人脐血干细胞的特性及其神经分化的研究进展

寻找一种合适的细胞来源进行移植以代替受损的神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞来修复神经损伤已成为人们的研究热点。早在20年以前,Ogawa等人就发现在人脐带血(human umbilical cord blood,HUCB)中存在原始的造血干细胞,随着近年来研究的深入,发现脐带血中不但含有丰富的造血干细胞,而且还含有大量的多潜能干细胞,可以向内皮、血管以及神经等组织分化,     

应用甲硝唑治疗乳牙牙髓根尖病疗效观察

<正>根尖周组织包括根尖部的牙槽骨、牙周膜和牙骨质,根尖周病是指发生在根尖周围组织的疾病,多为牙髓病的继发病。当牙髓病变没有得到有效控制,牙髓组织中的感染通过根尖孔,作用于根尖周组织,引起根尖周病。根尖周病中绝大多数为炎症性疾病,以根尖周炎居多。乳牙列与恒牙列相比具有其特异性。具有患病率高,发病早,     

脂肪干细胞外泌体对人牙髓干细胞增殖与成骨分化的影响北大核心CSCD

目的观察人脂肪间充质干细胞来源外泌体对人牙髓干细胞增殖与成骨分化的影响。方法制备人脂肪来源的间充质干细胞和外泌体。将人牙髓干细胞随机分为3组,正常组进行常规培养,对照组进行成骨诱导分化,实验组在成骨诱导分化时添加5μg·mL^(-1)外泌体。用CCK-8法检测细胞增殖活性,用酶联免疫吸附实验法检测碱性磷酸酶活性,用Western blot法检测骨钙素和骨桥蛋白的表达情况。结果实验组、对照组和正常组的细胞相对增殖活性(光密度值)分别为0.54±0.02,0.34±0.01和0.32±0.01,碱性磷酸酶相对活性(光密度值)分别为10.37±1.26,4.89±0.94和0.71±0.03,骨钙素蛋白相对表达量分别为0.59±0.10,0.23±0.05和0,骨桥蛋白相对表达量分别为0.63±0.12,0.61±0.04和0,实验组的上述指标与对照组和正常组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论人脂肪间充质干细胞来源的外泌体可促进人牙髓干细胞的增殖和成骨分化。     

人牙髓间充质干细胞致瘤性试验

目的 观察人牙髓间充质干细胞（HDP-MSCs）对免疫缺陷小鼠的致瘤性作用。方法 雌性NOG小鼠随机分为4组：对照组和HDP-MSCs低、中、高剂量（2×10⁶、5×10⁶和2×10⁷ cells/kg）组,每组20只;双后肢交替im给药,每周给药1次,共给药6个月（27次）;试验期间进行大体观察、体质量检查和肿瘤触诊,给药结束进行解剖检查、脏器检查和组织病理学检查。结果 对照组死亡2只动物,其中1只动物颈部出现肿块;HDP-MSCs低剂量死亡1只动物,另有1只动物出现弓背;中剂量组1只动物濒死;高剂量动物未见明显异常;低、中、高剂量组触诊未发现肿瘤。小鼠体质量无异常。解剖后对照组和HDP-MSCs低、中剂量个别动物发现有肿块。各剂量组脏器质量及系数无异常、组织病理学检查无药物相关性病变。结论 HDP-MSCs在本试验剂量下连续im给药6个月,致瘤试验结果为阴性。     

Vitapex根充糊剂治疗乳牙根尖周炎、牙髓疾病疗效观察

目的:观察Vitapex糊剂治疗乳牙根尖周炎、牙髓疾病的临床疗效.方法:本实验对治疗乳牙根尖周炎、牙髓疾病采用Vitapex糊剂进行根管充填来为实验组,氧化锌、替硝唑、丁香油调制成糊剂为对照组.结果: 经过0.5～2年的观察,用Vitapex糊剂进行根管充填为实验组总有效率94%,与对照组(90.7%)无显著差异.结论:Vitapex糊剂是治疗乳牙根尖周炎,牙髓疾病的理想根充材料之一.     

骨髓基质干细胞诱导分化为神经细胞的研究进展

骨髓基质干细胞具有取材简单、增殖速度快、培养过程中始终保持多向分化的潜能等特点,已经成为干细胞研究领域的热点,是最好的组织工程种子细胞之一,还可以诱导分化为神经细胞。本文对骨髓基质干细胞诱导分化为神经细胞的研究进展作一综述。     

骨髓基质干细胞分化为神经细胞的研究进展

骨髓基质干细胞具有广泛的分化能力,近年来发现其可以分化为神经元样细胞,且经不同因素诱导,可以分化为特殊的神经元表型,如多巴胺能神经元、5-HT敏感神经元等。其分化机制尚未明确,可能是通过独立的调节机制控制,且受神经特异性基因的表达数量调控,其中Sox、Pax、Notch等基因在其分化中起重要作用。尤其是RB/PBO基因更为重要,而RB基因则触发胆碱能神经分化。外源性因素如cAMP浓度等也有一定的影响。骨髓基质干细胞对神经退行性疾病的治疗作用已经得到证实,因其具有取材容易,分离、培养、扩增方法成熟,且不存在伦理学和免疫排斥问题,临床应用前景广阔。     

