肺鳞癌、腺癌中Survivin表达及其与VEGF和P53表达的相关性研究

目的探讨肺鳞癌、腺癌组织中survivin表达、临床意义及其与VEGF、P53表达的相关性。方法采用免疫组织化学（Envision二步法）检测survivin、VEGF和P53在116例肺鳞癌、腺癌组织及15例肺良性病变组织中的表达情况。结果 survivin、VEGF、P53的阳性率分别为62.1%（72/116）、72.4%（84/116）、55.2%（64/116）,显著高于肺良性病变组织的survivin表达与肺鳞癌、腺癌的低分化（P〈0.05）、淋巴结转移呈正相关（P〈0.05）,与患者预后负相关（P〈0.05）;VEGF和p53的表达与肺癌组织的分化程度、TNM分期及淋巴结转移均有关（P〈0.05）;并且Survivin表达与VEGF、P53表达呈正相关（P〈0.05）。结论 Survivin的表达与肺鳞癌、腺癌的低分化、淋巴结转移正相关;过度表达提示预后不良;Survivin有望成为肺癌诊断和基因治疗的新靶点;survivin、VEGF和P53三者的协同表达可能是促进肺癌恶性进展的重要因素。     

纤维支气管镜活检病变组织标本和痰标本Survivin基因的检测对肺癌的诊断价值

目的明确纤维支气管镜(以下简称纤支镜)活检病变组织和痰标本中SurvivinmRNA的检测在肺癌诊断中的意义。方法应用逆转录聚合酶链反应(RT PCR)法检测41例肺癌手术标本癌组织、癌旁组织和9例良性肺疾病病变组织手术标本,80例肺癌和30例良性肺疾病纤支镜活检病变组织标本及所有(160例)患者痰标本SurvivinmRNA表达情况,并与病理组织学、刷检细胞学和痰细胞学检查结果比较。结果肺癌手术切除标本癌组织SurvivinmRNA的阳性率为70.7%(29/41),高于癌旁组织[17.1%(7/41)]和良性肺疾病组织(1/9),差异有统计学意义(χ2值分别为23.97和10.93,P均<0.05),而癌旁组织与肺良性疾病组织相比,差异无统计学意义(χ2=0.20,P>0.05);纤支镜活检肺癌组织标本SurvivinmRNA的阳性率为63.8%(51/80),高于良性肺疾病的13.3%(4/30,χ2值为22.18,P<0.05);肺癌患者癌组织SurvivinmRNA表达与否及表达水平与患者年龄、性别及肿瘤的病理分型、分级、部位及转移情况均无明显相关性(P均>0.05)。肺癌患者痰标本SurvivinmRNA的阳性率是59.5%(72/121),癌细胞的检出率是47.1%(57/121);痰Survivin mRNA检测联合痰细胞学检查诊断肺癌的敏感性为80.2%(97/121),高于单独痰细胞学及单独痰SurvivinmRNA检测的敏感性(P均<0.05)。手术标本、纤支镜活检标     

Ki67表达对非小细胞肺癌淋巴结转移的诊断价值

目的评估经纤支镜或穿刺活检获得标本(小活检组织)中Ki67的表达对非小细胞肺癌淋巴结转移的诊断价值。方法收集该院68例因病情需要行纤支镜或穿刺活检并检测Ki67表达的非小细胞肺癌患者的相关临床资料进行分析。结果淋巴结转移与Ki67表达阳性呈正相关(P<0.05),诊断灵敏度80%,特异度45.8%。结论小活检组织中Ki67表达对非小细胞肺癌淋巴结转移有一定的诊断价值。     

肺癌患者GST-π基因表达的临床意义

目的 探讨肺癌组织谷胱甘肽-S-转移酶-π（GST-π）基因表达及其对化疗疗效的影响.方法 采用逆转录多聚酶链反应对60例经纤维支气管镜活检肺癌组织和20例非癌良性肺组织进行GST-πmRNA定量检测,肺癌患者行至少2个周期的铂制剂化疗.结果 肺癌组织GST-πmRNA表达阳性率（45.0%）明显高于良性肺组织（15.0% ,P＜0.05）,腺癌和鳞癌阳性率较高,分别为64.7%和45.5%,GST-πmRNA表达与肿瘤组织病理类型有相关性（P＜0.05）,GST-πmRNA阴性表达组化疗有效率（63.6%）显著高于阳性组（18.5%,P＜0.05）,组织GST-πmRNA表达与化疗疗效有相关性（P＜0.05）.结论 肺癌组织恶变过程中GST-πmRNA基因表达水平增加,GST-π可以作为肺癌耐药的预后因子,GST-π表达对临床化疗疗效判断有一定指导意义.     

