用于临床女性生育力评价初筛的可能价值。方法 收集南京医科大学第一附属医院生殖医学中心育龄期的健康女性和不孕女性血清标本共236份,所有受试者年龄均处于育龄阶段（22~49岁）,平均年龄为（30.8±5.1）岁。依据临床检测结果,将血清标本分为E2高值组（>5 000 pmol/L,78例）与E2低值组（<500 pmol/L,86例）、AMH高值组（≥ 1.1 ng/mL,33例）与AMH低值组（<1.1 ng/mL,30例）、AFC高值组（>14个,68例）与AFC低值组（<7个,34例）。建立血清SERS分析法并检测各组样本的拉曼光谱,对信号进行正交偏最小二乘法判别分析（OPLS-DA）、受试者工作特征（ROC）曲线分析及置换检验等统计学处理。结果 血清标本的平均拉曼光谱形态和谱峰E2高值组与低值组之间、AMH高值组与低值组之间、AFC高值组与低值组之间基本相似,但谱峰强弱在3个指标的高值组与低值组之间存在差异。在OPLS-DA模型中,E2、AMH和AFC 3个指标的高值组与低值组之间均具有明显的组间分离趋势,其ROC曲线下面积分别为0.996与0.996、0.995与0.995、1与1。结论 SERS技术具备应用于临床女性生育力初筛的潜力,血清SERS图谱作为不孕不育早期诊断的一种辅助手段值得进一步研究。     

FTS与NIRF共轭化合物用于小鼠肿瘤模型的成像和治疗

目的 研究法尼基硫代水杨酸（farnesylthiosalicylic Acid，FTS）与七甲川菁（heptamethine carbocyanine）近红外（near infrared，NIR）荧光染料共轭化合物的肿瘤靶向性及其在活体成像中的应用，明确该化合物对肿瘤生长的抑制作用。方法 将人乳腺癌细胞MCF-7、胶质瘤细胞U251和前列腺癌细胞PC3培养至对数生长期后，分别加入不同浓度的FTS和FTS-IR783，观察两种化合物对肿瘤细胞的生长抑制作用；培养的三种肿瘤细胞中加入FTS-IR783（20 μmol/L），荧光显微镜下观察荧光染料在肿瘤细胞中的聚集；将三种肿瘤细胞（每只1×10⁶个）皮下移植裸鼠，两周后荷瘤鼠腹腔注射FTS-IR783（每只10 nmol/L），活体成像分别测定肿瘤部位近红外荧光信号和肿瘤体积的相关性。结果 与FTS相比较，FTS-IR783可显著抑制MCF-7、U251和PC3的生长；三种肿瘤细胞可特异性识别FTS-IR783，呈现近红外荧光集聚；皮下荷瘤模型注射FTS-IR783后，活体成像显示肿瘤部位荧光强度与生物发光强度相关性分别达到0.987，0.998和0.971。结论 FTS与近红外荧光染料IR-783共轭结合后可特异性识别肿瘤细胞，用于肿瘤模型的活体成像，同时该化合物具有的肿瘤靶向性可显著抑制肿瘤细胞的生长，有望成为新型的靶向药物。     

Angiopep-2修饰的脑靶向多肽胶束的制备及体外评价

目的 构建angiopep-2修饰的硫辛酸-聚精氨酸组氨酸（LHRss）多肽纳米胶束并包载抗肿瘤药物多柔比星（DOX）的脑胶质瘤靶向纳米给药系统（LHRss-An/DOX）。方法 采用超声乳化法制备包载化疗药物DOX的多肽胶束LHRss-An/DOX,检测复合物的粒径、zeta电位和外观形态;测定载药量和包封率,并对其体外释放特性进行考察;通过体外血脑屏障（BBB）模型考察载药胶束的跨膜转运效率,使用激光扫描共聚焦显微镜观察DOX胞内的分布情况及对脑胶质瘤的靶向性。结果 胶束LHRss-An/DOX呈球形,平均粒径为（100.9±8.7） nm,聚合物分散性指数为0.232,电位为（28.8±3.3） mV,最佳药载比为40%,载药量为15.8%,包封率为55.3%,在pH 7.4、pH 5.5和pH 5.5+10 mmol/L DL-二硫苏糖醇（DTT）环境下72 h内的累积释放率分别为（60.3±2.6）%、（84.1±3.9）%和（96.6±2.7）%;LHRss-An/DOX的跨BBB效率分别是LHRss/DOX和游离DOX的2.04和4.27倍,差异有统计学意义（P<0.05）;脑胶质瘤细胞U251摄取LHRss-An/DOX的荧光强度强于LHRss/DOX和游离DOX的荧光强度。结论 经过angiopep-2修饰的载药纳米胶束的跨BBB能力及脑胶质瘤的靶向性显著增强,是一种潜在高效的靶向胶质瘤给药系统。     