CD34-造血干细胞的研究进展

随着研究的深入,人们发现了多种骨髓 ,外周血或脐带血等的CD34 -的细胞群都有造血干细胞的特点 ,认识到CD34 -造血干细胞的存在,并且开始研究这类细胞生物学特性以及可能的临床和研究的治疗价值。1CD34 -造血干细胞的发现1996年 ,Osawa等[1]人用抗CD34的单克隆抗体RAM34,发现成年小鼠体内CD34 -造血干细胞能够在经过致死量射线照射的小鼠体内重建造血功能 ,这些细胞是CD34 -Lin -Sca -1 +c -kit +骨髓细胞。随后Morel发现有造血干细胞功能的细胞是同时存在CD34 +和CD34 -细胞群。Goodell等人在其他一些哺乳动物中通过双色细胞流式…     

人骨髓基质干细胞向神经元分化的实验方法改进

目的 改进人骨髓基质干细胞向神经元样细胞分化的方法,使诱导分化后的神经元样细胞存活时间延长,为其将来可能的临床应用提供理论基础。方法 采用Percoll液分离成人骨髓基质干细胞(hBMSCs),体外扩增,流式细胞仪检测细胞表面抗原的表达．应用丁羟茴醚(BHA)和二甲基亚砜(DMSO),NT-3和PDGF定向诱导hBMSCs分化为神经元样细胞。结果 hBMSCs在体外扩增后,流式细胞检测结果显示CD29、CD44表达阳性,CD11b、CD45表达阴性;加入诱导剂一定时间后,细胞形态发生改变,同时神经丝蛋白表达阳性,胶质纤维酸性蛋白表达阳性。结论 成人骨髓基质干细胞在体外可分化为神经元样细胞和神经胶质样细胞,而且较单独使用BHA DMSO诱导的方法延长了诱导后的细胞存活时间。     

肿瘤干细胞理论及肿瘤干细胞分离和鉴定研究进展

肿瘤是当今社会对人类健康和生命危害最大的疾病之一,即使在人类医学科技迅速发展的今天,对于肿瘤的治疗仍是一大难题,其根本原因是对肿瘤的发生、发展、转移和复发的机制尚不清楚。近些年来,研究人员通过对肿瘤细胞表面标志物、增殖能力和致瘤能力等的深入研究,提出了肿瘤干细胞理论,即肿瘤中存在着少数具有无限自我更新能力和异种免疫缺陷动物致瘤能力的干细胞样肿瘤细胞,它们在肿瘤的发生、生长和转移等生物学过程中起着决定性的作用,该理论的提出给肿瘤治疗提供了新的思路和策略。本文将对肿瘤干细胞理论的形成和发展过程,肿瘤干细胞的特性以及肿瘤干细胞的分离和鉴定最新研究进展进行综述。     

牙髓塑化治疗乳牙根尖周炎疗效观察

牙髓塑化治疗根尖周炎已在临床上应用多年，但较少用于乳牙的治疗。本人通过近两年来对97例处于牙根稳定期的乳牙进行塑化治疗取得了较满意的临床效果。下面就将治疗结果报道如下。1 一般资料97例患牙均为乳磨牙，年龄4~8岁，急性根尖周炎56例，慢性根尖周炎(有窦型及无窦型)41例。2 操作方法开髓与揭髓室顶方法与根管治疗时相同，除去髓腔内感染物，髓腔内放置樟脑酚棉球，若为慢性炎症，则加封甲醛甲酚，炎症完全得到控制后，即可进行塑化，为加速凝固时间防止塑化液从根尖处流失，一般在塑化液中加入碘仿，且塑化液导入不宜过深。3 治疗…     

