前列地尔预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护性作用

目的本实验采用酶组织化学法观察前列地尔预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤是否有保护性,并探讨其可能机理。方法选用275±25g的SD雄性大白鼠,随机分为6组,每组8只。假手术对照组(A),心肌缺血再灌注模型组(B),经典缺血预处理组(C),前列地尔脂肪乳剂早期保护组(D),前列地尔脂肪乳剂延迟保护组(E),前列地尔脂肪乳剂在缺血前72h应用组(F)。采用酶组织化学方法观察心肌过氧化氢酶及琥珀酸脱氢酶表达。结果与模型组相比,经典缺血预处理组、前列地尔预处理早期保护组及延迟保护组心肌过氧化氢酶及琥珀酸脱氢酶明显升高(p<0.05),且早期保护作用强于延迟作用。结论前列地尔预处理对大鼠心肌损伤具有早期和延迟保护作用。     

缺血预处理对糖尿病大鼠缺血/再灌注损伤性心肌超微结构的影响

目的:研究缺血预处理对糖尿病大鼠缺血再灌注损伤性心肌超微结构的影响。方法:建立糖尿病大鼠、缺血再灌注和缺血预处理模型,随机分成6组,即非糖尿病和糖尿病的假手术组、缺血再灌注组、缺血预处理组,观察心肌酶和心肌超微结构变化。结果:非糖尿病的缺血预处理组心肌酶CK、CK-MB、LDH较缺血再灌注组明显降低,心肌超微结构损伤减轻;糖尿病缺血预处理组与缺血再灌注组相比心肌酶无降低,心肌超微结构损伤进一步加重。结论:缺血预处理对非糖尿病大鼠心肌具有保护作用,而对糖尿病大鼠心肌不具有同样的保护作用。     

大鼠心肌缺血/再灌注损伤基因表达谱特征的初步观察

目的:观察心肌缺血/再灌注损伤前后基因差异表达,探讨缺血/再灌注后心肌细胞损伤的分子生物学机制。方法:提取大鼠缺血/再灌注前后心肌组织mRNA并纯化,用Affymetrix RAT 230A基因表达谱芯片,对表达差异基因进行检测。结果:按差异显著阳性标准,从14000个基因中筛选出缺血/再灌注后差异表达基因179条,其中123条表达上调,56条表达下调,包括原癌基因、细胞周期、信号转导、细胞外基质、细胞骨架蛋白、转录因子、DNA损伤修复基因、凋亡相关蛋白及核糖体蛋白等相关编码基因。结论:用cDNA表达谱芯片分析心肌缺血/再灌注后基因表达,能快速筛选出再灌注损伤相关基因,为临床上更有效地预防缺血/再灌注损伤提供根据。     

前列地尔预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的心脏超微结构的保护作用

目的　观察比较前列地尔预处理及经典缺血预处理对在体大鼠缺血 /再灌注心肌损伤的保护效应。方法　动物分为假手术对照组、缺血再灌注组、经典缺血预处理组、前列地尔预处理早期保护组及延迟保护组 ,透射电镜观察心肌超微结构的变化 ,同时用黄嘌呤氧化酶法测定心肌组织的超氧化物歧化酶 (SOD)活性和用硫代巴妥酸法测定丙二醛 (MDA)含量。结果　前列地尔预处理及经典缺血预处理均有保护心肌超微结构和抗氧化效应 ,与模型组相比 ,经典缺血预处理组、前列地尔预处理早期保护组及延迟保护组明显降低缺血再灌注后的心肌MDA含量 (P<0 .0 5 和升高T SOD (P<0 .0 5 水平。结论　前列地尔预处理对在体大鼠缺血 /再灌注心肌损伤具有保护效应 ,能模拟经典缺血预处理心肌保护效应。     

