H+、K+-ATP酶的分子生物学研究进展及在药物研究中的应用

H~+,K~+-ATP酶抑制剂是胃及十二指肠溃疡的一类重要的治疗药物,我们曾对这类药物的研究进展做过综述。近年来,随着生物技术特别是分子生物学和生物信息学的发展,人们对H~+,K~+-ATP酶     

胃H+/K+转换ATP酶的可逆性抑制剂:一类新的抗分泌药物

通过组胺H_2受体的拮抗作用来抑制酸分泌已经彻底解决了消化溃疡的治疗问题.然而,刺激酸分泌的途径是复杂的,涉及到几种刺激物,致使这种方法受到限制.胃壁细胞顶端膜上的H~ /K~ -ATP酶作为HCl分泌的最后一步的确定和特性对更有效的药理学干预提供了一个新靶.取代的苯并咪唑化合物(如奥美拉唑,图1,la)是需要酸活化的前药,可以共价失活H~ /K~ -ATP酶并在抑制酸分泌方面非常有效.它们正被日益广泛地用于治疗与酸有关的疾病.本文讨论可逆性地结合到质子泵上并具有超过苯并咪唑类的潜在临床优越性的第二类H~ /K~ -ATP酶抑制剂的特性.     

原代培养家兔肾脏内髓集合管细胞单层H+/K+交换测定

目的建立IMCD细胞单层H     

柴胡皂甙和甘草甜素抑制Na+,K+-ATP酶活性的构效关系

研究在离体条件下各种单体柴胡皂甙和甘草甜素抑制Na⁺,K⁺-ATP酶活性的构效关系。实验结果表明,各种柴胡皂甙抑制Na⁺,K⁺-ATP酶活性的作用强度依次为:b₁>d>b₂>b₄>a>b₃>e>c。柴胡皂甙化学结构中的C₂₃-OH,C₁₆-OH及C₁₁和C₁₃的共轭双烯可能对其抑制活性起重要作用。甘草甜素(GL),甘草次酸(GA)和生胃酮(18-β-甘草次酸半琥珀酸双钠盐,CX)抑制Na⁺,K⁺-ATP酶活性的作用强度依次为GA≥CX>GL。研究还证明,柴胡皂甙d对Na⁺,K⁺-ATP酶的抑制为非竟争性抑制。     

间硝苯地平对老龄肾性高血压大鼠心肌和脑微粒体Na+,K+-ATP酶,Ca2+-ATP酶和Mg2+-ATP酶活性的影响

间硝苯地平(m-Nif,ig20mg·kg^-1·d^-1持续给药9周)可显著降低老龄肾性高血压大鼠(RVHR)血压和左室重量(P<0.01),增高心、脑微粒体Na⁺,K⁺-ATP酶和Ca²⁺-ATP酶活性(P<0.01),降低Mg²⁺-ATP酶活性,体外量效关系研究发现,m-Nif在较高剂量(10～1000μmol·L^-1)时可增高RVHR心脑微粒体Na⁺,K⁺-ATP酶和Ca²⁺-ATP酶活性,且随剂量增加而增高。上述结果表明,m-Nif可改善老龄RVHR心脑微粒体Na⁺,K⁺泵和Ca²⁺泵功能。     

多巴胺对大鼠纹状体突触前和突触后膜 Na+,K+-ATP 酶活性调节的差异

用蔗糖-Ficol梯度不连续离心法制备大鼠纹状体突触前膜和突触后膜,研究多巴胺(DA)受体对突触前和突触后膜Na⁺,K⁺-ATP酶活性的调节作用。结果表明,DA(10^-8～10^-5mol·L^-1)显著抑制突触后膜Na⁺,K⁺-ATP酶的活性,单独用选择性D1(SKF38393)或D2(LY171555)受体激动剂均无抑制作用,而当二者合用时则产生与DA相似的抑制效应。DA对Na⁺,K⁺-ATP酶的抑制效应可被单独用选择性D1(SCH23390)或D2(spiperone)受体拮抗剂而逆转。相反,DA却能显著激活突触前膜Na⁺,K⁺-ATP酶的活性,单用spiperone即可逆转此激活效应。结果提示,突触前和突触后DA受体对Na⁺,K⁺-ATP酶的调节存在差异,可能与它们的不同生理功能有关。     

