雌激素与流体剪切力对成骨细胞DNA合成的影响

骨质疏松是中老年人骨代谢的主要特征，雌激素缺乏是原发性骨质疏松症的主要原因之一。已有研究表明，雌激素能促进成骨细胞的生长分化，从而影响机体骨代谢。活体细胞对外力的反应是由于外力导致组织间液流动发生改变，从而被细胞感知。本项研究选择流体剪切力作为细胞加力方式。观察雌激素与流体剪切力对体外培养的成骨细胞增殖与DNA合成的影响，探讨雌激素与机械力对成骨细胞的影响。     

卵泡刺激素在女性绝经后骨质疏松及口腔骨吸收疾病中的研究

卵泡刺激素是(Follicle stimulating hormone,FSH)是由动物脑垂体前叶嗜碱性细胞合成与分泌的一种糖蛋白类促性腺激素。近年来,研究发现FSH可独立于雌激素调节骨量,影响绝经后骨质疏松。绝经后骨质疏松可影响牙槽骨骨量,在口腔骨吸收疾病中,起到一定作用。本文就FSH的研究背景及其对骨质疏松和口腔骨吸收疾病的影响作一综述。     

雌激素与牙周炎和绝经后骨质疏松的研究进展

牙周炎(periodontitis)是由多种因素所导致的发生在牙周支持组织的一种进行性损害性疾病,且牙槽骨破坏吸收十分明显.绝经后骨质疏松(Postmenopausal osteoporosis,PMO)主要是由绝经引起的骨质疏松症,属于女性中老年人一种进行性退行性病变,雌激素减少是导致本病发生的重要因素.流行病学研究显示慢性牙周炎与骨质疏松相关,尤其是与绝经期妇女的关系更为紧密,系统性骨质疏松造成的普遍性骨丧失可加速牙槽骨吸收.多项研究已表明,雌激素缺乏与牙周炎和骨质疏松这两种疾病的发生都存在着密切关系.该文就近几年雌激素缺乏与牙周炎和绝经后骨质疏松的研究进展进行综述.     

鸢尾素成骨作用的研究进展

鸢尾素是骨骼肌在运动中分泌的一种细胞因子,可以调节机体骨稳态,能够促进骨髓间充质干细胞、成骨细胞的成骨分化,抑制破骨细胞分化,增加骨细胞神经样树突的形成。鸢尾素还可以促进人牙髓细胞、牙周膜细胞以及牙胚干细胞成骨分化。体内实验结果表明,全身应用鸢尾素对骨质疏松和骨折小鼠的骨重建均有作用,但是,对于种植体周围骨缺损的骨再生无明显作用。本文针对鸢尾素对于骨修复重建作用的研究进行了综述,旨在为绝经后骨质疏松患者种植位点牙槽骨的再生以及骨密度的提高提供新的思路。     

骨质疏松时牙周组织正畸生物改建特征及其临床意义的研究(成果报告)

