13α-雌甾-4-烯-3,17-二酮的17位衍生物及其13β差向异构体的合成及与孕酮受体相对亲合力的测定

从13α-醋酸去氢表雄酮经7步反应得到13α-雌甾-4-烯-3,17-二酮,随后在丁基锂中进行17-位加成得到其17位衍生物,同时还合成了这些化合物的13β差向异构体以比较其在各方面的差异,并以放射受体分析法测定了这些化合物与孕酮受体的相对亲合力。     

重组人白细胞介素-13对造血细胞白细胞介素-13受体α1表达的调控

目的 探讨白细胞介素-13受体α1(interleukine-13 receptor α1,IL-13,Rα1)在造血细胞的表达及其在重组人白细胞介素-13(recombmant human ineterleukine-13,rhIL-13)作用下的表达变化.方法 细胞培养, 提取细胞总RNA, 用RT-PCR及图象分析法检测Dami细胞白细胞介素-13受体ɑ1mRNA表达的水平.结果 Dami细胞均表达白细胞介素-13受体α1;rhIL-13作用Dami细胞4h后,白细胞介素-13受体α1 mRNA表达降低12h后,IL-13Rα1 mRNA表达恢复.结论 ①Dami细胞表达IL-13Rα1.②rhIL-13短暂下调Dami细胞IL-13Rα1的表达.     

IL-13受体在白血病Dami细胞中的表达及IL-13对其表达的影响

目的 研究巨核细胞白血病Dami细胞是否表达IL-13受体α1和IL-4受体α以及IL-13对其表达的影响.方法 无血清培养Dami细胞,提取Dami细胞总RNA,反转录,形成第1条cDNA链,PCR扩增,琼脂糖凝胶电泳检测,Quantity One软件分析电泳条带光密度,数据进行统计学处理.结果 Dami细胞表达IL一13 Rα1mRNA.4h IL-13组Dami细胞IL-13Rα.1mRNA的表达明显低于血清组、混合组和空白对照组(P<0.05).12h IL-13组IL-13Rα1mRNA表达与血清组、混合组和空白对照组IL-13Rα1mRNA表达无明显区别(P>0.05).Dami细胞表达IL-4RαmRNA,且不受IL-13的影响.结论 Dami细胞表达IL-13 Rα1 mRNA,IL-13短暂下调Dami细胞IL-13 Rα1 mRNA表达.     

17β-羟基-7α-甲基-4-雌烯-3-酮衍生物的生物活性研究

通过研究17β-羟基-7α-甲基-4-雌烯-3-酮(Ⅱ)的一系列衍生物的孕酮受体亲和力及人蜕膜细胞抑制活性和大鼠抗着床活性,结果表明,4,17β-二羟基-7α-甲基-4-雌烯-3-酮(Ⅲ)的活性均属最佳,其孕酮受体结合率为R 5020的80.64％,抗着床100％有效剂量为0.02mg/kg。其它生物活性实验表明,在6mg/kg剂量下,Ⅲ对大鼠的抗早孕有效率达到100％;在小鼠子宫增重实验中,Ⅲ的雌激素活性约为雌二醇的四分之一。     

13-取代小檗碱衍生物的合成及其抗肿瘤活性研究

目的通过在小檗碱的13位上引入不同取代基,探讨13-取代小檗碱衍生物的体外抗肿瘤活性构效关系,并对其抗肿瘤作用机制开展初步研究。方法以小檗碱为起始原料,13-烷基小檗碱（3a-3j）可经选择性还原后与脂肪醛反应而制备;13-取代苄基小檗碱（3k-3n）可经碱性条件下丙酮加成后与取代溴苄反应而制备。采用磺酰罗丹明B（SRB）法和流式细胞仪分别检测化合物的肿瘤细胞活性及周期的影响。结果设计合成了14个目标化合物,其中7个为全新化合物,其结构经1H-NMR和高分辨质谱确证。所有目标物的抗肿瘤活性均强于小檗碱,其中3h对人肝癌HepG2细胞和白血病细胞HL60的IC50分别达到了0.08μg/mL和0.06μg/mL。初步构效关系研究表明：13位烷基取代衍生物活性明显优于13位苄基取代衍生物;13位烷基链长度适中时活性最好。初步作用机制显示：3h可将肿瘤细胞周期阻滞于G2/M期,使细胞增殖受阻,达到抗肿瘤效果。结论 13-取代小檗碱具有发展成为一类新型抗肿瘤药物的潜力。     