人畸胎瘤细胞株PA-1胚胎干细胞生物学特性的鉴定

目的鉴定人畸胎瘤细胞株PA-1的胚胎干细胞生物学特性。方法用碱性磷酸酶染色法鉴定体外培养PA-1细胞的分化水平,用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测PA-1细胞多能性基因Nanog、Oct4和Sox2的表达情况。通过悬滴培养法使PA-1细胞形成拟胚体,用RT-PCR法检测拟胚体分化的三胚层特异性基因的表达。通过SCID小鼠体内成瘤实验,用HE染色和免疫组化鉴定PA-1细胞体内接种后三胚层组织的分化。结果体外贴壁培养PA-1细胞碱性磷酸酶染色呈深紫色,PA-1细胞能表达多能性基因Nanog,Oct4和Sox2。悬滴培养PA-1细胞可形成拟胚体(EB),且能够表达三胚层特异性基因(内胚层:Sox17,AFP;中胚层:C-actin,Brachyury;外胚层:Sox1,Pax6)。PA-1细胞接种至SCID小鼠皮下可以形成畸胎瘤,HE染色可见神经外胚层组织,免疫组化可见三胚层细胞表面标志抗原:GFAP(外胚层)、Vimentin(中胚层)及Desmin(内胚层)均呈阳性表达。结论 PA-1细胞在贴壁培养过程中能够保持未分化/低分化状态,并表达多能性基因; PA-1细胞在体内及体外分化实验中均能分化出三胚层的细胞或组织;证明PA-1细胞具有一定的胚胎干细胞生物学特性。     

2D培养条件牙周膜和牙髓干细胞肌腱或韧带基因表达水平的比较

目的 采用酶解组织块法培养牙周膜干细胞(PDLSCs)与牙髓干细胞(DPSCs),分别测定和比较这2种干细胞在2D培养下的肌腱/韧带相关基因(SCX、TNC、TNMD、Six1、Six2、Eya2等)的表达水平的差异.方法 运用酶解组织块法培养PDLSCs与DPSCs,通过克隆生长、流式细胞仪检测细胞周期、干细胞表型CD146、STRO-1鉴定、细胞免疫组化检测波形丝蛋白的表达等方式对其干细胞进行鉴定.测定和比较PDLSCs与DPSCs在2D培养情况下的肌腱相关基因标志表达水平的差异,分析PDLSCs与DPSCs在向肌腱组织分化的能力高低.结果 DPSCs与PDLSCs相比,表达的Eya2,TNC,Col-Ⅰ,Col-Ⅵ,TNMD基因的水平相近,而低表达SCX基因.结论 2D培养下,PDLSCs比DPSCs可能在向肌腱/韧带细胞转化方面更具优势.     

不同培养基对人脐带间充质干细胞生物学特性的影响

目的观察不同培养基对人脐带间充质干细胞（hUC-MSCs）生物学特性的影响,优化培养方法。方法采用贴壁法从正常足月胎儿脐带中分离出间充质干细胞,细胞贴壁后利用DMEM/F12,Mesen PRORSTM Medium这两种培养体系进行体外扩增,绘制生长曲线,流式细胞仪检测其表面标志。结果从人脐带中分离出的间充质干细胞为梭形,呈平行排列生长或漩涡状生长;细胞表达CD29、CD44,不表达CD34、CD45和HLA-DR。结论加入Mesen PRORSTM Medium培养的细胞增殖速度快,更适合于脐带间充质干细胞的体外扩增。     

人多能干细胞在药物发育毒性评价中的研究进展

发育毒性是毒理学研究中最具挑战性的领域之一,传统的发育毒性评价方法均存在实验成本高、周期长、技术复杂等弊端.人多能干细胞(hPSC)包括人胚胎干细胞(hESC)和诱导多能干细胞(iPSC),具有分化多能性和无限增殖的潜力.近年来hPSC在发育毒性评价方面的研究逐渐增多,主要从hPSCs培养中代谢小分子的变化、hPSCs...     

斯康杜尼在乳牙牙髓治疗中的临床观察

目的评价斯康杜尼在乳牙牙髓治疗中的麻醉疗效。方法将117例患者随机分为两组,运用不同的麻醉方法,实验组注射斯康杜尼,对照组注射利多卡因。观察两组在牙髓治疗中的疗效。结果注射斯康杜尼的实验组与注射利多卡因的对照组比较差异有统计学意义(P<0.01),实验组麻醉效果优于对照组。结论斯康杜尼的麻醉效果优于利多卡因,对乳牙牙髓治疗有满意的镇痛效果。     

人骨髓基质干细胞体外分离培养的优化及定向分化的调控

目的 通过改进人骨髓基质干细胞（hBMSCs）的体外培养和定向诱导为神经细胞的方法,以获得纯化hBMSCs以及阳性率更高的神经细胞。方法 采用Percoll-Paque液（1．073g／m1）分离hBMSCs,Mensen Cult培养基体外培养扩增,流式细胞仪检测纯化率。至P3代加入特定组合诱导剂进行定向诱导分化,观察hBMSCs分化为神经细胞的形态学变化,免疫组化和免疫荧光检测特异性神经元烯醇化酶（NSE）、神经丝蛋白（NF）、胶质纤维酸性蛋白（GFAP）阳性细胞数。结果Mensen Cult培养hBMSCs的扩增速度快,纯化率高;在加入特定诱导剂后细胞出现胞体收缩、突起伸出等神经细胞的形态改变,NSE、NF、GFAP均有不同程度阳性率。结论 Mensen Cult是一种较为优秀的hBMSCs体外培养基,而且我们使用的诱导配方效果确切。