非小细胞肺癌组织中MMP-9、VEGF的表达变化及意义

目的观察非小细胞肺癌（NSCLC）组织中基质金属蛋白酶-9（MMP-9）和血管内皮生长因子（VEGF）的表达变化,探讨其在NSCLC侵袭和转移中的作用。方法采用免疫组化SP法检测90例NSCLC组织、30例肺良性病变组织和30例癌旁正常肺组织中MMP-9及VEGF,分析MMP-9及VEGF与NSCLC淋巴结转移、临床分期的关系。结果 NSCLC组织中MMP-9和VEGF表达显著高于癌旁正常肺组织和肺良性病变组织（P〈0.01）。MMP-9及VEGF在腺癌组织中的阳性表达率高于鳞癌（P〈0.05）,有淋巴结转移者高于无淋巴结转移者（P〈0.05）,Ⅲ、Ⅳ期者高于Ⅰ、Ⅱ期者（P〈0.05）。NSCLC组织中MMP-9与VEGF的表达呈显著正相关（r=0.451,P〈0.05）。结论 NSCLC组织中MMP-9和VEGF均表达上调,并与NSCLC侵袭、转移有关。     

非小细胞肺癌基质金属蛋白酶-28 mRNA的表达及其临床意义

目的 研究肺癌中基质金属蛋白酶-28（MMP-28）表达水平及其与肺癌临床病理生理特征的关系。方法 RT-PCR方法检测45例非小细胞肺癌组织和15例肺良性病变组织中MMP-28 mRNA表达水平。结果 ①肺癌组织中MMP-28 mRNA表达水平显著高于癌旁组织和肺良性病变组织（P〈0.01）。②肺癌组织中MMP-28 mRNA表达水平与细胞分化程度、P—TNM分期和淋巴结转移等均有密切关系（P〈0．05），而与患者性别、年龄、组织学类型和原发肿瘤大小等均无统计学意义（P〉0．05）。结论 MMP-28与肺癌的发生、发展和转移有关，因此有助于预测肺癌的恶性行为。     

纤维支气管镜刷检细胞学检查诊断肺癌的价值及影响因素分析

目的探讨纤维支气管镜（纤支镜）刷检细胞学检查诊断肺癌的敏感性、特异性及相关影响因素。方法以手术切除和（或）经纤支镜钳取活检组织病理学诊断结果为标准,对143例可疑肺癌患者的纤支镜刷检细胞学检查结果、涂片质量及纤支镜下表现等进行分析。结果以高级别异型增生及以上级别报告为阳性结果,纤支镜刷检细胞学检查诊断肺癌的敏感性为66．7％、特异性为96．6％;纤支镜活检和刷检结合肺癌检出率为89．3％,显著高于单纯刷检（P〈0．01）、显著低于组织病理学检查（P〈0．05）;纤支镜刷检肺癌检出率退变标本和未退变标本分别为25．0％．72．0％（P〈0．05）,中央型肺癌和非中央型肺癌分别为72．1％、43．8％（P〈0．05）,增生型、管壁浸润型、管外压迫型和正常型分别为81．4％、70．0％、22．2％、41．7％（P〈0．01）。结论纤支镜刷检细胞学检查简便、快捷,诊断肺癌特异性及敏感性均较高,与纤支镜钳取活检联用可提高肺癌检出率;但纤支镜刷检结果受标本质量、肺癌部位和纤支镜下分型等影响,临床医师要综合分析临床资料、排除假阴性。     