紫杉醇C_(13)边链的合成

目的：合成紫杉醇C13边链。方法：反式肉桂酸（1）经单过氧化硫酸氢钾复盐氧化，得到消旋环氧酸（2），化合物2经K-α-苯乙胺拆分、碱化制得钾盐（4），4与叠氮钠的反应产物经酸化得到叠氮酸（5），化合物5用4mol／L的HCL／MeOH溶液酯化得到叠氮酸甲酯（6），化合物6在含水（15％）四氢呋喃中经Zn／NH4Cl还原、苯甲酰化得到2S-羟基-3S-N-（苯甲酰基）-苯丙酸甲酯（8），化合物8在吡啶中与甲磺酰氯反应即得紫杉醇C13侧链（9）。结果：首次以反式肉桂酸（1）为原料制备了紫杉醇C13边链（4S-反式）-4，5-二氢-2，4-二苯基-1，3-噁唑-5-甲酸甲酯（9）。结论：此方法原料易得，反应每件温和并且成本低，易于生产化生产．     

金龟子绿僵菌对甾族化合物的11α-羟化

研究筛选金龟子绿缰菌及其的11α-羟化作用与生物氧化条件之间关系和底物分次添加方式影响。生物转化条件如培养基组成、菌龄、接种量等因素。在培养结果时取样作pH、菌丝量和转化率检测。结果：当底物浓度为0．2％转化率为36％。结论：金龟子绿僵菌作为19-去甲基-13-乙基-雄甾-4-烯-3，17-双酮（FA）的11α-羟化是很有效的。     

白细胞介素-13功能研究进展

白细胞介素－13主要由活化的Th2(CD4^ )细胞分泌，诱导单核巨噬细胞分化及延长寿命；促进MHC－Ⅱ，CD23表达；抑制炎性和趋化因子产生；诱导B细胞增殖，活化，刺激IgM,IgG的产生和重链的转换；使血管细胞粘附分子－1表达；抑制人类免疫缺陷病毒（HIV）复制；间接诱导巨噬细胞和NK细胞参与抗肿瘤作用。在变态反应性疾病和哮喘中引起呼吸道高反应性，嗜酸粒细胞性炎症，粘液分泌过多，基膜纤维化等，其受体是与IL－4Rα形成功能复合体而发挥作用。IL－13信号转导途径除了JAK／STAT6以外，尚有IRS－1,Fes，磷酸激酶，BCL－6／SOCS等途径。     

1-芳基-3-烷基-1,4-二氢-4-取代-5H-1,2,4-三唑啉酮-5衍生物的合成及生物活性

为寻找新的高效非肽类血管紧张素Ⅱ（AⅡ）受体括抗剂,以SC-51316为先导,运用生物电子等排和拼合原理,设计并合成了9个1-芳基-3-烷基-1,4-二氢-4-取代-5H-1,2,4-三唑啉酮-5衍生物。所有目的化合物均未见文献报道,其结构经IR、1HNMR和MS鉴定。初步体外药理实验表明：在抑制AⅡ诱发的兔主动脉收缩反应模型中,化合物17h具有较好的活性。     

17β-雌二醇对雌性去卵巢大鼠缺血性脑损伤的神经保护作用及机制

目的 探讨17β-雌二醇对雌性去卵巢大鼠缺血性脑损伤的神经保护作用及其可能机制.方法♀ SD大鼠60只随机分为17β-雌二醇处理组(A组)、假手术组(B组)和对照组(C组),采用线栓法制作大鼠大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,缺血24 h后观察脑梗死体积、神经功能缺损程度和雌激素受体α(ERα)的表达.结果缺血24 h后,A组较C组脑梗死体积小、神经功能缺损程度轻,ERα表达明显增多.结论 17β-雌二醇对雌性去卵巢大鼠缺血性脑损伤具有明显的神经保护作用;ERα可能直接介导了17β-雌二醇的神经保护作用.     

