三肽化合物酪丝亮肽抗肿瘤作用及对单核巨噬细胞激活作用机制

目的: 观察三肽化合物酪丝亮肽的抗肿瘤作用,探讨其对单核巨噬细胞的激活作用.方法: 观察YSL对人肝癌BEL-7402裸鼠移植瘤的抑制作用;观察YSL对体外培养BEL-7402细胞体系的抑制作用;观察YSL对PEMφ杀伤肿瘤细胞BEL-7402及B16-F10的影响;观察YSL对PEMφ分泌合成IL-1β,TNF-α和NO等细胞毒效应分子的影响.结果: YSL能显著抑制BEL-7402移植瘤裸鼠的肿瘤生长,给药剂量为160 μg/(kg*d)时疗效最显著,抑制率为44.03%;YSL体外对BEL-7402细胞生长有一定的抑制作用,与阴性对照组比较有显著性差异(P<0.05);YSL能增强裸鼠PEMφ对BEL-7402,B16-F10杀伤作用,与生理盐水对照组相比有显著性差异(P<0.05);YSL能增强Balb/c小鼠PEMφ对BEL-7402,B16-F10杀伤作用,与生理盐水对照组相比有显著性差异(P<0.05);YSL能促进小鼠PEMφ分泌合成细胞毒效应分子IL-1β,TNF-α和NO,与生理盐水对照组相比有显著性差异(P<0.05).结论: YSL能够抑制BEL-7402的增殖,增强单核巨噬细胞的细胞毒功能,促进细胞毒效应分子IL-1β,TNF-α和NO的分泌合成.     

三肽化合物酪丝缬肽对人肝癌裸鼠移植瘤基因表达谱的影响

目的：观察小分子三肽化合物酪丝缬肽(tyroservatide,YSV)的抗肿瘤作用,分析YSV对肿瘤细胞基因表达情况的影响。方法：建立人肝癌BEL-7402裸鼠移植瘤模型,应用基因芯片技术分析YSV对人肝癌BEL-7402裸鼠移植瘤肿瘤组织基因表达的影响,应用RT-PCR方法验证相关基因的表达情况。结果：给药剂量为320μg·kg~(-1)·d~(-1)时,YSV能显著抑制裸鼠人肝癌BEL-7402移植瘤的生长,抑瘤率为52.37%,与生理盐水组比较均有统计学意义(P＜0.05)。YSV组与生理盐水组比较有781个基因存在统计学差异,其中52个基因与抑瘤效果密切相关,37个促进肿瘤增殖的基因表达下调,15个抑制肿瘤增殖的基因表达上调。RT-PCR检测证实YSV能够明显抑制肿瘤细胞癌基因Akt与上调抑癌基因PTEN的表达。结论：YSV具有显著的抗肿瘤活性,可以抑制肿瘤增殖相关基因的表达,增强抑制肿瘤生长相关基因的表达水平,以恢复它们之间的平衡关系,达到抗肿瘤细胞效应。     

DC-CIK共培养细胞联合索拉菲尼对肝癌细胞体内外的杀伤效应

目的：观察DC、CIK共培养细胞（DC-CIK）联合索拉菲尼(sorafenib)对肝癌细胞BEL-7402的体内外杀伤效应。方法：取健康人外周血单个核细胞,加入不同细胞因子促进DC及CIK细胞成熟并混合共培养。CCK8试剂盒检测DC-CIK共培养细胞联合索拉菲尼对BEL-7402细胞的体外杀伤效应,Annexin V-FITC试剂盒检测两者联合对肝癌细胞凋亡率的影响。用肝癌细胞BEL-7402建立裸鼠皮下移植瘤模型,分为生理盐水对照组、索拉菲尼组、DC-CIK组、DC-CIK+索拉菲尼组,观察它们对裸鼠移植瘤生长的抑制作用。结果：联合组对肝癌细胞的杀伤率及诱导凋亡率均明显高于各单独治疗组,联合组杀伤率高达（75.24±1.91）%,是DC-CIK组的1.8倍,是索拉菲尼单药组的2.1倍（P<0.01）;联合组诱导肝癌细胞凋亡率达（78.32±2.54）%,与单独治疗组相比差异有统计学意义（P<0.05）。体内实验表明,DC-CIK+索拉菲尼组可明显抑制裸鼠BEL-7402移植瘤的生长,抑制率为（83.37±0.16）%,与单独治疗组相比差异有显著统计学意义（P<0.01）。结论：DC-CIK共培养细胞联合索拉菲尼在体内、外可显著抑制肝癌细胞的生长,分子靶向治疗联合细胞免疫治疗可能成为肝癌综合治疗的方法之一。     