血浆uPA、PAI-1和其4G/5G多态性与鼻咽癌临床分期关系

目的 探讨尿激酶型纤溶酶原激活物（uPA）、纤溶酶原激活物抑制剂1（PAI-1）的血浆浓度和PAI-1基因启动子区4G/5G多态性与鼻咽癌临床分期的相关性。方法 收集86例鼻咽癌患者血液标本,35例健康人血液标本作对照。所有标本均采用用酶联免疫吸附法（ELISA法）检测uPA和PAI-1的血浆浓度,微量法提取DNA,采用等位基因特异性引物PCR分析PAI-1基因启动子4G/5G多态性。结果 与正常对照组相比,鼻咽癌组血浆uPA浓度明显升高（P<0.05）,而血浆PAI-1浓度显著降低（P<0.05）,上述效应和临床分期具有显著相关性;PAI-1启动子区4G和5G基因频率与对照组相比差异无统计学意义（P>0.05）。结论 鼻咽癌的临床分期和恶性程度和血浆uPA浓度呈正相关,与PAI-1浓度呈负相关;PAI-1基因4G/5G多态性与鼻咽癌没有相关性。     

靶向MPO的次氯酸荧光探针用于细胞成像

目的：合成靶向髓过氧化物酶（myeloperoxidase,MPO）的次氯酸（hypochloric acid,HClO）荧光探针并评估其HClO示踪活性。方法：以硅罗丹明为荧光团合成SiRho-GABA-KYC,紫外分光光度计和荧光分光光度计检测其紫外光谱和荧光光谱以及pH稳定性和选择性,CCK-8法检测细胞毒性,用共聚焦显微镜进行细胞荧光成像。结果：合成了SiRho-GABA-KYC,对 HClO响应高,选择性好,细胞毒性小,可示踪HeLa细胞中HClO浓度的变化。结论：探针SiRho-GABA-KYC可用于检测HClO 浓度进而反映MPO催化活性。     

幽门螺杆菌感染致胃黏膜及尿中RNA损伤水平测定

目的 检测幽门螺杆菌（Hp）感染患者胃窦部黏膜及尿液中8-氧化脱氧鸟苷及8-氧化鸟苷水平,探讨Hp感染与DNA及RNA氧化损伤的相关性,并比较不同取材部位水平的差异。方法 Hp阳性组85例,Hp阴性组31例。分别留取尿液标本以层析分析法,同时两组中各30例取胃窦部黏膜以免疫组化法检测8-氧化脱氧鸟苷及8-氧化鸟苷。结果 胃窦部黏膜检测结果显示Hp阳性组8氧化鸟苷高于Hp阴性组,差异有统计学意义（P<0.05）,8-氧化脱氧鸟苷高于Hp阴性组,差异无统计学意义（P>0.05）;尿液检测,Hp阳性组8-氧化鸟苷及8-氧化脱氧鸟苷水平均高于Hp阴性组,差异均有统计学意义（P<0.05）。结论 尿液检测与胃黏膜组织检测结果趋势一致,Hp感染后DNA及RNA氧化损伤水平高于Hp阴性对照组,且尿液检测更敏感。RNA氧化产物8-氧化鸟苷可能是Hp感染致病的一个较敏感的指标。     

