p28GANK蛋白在肝细胞性肝癌组织中的表达及其临床意义

目的：探讨p28GANK蛋白在肝细胞性肝癌（HCC）组织中的表达及其临床意义。方法收集HCC组织及其相应癌旁组织60例（其中32例伴有肝硬化组织）、正常肝组织30例,采用免疫组化法检测HCC、癌旁组织、肝硬化组织、正常肝组织组织中p28GANK蛋白的表达,分析p28GANK蛋白表达水平与HCC患者临床病理特征关系。结果 p28GANK蛋白在HCC、癌旁肝组织、肝硬化组织性、正常肝组织阳性表达率分别为71．7％、10．0％、12．5％、6．7％,HCC中p28GANK蛋白的阳性表达率高于其他组织（P＜0．05）。 HCC患者中,低分化（Ⅲ～Ⅳ级）、淋巴结和（或）远处转移及TNM分期Ⅲ＋Ⅳ者p28GANK蛋白表达阳性率分别高于高分化（Ⅰ～Ⅱ级）、无淋巴结和（或）远处转移、TNM分期Ⅰ＋Ⅱ者（P＜0．05）。结论 p28GANK蛋白表达可能与HCC的发生发展有关,p28GANK可作为HCC诊断的分子标志物。     

髓样细胞触发受体-1与肝细胞癌发生和发展的相关性

目的研究髓样细胞触发受体-1（TREM-1）在人肝细胞癌（HCC）发生发展过程中的表达及意义。方法应用免疫组化法检
测HCC 76例、肝硬化33例、肝炎30例、正常肝组织20例中TREM-1蛋白的表达及定位,并对该蛋白与HCC临床病理特征之间
的关系进行分析。进一步在体外使用人正常肝细胞LO2 和肝癌细胞SMMC-7721,采用RT-PCR 和Western blotting 法检测
TREM-1 mRNA及蛋白表达,以证实组织学结果。结果正常肝组织中TREM-1为阴性表达;肝炎、肝硬化和HCC组织中该蛋
白表达显著上调,阳性表达率分别为20.00%（6/30）、24.24%（8/33）和21.05%（16/76）,但该3组间差异无统计学意义（χ2=0.195,
P=0.907）。与非癌肝组织（肝炎、肝硬化组织）相比,HCC组织中阳性表达的TREM-1 蛋白定位发生明显改变：非癌肝组织中
TREM-1 主要定位于肝细胞胞核中,偶见定位于细胞质;HCC组织中阳性表达的蛋白颗粒均位于癌细胞胞质,未见细胞核定
位。TREM-1蛋白与癌病理分级呈负相关（r=-0.261,P=0.023）,而与年龄、性别、肿瘤大小、临床分期、肝病背景、淋巴结转移及
脉管癌栓无明显相关（均P>0.05）。细胞学实验显示LO2细胞有部分TREM-1 mRNA及蛋白表达,而SMMC-7721肝癌细胞该
指标明显上调。结论TREM-1蛋白的表达上调及在胞质中的异常定位可能与HCC发生发展相关。
     

原发性肝癌组织中PTEN、p27的表达

目的探讨病理抑癌基因PTEN、p27在原发性肝细胞性肝癌（HCC）组织中的表达与病理学特征、预后的关系及两者的相关性。方法用免疫组织化学SP法检测5例正常肝组织、10例肝硬化组织、45例原发性肝细胞性肝癌组织中PTEN、p27的表达状况。结果45例HCC中PTEN、p27蛋白的阳性表达率（51．1％和40．0％）和阳性强度明显低于肝硬化组织（90．0％和100．0％）和正常肝组织（100．0％和100．0％）,PTEN、p27蛋白的阳性表达率与组织分化、癌肿直径、有无癌栓密切相关。双变量相关分析,PTEN在肝癌组织中的表达与p27在肝癌组织中的表达呈显著的正相关。结论PTEN、p27在肝癌组织中的表达与其组织分化等病理学特征密切相关。     