酪丝缬肽对裸小鼠人肝癌BEL-7402移植瘤的抑制作用

目的观察酪丝缬肽对裸小鼠人肝癌BEL-7402移植瘤的抑瘤作用,并初步探讨其可能的作用机制。方法通过动物模型观察酪丝缬肽对裸小鼠人肝癌BEL-7402移植瘤肿瘤重量及体积的影响;以电镜观察肿瘤细胞超微结构的改变;以免疫组化法观察瘤组织中增殖细胞核抗原(PCNA)的表达;以利用TUNEL法检测瘤组织细胞的凋亡情况。结果给药剂量为80μg·kg~(-1)·d~(-1)和160μg·kg~(-1)·d~(-1)时,酪丝缬肽可以显著抑制裸小鼠BEL-7402移植瘤的生长,抑瘤率分别为64．02%和66．27%,与生理盐水及相应氨基酸混合物组比较,差异均有统计学意义(P＜0．05)。酪丝缬肽可引起肿瘤细胞超微结构改变,导致肿瘤细胞广泛坏死和凋亡。酪丝缬肽给药组与生理盐水组比较,肿瘤组织细胞的PCNA表达明显降低,凋亡细胞明显增多。结论酪丝缬肽可显著抑制人肝癌BEL-7402细胞在裸小鼠体内的生长,抑制肿瘤细胞增殖,促进瘤细胞凋亡。     

蜂毒肽突变体Melittin-K1抑制人肝癌细胞BEL-7402生长的作用

目的:为了提高蜂毒肽Melittin的抗肿瘤活性,我们设计出新型多肽并将其命名为Melittin-K1。并对多肽Melittin-K1抑制人肝癌细胞BEL-7402生长的作用进行研究。方法:采用CCK-8法检测细胞活力。扫描电镜拍照结合培养基上清中乳酸脱氢酶（lactic dehydrogenase,LDH）的表达水平来评价细胞膜的损伤水平。构建BEL-7402细胞裸鼠异种移植瘤模型来评价Melittin-K1、Melittin体内对肝癌生长的影响以及毒性。结果:与Melittin相比,Melittin-K1抑制BEL-7402细胞生长的作用更显著;与L02细胞相比,BEL-7402对Melittin-K1的杀伤作用更敏感;Melittin-K1体外抑制BEL-7402细胞生长呈时间、剂量依赖性。扫描电镜以及LDH检测结果均显示Melittin-K1处理组细胞膜的破损情况严重。BEL-7402细胞裸鼠皮下移植瘤模型结果表明,Melittin-K1体内显著抑制肿瘤生长,其抗肿瘤作用明显高于同剂量Melittin。Melittin-K1和Melittin体内毒性小,主要表现在,与模型组相比,体重曲线、肝功指标均未发生明显改变。结论:Melittin-K1能够明显抑制肝癌细胞BEL-7402的增殖,是一种极具潜力的抗肝癌药物。     