结直肠癌组织中cyclin E、survivin、PTEN的表达及意义

采用免疫组化SP法检测95例结直肠癌组织及40例正常结直肠组织中细胞周期素（cyclin）E、生存素（survivin）及第10染色体同源丢失性磷酸酸—张力蛋白基因（PTEN）蛋白,采用RT-PCR技术检测46例结直肠癌组织中的cyclin E mRNA、survivin mRNA及PTEN mRNA。95例结直肠癌组织中cyclin E、survivin及PTEN的阳性表达率分别为45.3%、48.4%及36.8%,40例正常结直肠组织分别为0、0及95.0%。cyclin E表达与结直肠癌组织学分级、TNM分期有关（P均〈0.01）,survivin表达与结直肠癌组织学分级有关（P〈0.05）,PTEN与结直肠癌浸润深度、组织学分级、TNM分期有关（P均〈0.05）。cyclin E或survivin的阳性表达率与PTEN呈负相关（r分别为-0.3438、-0.3470,P〈均0.01）。cyclin E mRNA、survivin mRNA及PTEN mRNA在46例结直肠癌中的表达与组织学分级及TNM分期有关（P均〈0.05）。认为检测癌组织cyclin E、survivin及PTEN可评估结直肠癌的生物学行为,cyclin E和survivin表达上调与PTEN表达下调可能在结直肠癌的发生和进展中发挥协同作用。     

女性肺癌463例纤支镜肺活检结果分析

回顾性分析463例在我科经纤支镜肺活检的女性肺癌患者病理组织诊断结果。结果活检前临床诊断为肺部原发或转移癌与病理诊断符合率61．99％,误诊率38．01％。463例女性肺癌患者中,腺癌158例（34．13％）,小细胞癌132例（28．51％）,鳞癌112例（24．19％）,可疑癌33例（7．13％）,不易定型癌11例（2．35％）,其它癌17例（3．67％）。同期女性鳞癌、腺癌的检出率分别为24．19％、34．13％,男性分别为46．57％、21．45％,女性肺癌的病理类型与男性比较差异显著（P〈0．01）。认为经纤支镜肺活检是女性肺癌确诊的诊断方法之一,女性肺癌病理分型不同于男性肺癌患者。     

痰液中survivin、p53蛋白检测对肺癌的诊断价值

目的 探讨检测痰液中survivin、p53蛋白在肺癌诊断中的应用价值。方法 采用改良Saccomanno法收集40例肺癌患者、11例肺良性病变者和9名健康者痰液，用流式细胞技术检测痰液中survivin、p53蛋白的表达水平。结果 ①肺癌患者组痰液survivin、p53蛋白的表达量显著高于肺良性病变组和健康对照组（P〈0．05）；肺良性病变组和健康对照组痰液间无显著性差异（P〉0．05）；②痰液中p53蛋白的表达与吸烟指数有关。③痰液中survivin的表达与p53相关（r=0．575，P〈0．01）。结论 ①survivin、p53蛋白表达增高在肺癌的发生中起着重要作用。②痰或诱导痰中survivin、p53蛋白检测有可能为肺癌的诊断提供一个新的无创、安全的辅助方法。     

缺氧诱导因子-1α、血管内皮生长因子和生存素在非小细胞肺癌中的表达及相关性研究

目的:探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)和生存素(survivin)在非小细胞肺癌中的表达及相关性。方法:收集我院收治的病理确诊为非小细胞肺癌患者20例,并分别取其癌组织与癌旁组织。采用免疫组织化学染色法检测癌组织与癌旁组织中HIF-1α、VEGF和生存素的表达。结果:HIF-1α、VEGF和生存素在非小细胞肺癌癌组织中的表达均高于其癌旁组织(P0.05);在癌组织中,HIF-1α与VEGF和生存素表达呈正相关,Spearman相关系数分别为0.519、0.643;而VEGF与生存素表达亦呈正相关,Spearman相关系数为0.643(P0.05)。结论:在非小细胞肺癌癌组织中HIF-1α、VEGF和生存素表达明显高于癌旁组织;HIF-1α可以调节VEFG和生存素的表达,且VEGF和生存素在肿瘤发生、发展过程中可能有一定的协同作用。     