低浓度11,12-EET预干预对大鼠心肌缺血/再灌注损伤的影响

目的 :观察外源性低浓度 11,12 -EET预干预对大鼠在体心肌缺血 /再灌注损伤的影响。方法 :雄性Wistar大鼠 ,开胸 ,结扎和松开冠状动脉左前降支 ,复制心肌缺血 /再灌注模型 ;采用缺血 5min/再灌注 5min两次造成缺血预处置。实验分 3组 :对照组 ;缺血预处置组 ;外源性 11,12 -EET预干预组。每组再分为A、B 2小组 :A组动物心肌缺血 10min/再灌注 10min ,主要观察缺血 /再灌注各时程之心律失常 ;B组动物缺血 6 0min/再灌注 30min ,主要观察缺血期心律失常、心功能的变化及再灌注后心肌梗死范围。结果 :缺血预处置和 11,12 -EET(6 2 4× 10 -8mol/L)预干预均可减轻缺血 /再灌注心律失常及心功能的变化 ,降低心肌梗死范围。结论 :11,12 -EET预干预具有类缺血预处置样的心肌保护作用     

Apelin在大鼠心肌缺血/再灌注损伤及缺血预处理中的作用

目的： 观察大鼠心肌缺血/再灌注损伤及预处理中新的小分子活性肽-apelin的变化，探讨其在该病理过程中可能的作用。方法: SD大鼠45只随机分成3组：缺血/再灌注(IR)组、预处理(IP)组和假手术（SH）组；心电图评估心律失常得分；放免法测定血浆及心肌apelin-36蛋白含量；免疫组化法观察心肌apelin-36的表达。结果: （1）心律失常得分：IP组（2.1±0.5）仅为IR组（3.6±0.8）的58.3%（P<0.01）。（2）血浆和心肌apelin-36浓度：IR组分别比SH组低36.1%和45.6%(均P<0.01)；IP组比IR组分别高18.9%和38.5% (均P<0.05)，但IP组仍分别比SH组低23.8%和24.7%(均P<0.01)。（3）免疫组化染色平均吸光度值：IR组比SH组低 65.1％(P<0.01)，IP组比IR组高80.8％(P<0.05)，但比SH组低36.8％(P<0.05)。（4）心率失常得分与心肌组织中apelin-36蛋白含量呈显著负相关(r= 0.847,P<0.01)。结论: 在心肌缺血/再灌注损伤及预处理过程中，大鼠血浆及心肌组织apelin表达下调，提示apelin在该病理生理过程中可能有重要作用。     

心肌缺血后处理减轻大鼠缺血/再灌注心肌细胞凋亡及超微结构损伤

缺血预处理(ischemic preconditioning)是减轻缺血/再灌注损伤最有效的方法.Zhao等[1]最近提出的缺血后处理,即心肌缺血后再灌注前反复短暂开通及再闭冠脉,与缺血预处理一样可降低心肌梗死范围及心肌酶释放,但其对心肌细胞凋亡及超微结构的影响国内、外报道较少,尚未见同时从亚细胞水平及细胞凋亡改变评价的报道.     

低浓度11,12-EET预干预对大鼠心肌缺血/再灌注损伤的影响

目的:观察外源性低浓度 11,12-EET预干预对大鼠在体心肌缺血/再灌注损伤的影响。方法:雄性Wistar大鼠,开胸,结扎和松开冠状动脉左前降支,复制心肌缺血/再灌注模型;采用缺血 5min/再灌注 5min两次造成缺血预处置。实验分 3组:对照组;缺血预处置组;外源性 11,12-EET预干预组。每组再分为A、B 2小组:A组动物心肌缺血 10min/再灌注 10min,主要观察缺血/再灌注各时程之心律失常;B组动物缺血 6 0min/再灌注 30min,主要观察缺血期心律失常、心功能的变化及再灌注后心肌梗死范围。结果:缺血预处置和 11,12-EET(6 2 4× 10^-8mol/L)预干预均可减轻缺血/再灌注心律失常及心功能的变化,降低心肌梗死范围。结论:11,12-EET预干预具有类缺血预处置样的心肌保护作用.     