Polyporus sp.MO5多糖的抗肿瘤作用

目的研究真菌Polyporus sp.M05多糖PSM-a体内对荷瘤小鼠S180的抑瘤作用及其机制.方法 MTT法检测PSM-a体外对S180细胞株的增殖抑制作用.建立S180小鼠模型,灌胃治疗,每日检测肿瘤体积并计算瘤体比和抑瘤率.实验结束后处死小鼠,MTT比色法测定小鼠自然杀伤(NK)细胞及淋巴因子活化杀伤细胞(LAK)的杀伤活性.HE染色检测肿瘤组织细胞坏死情况.结果 PSM-a在体外能抑制S180细胞生长;在体内能显著降低荷瘤小鼠的瘤重和瘤体比,250μg/ml的PSM-a对肿瘤抑制率高达80%以上;PSM-a能促进NK细胞及LAK细胞的杀伤活性;病理切片显示PSM-a作用后引起肿瘤组织坏死.结论 PSM-a对S180荷瘤小鼠肿瘤的生长有明显的抑制作用,其机制可能与提高机体免疫细胞对肿瘤细胞的杀伤活性有关.     

白藜芦醇增强顺铂对肝癌细胞Bel-7402的生长抑制作用

目的观察白藜芦醇与顺铂联合应用对人源肝癌细胞Bel-7402生长的影响。方法采用MTT法、协同指数分析及裸鼠移植瘤模型研究白藜芦醇与顺铂合用对Bel-7402体外增殖及体内生长的抑制作用。结果细胞活性分析表明,两药合用对体外培养的Bel-7402细胞增殖有协同抑制作用,协同指数从0.904-0.739之间分布;动物实验也证实白藜芦醇与顺铂合用可明显抑制Bel-7402裸鼠移植瘤的生长,其药效优于两药单用（P〈0.01）。结论白藜芦醇与顺铂合用可协同抑制人肝癌细胞Bel-7402的生长。     

树突状细胞对肿瘤浸润淋巴细胞抗小鼠肝癌活性影响的研究

目的探讨H22细胞全细胞性抗原致敏的DC激活的TIL体外抗小鼠肝癌活性,并将H22-DC-TIL过继免疫荷瘤小鼠,研究其对荷瘤小鼠免疫功能的影响及抑瘤作用。方法从小鼠四肢长骨骨髓中获取DC,应用粒/巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白介素-4(IL-4)和肿瘤全细胞性抗原致敏DC,然后用DC激活TIL,观察TIL在体外对H22细胞、Hepal-6细胞和B16细胞的杀伤活性;检测应用H22-DC-TIL后荷瘤小鼠的脾淋巴细胞的NK、LAK、CTL活性、血清TNF活性、抑瘤作用以及瘤体病理改变,并与对照组相比较。结果①H22-DC-TIL具有很强的对H22细胞杀伤活性[杀伤率为(71.31±3.11)%],明显高于其对Hepal-6和B16细胞的杀伤活性[杀伤率分别为(50.11±3.03)%,(30.31±2.89)%],也明显高于未经DC激活的TIL、H22-DC-脾淋巴细胞和未经DC激活的脾淋巴细胞对H22细胞杀伤活性[杀伤率分别为(49.80±3.21)%,(48.76±3.60)%和(19.23±2.71)%]和对Hepal-6细胞杀伤活性[杀伤率分别为(39.40±3.21)%,(38.62±2.87)%和(18.73±2.40)%]以及对B16细胞杀伤活性[杀伤率分别为(26.38±2.51)%,(25.82±2.70)%和(18.34±3.01)%],同时B16-DC-TIL(TIL来源于H22瘤体)也可诱导相对较低的对B16细胞的特异性细胞杀伤活性。②H22-DC-TIL可明显诱导提高荷瘤脾淋巴细胞NK、LAK和CTL活性[活性为(30.43±1.35)%、(31.40±1.80)%、(35.30±1.20)%],并可检测到血清TNF水平明显上升[血清TNF为(40.41±1.85)U/ml],它们均达正常对照组水平,与未经DC激活的TIL组、H22-DC-脾淋巴细胞组、未经DC激活的脾淋巴细胞组、生理盐水组分别对应比较,差异均有显著性(P<0.01)。该组瘤体内淋巴细胞浸润程度也高于对照组,其瘤体生长明显受到抑制。结论①H22-DC-TIL可产生很强的体外针对H22细胞的特异性杀伤活性。②H22-DC-TIL具有很强的特异性抗小鼠肝癌作用。     