痰液、血液和纤维支气管镜活检组织中P16INK4a基因甲基化与临床肺癌诊断的关系

目的探讨血液、痰液和纤维支气管镜活检组织中的P16INK4a基因甲基化与临床肺癌诊断的关系。方法运用甲基化特异度聚合酶链技术(methylation-specific PCR,MSP)检测40例临床诊断肺癌患者和45例一般呼吸道疾病患者血液、纤维支气管镜活检组织和痰液标本中P16INK4a的甲基化状况。比较单一组织来源标本检测和多种组织来源标本联合检测诊断肺癌的诊断特性。结果肺癌患者单一血液、痰液和纤维支气管镜活检组织来源标本中甲基化阳性率分别为54.54%(18/33)、65.00%(13/20)和71.43%(10/14);一般呼吸道疾病患者的单一血液、痰液和纤维支气管镜活检组织来源标本中的甲基化阳性率分别为18.18%(6/33)、23.08%(3/13)和23.53%(4/17);两者比较差异显著(P<0.05);肺癌患者多种组织来源标本联合检测甲基化阳性率为85.00%,和前二者比较差异有显著性(P<0.05)。联合检测诊断试验的准确率为84.71%,阳性预测值82.93%,阴性预测值86.36%,阳性似然比为5.46,阴性似然比0.18。结论肺癌患者痰液、血液和纤维支气管镜活检组织中P16INK4a基因甲基化有助于肺癌诊断,对同一患者获取多种组织来源标本联合检测,可提高检测阳性率。     

Caspase-9和Survivin在肝癌组织中的表达及意义

目的探讨Caspase-9和Survivin在肝细胞癌(HCC)患者肝癌组织中的表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学SP法检测92例肝癌患者肝癌组织及其对应癌旁正常肝组织中Caspase-9和Survivin的表达,并分析其表达与HCC临床恶性生物学行为的相关性。组间比较采用卡方检验,相关性分析采用Spearman等级相关法。结果 Caspase-9在肝癌组织中的表达明显低于癌旁组织,而Survivin在肝癌组织中的表达明显高于癌旁组织,差异均具有统计学意义(χ2=6.48、7.05,P0.05)。在TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、门静脉癌栓、淋巴结转移的肝癌组织中Survivin的阳性表达率明显增高(χ2=5.07、6.18、8.29,P0.05),而在其他分组中比较差异无统计学意义;在病理分级Ⅲ~Ⅳ级的肝癌组织中Caspase-9的阳性表达率明显降低(χ2=7.63,P0.05),而在其他分组中比较差异无统计学意义。结论 Caspase-9低表达和Survivin异常高表达均参与肝癌的发生过程,Caspase-9低表达可能与肝癌细胞恶性分化密切相关,而Survivin高表达与肝癌的浸润或远处转移等恶性发展密切相关。     

连接蛋白43在肺腺癌中表达的意义

目的检测肺腺癌组织及正常肺组织中缝隙连接蛋白43(Connexin 43)的表达。方法应用免疫组织化学法和原位杂交方法检测146例肺腺癌组织及20例正常肺组织中Connexin 43蛋白及mRNA的表达,并分析其表达与肺腺癌转移的关系。结果正常肺组织和肺腺癌组织中Connexin 43蛋白阳性表达率分别为95%(19/20)和39.9%(59/148);mRNA的阳性表达率分别为90%(18/20)和54.7%(81/148)。肺腺癌组织中Connexin 43蛋白及mRNA阳性表达率均低于正常肺组织(P0.05)。在高/中分化和低/未分化的肺腺癌组织中阳性表达率分别为48.7%和30.0%(P0.05);Cx43在无淋巴结转移和有淋巴结转移的肺腺癌组织中阳性表达率分别为56.3%和34.5%(P0.05);Connexin43在Ⅰ、Ⅱ期和Ⅲ、Ⅳ期肺腺癌组织中的阳性表达率分别为51.5%和34.0%(P0.05)。结论 Connexin 43蛋白和mRNA低表达与肺腺癌发生、发展及浸润、转移有关。     