多巴胺受体2减轻离体大鼠心肌缺血/再灌注损伤

目的 观察多巴胺受体2(DR2)对离体大鼠心肌缺血/再灌注(I/R)损伤的影响及其可能机制.方法 将大鼠40只,每组n=10,随机分成对照组(control)、I/R组、10 pmol/L Bromocriptine(DR2激动剂)组(Bro),10 μmol/L Haloper-idol(DR2抑制剂)组(Hal).用Langendorff离体灌流装置,复制大鼠心肌I/R损伤模型.Powerlab生理记录仪记录心功能;比色法测定冠脉流出液LDH、CK活性和心肌组织匀浆SOD活性以及MDA含量;TUNEL染色检测心肌细胞凋亡;Western blot检测DR2、Bcl-2、caspase-3和caspase-9蛋白的表达.结果 与对照组比较,I/R组DR2、Bcl-2、caspase-3和cmpase-9蛋白表达、LDH和CK活性、MDA含量和细胞凋亡率均增加(P＜0.01),唯有SOD活性降低,心功能减弱(P＜0.01).与I/R组比较,Bro降低LDH和CK活性、MDA含量、细胞凋亡率、caspase-3和caspase-9的表达,升高SOD活性,改善心功能和进一步增加Bcl-2的表达(P ＜0.01);Hal对上述指标影响不显著.结论 DR2可减轻心肌I/R损伤,其机制与抗氧化、清除自由基、上调Bcl-2表达以及下调caspase-3和caspase-9的表达有关.     

缺血预处理抗缺血再灌注心肌间质损伤的实验研究

目的：观察缺血预处理（ＩＰＣ） 对大鼠缺血再灌注心肌间质胶原及心肌功能结构关系的影响,以进一步探讨ＩＰＣ 对心肌的保护作用。方法：实验采用体重（２５０ ±３０）ｇ 雄性ＳＤ 大鼠２４ 只,分３ 组,每组８ 只,即假手术对照（ＳＣ）组;缺血再灌注（Ｉ／Ｒ） 组和缺血预处理（ＩＰＣ） 组。用超微结构立体计量及羟脯氨酸浓度测定观察心肌间质胶原变化,多道记录仪测量心功能指标,透射电镜观察心肌超微结构。结果：Ｉ／Ｒ 时心肌间质胶原浓度显著低于ＳＣ 组（ Ｐ＜ ０－０１） ,心肌超微结构损伤严重,左室功能明显低于ＳＣ 组（ Ｐ＜ ０－０１） 。ＩＰＣ 组心肌超微结构破坏明显低于Ｉ／ Ｒ 组。同时,心肌间质胶原浓度、胶原纤维线密度及左室功能指标明显高于Ｉ／Ｒ 组（ Ｐ＜ ０－０５ ,Ｐ＜ ０－０１） 。结论：ＩＰＣ 的心肌保护作用不仅表现在对心肌细胞上,而且对心肌间质也有重要的保护作用。     

Troxerutin Preconditioning and Ischemic Postconditioning Modulate Inflammatory Response after Myocardial Ischemia/Reperfusion Injury in Rat Model

Protective effects of ischemic postconditioning in myocardial ischemia/reperfusion (I/R) injury have been ever demonstrated, but the exact mechanisms remain unclear. Because of their multiplex activities, using natural pharmaceuticals seems to be clinically interesting. The aim of present study was to investigate the effects of troxerutin preconditioning and ischemic postconditioning on inflammatory responses after myocardial I/R injury in a rat model. Twenty-four Wistar rats were divided into four groups as the control, troxerutin receiving (TXR), postconditioning receiving (PostC), and combined therapy (TXR + PostC). Rats’ isolated hearts underwent 30-min LAD regional ischemia followed by 45-min reperfusion. Troxerutin was orally administered for a month before I/R. Ischemic PostC was applied by alternative three cycles of 30-s R/I at the onset of reperfusion. The coronary effluent and ischemic left ventricular samples were used to determine the activities of creatine kinase (CK), intercellular adhesion molecule-1 (ICAM-1), interlukin-1beta (IL-1β), tumor-necrosis factor (TNF-α), and also histopathological studies. Pretreatment of rats with troxerutin significantly reduced myocardial inflammatory cytokines TNF-α and IL-1β levels and ICAM-1 activity after I/R insult compared to those of control I/R hearts (P?<?0.05). Application of PostC showed similar impacts on those parameters. In fact, anti-inflammatory mechanisms of both treatments were associated with their protective effects against myocardial damages causing from I/R injury. Pretreatment with troxerutin as well as postconditioning can induce cardioprotection through prevention of the cell-cell interaction and release of inflammatory mediators, minimizing I/R pathological changes in myocardial cells. These two treatments may share same mechanisms in their actions since they showed no significant additive effects.     