原位分子杂交和免疫组化SP法对PTEN的检测

目的研究原位分子杂交和免疫组化SP法检测PTEN mgNA及其蛋白在HCC中的表述隋况。方法56例肝细胞肝癌组织、17例肝硬化组织手术切除标本,经40g／L福尔马林固定,4μm厚连续切片,HE染色,病理诊断证实。结果HCC组织中,PTEN mRNA与蛋白的阳性表达率分别为625％和714％。17例肝硬化组织中的阳性表达率分别为88．2％和94．1％。21例癌旁组织中的阳性率分别为905％和100％。HCC与肝硬化组织和癌旁肝组织中PTEN mENA及其蛋白的表达具有显著性差异（P〈0.05）。结论HCC组织中存在较高比例的PTEN mENA和蛋白表达缺失,且恶性程度最高的HCC组织中,PTEN mgNA和蛋白的阳性表达率最低。     

肝癌组织中FN和PTEN的表达及其临床意义

目的：探讨抑癌基因纤黏连蛋白（fibronectin,FN）、张力蛋白同源基因蛋白（phosphatase and tensin homology deleted on chromosome ten,PTEN）在肝细胞性肝癌（hepatocellular carcinoma,HCC）组织中的表达及其临床意义。方法：收集215例HCC、癌旁组织和19例正常肝组织,用RT-PCR、Western blot、免疫组化SP法检测FN、PTEN mRNA和蛋白表达,分析FN和PTEN表达与HCC临床病理特征的关系。结果：肝癌组织中FN mRNA和蛋白表达均明显高于癌旁组织及正常肝组织（F=142.334,P=0.000）;而PTEN低于癌旁组织及正常肝组织,且在癌旁组织中的表达亦明显低于正常肝组织（F=80.861,P=0.000）。FN表达阳性患者组较阴性患者组生存时间短;而PTEN表达阳性患者较阴性患者生存时间长,且在1年以后两者生存期有统计学意义（P<0.05）。结论：HCC癌组织中 FN、PTEN在肝癌组织中存在异常表达,两者异常表达可能在肝癌的发生发展、侵袭转移中起一定的促进或抑制作用。     

pAkt在肝细胞肝癌中的表达及意义

目的研究pAkt在肝细胞肝癌（HCC）中的表达及其与临床病理参数、预后之间的关系。方法利用组织芯片技术和免疫组化方法检测85例HCC组织、85例癌旁组织和26例正常肝组织中pAkt的表达情况,并分析其与临床病理参数和预后的关系。结果pAkt在HCC中的表达阳性率（75.3％）高于癌旁组织（21．2％）（P〈0．01）和正常肝组织（15．4％）（P〈0．01）,pAkt在HCC癌组织的表达与患者肿瘤转移有关,差异均具有统计学意义（P=0．007）;pAkt阴性表达组（66．7％）生存率高于阳性表达组（35．9％）,差异具有统计学意义（P=0．017）。结论pAkt在HCC中过表达,在HCC的发生、发展、侵袭转移及预后中可能起重要作用。     

促凋亡基因bax在肝细胞癌的表达及其临床意义

目的：研究促凋亡基因bax在肝细胞癌（HCC）的表达及其临床意义。方法：应用免疫组化SP方法，检测44例原发性肝细胞癌（包括其中22例肝癌伴肝硬化）、肝硬变20例和正常肝组织中bax蛋白的表达。结果：bax阳性率在HCC为2．27％（1／44）、肝硬变为30％（6／20）和10例正常肝组织为50％（6／20）和10例正常肝组织为50％（5／10）。结论：肝癌与肝硬化之间以及肝癌与正常肝组织间均有显著差别P＜0．05，bax参与细胞凋亡的调节作用。     

间隙连接基因Cx32在肝细胞癌中的表达意义

目的：探讨肝细胞癌（HCC）、癌旁组织及正常肝组织中细胞间隙连接Cx32mRNA与Cx32蛋白的表达及其在HCC发生中的意义和机制。方法：应用Western blot和RT-PCR分别检测Cx32蛋白和Cx32mRNA在26例HCC组织、22例癌旁组织和9例正常肝组织中的表达。结果：Cx32蛋白在HCC中的表达明显低于正常肝组织和癌旁肝组织（P〈0.01）;Cx32mRNA在HCC、癌旁肝组织和正常肝组织均有一定水平,但三者之间差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：Cx32蛋白在肝癌中的表达下调可能是肝癌发生的重要环节,Cx32蛋白的减少与该基因在翻译或蛋白质的加工修饰过程中调控异常有关。     