胃癌中胸苷磷酸化酶和基质金属蛋白酶2的表达及意义

目的探讨胃癌中胸苷磷酸化酶（TP）和基质金属蛋白酶2（MMP-2）表达的意义及其与肿瘤浸润转移的关系。方法免疫组化SP法检测69例不同胃黏膜组织（正常胃黏膜组10例、慢性胃炎组10例、胃癌组39例、胃癌转移的淋巴结组10例）中TP和MMP-2的表达情况。结果胃癌组织及淋巴结胃癌转移灶中TP与MMP-2的表达较正常组及慢性胃炎组显著增高（P〈0．05）。TP与MMP-2表达与胃癌患者的性别、年龄及肿瘤的分化程度无关。肿瘤≥5cm组及T3-4组TP阳性率湿著高于〈5cm组及T1-2组,有远处转移的胃癌组TP阳性率高于无远处转移组,差具有显著性（P〈0．05）;临床Ⅰ-Ⅱ期和Ⅲ-Ⅳ期之间TP阳性率的差异也具有显著性（P〈0．001）。MMP-2在T1-2组与T3-4组的阳性率分别为60．87％和93．75％,有显著性差异（P〈0．05）。在有淋巴结转移的胃癌组MMP-2阳性率显著高于无淋巴结转移组（P〈0．05）;临床Ⅰ-Ⅱ期阳性表达59．09％,Ⅲ-Ⅳ期阳性表达为94．12％,两组有显著性差异（P〈0．05）。而MMP-2表达却与肿瘤大小及远处转移无关。TP表达阳性的胃癌中MMP-2阳性率88．00％高于TP阴性组的50．00％。结论胃癌中TP与MMP-2表达增高与肿瘤进展的病理临床参数有关;TP的表达与MMP-2的表达有关,提示TP在影响肿瘤进展的过程中可能通过MMP-2促进肿瘤浸润转移。     

VEGFR-3信号途径相关蛋白在胃癌中的表达及意义

目的研究血管内皮生长因子受体（VEGFR）-3信号途径相关蛋白C、D（VEGF—C、VEGF—D）在胃癌中的表达并探讨其与淋巴结转移的关系。方法80例胃癌手术病例分为淋巴结阳性组（n=48）和淋巴结阴性组（n=32）,另设胃溃疡病例为对照组（n=10）。采用ELISA技术进行血清VEGF—C和VEGF-D水平检测,然后应用免疫组织化学EnVisionTM两步法检测胃溃疡组织和胃癌标本VEGF—C、VEGF-D表达。结果胃癌患者血清VEGF-C和VEGF—D水平明显高于对照组（P〈0．05）,胃癌患者血清VEGF-C水平与淋巴结转移有关（P〈0．05）;胃癌组织中VEGF—C、VEGF—D阳性表达率均高于对照组（P〈0．05）,伴淋巴结转移的胃癌组织VEGF-C阳性表达率较无淋巴结转移者更高（P〈0．01）。结论血清VEGF—C可作为胃癌的标记物,对术前判定淋巴结转移具有一定的临床价值。     

非小细胞肺癌患者外周血中多参数检测对诊断微转移的作用

目的 探讨细胞角蛋白19（CK19）、肺组织特异性X蛋白（LunX）、上皮癌相关基因（KS1/4）在非小细胞肺癌（NSCLC）外周血中的表达差异与NSCLC微转移的关系.方法 选择经过9个月随访的52例患者,分为转移组和无转移组,并以胸部良性病变手术患者20例作为对照组.提取外周血标本的总RNA,反转录为cDNA,采用荧光定量实时聚合酶链反应（PCR）检测其中CK19mRNA、LunXmRNA、KS1/4mRNA的表达水平.结果 总RNA通过紫外分光光度仪检测RNA纯度,OD268/280值在1.612 ～2.1之间,RNA浓度在100～ 1410μg/ml之间.经过随访,52例患者中发生转移或复发共18例,转移复发率34.6％ （18/52）.其中转移组外周血中CK19mRNA、LunXmRNA明显高于无转移组及对照组（P＜0.05）,但KS1/4 mRNA在三组患者外周血的表达差异无统计学意义（P＞0.05）;转移组的外周血中LunXmRNA的表达量最高,KS1/4 mRNA其次,CK19mRNA表达量最低,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 CK19、LunX可以作为预测NSCLC转移或复发的指标,辅助诊断NSCLC微转移,其中LunX的敏感性略显优势.     

