gax基因在移植静脉重塑早期过表达对平滑肌细胞转化态的影响

目的　探讨 gax基因在移植静脉重塑早期过表达对平滑肌细胞 (VSMCs)表型转化的影响。方法　 48只大鼠随机分为实验组与对照组 ,每组 2 4只 ,均行右颈内静脉移植到同侧颈总动脉显微手术。术后 14d取出移植静脉 ,检测并观察 gax基因、凋亡相关基因及VSMCs的表型转化状态。结果　实验组与对照组比较 :gaxmRNA表达明显增加 (10 6.9± 3 8.7,P <0 .0 1) ,末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记 (TUNEL)阳性细胞明显增多 (5 0 .5± 2 0 .4,P <0 .0 1)和增殖细胞核抗原 (PCNA)阳性细胞显著减少 (3 3 .86± 13 .3 8,P <0 .0 1) ;bcl 2表达明显下降 (13 .0±4.6,P <0 .0 1) ;p5 3、bax表达显著增高 (分别为 2 7.0 0± 7.2 5或 2 8.6± 5 .5 ,P均 <0 .0 1)。结论　gax基因过表达可促进移植静脉合成表型VSMCs的凋亡     

半乳糖化磁性阿霉素白蛋白纳米粒对大鼠移植性肝癌模型bcl-2/bax蛋白表达的研究

目的　半乳糖化白蛋白磁性阿霉素纳米粒 (Gal MADM NP)治疗大鼠移植性肝癌对肿瘤细胞凋亡bcl 2及bax蛋白表达的影响。方法　采用SABC法进行免疫组织化学染色观察bcl 2及bax蛋白的表达。结果　注射Gal MADM NP(肿瘤区加磁场 )组免疫组织化学显示bcl 2蛋白表达阳性率 2 3 .5 3 % ,低于ADM组 5 4.5 5 %及NS组 71.43 % (P <0 .0 1) ,bax蛋白表达阳性率88.2 4% ,高于ADM组 45 .45 %及NS组 2 8.5 7%。结论　Gal MADM NP组在适当外加磁场的作用下 ,能够降低bcl 2蛋白表达 ,增加bax蛋白表达 ,促进移植肝癌肿瘤细胞凋亡。     

p38 MAPK在自体移植静脉中的表达及其意义

目的　研究丝裂原活化蛋白激酶p3 8MAPK信号传导通路在自体移植静脉中的表达。方法　Wistar大鼠 80只 ,建立自体移植静脉模型。术后随机分为 6,2 4h ,3 ,7d和 2 ,4,6,8周等 8组 ,于相应时点取材 ,半定量逆转录PCR检测移植血管中p3 8MAPK的mRNA表达 ,Western蛋白印迹定量检测 p3 8的蛋白产物及磷酸化蛋白产物表达 ,原位杂交和免疫组化方法定位p3 8mRNA及蛋白表达。结果　移植静脉术后 6hp3 8的mRNA表达即较正常静脉明显增强 (P <0 .0 1) ,并于术后 2周达高峰 ,表达值为 (59± 2 6) % ,与 4,6,8周比较差异极显著 (P <0 .0 1)。Western蛋白印迹提示 p3 8在移植 2～ 4周达高峰 ,之后开始减少 ,8周时仍维持一定表达量 (1/4～ 1/2 )。原位杂交及免疫组化提示阳性表达多定位于移植血管中层或增生内膜中的血管平滑肌细胞 (VSMCs)。结论　p3 8MAPK通路的激活参与了移植静脉的内膜增生以及血管重塑 ,可望成为防治移植静脉狭窄闭塞的治疗靶点     

腹主动脉瘤动脉壁血管平滑肌细胞增殖及凋亡的研究

目的研究腹主动脉瘤 (abdominalaorticaneurysm ,AAA)在发病不同时期动脉壁平滑肌细胞 (smoothmusclecells,SMC)增殖与凋亡的改变。方法建立大鼠AAA模型 ,分别于术后 3d、1、2、3、4周切取腹主动脉 ,应用原位DNA片段末端标记 (TUNEL)和免疫组织化学方法检测腹主动脉壁中SMC凋亡和相关基因bcl 2、bax蛋白以及增殖细胞核抗原 (PCNA)、α 血管平滑肌肌动蛋白(α actin)的表达。结果TUNEL及PCNA表达高峰时段分别为术后 2～ 3周和 1周 ;术后 3d至 1周凋亡细胞少于PCNA阳性SMC ,2～ 4周多于PCNA阳性SMC且SMC数量明显减少 ;bcl 2与bax蛋白表达分别于术后 1、3周达到峰值 (P <0 0 1)。结论动脉壁SMC增殖和凋亡的失衡与AAA发病密切相关 ;bcl 2与bax基因参与了对AAA动脉壁中SMC凋亡的调控。     