LRG1基因在肝细胞癌中的表达情况研究

目的：研究富亮氨酸重复1（leucine-rich-alpha-2-glycoprotein 1,LRG1）在人肝细胞癌（hepatocellular carcinoma, HCC）中的表达情况,探讨其与 HCC 的相关性。方法：选取6个肝癌细胞系及30对连续的新鲜冰冻HCC 组织及其相应的癌旁非瘤肝组织标本,采取 qRT-PCR 检测 LRG1mRNA 的表达;Western blot 检测 LRG1的蛋白表达。结果：肝癌细胞系中 LRG1的 mRNA、蛋白的表达水平明显高于正常肝细胞系 LO2,LRG1的表达量与肝癌细胞系的侵袭转移能力正相关,新鲜冰冻组织中 LRG1的 mRNA、蛋白的表达水平明显高于相应的癌旁非瘤肝组织。结论：LRG1的高表达与 HCC 的恶性程度密切相关,对其研究可用于研发新的靶向药物。     

基质金属蛋白酶-9及其抑制剂与肝癌侵袭转移的关系

目的研究基质金属蛋白酶-9（MMP-9）及其组织抑制剂-2（TIMP-2）在肝细胞肝癌（HCC）组织中的表达及其与HCC侵袭转移的关系。方法应用组织芯片技术和免疫组化方法（SP法）检测93例HCC组织、66例癌旁组织和36例正常肝组织中MMP-9和TIMP-2的表达情况。结果MMP-9在HCC癌组织中的表达阳性率（62．4％）和癌旁组织（57．6％）高于正常肝组织（11．1％，P〈0．001）；MMP-9的表达随癌的转移而升高（P〈0．01）。TIMP-2在HCC中表达阳性率（51．6％）低于癌旁组织（83．3％，P〈0．001）和正常肝组织（86．1％，P〈0．001）；TIMP-2表达随癌的转移而降低（P〈0．05）。MMP-9和TIMP-2与患者合并硬化、组织分化、AFP水平和HBsAg状态无关（P〉0．05）。结论MMP-9和TIMP-2表达与HCC的侵袭转移密切相关，MMP-9和TIMP-2可以作为临床判断HCC侵袭转移有价值的参考指标。     

原发性肝癌中肝细胞生长因子mRNA的定量表达及其临床意义

目的对原发性肝癌组织、癌旁组织以及正常肝脏组织肝细胞生长因子(HGF)mRNA进行定量测定,分析其表达与临床特征的关系,探讨其临床意义。方法采用实时荧光定量PCR检测59例原发性肝癌组织、相对应癌旁组织以及17例正常肝脏组织HGF mRNA的表达量,分析其表达量与性别、年龄、血清HBsAg、AFP、分化程度、肿瘤大小、临床分期、转移状态以及是否合并肝硬化等临床特征的关系。结果HGF mRNA在原发性肝癌组织、癌旁组织中的表达与正常肝脏组织差异无显著性(P>0.05)。HGF mRNA在肝癌合并肝硬化组中的表达明显高于未合并肝硬化组(P<0.05),但与其它临床特征无关。结论HGF mRNA在肝癌合并肝硬化组织中呈高表达,提示可能与肝癌发生发展有关。     

人肝癌中p57kip2 mRNA及其蛋白表达研究

【目的】研究p57kip2基因在人体肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)不同阶段的mRNA和蛋白表达情况,以探讨HCC发生的分子生物学机制。【方法】运用原位分子杂交和免疫组化技术分别检测30例正常肝组织、30例癌周肝硬化和30例肝癌组织中p57kip2mRNA及P57kip2蛋白的表达情况。【结果】p57kip2mRNA表达:正常肝组织组未见表达,癌周肝硬化组与肝癌组阳性表达率分别为33.33%和16.67%。肝癌组分化好和分化差阳性表达率之间差异有统计学意义,相关分析呈正相关。P57kip2蛋白表达:正常肝组织组未见表达;癌周肝硬化组与肝癌组阳性表达率分别为56.67%和63.33%。肝癌组分化好者与分化差者阳性表达率之间差异有统计学意义,相关分析呈正相关。【结论】p57kip2基因mRNA和蛋白表达缺失或下降与HCC分化程度低呈正相关,提示p57kip2基因的失活可能是进展期HCC的晚期分子事件,并可能是一个新的预后指标。     