盐酸13-己基小檗碱对T淋巴细胞活化和角质形成细胞细胞因子产生的影响

目的研究盐酸13-己基小檗碱对T淋巴细胞活化、角质形成细胞增殖、以及白介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-1(IL-1)产生的影响,探索该化合物针对炎症性皮肤病的作用靶点。方法体外培养小鼠脾脏T淋巴细胞、永生化角质形成细胞株HaCaT细胞以及小鼠腹腔巨噬细胞,分别用伴刀豆球蛋白A(ConA)、重组人肿瘤坏死因子-α(rhTNF-α)、312nm窄波UVB和脂多糖(LPS)诱导,采用MTT法检测盐酸13-己基小檗碱对小鼠T淋巴细胞活化和HaCaT细胞增殖的影响,用ELISA法检测其对HaCaT细胞IL-8和TNF-α,以及小鼠腹腔巨噬细胞IL-1β产生的影响。结果盐酸13-己基小檗碱明显抑制小鼠T淋巴细胞活化(IC50≈0.123μg/ml);在0.05～0.78μg/ml范围对HaCaT细胞增殖无明显的直接影响(抑制率<15%),能剂量依赖性抑制25ng/ml rhTNF-α诱导的HaCaT细胞IL-8产生(IC50=0.13μg/ml)和124.2 mJ/cm2窄波UVB照射引起的HaCaT细胞TNF-α产生(IC50=0.21μg/ml);在0.01μg/ml浓度时抑制10μg/ml LPS诱导的小鼠腹腔巨噬细胞IL-1β产生(抑制率达50%)。结论盐酸13-己基小檗碱能抑制T淋巴细胞活化及炎症性细胞因子IL-8、TNF-α和IL-1β产生,提示以上作用可能是该化合物针对炎症性皮肤病的作用靶点。     

多光子解离CHClF_2富集~(13)C

用无氦TEA CO_2激光器(9μm带谱线)辐照F-22,选择性激发~(13)CHClF_2,使其达到离解,得到~(13)C的富集。测得选择系数α的峰值位置在1047cm~(-1),相对于~(13)CHClF_2的线性吸收峰位置红移了36cm~(-1),α随激光能量密度、F-22气压的增高而降低。     

包甲素类似物的1H-NMR和13C-NMR谱

目的通过对包甲素类似物NMR谱的分析,考察其结构差别对共振信号化学位移的影响.方法以6β-乙酰氧基-3α-羟基莨菪烷为原料,利用酰化和磺酰化反应合成包甲素类似物,测试各化合物的1H-NMR谱和个别化合物的13C-NMR谱.结果合成了8个化合物,并对各化合物的NMR谱信号进行详细归属.结论取代基的诱导效应、共轭效应、磁各向异性效应和立体效应对莨菪烷化合物杂环上氢核和碳核的化学位移有较大的影响.     

一例17-α羟化酶缺陷症患者临床和CYP17A1基因突变分析

目的 分析1例17-α羟化酶缺陷症患者的临床和CYP17A1基因突变特点.方法 以1例17-α羟化酶缺陷症患者为研究对象,观察其临床表现和辅助检查结果,并对患者及其父母进行CYP17A1基因检测.结果 患者就诊时血压高于正常值,第二性征发育不良;血钾低于正常值.CYP17A1基因检测显示,患者第8外显子9个碱基（TCGACTCTT）缺失,导致第487～489位氨基酸缺失,其母为该部位氨基酸杂合缺失,其父未有异常发现.结论 高血压伴低血钾患者如同时存在性发育不良,应考虑17-α羟化酶缺陷症的可能,CYP17A1基因检测有助于早期诊断.     

17α-羟化酶缺陷症的早期诊断与干预

目的 分析17α-羟化酶缺陷症患者的发病特点,探讨其早期诊断与干预措施.方法 选择2000-2012年我院收治的13例17α-羟化酶缺陷症患者的临床诊治资料,分析其特点.结果 13例患者均为女性,初诊年龄4~29岁.均存在低血钾、高血压,9例＞13岁者均缺乏青春期性腺发育;2例于4岁时明确诊断,其余患者平均诊断年龄为16.3岁.以发现血钾异常为起点,17α-羟化酶缺陷症的确诊时间为(58.2±38.5)个月.结论 该病发生率较低,临床表现复杂,漏诊率高,对高血压、低血钾的患者,特别是伴有性腺发育异常者,应注意鉴别17α-羟化酶缺陷症,力争早期干预.     