骨关节炎软骨细胞凋亡调控基因的研究

目的　比较分析正常人及老年性骨关节炎患者软骨细胞bax和bcl 2的表达及细胞凋亡状况。　方法　取 9例骨关节炎患者的关节软骨做实验标本 ,以 6例无骨关节炎病史的意外死亡者关节软骨作为正常对照 ;采用逆转录 /聚合酶链反应 (RT PCR)方法检测bax和bcl 2mRNA表达 ,免疫组化检测bax和bcl 2蛋白 ;应用TUNEL方法进行凋亡细胞原位检测。　结果　骨关节炎患者和正常对照软骨细胞都能表达bax和bcl 2mRNA ;骨关节炎关节软骨细胞baxmRNA表达量较正常对照显著增高 (P <0 0 1) ,bcl 2mRNA表达量也高于正常对照组 (P <0 0 5 ) ,两组间bax/bcl 2表达量的比值差异无显著性意义 (P >0 0 5 ) ;免疫组化可检测到相应表达水平的蛋白 ;骨关节炎软骨细胞凋亡 (4%～ 14% )多于正常对照 (0～ 2 % )。　结论　软骨细胞凋亡受bax和bcl 2共同调节 ;bax和bcl 2的共同调节结果可能是OA患者软骨细胞凋亡增加 ,但凋亡率不高、病理过程进展缓慢的一个重要的原因     

生长抑素类似物诱导胆管癌细胞凋亡和bcl-2/bax表达的研究

目的探讨生长抑素类似物SMS2 0 1 995 (SMS)对人胆管癌SK ChA 1细胞凋亡和凋亡调控基因bcl 2和bax的影响。方法用DNA凝胶电泳、流式细胞仪检测AnnexinV标记凋亡细胞、免疫组化和原位杂交方法研究SMS(10 0ng/ml)处理 6、12和 2 4h后人胆管癌SK ChA 1细胞凋亡和bcl 2 /bax表达的变化。结果SMS作用SK ChA 1细胞 6h对DNA无明显影响 ,作用 12和 2 4h后DNA凝胶电泳出现呈典型梯状条带。SMS作用 6、12和 2 4h后 ,AnnexinV标记的凋亡细胞分别为 (2 2±5 ) % ,(39± 7) %和 (5 8± 10 ) %。同时 ,SMS可使细胞bcl 2蛋白表达下降 ,使bax蛋白和mRNA表达升高。结论SMS能诱导SK ChA 1细胞发生凋亡 ,bax和bcl 2凋亡基因介导了SMS对SK ChA 1细胞凋亡的发生     

苦参碱对增生性瘢痕成纤维细胞凋亡及相关调控蛋白表达的影响

目的　研究苦参碱 (matrine,Mat)对增生性瘢痕成纤维细胞 (fibroblast,FB)凋亡及相关调控蛋白表达的影响。方法　于 2 4只新西兰白兔耳部腹侧面制作增生性瘢痕模型。所有动物随机分为Mat组和对照组 (每组 12只 ) ,分别采用Mat(5 0 g/L)和等渗盐水于各组兔耳瘢痕处行局部封闭注射 ,1次 / 4d。用药 2、4、6、8、12周后 ,采用DNA切口末端标记技术 (TUNEL)检测各组增生性瘢痕FB的凋亡细胞数量 ,利用免疫组织化学方法检测凋亡相关调控蛋白 p5 3、bcl 2、bax的表达。 结果与对照组比较 ,用药 2、4、6、8、12周后 ,Mat组FB凋亡数量均明显增加 (P <0 .0 5 ) ,bax表达明显增强 ,p5 3、bcl 2表达明显减弱 ,瘢痕逐渐趋于平复。　结论　Mat可促进兔耳增生性瘢痕FB的凋亡 ,使凋亡相关调控蛋白bax表达上调 ,p5 3、bcl 2表达下调     

5-氟尿嘧啶诱导直肠癌HR8348细胞凋亡作用的研究

目的　探讨 5 氟尿嘧啶 (5 fluorouracil ,5 FU )体外诱导直肠癌HR83 48细胞凋亡的作用及细胞凋亡与bcl 2、bcl xl、bax及 p5 3表达的关系。 方法　经 5 FU处理HR83 48细胞 2 4h后 ,用甲基绿 派若宁染色法和TUNEL法检测细胞凋亡情况 ,并用SP免疫组织化学法检测HR83 48细胞中bcl 2、bcl xl、bax和 p5 3的表达。 结果　HR83 48细胞经 5 FU作用 2 4h后 ,细胞凋亡指数 (AI)明显高于对照组 ,差异有显著性意义 (P<0 .0 1)。 5 FU作用不同时相bcl 2的表达评分结果与对照组比较差异均无显著性意义 ;不同时相bcl xl的表达评分结果与对照组比较稍降低 ;而bax的表达评分结果随时间延长明显增加 ,2 4h、3 6h的表达评分结果明显高于对照组 (P<0 .0 1) ,而 p5 3在 5 FU组和对照组各时相均未见表达。结论　 5 FU具有诱导HR83 48细胞凋亡的作用 ;5 FU可能通过上调bax的表达并改变bax/bcl xl的比值而诱导HR83 48细胞凋亡。     