P-gp在人肝硬化及肝细胞肝癌中的表达及意义

目的探讨P糖蛋白(P-gp)在原发性肝细胞癌(HCC)中的表达及其与临床病理特征的关系。方法采用免疫组织化学SABC法分别检测41例HCC、10例肝硬化及10例正常肝组织中P-gp蛋白的表达。结果P-gp在HCC组织中阳性表达率为70.73%(29/41),肝硬化中P-gp阳性表达率为40%(4/10),正常肝组织P-gp阳性表达率为30%(3/10)。3种组织P-gp表达不同(P<0.05);P-gp在正常肝组织与HCC组织中的表达比较差异有统计学意义(P<0.017);在肝硬化与HCC组织中的表达比较差异具有统计学意义(P<0.017);而在肝硬化组织和正常肝组织之间差异无统计学意义(P>0.017)。P-gp的阳性表达与HCC的Edmenson分级明显相关,分化程度越低,P-gp表达越高。结论P-gp蛋白在HCC中高表达,可能参与了HCC的发生、发展及恶性增殖。     

凋亡抑制因子Survivin mRNA在肝癌组织中的表达及其意义

目的：检测凋亡抑制因子Survivin mRNA在肝癌组织中的表达．探讨Survivin mRNA在肝癌诊断及治疗方面的应用。方法：采用逆转录多聚酶联反应（RT—PCR）技术检测46例肝癌组织、30例肝硬化组织及10例正常肝脏组织中Survivin mRNA的表达。结果：46例肝癌组织中Survivin mRNA阳性表达率为100％,而在30例肝硬化活检病理标本和10例正常肝脏组织中未表达。结论：Survivin mRNA有望成为新的肿瘤标志物,应用于临床以协助肝癌诊断和靶向性基因治疗。     

肝细胞癌中ZHX2 mRNA的表达及其临床意义的研究

[目的探讨转录抑制因子ZHX2（zinc-fingers and homeoboxes2,ZHX2）在肝细胞癌（hepatoceUu1ar carcinoma,HCC）中的表达及其与转移的关系。方法通过RT-PCR方法,检测35例HCC癌组织及相应癌旁组织和8例正常肝组织中ZHX2 mRNA的表达,并分析其与临床病理参数的关系。结果HCC癌组织中ZHX2 mRNA的表达率明显低于癌旁组织与正常肝组织（P〈0．05）。术中发现伴随转移的HCC癌组织中ZHX2 mRNA的阳性表达率明显低于无转移的HCC（P〈0．05）。ZHX2 mRNA的表达与血清甲胎蛋白（alphafetoprotein,AFP）水平呈负相关（P〈0．05）,而与年龄、性别、HBsAg感染、肿瘤直径、分化程度、是否伴随肝硬化无明显关系。结论ZHX2低表达与HCC转移密切相关,并与AFP的高表达有关。     

趋化因子受体4在人肝细胞癌中的表达及临床意义

目的观察趋化因子受体4（CXCR4）在肝细胞肝癌（HCC）中的表达,探讨CXCR4和HCC的临床、病理特点及术后复发的关系。方法应用免疫组织化学技术检测CXCR4蛋白在41例HCC癌组织、癌旁组织和11例正常肝组织中的表达;分析临床、病理资料,并对上述患者进行随访,根据HCC患者术后复发时间进行生存分析。结果 CXCR4在HCC癌组织、癌旁组织及正常肝组织中的表达阳性率分别为80.48%、65.85%和36.36%（P〈0.05）。CXCR4表达强度与肿瘤病理分级呈正相关（低分化为60.87%,高分化为16.67%;转移组为52.00%,未转移组为12.50%）,差异有统计学意义（P〈0.01）。CXCR4表达阳性、阴性患者12个月内的复发率分别为48.1%和14.3%（P〈0.01）。结论 CXCR4在HCC中表达上调,CXCR4的高表达在肝癌发生过程中发挥重要作用。CXCR4可作为一种新的判断HCC患者术后复发和预后的指标。     