喷他脒对卵巢癌SKOV3细胞抑制作用的体内体外研究

目的探讨喷他脒对人卵巢癌SKOV3细胞株及卵巢癌SKOV3细胞株裸鼠皮下移植瘤的抑制作用。方法通过MTT法测定卵巢癌细胞生长抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡率;建立人卵巢癌SKOV3细胞裸鼠转移瘤模型,按不同剂量喷他脒给药,观察并记录各组裸鼠及其皮下移植瘤的生长情况,计算肿瘤体积和肿瘤生长抑制率。结果经不同浓度的喷他脒处理后,卵巢癌SKOV3细胞生长明显受到抑制,且这种抑制作用呈时间及浓度依赖性,凋亡率增加。在卵巢癌裸鼠皮下移植瘤动物模型中,喷他脒能够明显抑制移植瘤的生长,且呈剂量依赖改变,高剂量的10 mg/kg组喷他脒对肿瘤抑制作用更明显。结论 (1)喷他脒可以抑制卵巢癌细胞的增殖及诱导凋亡。(2)高、中、低3种喷他脒给药剂量对荷瘤裸鼠无明显毒性作用。(3)喷他脒对荷瘤裸鼠皮下移植瘤的生长有抑制作用,并呈剂量依赖。     

碘[125I]粒子植入对人肝癌细胞裸鼠HepG2移植瘤抑制作用的实验研究

[目的]探讨不同剂量碘[125I]粒子组织间植入对人肝癌细胞裸鼠HepG2移植瘤生长的抑制作用。[方法]构建20只人肝癌HepG2的裸鼠移植瘤模型,随机分为4组,每组5只。3个治疗组分别接受18.5MBq（A组）、29.6MBq（B组）、37MBq（C组）的碘[125I]粒子治疗,对照组（D组）不接受治疗。采用经皮肿瘤组织直接植入的方式分别将不同剂量的碘[125I]粒子植入各治疗组小鼠的瘤体内,每只小鼠瘤体内植入一粒碘[125I]粒子。观察各组小鼠的体重及瘤体体积的变化。至治疗第28d时处死所有小鼠,剥离肿瘤并称重。[结果]各治疗组小鼠瘤体的体积增长速度随碘[125I]粒子的剂量增加而逐渐降低。A、B、C组小鼠与D组小鼠的肿瘤体积相比,抑瘤率分别是41.81%、64.45%和69.69%;A、B、C组小鼠与D组小鼠的肿瘤重量相比,抑瘤率分别是31.11%、62.22%和64.44%。[结论]碘[125I]粒子组织间植入治疗可抑制荷HepG2肝癌裸鼠肿瘤的生长,抑瘤作用与剂量呈正相关。     

mTOR对非激素依赖性前列腺癌的作用研究

[目的]探讨mTOR对非激素依赖性前列腺癌裸鼠移植瘤的影响及作用机制。[方法]背部皮下注射LNCaP细胞复制裸鼠前列腺癌模型,去势同时瘤体内注射mTOR shRNA慢病毒颗粒,记录移植瘤进入激素耐药的时间,同时测量肿瘤组织体积及重量;RT-PCR和Western blot方法分别检测肿瘤组织中mTOR、CgA、NSE的mRNA和蛋白表达情况;采用PI染色和AV/PI染色联合流式细胞术检测肿瘤组织中细胞周期变化和细胞凋亡情况。[结果]与对照组相比,瘤体内注射mTOR shRNA慢病毒颗粒后,移植瘤进入激素耐药时间有所延长,肿瘤组织的体积和重量均显著下降（P〈0.05）,细胞周期中S期细胞所占比例减少、凋亡细胞有所增加,同时,CgA和NSE表达下降（P〈0.05）。[结论]瘤体内注射mTOR shRNA慢病毒颗粒可抑制前列腺癌神经内分泌分化,促进移植瘤组织凋亡、抑制细胞增殖。     