缺血预处理对大鼠肥大心脏缺血再灌注损伤的影响

本实验用一氧化氮合成抑制剂－左旋硝基精氨酸复制大鼠高血压心脏肥大模型并作缺血再灌注处理，以观察缺血预处理对高血压肥大心脏Ｉ／Ｒ损伤的影响及ＮＯ在其中的作用。结果显示：ＩＰＣ能减轻大鼠高血压有肥大心脏Ｉ／Ｒ损伤，其程度与ＩＰＣ对正常心脏Ｉ／Ｒ损伤的保护相近，表明高血压肥大心脏同样具有ＩＰＣ保护现象，但ＮＯ在本模型中未起作用。     

缺血预处理诱导脑缺血再灌注损伤后Bcl-2及Bcl-xl表达

目的 探讨调亡抑制基因Bcl-2及Bcl-xl在缺血预处理（IPC）对海马CA1区神经元细胞保护中的作用。方法 利用大鼠四血管阻断及再通建立前脑缺再缺血灌注损伤模型,采用尼氏染色光镜观察、流式细胞术、免疫组织化学等技术,观察缺血预处理海马CA1区神经元病理组织学改变、细胞凋亡面分率有Bcl-2及Bcl-xl蛋白表达的情况。结果 1、大鼠前脑缺血再灌注引起海马CA1区部分神经元发生调亡。2、IPC可明显地减少缺血再灌注损伤后调亡的神经元数目,产生细胞保护作用。3、IPC可诱导缺血再灌注损伤早期缺血敏感神经元中Bcl-2和Bcl-xl蛋白表达。结论 抑制神经元调亡发生可能IPC对缺血再灌注损伤起保护作用的机制之一。     

延迟预适应对兔心脏缺血再灌注损伤保护作用的研究

目的:观察延迟缺血预适应(IschemicPreconditioning,IPC)对兔在体心脏缺血再灌注(Ischemia/Reperfusion,I/R)损伤的保护作用。方法:方法18只兔随机分为3组:假手术组(CON组,n=6),缺血再灌注组(I/R组,n=6),预适应组(IPC组,n=6)。采用免疫组化方法检测诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)及内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)在心肌及冠状动脉内皮中的表达情况。结果:IPC组的梗死面积明显小于I/R组。在心肌中,IPC组iNOS表达明显高于I/R组与CON组,而eNOS无显著性差异。在内皮中,IPC组eNOS表达明显高于I/R组,与CON组无显著性差异,而iNOS均无表达。结论:延迟缺血预适应能缩小兔缺血再灌注后心肌梗死面积。     

延迟预适应对缺血再灌注损伤冠状动脉内皮细胞的保护作用

目的:研究延迟缺血预适应(IPC)对缺血再灌注(I/R)冠状动脉内皮细胞的保护作用。方法:所有动物随机分为三组:假手术组(CON组,n=6),缺血再灌注组(I/R组,n=6),预适应组(IPC组,n=6)。I/R组及IPC组分别于不同时间段抽血检测NO、丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)的含量。实验结束后,取心脏左前降支(LAD)所支配的心肌组织一小块,行免疫组化染色。结果:IPC组NO缺血前明显高于开胸后,缺血前IPC组高于I/R组;MDA含量缺血前及再灌注后IPC组均低于I/R组;SOD的活性,再灌注后两组差异显著。IPC组内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)的表达明显高于I/R组。结论:延迟预适应早期内皮细胞生成NO的量增加,自由基减少,且保护后期的再灌注中NO、自由基的量处于相对稳定,同时使内皮中SOD的活性及eNOS的表达增加。     