前胡香豆素对肾型高血压大鼠左室肥厚及心肌胞内钙、Na+,K+-ATP酶和Ca2+,Mg2+-ATP酶活性的影响

目的研究前胡香豆素组分对肾型高血压左室肥厚的预防和逆转作用及机制。方法用两肾一夹肾型高血压左室肥厚大鼠(RHR)模型,测定前胡香豆素组分对其血压、左室湿重、心肌细胞面积、胞内静息钙及胞膜和线粒体ATP酶活性的影响。结果前胡香豆素组分(30 mg·kg^-1·d^-1,ig)预防组及逆转组大鼠血压、左室湿重/体重均较肥厚组明显降低;左室心肌细胞面积、胞内静息钙均较肥厚组降低;对KCl致钙浓度升高亦明显低于肥厚组;两组均可增加心肌细胞膜及线粒体Na⁺,K⁺-ATP酶和Ca²⁺,Mg²⁺-ATP酶活性。结论前胡香豆素组分可预防及逆转RHR左室肥厚,减少心肌细胞内钙含量,增加ATP酶活性。     

标本放置时间对血K+浓度的影响

目的检测标本放置时间对血K+浓度的影响.方法采用美国MADICA电解质分析仪离子电极法.结果放置时间不同差异显著.结论检测标本要及时分离血清测定     

吡喹酮对日本血吸虫雄虫的Ca2+,Mg2+,K+与Na+的含量及45Ca2+在虫体内分布的影响

日本血吸虫雄虫在4℃或37℃的HBS及无⁴⁵Ca²⁺的HBS中经吡喹酮1或30μg/ml作用0.5～2h后,未见虫的Ca²⁺,Mg²⁺含量有明显变化,但除4℃的HBS组外,余2组虫的K⁺含量明显减少,而虫的Na⁺含量的增加则不明显。在含30 mM Mg²⁺的HBS中,雄虫经吡喹酮作用1h后,虫的Mg²⁺含量明显增加。在37℃的HBS中,血吸虫雄虫经吡喹酮1μg/ml作用5～60min后,虫的皮层胞质中的⁴⁵²⁺含量的百分比较各相应对照组的明显减少,而虫体肌肉的则相反。在4℃的HBS或无⁴⁵Ca²⁺的HBS中,吡喹酮对⁴⁵²⁺在虫体内的分布无明显影响。     

聚合物囊泡的稳定性及H+透膜特性考察

目的 以嵌段聚合物制备聚合物囊泡并考察其稳定性，测定聚合物囊泡膜层的H⁺跨膜渗透特性，及1,4-二氧六环对膜渗透性能的影响，作为聚合物囊泡载药的基础。方法 以二嵌段共聚物PEG-PLGA在溶液中自组装制备聚合物囊泡，采用pH敏感荧光探针HPTS对囊泡的H⁺透膜特性进行考察，并与PBD-b-PEO、PS-b-PEO制备的囊泡及脂质体进行比较。考察不同浓度的1,4-二氧六环对聚合物囊泡膜渗透特性的作用。结果 HPTS的荧光激发光谱有pH依赖性，囊泡外水相中H⁺浓度与t^1/2呈线性相关，不同膜壁厚度的聚合物囊泡的膜渗透能力有显著区别。3种聚合物囊泡对比脂质体，H⁺透膜系数分别降低了2.39×10⁴ 、3.38×10⁴、5.48×10⁸倍。1,4-二氧六环对囊泡膜的渗透性具有调节作用，且存在浓度依赖关系。结论 聚合物囊泡的膜渗透显著低于脂质体，稳定性更好，1,4-二氧六环可调节囊泡膜的渗透性，从而调节药物的装载和释放。     