金龙胶囊对肝癌切除后复发转移影响的初步临床观察

目的:观察金龙胶囊对肝切除术后肝癌肝内转移复发、机体细胞免疫的影响并评估其临床疗效。方法:将肝细胞癌122例随机分成治疗组与常规化疗对照组,观察血清中NK细胞和T细胞亚群的变化;检测血清中的MMP-9和AFP水平;术后1年内,每个月行B超检查1次,每3个月行增强CT1次,观察肿瘤有无复发及临床疗效并对生活质量进行评分。结果:术后肝癌切除联合金龙胶囊治疗组CD4 /CD8 和NK细胞水平高于对照组,P<0.05;治疗组血清AFP与对照组比较差异无统计学意义,但MMP-9水平明显低于对照组,P<0.05;治疗组术后半年影像学检查肿瘤复发率为37.7%(23/61),与对照组60.6%(37/61),比较差异有统计学意义,P<0.05。治疗组平均生存期、中位生存期较对照组明显延长,P=0.001;生活质量评分治疗组明显优于对照组,P<0.05。结论:肝癌切除术后联合金龙胶囊治疗能明显降低MMP-9的水平,有效抑制残肝术后肝内转移的发生;对患者的细胞免疫功能影响小,有利于患者术后免疫功能的及时恢复;同时可提高临床疗效及患者术后生活质量及生存期,对于肝细胞肝癌的预后具有重要的临床价值。     

子宫内膜癌术后辅助放疗的临床观察

 目的　评价高危子宫内膜癌术后辅助放疗的价值。方法　具有高危因素的子宫内膜癌 184例 ,12 6例接受术后放疗 ,5 8例行单纯手术 ,比较两组的局部复发率及 5年生存率。结果　在早期 (Ⅰ、Ⅱ期 )子宫内膜癌 ,术后放疗组与单纯手术组的局部复发率分别为 7.5 %、2 1.9% (P <0 .0 1)。 5年生存率分别为 88.1%、6 8.2 % ,两组差异呈显著性 (P <0 .0 1) ,在晚期 (Ⅲ、Ⅳ期 )子宫内膜癌 ,两组的 5年生存率为 35 .6 %、2 9.4 % (P >0 .0 1)。结论　术后辅助盆腔放疗可以提高具有高危因素的Ⅰ、Ⅱ期子宫内膜癌的 5年生存率 ,降低局部复发率 ,对于Ⅲ、Ⅳ期子宫内癌 ,术后放疗不能改善 5年生存率。     

乳腺癌术后放疗对局部复发的影响

目的 :评价乳腺癌术后放疗的作用。方法 :选择 117例根治术后乳腺癌患者 ,用 χ2 检验比较 3年局部复发率。结果 :全组 3年局部复发率 12 8% ,无内乳、腋窝复发患者。胸壁复发占局部复发的80 % (12 15 )。无腋窝淋巴结转移 ,但乳腺肿块位于内象限、中央区或腋窝淋巴结转移 1～ 3个的 80例中 ,3年局部复发率为 8 75 % ,对于接受或未接受术后放疗患者分别为 10 3%、7 3% ,差异无显著性 (P>0 0 5 )。对于乳腺肿块 <5cm或≥ 5cm患者分别为 3 17%、2 9 4 1% ,差异有显著性 (P =0 0 0 4 )。结论 :无腋窝淋巴结转移但乳腺肿块位于内象限、中央区或腋窝淋巴结转移 1～ 3个可不作为术后常规术后放疗指征 ,但此种情况下若乳腺肿块≥ 5cm ,或腋窝淋巴结转移≥ 4个 ,尤其当腋窝淋巴结转移 >10个时 ,应该进行包括胸壁照射在内的术后放疗。     

砷化物治疗肿瘤的研究近况

近年来临床研究表明 ,三氧化二砷 (As2 O3 )和四硫化四砷 (As4S4)对急性早幼粒细胞白血病有显著的疗效 ;有机砷美拉砷醇也试用于治疗难治或耐药的白血病患者。大量研究资料表明 ,As2 O3 、美拉砷醇、二硫化二砷 (As2 S2 )和As4S4等砷化物对各种血液肿瘤细胞和许多实体瘤细胞均有诱导凋亡和 或抑制其生长作用。As2 O3 治疗多发性骨髓瘤、慢性粒细胞白血病、骨髓增生异常综合征、原发性肝癌等某些实体瘤Ⅱ期临床研究均获得一定疗效。     