川芎嗪预处理对心肌缺血再灌注所致血管内皮细胞损伤的保护作用

目的 :用心肌缺血预处理的整体动物模型 ,观察川芎嗪预处理对麻醉大鼠心肌缺血再灌注所致血管内皮细胞损伤的保护作用。方法 :动物麻醉后 ,在人工呼吸状态下 ,开胸 ,结扎左冠状动脉。单纯缺血再灌注组 :结扎冠脉 3 0min ,其后再灌 12 0min ;缺血预处理组 :冠脉结扎5min ,再灌 5min ;然后 ,再次结扎冠脉 3 0min ,其后再灌 12 0min ;药物预处理组 :川芎嗪 2 0mg·kg-1 连续静脉给药 5min ;5min后 ,结扎冠脉3 0min ,其后再灌 12 0min ;假手术组 :冠脉下穿线 ,不做任何处理。实验结束后 ,腹主动脉采血 ,分离血浆。用放免法 (RIA)测ET ,TXB2 /6 酮 PGF1α,降钙素相关基因肽 (CGRP)。结果 :川芎嗪预处理降低缺血再灌后ET及TXB2 的释放 ,而 6 酮 PGF1α的释放增加 ,对CGRP没有影响。结论 :川芎嗪可能通过预处理途径对大鼠心肌缺血再灌注所致血管内皮细胞损伤具有保护作用     

Remote Ischemic Preconditioning Attenuates Hepatic Ischemia/Reperfusion Injury after Hemorrhagic Shock by Increasing Autophagy

Fluid resuscitation after hemorrhagic shock is a model of systemic ischemia/reperfusion injury (SI/RI), and the liver is one of the main target organs. Ischemic preconditioning (IPC) can reduce hepatic ischemia-reperfusion injury (I/RI) via autophagy. However, whether remote ischemic preconditioning (RIPC) can alleviate the liver injury that is secondary to hemorrhagic shock and the role of autophagy in this process remain unclear. Thus, we constructed a hemorrhagic shock model in rats with or without RIPC to monitor mean arterial pressure (MAP) and investigate liver secondary injury levels via serum aminotransferase, ultrasound, HE staining and TUNEL fluorescence staining. We also detected levels of serum inflammatory factors including tumor necrosis factor-alpha (TNF-α) and interleukin 1β (IL-1β) by enzyme-linked immunosorbent assay (ELLSA), observed autophagosomes by Transmission electron microscopy (TEM), and analyzed LC3, Beclin-1, p62 protein expression levels by immunohistochemical (IHC) and western blot (WB). We found that RIPC increased blood pressure adaptability, decreased lactate (Lac) and aminotransferase levels, and delayed the decrease in liver density. Levels of inflammatory factors TNF-α, IL-1β and apoptosis were attenuated, autophagosomes was increased in the RIPC group compared with controls. IHC and WB both revealed increased LC3 and Beclin-1 but decreased p62 protein expression levels in the RIPC group. Together, our data suggest that RIPC-activated autophagy could play a protective role against secondary liver injury following hemorrhagic shock.     