细胞凋亡与增殖在先天性胆总管囊肿发病中的作用

目的　研究不同类型 (囊状、梭状型 )先天性胆总管囊肿壁细胞凋亡与增殖的关系 ,了解细胞凋亡 /增殖在胆总管囊肿中的作用。方法　以胆总管囊状扩张组 32例、梭状扩张组 35例及胆总管结石致胆管扩张组 (对照组 ) 2 5例为研究对象。术中取部分胆总管壁送检 ,观察胆总管壁损伤情况。用免疫组织化学法检测细胞凋亡的相关指标bcl 2、bax及细胞增殖指标PCNA的表达 ;用TUNEL法检测细胞凋亡情况。结果　囊状扩张组胆总管壁粘膜上皮细胞破坏严重 ,梭状扩张组镜下所见与囊状扩张组相似 ,但程度较轻。对照组胆总管粘膜上皮细胞破坏最轻 ,其凋亡细胞呈散在分布 ,上皮细胞和成纤维细胞凋亡阳性率较低 ,分别为 (2 .74± 1 .0 0 ) %和 (2 .95± 0 .87) % ;bcl 2、bax表达率较低 ,水平相似 (P>0 .0 5) ;PCNA表达率较高 ,分别为 (3 .74± 1 .0 0 ) %和 (3 .71± 1 .77) %。囊状扩张组与梭状扩张组囊壁残留上皮中的bcl 2和PCNA表达率低 ,分别为 (0 .99± 0 .51 ) %和 (0 .90± 0 .38) % ;bax呈高表达 ,bcl 2呈低表达 ,凋亡细胞阳性率较高 ,分别为 (1 3 .94± 4 .77) %和 (7.51± 3 .46) % ;成纤维细胞中的PCNA表达率较高 ,分别为 (9.91± 2 .91 ) %和(9.70± 3 .1 8) % ,bax呈低表达 ,bcl 2呈高表达 ,凋亡细胞阳性率较低     

重组人红细胞生成素对大鼠心肌梗死的治疗作用

目的　观察重组人红细胞生成素 (rHu EPO)治疗心肌梗死大鼠心功能和心肌细胞凋亡情况 ,探讨其机制。方法　 3 2只SD大鼠分空白组 (Sham )、心肌梗死组 (MI)和治疗组 (MI EPO) ,结扎左冠前降支制备心肌梗死的模型 ,治疗组每天腹腔注射 5 0 0 0IU /kg体重rHu EPO共 7d ,14d后所有大鼠检测血流动力学指标 ,心脏切片原位末端标记 (TUNEL)检测凋亡 ,免疫组织化学检测bcl 2、bax表达。结果　心肌梗死组凋亡指数 (AI)为 1.65 % ,bcl 2及bax蛋白阳性表达指数 (PEI)分别为 0 .96%和 1.3 4% ,均明显高于空白组 (P <0 .0 5 ) ;治疗组心功能保存较好 ,AI与bax蛋白PEI分别为 0 .84%和 0 .68% ,均下降 (P <0 .0 5 ) ,而bcl 2蛋白PEI增高 (P <0 .0 5 )为 1.43 %。结论　rHu EPO可抑制心肌细胞凋亡 ,保存心功能。可能是通过下调bax表达和上调bcl 表达实现的。     

Soluble Fas and Fas-ligand in bladder cancer in vitro and in vivo

Circulating soluble Fas (sFas) and expression of Fas-ligand on cancer cells are mechanisms of immune escape. The aim of the present study was to investigate expression and production of Fas and Fas-ligand on bladder cancer cell lines of different grade as a basic mechanism of their secretion in vivo. sFas and sFas-ligand serum levels of patients with different stage of bladder cancer were examined to determine the possible clinical use of these molecules as tumor markers. Bladder cancer cell lines RT4 (G1), RT112 (G1), T24 (G3) and SUP (G4) were analyzed by flowcytometry for Fas and Fas-ligand expression. To determine if the Fas-ligand gene is transcribed in these bladder cancer cell lines, RT-PCR was performed on mRNA extracted from these cell lines. Production of sFas and sFas-ligand was examined in cell culture supernatants of the cancer cells as well as in the serum of 62 patients with bladder cancer by a specific ELISA test. We demonstrate that Fas is expressed in similar levels on all human bladder carcinoma cell lines. In T24 (G3) and SUP (G4) cell lines we were able to detect the Fas-ligand protein, whereas no Fas-ligand protein could be found in RT4 and RT112 (G1) cells. Fas-ligand mRNA was expressed in all bladder cancer cell lines. Furthermore, all bladder cancer cell lines produce sFas but no sFas-ligand in spite of mRNA expression. The range of sFas levels in the serum of all patients with bladder cancer was large and did not show a correlation to the histopathological stage of bladder cancer. Although there is in vitro evidence that sFas and Fas-ligand play a role in bladder cancer, no correlation between the sFas and s Fas-ligand serum levels and the histopathological stage of bladder cancer could be found. Therefore, serum sFas and sFas-ligand have to date limited clinical relevance.     

Overweight in childhood and bone density and size in adulthood

Summary  

We evaluated the adult bone structural traits in relation to childhood overweight in 832 men and women. Childhood overweight was associated with larger cross-sections at long bones in both sexes. Excess weight in childhood may also lead to higher trabecular density in females and somewhat lower cortical density in men.