成人正畸在我国以非常惊人的速度增加,已达到正畸患者人数20％,在成人正畸患者中,众多中老年患者因美观、咬合功能、牙周病及修复性咬合重建等原因,需要接受正畸治疗。骨密度降低与骨质疏松是骨代谢增龄改变的结果,是中老年骨骼的主要特征,但至今对骨质疏松时牙周组织在正畸力作用下能否进行正常的组织改建,是否会引起牙槽的进一步吸收仍不清楚,这是严重制约中老年正畸治疗的关键因素。为此,自 1996年起共有5位研究生从事该课题的研究,包括骨质疏松时正畸牙齿移动实验研究;雌激素与正畸牙周组织改建相关研究;雌激素治疗骨质疏松大鼠牙槽骨生物改建与正畸牙齿移动规律的实验研究;雌激素对体外培养成骨细胞生长与分化影响的研究等。我们通过复制骨质疏松时牙槽骨正畸生物改建特征及其正畸牙齿移动规律进行了多方面深入研究,为临床治疗提供了科学理论依据。 研究结果表明,大鼠血清雌激素水平在卵巢切除术后(OVX)第2天开始下降、第7天时降至最低并维持低水平。血清钙,磷离子及ALP检测结果显示,OVX大鼠与正常大鼠存在明显差异。并发现大鼠卵巢摘除以后5周天开始出现长骨骨质疏松,组织切片结果显示,此时大鼠牙槽骨出现骨质疏松表现,表现为骨小梁变细,骨髓腔增大,破骨细胞数量增多。牙齿移动实验结果显示,骨质疏松大鼠牙齿正畸移动速度明显快于正常对照大鼠,其牙槽骨改建的组织学改变也有所不同,表现为骨吸收活跃,而骨再生缓慢,容易出现牙周组织损伤,如牙骨质吸收等,但未发现槽骨高度降低。细胞超微结构显示,破骨细胞功能活跃,而成骨细胞的功能较弱。免疫组化结果显示,骨质疏松大鼠正畸牙周组织改建中IL-1βIL-6、TNFα的分布与正常对照组有明显区别。骨质疏松大鼠补充雌激素后可使牙槽窝骨愈合速度加快,牙槽骨组织BMP表达增强。牙齿正畸移动研究结果表明,补充雌激素后可使可齿移动速度减慢,但牙周组织的损伤反应也减轻,破骨细胞功能减弱而成骨细胞功能活跃。体外细胞培养研究结果表明,雌激素可促进成骨细胞增殖与碱性磷酸酶活性,雌激素对成骨细胞可产生直接或间接的影响。 结论骨质疏松时牙槽骨密度降低,可使牙周组织对正畸力的敏感性增加,牙槽骨吸收活跃,骨形成能力减弱,正畸牙齿移动速度加快,另外,牙周组织对矫治力的耐受性降低,容易引起病理性损伤。但只要严格控制临床矫治力大小,并配合雌激素补充治疗,骨质疏松患者进行正畸治疗是安全可行的。     

骨质疏松症与种植体骨结合

骨质疏松症(osteoporosis,OP)是常见的全身性骨代谢疾病,以骨量减少、微结构破坏增加(骨皮质内板层丢失,骨小梁纤细、稀疏,髓腔增宽)为特征,致使骨强度降低易发生骨折.遗传、雌激素、营养和生活方式与OP发病密切相关,主要发病机制是雌激素缺乏导致破骨细胞增殖分化,破骨细胞功能活跃,同时抑制破骨细胞凋亡,从而使骨吸收速度超过骨形成速度,造成骨质有机物和无机物成比例地减少,在老年人特别是绝经后妇女中发病率较高.     

雌激素治疗对骨质疏松大鼠牙槽骨改建中细胞凋亡的影响

为探讨雌激素对骨质疏松牙槽骨改建中细胞凋亡的影响及意义,本研究在建立SD大鼠骨质疏松模型的基础上,用TUNEL法染色观察细胞凋亡在骨质疏松以及雌激素治疗后的牙槽骨中的变化.结果显示对照组在拔牙一个月时创窝骨修复区内骨组织中可见大量凋亡的骨细胞,两个月时,可见骨细胞凋亡数量较一个月时稍有减小.骨质疏松组在一个月时骨组织中少见骨细胞凋亡.两个月时,凋亡细胞的数量变化很小.骨质疏松雌激素治疗组一个月时,在新生骨小梁中可见大量凋亡的骨细胞,两个月时凋亡细胞均减少.结论雌激素可以通过促使破骨细胞凋亡而抑制降低破骨细胞骨吸收作用.     