循环miR⁃124作为铅神经毒性标志物的灵敏性、稳定性和组织特异性研究

目的：验证循环微小核糖核酸（microRNA,miRNA）-124的稳定性、组织特异性及其检测铅神经毒性的灵敏性,为循环miR-124用于铅神经毒性评价提供依据。方法：采用Zea-Longa线栓法建立大鼠大脑中动脉闭塞模型,采集血液样本离心、分装后立即检测或在室温、2~8 ℃和-70~-90 ℃条件下储存不同时间后,采用实时荧光定量聚合酶链式反应（quantitative real- time polymerase chain reaction,RT-qPCR）检测miR-124的表达;分别使用对乙酰氨基酚（1 250 mg/kg）、异丙肾上腺素（2.5 mg/kg）和庆大霉素（80 mg/kg）建立大鼠肝毒性、心脏毒性和肾毒性模型,采集血液样本检测并比较造模前后循环miR-124的变化;使用醋酸铅（300、600 mg/kg）建立大鼠神经毒性模型,采用酶联免疫吸附测定方法（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）检测白细胞介素（interleukin,IL）-10、IL-1β和肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factorα,TNF-α）的变化,比较检测到细胞因子和循环 miR-124含量变化的时间评估其灵敏性。结果：以新鲜血液样本作为对照,血液样本室温保存6 h,2~8 ℃保存24 h,-70~-90 ℃ 保存36 d以及3次冻融后循环miR-124仍保持稳定,稳定性可以支持实验室需求;循环miR-124在大鼠肝毒性、心脏毒性和肾毒性模型中均无明显改变,具有良好的组织特异性;与细胞因子相比,循环miR-124可以更灵敏地检测铅暴露引起的神经炎症。结论：循环miR-124具有良好的稳定性、组织特异性和灵敏性,可作为评价铅神经毒性的潜在的生物标志物。     

开展品管圈活动提高单克隆浆细胞遗传学异常检出率

目的 通过开展品管圈活动,提高单克隆浆细胞遗传学异常检出率。方法 成立品管圈小组,收集海军军医大学（第二军医大学）长海医院血液科2014年6月至2014年12月所有疑诊多发性骨髓瘤并进行浆细胞相关免疫荧光原位杂交（FISH）检测的骨髓标本,分析单克隆浆细胞遗传学异常检出率的状况,并与文献对比发现异常检出率差异及可能原因,制定改进措施、实践并回顾分析、判断改进效果。结果 现况调查发现初发标本内肿瘤负荷低、检测结果在临界值附近无法判断是本次活动改善重点。品管圈活动小组通过头脑风暴,根据实验室现有条件,提出了先用流式分选浓缩异常细胞,提高肿瘤细胞密度、降低背景值,再进行遗传学检测等关键手段。最终将我院单克隆浆细胞遗传学异常检出率从61.3%（95/155）提高至92.1%（174/189）。结论 通过开展品管圈活动,优化了疑诊多发性骨髓瘤患者骨髓FISH检测流程,有效提高了浆细胞遗传学异常检出率。     

异长春花碱不同制剂的抗肿瘤作用比较研究

目的 比较异长春花碱（VRB）长循环脂质体、普通脂质体、重酒石酸盐注射液不同剂型的抗肿瘤作用。方法 建立C57BL/6J小鼠Lewis肺癌模型,以肿瘤体积、小鼠生存时间、抑瘤率、组织病理切片为指标考察VRB不同制剂的抗肿瘤作用。结果 与模型组（平均肿瘤体积为4 980 mm³）相比,VRB长循环脂质体组、普通脂质体组和重酒石酸盐注射液组小鼠造模30 d后的平均肿瘤体积分别为1 622、2 136、3 652 mm³（P＜0.05、0.01）,抑瘤率分别为66.29%、49.44%、29.21%（P＜0.01）;VRB长循环脂质体组小鼠生存时间明显延长;肿瘤组织病理切片观察可见各制剂组肿瘤细胞均出现不同程度的坏死,其中VRB长循环脂质体组出现肿瘤细胞核凝固坏死、核破碎溶解现象。结论 在相同给药剂量下,VRB长循环脂质体的抗肿瘤作用明显优于其重酒石酸盐注射液。     

5种生物碱胃癌多药耐药逆转剂的筛选及机制研究

目的 研究骆驼蓬碱、去氢骆驼蓬碱、贝母素甲、贝母素乙和氧化苦参碱对肿瘤细胞多药耐药性（MDR）的逆转作用及机制。方法 以胃癌亲本细胞系SGC-7901和MDR细胞系SGC-7901/VCR为细胞模型,采用MTT法检测上述5种生物碱的细胞毒活性及对MDR的逆转效果;用流式细胞仪检测MDR逆转效果最好的贝母素乙对肿瘤细胞内阿霉素（ADR）蓄积的影响;Western blotting法检测P-糖蛋白（P-gp）的表达;Hoechst荧光染色和细胞免疫荧光法检测贝母素乙诱导SGC-7901/VCR细胞凋亡情况。结果 骆驼蓬碱、去氢骆驼蓬碱、贝母素甲、贝母素乙和氧化苦参碱均能不同程度地抑制SGC-7901和SGC-7901/VCR细胞的增殖,在非毒剂量下贝母素乙能够显著提高SGC-7901/VCR细胞对ADR的敏感性及细胞内ADR的浓度,降低P-gp表达。贝母素乙联合5-氟尿嘧啶（5-FU）给药可诱导SGC-7901/VCR细胞凋亡,凋亡细胞cleaved caspase-3呈高表达。结论 贝母素乙具有作为胃癌MDR逆转剂的潜力,其逆转耐药的机制可能与下调P-gp表达和诱导细胞凋亡有关。     

