变形链球菌表面蛋白A区遗传多态性的研究

目的:探讨变形链球菌表面蛋白A区遗传多态性与其粘附性能的关系。方法:分别选取本实验室前期工作所获得的粘附能力较强和较弱的血清c型变形链球菌临床分离株，提取全菌DNA，经PCR扩增表面蛋白A区编码基因spaP-a后，用限制性内切酶Hae班进行限制性片段长度多态性分析。结果:经Hae ]II酶切后，两组血清c型变形链球菌均出现了4种基因型，且4种基因型在两组菌株的构成情况不同。结论:血清c型变形链球菌临床分离的 spaP-a具有遗传多态性，粘附能力较强的菌株比粘附能力较弱的菌株具有更明显的异质性。     

变形链球菌F-ATP酶亚基基因uncA遗传多态性的研究

目的研究变形链球菌临床分离株耐酸因子F—ATP酶亚基α的结构基因uncA的遗传多态性，并探讨基因多态性与细菌耐酸力及龋病发生的关系。方法分别从高龋、无龋个体中分离变形链球菌34和30株，其中包括18株高耐酸株、20株低耐酸株。从细菌组DNA扩增uncA，行限制性内切酶长度多态性分析（RFLP）及核酸测序比较。结果不同限制性内切酶RFLP产生不同的基因型，测序证实了导致多态出现的基因变异；内切酶Hph Ⅰ产生的A、B基因型在不同患龋个体分离菌株的分布不同（P〈0．05），A型uncA在高龋分离株的检出率高于无龋分离株；内切酶MboⅡ产生的C、D基因型在不同耐酸力菌株中的分布不同（P〈0．05），C型uncA在高耐酸力菌株的检出率高于低耐酸力菌株。结论变形链球菌F—ATP酶的α亚基基因uncA具有明显遗传多态性，酸性环境下生存力强的菌株可能出现基因的适应性变异，不同基因型uncA分布与菌株的耐酸力及致龋力相关。     

变链菌葡糖基转移酶遗传多态性与乳牙高龋的关系

目的对乳牙高龋与变链菌葡糖基转移酶基因遗传多态性的关系进行初步研究。方法以20名高乳牙龋幼儿合成水不溶性葡聚糖量最高的15个菌株及20名无龋幼儿合成水不溶性葡聚糖量最低的15个菌株作为实验菌株，UA159为参考菌株，应用三种限制性内切酶（HinfI、TaqI、MboI）以PCR-RFLP法分析高龋无龋幼儿变链菌临床分离株葡糖基转移酶gtfBC基因的遗传多态性。结果Hinf I的酶切图谱在两组幼儿间存在差别，高龋组有5株与UA159一致，而无龋组3株与UA159一致，但差别没有统计学意义；TaqI酶切图谱除无龋组有一株与UA159不同外，其余均相同；所有MboI的酶切图谱与UA159相同。结论高龋和无龋幼儿gtfBC基因限制性酶切图谱未发现有统计学意义的差异。     

老年人高龋患者牙菌斑中变形链球菌临床分离株合成胞外多糖能力的研究

目的；探讨老年人高龋患者牙菌斑中变形链球菌（血清C型）临床分离株合成胞外多糖能力。方法：收集老年人高龋患者、无龋者牙菌斑中变形链球菌（血清C型），检测合成胞外多糖能力，并与国际参考菌株比较。结果：老年人高龋患者牙菌斑中分离出的变形链球菌临床分离株合成胞外多糖能力明显高于无龋组。同时研究发现，在老年人高龋患者同一个体牙菌斑中，不同基因型变形链球菌临床分离株合成胞外多糖的能力仔任差异，在无龋者牙菌斑中发现没有这一现象。结论：老年人高龋患者牙菌斑中变形链球菌（血清C型）临床分离株合成胞外多糖能力强的菌株与龋病的发生密切有关。     