雌激素对正畸骨改建相关细胞因子的影响

骨密度降低和骨质疏松不利于正畸治疗的进行,而雌激素可促进牙槽骨形成,抑制骨吸收。在正畸矫治力作用下,多种细胞因子参与雌激素对正畸骨的改建。首先,雌激素可以通过上调骨保护蛋白和下调核因子-κB受体活化因子配体的表达来抑制骨吸收,促进骨形成;其次,雌激素也可以通过促进成骨细胞和骨细胞分泌骨形态发生蛋白来加快牙槽骨的改建;另外,雌激素可以抑制肿瘤坏死因子α,白细胞介素-1和白细胞介素-6的表达,从而控制骨吸收;雌激素缺乏使巨噬细胞集落刺激因子基因的表达增加从而促进破骨细胞的形成,相反,雌激素可以通过抑制干扰素-γ的表达来抑制骨吸收。由此可见,对于某些骨质疏松患者,为达到有效安全的正畸治疗目的,补充适当剂量的雌激素不失为一种可靠的辅助治疗方法。     

雌激素对原代成骨细胞骨形成的影响

了解雌激素对培养的原代成骨细胞骨形成的影响。观察添加雌激素后直接对成骨细胞骨形成的作用，并用VOnKossa免疫染色法定量表示骨形成。结果显示：雌激素对该原代成骨细胞无促进骨形成作用。     

唾液细胞外囊泡miRNA-143/145与雌激素缺乏性骨质疏松相关性的临床研究

目的 研究唾液细胞外囊泡miRNA-143/145表达水平与女性绝经后骨质疏松的相关性,以探讨其对雌激素缺乏性骨质疏松的诊断价值。方法 选取在我院进行种植牙手术的绝经前后女性患者,采用CBCT对松质骨进行骨参数分析,测量患者骨密度差异;选择在我院进行住院手术的绝经期前后女性,分别收集血清、唾液样本,提取细胞外囊泡;透射电镜观察血清和唾液中细胞外囊泡形态;ELISA检测血清中雌激素表达水平;qRT-PCR检测血清和唾液细胞外囊泡中miRNA-143/145水平。结果 经分析发现,绝经后女性雌激素水平明显下降,并伴有骨密度的显著降低;经透射电镜观察,血清和唾液中细胞外囊泡为直径约100 nm的杯状双层膜样结构;和绝经前相比,绝经后女性血循环中miRNA-143/145的表达显著升高;进一步检测唾液中miRNA-143/145表达,呈现相似的趋势。结论 基于唾液细胞外囊泡中miRNA-143/145检测结果与血清检测相似,提示唾液检测作为一种无创性操作方式,更便于临床医生为女性绝经后骨质疏松状态做出诊断。     

自噬在骨代谢中作用的研究进展

骨代谢的平衡取决于成骨细胞骨形成和破骨细胞骨吸收之间的平衡,而这一平衡被打破会导致一系列骨代谢紊乱相关疾病。最近的证据表明,自噬可能在调节成骨细胞和破骨细胞的增殖、分化和凋亡等方面发挥着重要作用。本文回顾了自噬在调节成骨细胞和破骨细胞功能中的相关研究。     

雌激素对骨质疏松时种植体骨愈合的影响:Ⅱ骨计量学和电镜观察

目的 :研究雌激素替代治疗对骨质疏松时种植体骨愈合的影响。方法 :选用32周龄雌性SD大鼠36只 ,并随机分为假手术组、卵巢切除组及雌激素组。卵巢切除12周后于大鼠胫骨近中干骺端植入纯钛螺纹状种植体 ,雌激素组同时肌注苯甲酸雌二醇。种植术后4周及12周分两批处死大鼠 ,摘取胫骨 ;标本分别进行扫描电镜观察和骨计量学测量。结果 :在种植后4周及12周时 ,雌激素组除12周时皮质骨结合率与卵巢切除组无显著差异外 ,其它各项骨计量学参数均显著高于卵巢切除组 (P<0.05或P<0.01) ;而与假手术组比较 ,除骨矿化速度及4周时单位骨量外 ,其他各项指标均无显著差异 (P>0.05)。电镜观察种植体—骨界面愈合雌激素组和假手术组均优于卵巢切除组。结论 :雌激素替代治疗可促进实验性骨质疏松大鼠种植体骨愈合 ;该方法有助于增加临床绝经性骨质疏松患者牙种植体骨整合率     