Rapid Identification of Legionella Pathogenicity by Surface-Enhanced Raman Spectroscopy

Objective To establish Surface-enhanced Raman Spectroscopy (SERS) can be used as a rapid and reliable method to distinguish virulent strain and mild strain of L. pneumophila.
Methods We isolated and characterized of bacterial strains from ATCC and water samples strains, while we analyzed data from SERS technology using gold nanoparticles as a base and cell infections were employed to rapidly detect L. pneumophila strains. Origin 8.0 was used to collect Raman spectra, smooth and homogenize data, and to contrast spectra. Principal component analysis (PCA) was conducted to discriminate differences between groups using the multivariate analysis package PyChem 3.0.5.
Results Our results indicated that the peaks of high virulence strains reached≥4000. This criterion was verified by subsequent cell experiments. In addition, we also conducted SERS rapid identification on the virulence of several collected clinical strains and obtained accurate results.
Conclusion The present study indicates that the established SERS protocol can be used as a rapid and reliable method to distinguish virulent and mildly virulent strains of L. pneumophila, which can be further used in clinical samples.     

Formation mechanisms of sub-micron pharmaceutical composite particles derived from far- and near-field Raman microscopy

Surface enhanced Raman spectroscopy (SERS) and confocal Raman microscopy are applied to investigate the structure and the molecular arrangement of sub-micron furosemide and polyvinylpyrrolidone (furosemide/PVP) particles produced by spray flash evaporation (SFE). Morphology, size and crystallinity of furosemide/PVP particles are analyzed by scanning electron microscopy (SEM) and X-ray powder diffraction (XRPD). Far-field Raman spectra and confocal far-field Raman maps of furosemide/PVP particles are interpreted based on the far-field Raman spectra of pure furosemide and PVP precursors. Confocal far-field Raman microscopy shows that furosemide/PVP particles feature an intermixture of furosemide and PVP molecules at the sub-micron scale. SERS and surface-enhanced confocal Raman microscopy (SECoRM) are performed on furosemide, PVP and furosemide/PVP composite particles sputtered with silver (40 nm). SERS and SECoRM maps reveal that furosemide/PVP particle surfaces mainly consist of PVP molecules. The combination of surface and bulk sensitive analyses reveal that furosemide/PVP sub-micron particles are formed by the agglomeration of primary furosemide nano-crystals embedded in a thin PVP matrix. Interestingly, both far-field Raman microscopy and SECoRM provide molecular information on a statistically-relevant amount of sub-micron particles in a single microscopic map; this combination is thus an effective and time-saving tool for investigating organic sub-micron composites.     

用膜滤过联合激光扫描细胞仪检测恶性肿瘤患者循环肿瘤细胞

目的建立用膜滤过分离肿瘤细胞技术（ISET）联合激光扫描细胞仪（LSC）检测循环肿瘤细胞（CTC）的方法。方法将不同数量的乳腺癌细胞系（MCF-7）细胞分别混入健康血标本中,用ISET联合LSC自动扫描分析,以建立稳定的检测方法,同时验证该方法肿瘤细胞回收率、敏感性及特异性。结果建立了用ISET（用8μm孔径的聚碳酸酯滤膜）联合LSC,并用CK8抗体、CD45抗体分别作为肿瘤上皮细胞的阳性和阴性选择标记来检测CTC的方法;该方法肿瘤细胞回收率为（10.34±1.15）%,在混入60～600000个肿瘤细胞范围内回收率保持稳定（P〉0.05）;达到可检测到1ml血中一个肿瘤细胞的敏感性,相同条件下空白对照组均未检出肿瘤细胞。结论用ISET联合LSC检测恶性肿瘤患者CTC方法简便、敏感性高、特异性强,有望进一步应用于临床。     