前列腺素E1对豚鼠心室肌细胞ATP敏感K+通道的影响

目的从离子通道水平,探讨前列腺素E1(PGE1)对ATP敏感K+(KATP)通道的作用.方法膜片钳制技术全细胞记录模式.结果PGE1可诱导KATP通道开放并呈浓度依赖关系.保持电位-40mV,指令电位+20mV,持续时间1s条件下,,10μmol·L1PGE1使外向K+电流由给药前的(2.27±0.34)nA增加到(5.46±0.34)nA(n=6,P＜0.01),增加了(3.18±0.23)nA.并且增加的钾电流可被KATP通道特异阻断剂Glibenclamide(10μmol·     

白术水煎剂对老龄大鼠心肌Na+，K+-ATPase和血清TAA的影响

目的探讨白术对老年大鼠心肌细胞膜钠钾ATP酶(Na     

CD4+与CD8+ T淋巴细胞在骨关节炎中作用的研究进展

骨关节炎是一种慢性、进行性、破坏性的关节炎性病变,常累及软骨及周围组织,最终可导致关节衰竭并伴有疼痛和残疾。许多证据表明免疫机制贯穿骨关节炎的发生发展,目前研究发现,CD⁺₄、CD⁺₈ T淋巴细胞介导的细胞免疫通过细胞分化、组织浸润、免疫亚群失衡以及释放不同的细胞因子,激活相关细胞通路,造成滑膜炎症、软骨丢失、降解、内稳态失衡以及软骨下骨重建等。现就CD⁺₄、CD⁺₈ T淋巴细胞在骨关节炎中作用的研究进展进行总结。     

参麦注射液静注对红细胞膜Na+-K+-ATP酶的影响

为了解参脉注射液对患红细胞（RBC）膜Na^ -K^ -ATP酶的影响,本研究随机选择级择期上腹部手术性男性患60例,根据参脉给药剂量的不同,随机分为三组,每组20例：Ⅰ组、Ⅱ组和Ⅲ组剂量分别为40,60,80mg/kg。给药后10,20,30min时测定各组患静脉血红细胞膜Na^ -K^ -ATP酶活性,各组患血压、心率、氧饱和度的变化也同时被记录。结果发现：参脉注射液对RBC膜Na^ -K^ -ATP酶活性具有短暂的抑制作用,当参脉注射液输液量为80mg/kg时对心率也存在短暂的减慢作用。     

参麦注射液静注对红细胞膜Na+-K+-ATP酶的影响

为了解参脉注射液对患者红细胞(RBC)膜Na+-K+-ATP酶的影响,本研究随机选择级择期上腹部手术男性患者60例,根据参脉给药剂量的不同,随机分为三组,每组20例Ⅰ组、Ⅱ组和Ⅲ组剂量分别为40,60,80 mg/kg.给药后10,20,30min时测定各组患者静脉血红细胞膜Na+-K+-ATP酶活性,各组患者血压、心率、氧饱和度的变化也同时被记录.结果发现参脉注射液对RBC膜Na+-K+-ATP酶活性具有短暂的抑制作用,当参脉注射液输液量为80 mg/kg时对心率也存在短暂的减慢作用.     

白术、附子、肉桂合剂对老龄大鼠心肌Na+,K+-ATPase和血清TAA的影响

目的探讨白术、附子、肉桂合剂对老年大鼠心肌细胞膜钠钾ATP酶(Na+,K+-ATPase)活性和总抗氧化能力(TAA)的影响,及产生显著影响的时间.方法给老年Wistar大鼠灌服白术、附子、肉桂合剂水煎剂,制备血清、心肌匀浆和心肌细胞膜,分别测定血清TAA和Na+,K+-ATPase活性,并与对照组进行比较.结果老年大鼠心肌Na+,K+-ATPase活性和TAA明显低于青年对照组(P＜0.05,P＜0.01).灌服合剂后30天心肌Na+,K+-ATPase明显高于老年对照组,分别为(0.91±0.05)、(0.62±0.09)μmolPi·mg-1Pr·h-1;而血清TAA在20天时明显高于老年对照组,分别为(8.45±1.78)、(5.38±0.58)U·