血清白细胞介素-13、17与气道高反应性的关系

目的研究白细胞介素(IL)-13、IL-17与气道高反应性(AHR)的关系。方法对20例非急性发作期和缓解期哮喘患者、14例稳定期COPD患者、21例非急性发作期慢性支气管炎(CB)患者和10例正常参照者行气道激发试验。采用ELISA法测定四组受试者的血清IL-13和IL-17。结果伴有AHR的哮喘患者血清IL-13水平(53.62±8.85)pg/ml和COPD、CB患者血清IL-13水平(48.15±6.02)pg/ml均较正常人(39.99±5.95)pg/ml明显升高(P<0.05)。Spearman相关分析表明,IL-13与哮喘患者PC20FEV1呈负相关(r=-0.602,P<0.01),与COPD、CB患者PC20FEV1也呈负相关(r=-0.632,P<0.05)。哮喘患者血清IL-17水平(18.10±3.90)pg/ml较正常人(14.40±4.05)pg/ml显著升高(P<0.05);Spearman相关分析表明,IL-17与COPD、CB和哮喘患者PC20FEV1无显著相关性(P>0.05)。结论血清IL-13与哮喘、COPD、CB患者AHR的发生相关;而血清IL-17与AHR无明显相关性。     

番荔枝酰胺环状类似物的合成及抗氧化活性

目的设计合成一系列番荔枝酰胺环状类似物并考察其抗氧化活性.方法以对羟基苯乙酸为原料,经9步反应,得到一系列3-位取代的吲哚-2-酮类化合物,其结构经核磁共振氢谱和质谱确定.结果11个3-位取代的吲哚-2-酮类化合物中化合物9和13的抗氧化活性和阳性对照FLZ-52活性相当.结论以番荔枝酰胺环状类似物FLZ-52为先导物进行的环合结构改造有一定效果,值得进一步研究.     

AGEs对兔软骨细胞TNF-α和MMP-13表达的影响及其机制研究

目的:探讨晚期糖基化终末产物(AGEs)对兔软骨细胞肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和基质金属蛋白酶-13(MMP-13)的影响及可能机制。方法:不同浓度的AGEs与兔软骨细胞共孵育48h后采用RT-PCR方法检测TNF-α和MMP-13的mRNA表达量,试剂盒方法检测过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)水平,荧光探针法检测细胞内活性氧(ROS)水平。AGEs与兔软骨细胞共孵育的同时,分别加入AGEs受体的抗体(Anti-RAGE)及核因子-κB(NF-κB)的特异性阻断剂PDTC处理,同法检测TNF-α和MMP-13的mRNA表达量。结果:与AGEs共孵育48h后兔软骨细胞TNF-α及MMP-13表达明显增多,CAT、SOD活性降低,MDA、ROS含量增多,均呈浓度依赖性;分别加入Anti-RAGE及PDTC处理后软骨细胞TNF-α及MMP-13表达明显低于AGEs单独处理组(P<0.01),与正常对照组差异无统计学意义(P>0.05)。结论:AGEs能诱导软骨细胞TNF-α和MMP-13表达增多,其机制与激活RAGE,诱导ROS生成增多,激活NF-κB信号通路有关。     

雄甾-4-烯-3,17-双酮转化菌株的筛选及转化产物的鉴定

目的甾体化合物雄甾-4-烯-3,17-双酮（andros-t 4-ene-3,17-dione,4AD）是制造甾体激素类药物的关键药物中间体之一,开展4AD的微生物转化,以探索具有新活性的4AD衍生物的合成。方法本研究通过摇瓶培养转化,TLC分析,筛选能够对4AD进行有效转化的菌株,利用硅胶柱层析对转化产物进行分离纯化,通过TOF-MS、IR、1 HNMR、13 C NMR光谱数据分析,同时与相关文献报道结合,确定转化产物的结构。结果本研究筛选到了一株能够对4AD进行有效转化的菌株,初步确定其为茄病镰孢菌（Fusarium solani）,得到2种转化产物：具有较大生物活性潜力的17-hydroxy-pregen-1,4-dien-3-one和重要的药物中间体雄二烯二酮（ADD）。结论本研究筛选得到的茄病镰孢菌能够对4AD进行有效转化,对于利用微生物转化的方法生产17位羟基化甾体物质和ADD具有较大的应用潜力。     

IL-13Rα_2在人脑胶质瘤分子靶向及免疫治疗中的应用

脑胶质瘤是脑内最具破坏的肿瘤之一,患者预后不容乐观。近年来随着分子生物学及免疫学的不断发展,脑胶质瘤的分子靶向及免疫治疗不断得到重视。白细胞介素13α2受体(IL-13Rα2)作为人脑胶质瘤的特异表达肽,其作为特异靶点分子靶向治疗,同时可与树突状细胞联合免疫治疗胶质瘤已不断得到应用。现就IL-13Rα2在人脑胶质瘤分子靶向及免疫治疗中的应用予以综述。