高龋及无龋者变形链球菌临床分离株致龋性研究Ⅱ合成细胞外多糖能力的实验研究

目的：探讨来自不同龋敏感者的变形链球菌（血清型ｃ）临床分离株合成细胞外多糖的能力。方法：采用红外光谱分析对葡萄聚糖样本作定性分析,用蒽酮法分别定量测定水溶性和水不溶性的葡聚糖含量。结果：同一个体所带不同基因型变形链菌菌株合成细胞外多糖能力具有差异;高龋组个体定植的合成水溶性及水不溶性葡聚糖能力强的菌株所占比较显著高于无龋组。结论：高龋组变形链球菌（血清型ｃ）临床菌株的高致龋力与其携带有合成细胞外多糖能力强的菌株密切相关。     

变链菌细胞外多糖合成与乳牙高龋的关系研究

目的:比较高龋和无龋幼儿变链菌临床分离株在体外利用蔗糖合成水溶性、水不溶性葡聚糖的能力。方法:蒽酮法定量测定从高龋(dmft≥5)和无龋幼儿(dmft=0)牙菌斑分离的变形链球菌临床分离株水溶性和水不溶性葡聚糖产量。结果:高龋组菌株合成水溶性与水不溶性葡聚糖量平均分别为0.0332mg/ml和0.0357mg/ml,高于无龋组菌株的0.0215mg/ml和0.0192mg/ml;高龋幼儿定植的合成水溶性及水不溶性葡聚糖能力强的菌株所占比例也高于无龋幼儿;变链菌临床菌株水不溶性葡聚糖产量平均为0.0301mg/ml,高于水溶性葡聚糖产量(0.0267mg/ml);差异有统计学意义。结论:高龋幼儿的龋活跃性与其口腔中变形链球菌临床菌株合成细胞外多糖能力强有关。     

维吾尔族不同龋敏感儿童变形链球菌临床分离株表面蛋白A区遗传多态性研究

目的:分析维吾尔族高龋和无龋儿童变形链球菌临床分离株表面蛋白A区基因遗传多态性与其黏附能力的关系。方法:通过细菌贴壁法进行维吾尔族儿童高龋组(dmft≥5)和无龋组(dmft=0)变链菌临床株黏附试验。选取黏附能力较强和较弱的菌株,提取细菌DNA,经PCR扩增其表面蛋白A区编码基因spaP-a后,利用限制性内切酶HaeⅢ进行限制性片段长度多态性分析。结果:高龋组黏附能力(33.92±8.79)%强于无龋组(27.53±7.45)%,差异有统计学意义(P<0.05)。经HaeⅢ酶切后,高黏附力组和低黏附力组变链菌均出现了A、B两种基因型,且在两组菌株中的分布情况不同,A基因型在高黏附力组居多,B基因型在低黏附力组居多,差异有统计学意义(P<0.05)。测序证实spaP-a基因的特异性碱基突变引起酶切位点改变而产生基因多态性。结论:维吾尔族不同龋敏感儿童变链菌临床株spaP-a基因具有得遗传多态性可能是其黏附能力出现差异的原因之一。     

变形链球菌F-ATPase亚基基因uncEBF基因多态性的研究

目的研究变形链球菌临床分离株耐酸因子F- ATPase亚基c、a、b联合基因uncEBF的遗传多态性,并探讨基因多态与细菌耐酸力的关系。方法选取18株变形链球菌高耐酸株、20株低耐酸株,以特异引物从细菌组DNA扩增uncEBF,行限制性内切酶长度多态性分析（RFLP）和测序比较。结果不同限制性内切酶RFLP产生不同的基因型,测序证实了导致多态出现的基因变异;其中内切酶AluⅠ产生的A、B基因型在不同耐酸力菌株的分布不同（P<0.05）,高耐酸性菌株中A型基因uncEBF的检出高于低耐酸力菌株。结论变形链球菌F- ATPase亚基联合基因uncEBF具有明显基因多态性,酸性环境下生存力强的菌株可能出现基因的适应性变异,可认为不同基因型uncEBF分布与耐酸力不同相关。     