实时荧光定量PCR法检测乳腺癌外周血循环肿瘤细胞的临床价值

目的:比较运用实时荧光定量PCR法联合不同生物标志物细胞角蛋白19(cytokeratin 19,CK19)?乳珠蛋白(human mammaglobin,hMAM)?小黏蛋白(small breast epithelial mucin,SBEM)检测乳腺癌外周血循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTCs)的临床价值?方法:运用实时荧光定量PCR法检测人乳腺癌细胞株MCF-7中的生物标志物CK19?hMAM?SBEM的表达情况,对20例健康志愿者和20例乳腺良性疾病患者(对照组人群)进行检测以确定CK19?hMAM?SBEM在外周血中的基础表达水平,检测94例可手术乳腺癌患者外周血中CK19?hMAM?SBEM表达情况?结果:人乳腺癌细胞株MCF-7中CK19?hMAM?SBEM均有表达,Ct值分别为13.87?34.47?20.14;40例对照组人群中有1例表达CK19,另有1例表达hMAM,未检测到SBEM表达;94例可手术乳腺癌患者中CK19表达率49%?hMAM表达率34%?SBEM表达率13%,联合CK19?hMAM?SBEM阳性率为56%?结论:运用多标志物(CK19?hMAM?SBEM)联合的实时荧光定量PCR法检测乳腺癌外周血CTCs具有较高的敏感性,同时特异性并不降低?     

肝细胞癌患者血液AFP mRNA检测的临床意义

目的：探讨肝细胞癌患者血液甲胎蛋白（ＡＦＰ）ｍｒＲＮＡ检测的临床意义。方法：取９３例肝癌患者,１５例肝炎后肝硬化患者,１２例慢性肝炎患者及１０例健康人静脉血各５ｍｌ,应用巢式ＲＴ－ＰＣＲ检测其周围静脉血中ＡＦＰｍＦＮＡ。结果：在５０个肝癌血标本中检测到ＡＦＰｍＲＮＡ（５３．８％）,而对照组中未检测到１例。ＡＦＰｍＲＮＡ检出率与肝癌分期、血清ＡＦＰ浓度、肝内转移、门静脉癌栓、肿瘤大小及远处转移有明显     

外周血癌细胞中多种肿瘤标记物基因检测预测乳腺癌患者转移和预后的意义

目的：筛选一组可检测乳腺癌循环癌细胞的标记物基因,分析乳腺癌患者相对循环癌细胞数（Lc）与临床病理特征的关联。方法：收集乳腺癌患者142例（乳腺癌组）和正常女性60人（正常对照组）外周血标本。利用CGAP提供的SAGE Genie数据库中数字基因表达演示工具,筛选一组可用于检测乳腺癌循环癌细胞的标记物基因（FAM83A、NPY1R和KRT19）。应用定量巢式PCR方法检测研究对象外周血中标记物基因的表达水平,并通过公式计算患者Lc值。结果：在乳腺癌组患者外周血中肿瘤标记物基因FAM83A、NPY1R和KRT19的表达水平均明显高于正常对照组（P<0.001）。142例乳腺癌患者中有113例（79.6%）至少表达1个肿瘤标记物基因。乳腺癌患者Lc值与其临床分期和远处转移有关联（P<0.001）。Kaplam-Meier生存曲线,Lc值小于2的患者生存时间明显长于Lc值大于2者（P=0.005）。结论：筛选了一组检测乳腺癌外周血循环癌细胞的标记物基因,联合该组基因计算的Lc值与患者临床分期和远处转移有关联,并可辅助判断乳腺癌预后。     

D—CIK治疗抑制进展期乳腺癌中循环肿瘤细胞的初步研究

目的探讨D-CIK治疗对进展期乳腺癌外周血中循环肿瘤细胞数的变化情况及意义。方法采用Cellseareh检测系统对32例明确诊断为进展期乳腺癌患者分别在CIK细胞回输治疗前后检测外周血中循环肿瘤细胞数目变化情况,同时观察治疗过程中患者的相关不良反应。结果患者接受D—CIK治疗后,循环肿瘤细胞的数目明显减少,由治疗前的5～18个／7．5ml减少为治疗后的2～11个／7．5ml,两者差异具有统计学的意义（P〈0．05）。治疗过程中未见明显不良反应。结论D-CIK治疗可明显降低患者外周血中循环肿瘤细胞的数目。     