辛伐他汀和雌激素联合对大鼠成骨细胞分化和矿化功能的影响

目的:研究辛伐他汀和雌激素联合对大鼠成骨细胞分化和矿化功能的影响,探讨其对成骨的影响是否具有协同性。方法:体外培养4w龄雌性大鼠骨髓来源的成骨细胞,以不同浓度辛伐他汀和雌激素联合作用于成骨细胞,用对硝基酚磷酸酯法测定细胞碱性磷酸酶活性;检测培养液中羟脯氨酸含量,了解细胞I型胶原的分泌情况;通过矿化结节计数反映细胞的矿化能力。结果:辛伐他汀和雌激素联合应用可增加成骨细胞碱性磷酸酶活性;提高培养液中羟脯氨酸含量,显著提高细胞的矿化能力。结论:辛伐他汀和雌激素联合应用对成骨细胞的分化和成熟有协同作用。     

高浓度唑来膦酸对人成骨细胞成骨分化及凋亡影响的实验研究

目的研究高浓度唑来膦酸对体外分离的健康人下颌骨成骨细胞的影响。方法体外分离培养来源于健康人下颌骨的成骨细胞,取P3代成骨细胞,用1 μmol/L、5 μmol/L唑来膦酸分别处理,不加药组为空白对照。以CCK8检测细胞增殖,流式细胞技术检测细胞凋亡,ALP染色及定量分析检测细胞成骨分化,荧光定量PCR检测成骨相关基因ALP、OPN和Runx2的表达,Western免疫印迹检测OPN蛋白的表达。采用SPSS16.0软件包对数据进行统计学分析。结果唑来膦酸处理后的成骨细胞增殖减慢,5 μmol/L处理组较1 μmol/L组增殖更慢。药物处理后的细胞凋亡较对照组增加,且随着药物浓度的增加,凋亡百分比显著上升。1 μmol/L及5 μmol/L唑来膦酸处理后的成骨细胞的成骨分化能力较对照组显著下降。荧光定量PCR结果提示,药物处理后的成骨相关基因ALP、OPN和Runx2的表达显著降低。Western免疫印迹检测结果显示药物处理组OPN蛋白表达量显著下降。结论高浓度唑来膦酸抑制来源于人下颌骨成骨细胞的增殖及成骨分化,促进其凋亡发生。     

雌性激素对牙槽骨骨量的影响

本实验采取切除大鼠双侧卵巢制造人工绝经模型,观察雌激素缺乏对股骨与牙槽骨骨质疏松产生的影响。采用骨密度测定,骨小梁参数测定,包括骨小梁体密度(TBV),骨小梁板厚度(MTPT)和平均骨小梁板间隙(MTPS),同时检测骨Ca、Mg含量,血清Ca、Me、P、ALP及空腹尿Ca/cr值。结果表明,雌激素水平低下与股骨、牙槽骨骨密度降低有正相关性,骨小梁参数亦表现相应的改变。给予去势动物雌激素治疗后骨密度有所增加。以上结果并得到组织学证实,说明雌激素缺乏是引起牙槽骨骨质疏松的原因之一。     

间充质干细胞成骨成脂分化在糖尿病骨质疏松中的作用

糖尿病性骨质疏松的发生源于糖尿病状态下骨代谢的改变.间充质干细胞作为成骨细胞、脂肪细胞等的来源细胞,其数量、功能活性以及成骨成脂之间的平衡是成骨质量的关键.近年来多项研究表明,糖尿病相关的细胞因子、生长因子、信号通路在间充质干细胞的分化过程中发挥着重要的调控作用,共同导致糖尿病性骨质疏松的发生.本文就间充质干细胞成骨成脂分化在糖尿病骨质疏松中的作用做一综述.     