老年人高龋患者牙菌斑变形链球菌临床分离株产酸能力的研究

目的：探讨老年人不同龋敏感者口腔中变形链球菌（血清C型）的临床分离株产酸能力的差异。方法：收集老年人高龋患者、无龋者牙菌斑变形链球菌临床分离株（血清C型），比较细菌产酸能力，并与国际参考菌株比较。结果：老年人高龋患者口腔中分离出的变形链球菌临床分离株产酸能力明显高于无龋者口腔中分离出的变形链球菌临床分离株，与国际参考菌株却无明显地统计学差异。同时我们研究也发现，在老年人高龋患者同一个体的口腔中变形链球菌的临床分离株产酸能力存在明显差异。结论：老年人高龋者口腔中变形链球菌（血清C型）临床分离株的高致龋性与其携带有产酸能力强的菌株有关。     

变形链球菌临床株质子移位膜ATP酶γ亚基基因uncG遗传多态性及mRNA表达水平的研究

目的研究变形链球菌临床分离株质子移位膜ATP酶（F- ATPase）的γ亚基基因uncG的遗传多态性和mRNA表达水平。方法选取在不同龋敏感人群中分离的18株高耐酸和20株低耐酸变形链球菌为实验株,扩增uncG基因,行限制性内切酶长度多态性（RFLP）分析和测序比较,应用RT- PCR法和凝胶成像系统定量软件对20株不同基因型和不同耐酸力变形链球菌uncG基因的mRNA表达水平进行评价和比较。结果ALuⅠ- RFLP和BsrⅠ-RFLP产生A、B、C、D 4种基因型,但4种基因型在不同耐酸力菌株的分布差异没有统计学意义（P>0.05）。不同基因型及不同耐酸力菌株uncG的mRNA表达水平不同,但其差异也没有统计学意义（P>0.05）。结论变形链球菌F- ATPase γ亚基基因uncG的RFLP基因型和mRNA表达水平具有明显遗传异质性,但对菌株耐酸力没有明显影响。     

维吾尔族不同龋敏感儿童变链菌临床分离株生物膜状态合成胞外多糖能力的比较

目的:比较维吾尔族高龋和无龋儿童变链菌临床分离株在生物膜状态下合成胞外多糖的能力,以推测其致龋能力的差异。方法:1)选取课题组前期分离鉴定的维吾尔族儿童变链菌临床株27株,其中高龋(dmft≥5)17株,无龋(dmft=0)10株。2)在0.8cm×0.8cm无菌盖玻片上形成变形链球菌生物膜标本。3)采用蒽酮法测定高龋组与无龋组生物膜状态下合成胞外多糖的量。结果:高龋组合成水溶性及水不溶性葡聚糖量平均为(0.3011±0.0398)g/L和(0.3711±0.0372)g/L,高于无龋组的(0.2067±0.0265)g/L和(0.3489±0.0537)g/L,差异有统计学意义(P<0.05)。高龋及无龋组变链菌临床菌株生物膜状态下合成水不溶性葡聚糖量为(0.3656±0.0459)g/L高于水溶性葡聚糖量(0.2539±0.0586)g/L,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:维吾尔族不同龋敏感儿童变链菌临床分离株生物膜状态下合成胞外多糖能力有差异,推测与其致龋性差异有关。     

高龋及无龋者变形链球菌临床分离株致龋性研究Ⅰ对唾液包被羟磷灰石的粘附实验

目的：探讨来自不同龋敏感者的变形链球菌（血清型ｃ）临床分离株的粘附能力。方法：采用液体闪烁计测法测量＾３Ｈ－ＴＤＲ标记的变形链球菌临床分离株对唾液包被羟磷灰石（ＳＨＡ）的粘附。结果：同一个体所带不同基因型菌株对ＳＨＡ粘附量差异较大;高龋组个体定植的粘附能力强的菌株所占比较显著高于无龋组。结论：高龋组变形链球菌（血清型ｃ）临床菌株的高致龋力与其携带有粘附能力强的菌株密切相关。     