Ischemia/Reperfusion Injury in the Rat Colon

This study investigated metabolic and biochemical consequences of colonic ischemia/reperfusion (I/R) in the rat and evaluated whether antioxidants prevent I/R-induced functional damage in the rat colon. The surgical preparation involved a 10 cm segment of the colon and occlusion of the superior mesenteric artery (SMA) to induce I/R. Arterial blood from the aorta and venous blood from the superior mesenteric vein (SMV) was collected to measure blood gases, lactic acid (LA) and arachidonic acid (AA) metabolites. Tissue xanthine oxidase (XO) and thiobarbituric acid (TBA) derivatives were measured before and after reperfusion. In addition, vascular and mucosal permeability, and the effect of MDL 73404 (a water soluble vitamin E analog) and 5-aminosalicylic acid on LA, AA, XO and TBA was measured. After ischemia, the colon displayed a metabolic shift from aerobic to anaerobic course by increasing lactic acid production in the colon (183% increase in SMV lactate level compared 87% in the SMA; p < 0.03). After 10 minutes of reperfusion, circulating 6-keto-prostaglandin F₁ increased by 3.85 fold (p < 0.001) and thromboxane B₂ increased by 2 to 3 fold. An Ischemia time longer than 60 minutes was required to cause changes in tissue XO levels. Tissue TBA levels showed a good dose response corresponding with I/R time. I/R (60 minutes) caused a three and 16 fold increase (p < 0.01) in vascular and mucosal permeability, respectively. MDL 73404 and 5-aminosalicylic acid significantly inhibited the vascular permeability and decreased LA, AA, XO and TBA. These observations provide the first direct experimental evidence for I/R-induced damage in the colon and some of its effects can be reversed by conventional and novel antioxidants.     

罗布麻叶提取物预处理对缺血再灌注大鼠心肌损伤的作用

目的:观察罗布麻叶提取物(AVLE)预处理对心肌缺血再灌注(MI/R)大鼠心肌细胞凋亡和细胞信号转导系统中丝(苏)氨酸激酶(Akt)和细胞外信号调节激酶(ERK1/2)的影响。方法:采用SD大鼠MI/R模型(结扎冠脉左前降支起始部30min后再灌注4h),随机分为Sham组(假手术)、MI/R组、AVLE预处理组[AVLE(500mg/kg)灌胃,每日一次,连续灌胃7天后再行MI/R]。用TUNEL法检测各组心肌细胞凋亡,计算凋亡指数(AI);荧光免疫分析法检测各组心肌组织凋亡蛋白Caspase-3活性;Western Blotting测定心肌组织Akt和ERK1/2的表达水平和磷酸化水平。结果:与Sham组比较,MI/R组心肌细胞AI显著升高(P0.05),心肌组织Caspase-3活性明显升高(P0.05),心肌Akt和ERK1/2的磷酸化水平显著降低(P0.05);与MI/R组比较,AVLE预处理组AI明显下降(P0.05),心肌组织Caspase-3活性显著降低(P0.05),Akt和ERK1/2磷酸化水平显著升高(P0.05)。结论:AVLE能够抑制缺血再灌注所致心肌细胞损伤,其作用与生存信号通路蛋白PI3K/Akt和ERK1/2的活化水平有关。     

大鼠肝缺血/再灌注对Orexin-A表达水平的影响

目的：研究肝缺血/再灌注（H-I/R）对食欲素-A（Orexin-A）表达水平的影响,探讨Orexin-A在创伤应激反应中的作用。方法：建立大鼠70%H-I/R模型,设立假手术和不同再灌注时间的损伤组,每组9只。采用自制Orexin-ARIA检测损伤后血浆、下丘脑Orexin-A的蛋白水平,并采用RT-PCR观察损伤后下丘脑Orexin-AmRNA表达的变化。结果：所用Orexin-ARIA的标准曲线形态和测量结果均良好。与损伤后假手术组血浆、下丘脑Orexin-A的蛋白水平相比,四个再灌注组与之均无显著差异,而缺血60min/再灌注60min（I60’R60’）组血浆Orexin-A水平显著高于I60’R360’组。损伤后I60’R240’、I60’R360’组下丘脑Orexin-AmRNA表达均显著高于假手术组和I60’R60’组。结论：H-I/R引起Orexin-A表达水平一定程度的变化,Orexin-A可能作为一种迟发的应答因子参与创伤应激后代谢紊乱的调控。