P(St-co-MMA)微球表面包覆磁性氧化石墨烯的制备与表征

以单分散的苯乙烯-甲基丙烯酸甲酯共聚物(P(St-co-MMA))微球为载体,FeSO₄·7H₂O和FeCl₃·6H₂O为铁源,NaOH为沉淀剂,在氧化石墨烯(GO)存在下,利用反相共沉淀法通过原位复合技术在P(St-co-MMA)微球表面包覆磁性氧化石墨烯(P(St-co-MMA)/Fe₃O₄/GO)。通过扫描电子显微镜(SEM)、透射电子显微镜(TEM)、傅里叶变换红外光谱仪(FT-IR)、X射线衍射仪(XRD)、振动样品磁强计(VSM)和氮吸附-脱附等温线对P(St-co-MMA)/Fe₃O₄/GO样品的结构和性能进行表征分析。研究结果表明:纳米级的磁性氧化石墨烯成功地负载在了微米级的共聚物P(St-co-MMA)表面,所制备的P(St-co-MMA)/Fe₃O₄/GO微纳米复合物平均孔径为14.55 nm,孔体积为0.204 2 cm³/g,比表面积为56.14 m²/g。该复合物具有超顺磁性和良好的磁响应性,能够满足磁分离的要求。     

大蒜油对环磷酰胺化疗小鼠白细胞减少症的预防作用

目的 探讨大蒜油 (GO) 对环磷酰胺（CP）化疗荷瘤小鼠白细胞减少症的预防作用。方法 60只昆明小鼠随机分为荷瘤模型组（Model组）、CP组、25μg/g GO+CP组（GO1+CP组）和50μg/g GO+CP组（GO2+CP组）,共4组。右侧腋窝下接种H22瘤细胞,连续给药13d 。观测体质量、瘤重、脾重、脾结节计数、外周血象、骨髓DNA含量、骨髓有核细胞计数及骨髓嗜多染红细胞微核率变化。结果 与Model组相比,CP组瘤重减少60.5%（P<0.05）,白细胞计数降低65.9%（P<0.05）,脾脏指数、脾结节计数、骨髓DNA含量、骨髓有核细胞计数分别降低了34.8%,63.1%,50.1%,64.3%（P<0.05）,骨髓微核率升高到40.2‰（P<0.05）。GO1+CP组和GO2+CP组抑瘤率分别为58.1%、62.0%,与CP组差异无统计学意义（P>0.05）。与CP组比较,GO2+CP组白细胞计数显著增加（P<0.05）,脾脏指数、脾结节计数、骨髓DNA含量、骨髓有核细胞计数分别升高了60.0%,161.3%,39.7%,140%（P<0.05）,其骨髓微核率降低至28.6‰（P<0.05）。结论 大蒜油在保证环磷酰胺抑瘤作用下,可明显减轻白细胞减少症等化疗副作用。     

氧化石墨烯衍生物对L6细胞活性的影响

目的：研究氧化石墨烯(GO)衍生物对L6细胞活性的影响。方法原代的L6细胞经过1 d或3 d培养,倒置荧光显微镜观察细胞形态并采取电子图片保存;收集对数期成熟的L6细胞,MTT法测定细胞增殖活性;对数期成熟的L6细胞,经GO衍生物3 d的刺激培养,收集细胞培养上清液,采用ELISA方法测定肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和干扰素-γ(IFN-γ)。结果原代L6经过3 d培养,80%以上细胞分化为成熟的L6细胞;0.3μg/mL GO衍生物(GO-L和GO-D)经过3 d刺激,GO-L刺激细胞增殖的OD值为(0.52±0.28),GO-D刺激细胞增殖的OD值为(0.81±0.34),两者与对照细胞OD值(0.18±0.06)比较差异有显著统计学意义(F=6.05,P<0.01);其中D型衍生物对L6细胞增殖活性强于L型衍生物,两者之间比较差异有统计学意义(F=4.54,P<0.05);L型衍生物和D型衍生物均能诱导L6细胞分泌TNF-α[(18.6±5.36) vs (24.9±8.86)]和少量IFN-γ[(14.3±3.78) vs (13.8±2.62)]。但IFN-γ分泌两者差异无统计学意义(F=0.82,P>0.05)。结论 GO衍生物能诱导L6细胞活化和分泌TNF-α,可能会影响L6细胞中糖的代谢与调节。