高龋及无龋儿童变形链球菌分离株的蔗糖粘附能力比较

目的:探讨高龋和无龋儿童变形链球菌(变链菌)临床分离株的蔗糖依赖性粘附能力。方法:选取本实验室从10例高龋儿童和10例无龋儿童(3￣5岁)牙菌斑内分离、鉴定所得的60株变链菌临床分离株进行研究。采用紫外分光光度计,检测来自高龋儿童(dmfs≥6)的39株和无龋儿童(dmfs=0)的21株变链菌在含糖培养基中对玻壁的粘附情况。采用SPSS12.0软件包进行单因素方差分析,比较高龋儿童和无龋儿童之间牙菌斑内变链菌分离株的玻壁粘附能力。结果:在含1%蔗糖的培养基中,高龋组变链菌分离株对玻壁的粘附比平均值为(55.49+26.16)%,无龋组变形链球菌分离株对玻壁的粘附比平均值为(27.01+18.39)%,2组间差异具有显著性,P<0.01。结论:在含蔗糖环境中,分离自高龋儿童牙菌斑的变链菌株对玻壁的粘附能力高于来自无龋儿童的变链菌分离株,提示变链菌临床分离株的粘附能力与其致龋力相关。     

新疆维吾尔族儿童乳牙龋与变形链球菌基因型相关性的初步研究

目的 探讨新疆维吾尔族不同龋敏感儿童口腔中变形链球菌幕冈多态性与乳才龋发生的关系,以期为新疆维吾尔族儿童乳牙龋危险性预测和防治提供依据.方法 选取新疆乌鲁小齐市3～5岁维吾尔族高龋(龋失补牙数≥5)和无龋(龋失补牙数=0)儿童各17名为研究对象,收集唾液样本,轻唾一杆菌肽琼脂培养基分离培养变形链球菌.典型菌落行革兰染色...     

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目的    探讨2岁儿童口腔菌斑中变形链球菌（变链菌）的检出率和蔗糖依赖性黏附能力。方法    选取广州市郊花都区2008年8—9月于入托前在妇幼保健院儿保科体检的2岁高龋（龋失补牙数≥ 5）及无龋（龋失补牙数 = 0）儿童各32名,形态学、生理生化学方法对其牙菌斑进行分离鉴定;采用分光光度比浊法,检测高龋儿童和无龋儿童变链菌临床分离株对玻壁的黏附情况。结果    64名儿童中变链菌的检出率为56.25%,高龋组儿童变链菌检出率（75.00%）显著高于无龋组儿童（37.50%）,差异有统计学意义（P < 0.05）。生化鉴定获得高龋儿童75株和无龋儿童34株变链菌临床分离株。在含1%蔗糖的培养基中,高龋组变链菌分离株对玻壁的黏附比为0.58 ± 0.15,略高于无龋组0.56 ± 0.13,但两组间差异无统计学意义。结论    2岁儿童变链菌检出率与高发龋相关,而未见其蔗糖依赖性黏附力对龋病高发有影响。     

Determination of mutacin activity and detection of mutA genes in Streptococcus mutans genotypes from caries-free and caries-active children

Relationships between genetic diversity, mutacin production and sensitivity to mutacins in Streptococcus mutans were evaluated in 19 clinical isolates from caries-free and caries-active children. Mutacin production was tested against 30 indicator strains; results showed significant variations in the inhibitory spectra of the clinical isolates. There was no association between the inhibitory spectrum of the infecting strain and the caries experience or the level of mutans streptococci infection of the host. Homology to the mutA gene coding for mutacin II was detected in one clinical isolate; none of the clinical isolates showed homology to the mutA genes coding for mutacins I or III. Genotyping by random amplified polymorphic DNA (RAPD) reactions grouped the isolates into three clusters, but no correlation was found between any of the clusters and mutacin activity, caries experience or level of mutans streptococci in the host.