实时逆转录荧光定量聚合酶链反应检测外周血GPC3mRNA在原发性肝癌患者中的表达及意义

目的探讨实时逆转录荧光定量聚合酶链反应（RealtimeQRT-PCR）检检测外周血磷脂酰肌醇蛋白聚糖3 mRNA（GPC3 mRNA）在原发性肝癌（HCC）患者中的表达意义。方法采用Realtime QRT-PCR技术分别检测37例HCC、21例转移性肝癌、22例肝硬化患者和35例体检健康志愿者外周血中GPC3 mRNA的水平。结果 HCC患者外周血GPC3mRNA的阳性率为91.8%（34/37）,表达水平为（1.5±0.9）×106copies/ml;转移性肝癌外周血GPC3 mRNA的阳性率为4.7%（1/21）,表达水平为5.2×103copies/ml;肝硬化患者GPC3 mRNA的阳性率为4.5%（1/22）,表达水平为2.6×103 copies/ml;体检健康志愿者外周血GPC3 mRNA无阳性表达。HCC患者手术前后血液中GPC3 mRNA的阳性率差异无统计学意义（P〈0.05）,但两者表达水平差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 Realtime QRT-PCR检测外周血GPC3 mRNA是诊断早期HCC血微转移可行的实验方法。     

Wnt-5a在原发性肝细胞癌发生中的表达及临床意义

目的 检测Wnt-5a基因和基因产物在原发性肝细胞癌中的表达,探讨Wnt-5a基因在肝癌发生过程中的作用和临床意义.方法 采用实时定量PCR技术,检测Wnt-5a mRNA在26例新鲜肝细胞癌和癌旁组织中的含量;用免疫组化法观察Wnt-5a蛋白在85例肝细胞癌和癌旁组织、15例肝硬化组织中的表达.结果 Wnt-5a mRNA在肝癌及癌旁组织中的相对含量分别为0.102 127±0.158 620和0.020 106±0.022 075,两者间差异有统计学意义（P＜0.05）;Wnt-5a蛋白在肝细胞癌、癌旁组织和肝硬化中的阳性率分别为21.2％ （18/85）、81.26％ （69/85）和86.7％ （13/15）,Wnt-5a在肝癌组织中的阳性表达显著低于肝硬化和癌旁组织,差异有统计学意义（P ＜0.01）;Wnt-5a蛋白在肝癌中的表达与肿瘤的TNM分期和血清甲胎蛋白（AFP）含量有关（P＜0.05）.结论 Wnt-5a基因在HCC基因转录中呈上调表达,而在蛋白水平显示为缺失和下调表达,提示肿瘤细胞是在蛋白翻译水平而不是转录水平干扰了Wnt-5a基因功能.     

肝癌组织中β-catenin和核PTEN的表达及其与病理学特征关系研究

目的研究肝癌组织中β-catenin和PTEN蛋白的表达及其与临床病理学特征之间的关系。方法应用免疫组织化学染色法对64例原发性肝癌组织、9例肝硬化组织、5例正常肝组织中β-catenin和PTEN的表达情况进行检测,结合肝癌的临床病理学特征进行分析。结果原发性肝癌（HCC）中β-catenin蛋白的异常表达率为68.8%（44/64）,与肝硬化和正常肝组织相比,有显著性差异（P〈0.05）;PTEN蛋白的核阳性表达率为53.1%（34/64）,与肝硬化及正常肝组织相比无显著性差异。HCC低分化组的β-catenin异常表达率高于中高分化组,而核PTEN的表达无显著性差异（P〉0.05）。结论β-catenin的异常表达和HCC的发生及分化密切相关。     

GCF2选择性剪接区在肝癌组织及细胞株中的表达及意义

目的：研究肿瘤相关抗原GCF2选择性剪接区在人肝癌细胞株、肝癌组织、癌旁组织及正常成人肝细胞及组织中的表达及意义.方法：采用RT PCR检测GCF2 5个选择性剪接区（D1～D5）在人肝癌细胞株、43例肝癌组织、相对应的癌旁组织,以及正常成人肝细胞株及9例肝组织中的表达.结果：GCF2 4个选择性剪接区（D1～D4）在所检测的细胞株、肝癌组织、癌旁组织和正常成人肝组织中均未检测到表达;GCF2选择性剪接区D5仅在人肝癌细胞株检测到阳性表达;在43例肝癌组织及相应的癌旁组织中,有41例肝癌组织GCF2选择性剪接区D5呈阳性表达,阳性表达率为95.35％ （41/43）,而9例正常肝组织均未检测到GCF2选择性剪接区D5表达.结论：GCF2 D5选择性剪接区在肝癌组织中有较高阳性表达,GCF2选择性剪接区D5可能与肝癌的发生发展有关.