LKB1和血管内皮生长因子在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨LKB1和血管内皮生长因子(VEGF)在胃癌中的表达及临床意义。方法采用免疫组织化学(SP)法检测115例胃癌组织和20例胃正常组织中LKB1和VEGF的表达,并探讨其与胃癌分期、淋巴结转移、Lauren's分型及预后的关系。结果 LKB1在胃癌组织中的阳性率为20.9%,低于正常胃组织中的95.0%(P0.01);VEGF在胃癌组织中的阳性率为64.3%,高于正常胃组织中的5.0%(P0.01)。LKB1在胃癌组织中的低表达与胃癌的TNM分期、淋巴结转移、Lauren's分型及预后有关(P0.05);VEGF在胃癌中的表达与淋巴结转移、远处转移、TNM分期及预后相关(P0.05)。结论 LKB1的低表达与胃癌的发生、发展有关,对胃癌恶性生物学行为的评估及预后判断具有重要的指导意义。     

Survivin、Caspase-3在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义

目的探讨非小细胞肺癌（non-small-cell lung cancer，NSCLC）中存活素（survivin）与半胱氨酸蛋白酶（Caspase-3）之间的关系及其临床意义。方法采用免疫组织化学法检测117例NSCLC中Survivin的表达，同时采用流式细胞技术检测Caspase-3；分析评估此二者在肿瘤细胞抗凋亡与凋亡促成之间的意义。结果Survivin阳性率明显高于对照组（P〈0．01），Survivin与肿瘤的分型无关（P〉0．05），在淋巴转移中无表达。Caspase-3定量分析中，癌组与对照组、鳞癌与腺癌组、高中低分化组、淋巴转移与无淋巴转移组均有不同程度的统计学意义。结论Survivin、结合Caspase-3定量分析，凋亡指数均有不同程度的衰减。通过生物学行为研究，了解肿瘤细胞的凋亡抑制，有助于临床正确制订化疗方案和判断预后。     

CD44v17在胃癌组织中的表达及其与临床生物学特性之间的关系

目的 探讨一种新的CD44变异体（CD44v17）在胃癌组织中的表达及其与临床生物学特性之间的关系.方法根据本实验室在MCF-7／Adr中新发现的1种CD44剪切拼接变异体CD44v17设计特异性引物,应用SYBR Green I荧光染料,采用实时PCR法检测87例胃癌组织及相应癌旁组织CD44v17 Mrna的表达,根据标准曲线计算CD44v17mRNA的表达量,分析CD44v17mRNA表达与胃癌临床生物学特性之间的关系.结果胃癌组织CD44v17 Mrna表达明显高于相应癌旁正常组织（P〈0.05）;肿瘤〉5 cm组CD44v17 Mrna表达与肿瘤≤5 cm组表达比较差异无显著性（P〉0.05）;未分化腺癌组表达明显高于乳头状腺癌及管状腺癌组（P〈0.05）,乳头状腺癌组CD44v17 Mrna表达与管状腺癌组比较差异无显著性（P〉0.05）;肿瘤累及浆膜及浆膜外组CD44v17 Mrna表达显著高于侵及黏膜、黏膜下层及肌层组（P〈0.05）,而肿瘤侵及黏膜及黏膜下层组的CD44v17 Mrna表达与侵犯肌层组表达比较差异无显著性（P〉0.05）.淋巴结转移组CD44v17 Mrna表达明显高于淋巴结无转移组（P〈0.05）;有肝脏转移组CD44v17 Mrna表达显著高于无肝脏转移组（P〈0.05）.结论CD44v17 Mrna在胃癌组织中高表达,可能与胃癌的侵袭、转移及预后有关.