小鼠uroplakinⅡ启动子在人细胞中的作用

目的　研究小鼠UroplakinⅡ (UPⅡ )启动子在人细胞中的作用。方法　采用半定量RT PCR方法 ,检测人类膀胱移行细胞癌细胞系 (BIU 87)、肾癌细胞系 (GRC 1)、脐静脉血管内皮细胞系(EC)、肺癌细胞系 (A549)和皮肤成纤维细胞系 (Hs2 7)中UPⅡ基因mRNA的表达情况 ;同时构建pEGFP UPⅡ、pGL UPⅡ重组质粒 ,应用脂质体转染技术 ,将重组质粒转染入BIU 87、GRC 1、EC、A549和Hs2 7;利用共聚焦显微镜、流式细胞仪和微板检测仪观察细胞表达绿色荧光蛋白 (GFP)和荧光素酶(Luc)的情况。结果　UPⅡ基因mRNA在BIU 87中有较高的表达 ,而在其他组织细胞中表达极低。BIU 87表达GFP较多 (5～ 10 /HP) ,亮度较强 ,流式细胞仪测定表达量为 10 .1% ;而GRC 1、EC细胞表达GFP极少 (0～ 2 /HP) ,亮度暗 ,流式细胞仪测定表达量分别为 0 %和 1.8%。Luc在BIU 87中的表达量是其他组织细胞的 1.8～ 8.2倍 ,差异有显著性 (P <0 .0 1)。结论　UPⅡ特异性的表达在膀胱癌细胞中。小鼠的UroplakinⅡ启动子在人类细胞中仍具有膀胱特异性的启动活性     

同步放化疗对局部晚期鼻咽癌患者营养状况的影响

目的研究调查分析同步三维适形放疗联合化疗对局部晚期鼻咽癌患者营养状况的影响。方法回顾性调查分析我院89例接受同步三维适形放疗联合化疗的局部晚期鼻咽癌患者治疗前后的营养相关生化指标及体重和身体质量指数(BMI)的变化。结果所有患者均有体重下降,83.1%的患者体重下降明显。同步放化疗前后患者血浆白蛋白浓度和血浆甘油三酯浓度比较,差异有显著性(P<0.05)。而患者血浆总蛋白,钙、镁离子浓度在治疗前后无显著变化。结论同步放化疗对局部晚期鼻咽癌患者的营养相关指标有显著影响,尤其是血浆白蛋白和甘油三酯浓度。     

miR-130在恶性肿瘤中作用研究进展

微小RNA（miRNAs）是一组在转录后水平上调节基因表达的非编码RNA分子,通常结合到mRNA分子上导致靶mRNA降解或翻译抑制。microRNA-130（miR-130）包括miR-130a和miR-130b。研究发现,miR-130在多种机制调控下,在一些肿瘤中发挥癌基因作用,而在另一些肿瘤中发挥抑癌作用,并且与多种肿瘤化疗耐药性有关。本文就miR-130在肿瘤中的作用做一综述。     

化疗对卵巢癌腹膜后淋巴结转移疗效观察

 目的　本研究目的是决定化疗对卵巢癌腹膜后淋巴结转移癌的作用。方法　1986—1995年,我院收治86例原发性卵巢癌行盆腔淋巴结清扫与腹主动脉旁淋巴结切除术。分为两组：前5年44例单纯手术组,后5年42例化疗加手术组。结果　Ⅲ期,单纯手术组,盆腔淋巴结转移率56.25%(9/16),腹主动脉旁淋巴结转移率31.25%(5/16)。化疗加手术组各为56.6%(17/30)与30%(9/30),两组统计学上无显著性差异(P＞0.05)。化疗加手术组42例中有淋巴结转移21例,21例中组织学上有效者2例,占9.5%。结论　本研究表示化疗对卵巢癌腹膜后淋巴结疗效不佳。