供体MSCs来源的外泌体转运miR-26a恢复宿主MSCs功能并缓解骨质疏松

目的:探讨移植的供体间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)通过分泌外泌体缓解雌激素缺乏导致的骨质疏松的机制.方法:建立12只小鼠雌激素缺乏骨质疏松模型,通过siRNA调控MSCs外泌体释放及直接注射外泌体,明确外泌体的分泌在MSCs治疗骨质疏松中的作用;通过体外成骨分化诱导、茜素红染色、qPCR明确供体MSCs来源的外泌体对宿主MSCs功能的影响;通过miR-26a模拟物、抑制物转染、qPCR明确外泌体发挥治疗作用的机制.结果:供体MSCs通过分泌外泌体缓解雌激素缺乏骨质疏松,并证明外泌体通过恢复骨质疏松宿主MSCs成骨分化功能缓解骨质疏松,外泌体可通过转运miR-26a恢复骨质疏松宿主MSCs的成骨分化功能.结论:供体MSCs来源的外泌体可通过转运miR-26a恢复宿主MSCs功能并缓解骨质疏松.     

雌激素对大鼠骨髓基质细胞增殖和分化的影响

目的：研究雌激素对大鼠骨髓基质细胞增殖和分化的影响,探讨其对成骨的影响。方法：体外培养4周龄雌性大鼠骨髓基质细胞,以不同浓度雌激素作用于成骨细胞,用噻唑蓝法测定细胞增殖情况;对硝基酚磷酸酯法测定细胞碱性磷酸酶活性;检测培养液中羟脯氨酸含量,了解细胞Ⅰ型胶原的分泌情况;通过矿化结节计数反映细胞的矿化能力。结果：雌激素促进成骨细胞增殖,增加碱性磷酸酶活性;提高培养液中羟脯氨酸含量,峰值浓度为10^-7mol／1,与对照组比较有统计学意义（P〈0．05）;雌激素显著提高细胞的矿化能力,10^-7mol／L浓度作用最显著（＋45．4％,P〈0．05）。结论：雌激素促进成骨细胞增殖和分化,提高其矿化能力,从而刺激骨形成。     

凋亡抑制因子ARC抑制人成骨细胞的凋亡及促成骨分化的实验研究

目的 探讨凋亡抑制因子（Apoptosis repressor with caspase recruitment domain，ARC）对双磷酸盐作用下的人成骨细胞的影响。方法 建立ARC过表达的人成骨细胞，然后，用不同浓度的唑磷酸处理，MTT法用来检测细胞的增殖，流式细胞技术用来检测细胞凋亡情况，ALP染色及半定量等用来检测过表达ARC的成骨细胞的成骨分化。RT-PCR检测成骨相关基因BSP，Runx2，OCN及ALP的表达。结果 ARC能抑制唑磷酸引起的成骨细胞的凋亡，促进成骨细胞的成骨相关基因表达，促进成骨细胞的成骨分化。结论 ARC在调节唑磷酸处理的人成骨细胞中发挥了重要的作用。     

染料木黄酮对成骨细胞增殖、分化和凋亡影响的实验研究

目的研究染料木黄酮对成骨细胞增殖、分化和凋亡的影响，以阐明其对骨形成的作用机制。方法酶消化和组织块相结合培养获得原代成骨细胞，并以成骨肉瘤细胞株UMR-106细胞作对照，加入不同浓度的染料木黄酮后，流式细胞仪和噻唑蓝比色法(MTT)检测成骨细胞细胞周期比例的改变以及凋亡情况；生化法检测细胞内碱性磷酸酶含量的改变。结果流式细胞分析和MT观测结果表明：染料木黄酮促进了原代成骨细胞由G0(G1)期向S期、G2期和M期的移行过渡，从而促进了原代成骨细胞的增殖。染料木黄酮对成骨肉瘤细胞株UMR-106细胞周期无影响，但可诱导UMR-106细胞凋亡。碱性磷酸酶检测结果表明：染料木黄酮可促进原代成骨细胞的分化。结论染料木黄酮可在一定程度上促进成骨细胞的增殖和分化，诱导成骨肉瘤细胞凋亡。