赖氨大黄酸通过激活JNK诱导宫颈癌HeLa细胞凋亡

目的研究赖氨大黄酸(RHL)对人宫颈癌HeLa细胞增殖、凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法用MTT法检测细胞增殖;用流式细胞仪检测细胞凋亡,用Western blot检测凋亡相关蛋白及JNK蛋白与蛋白磷酸化水平。结果 RHL能有效抑制宫颈癌HeLa细胞增殖,并能诱导其凋亡,随药物浓度的增加,细胞凋亡率也逐渐升高;RHL能够激活caspase-3、caspase-7和PARP,并激活磷酸化的JNK表达,磷酸化的JNK表达增加在RHL的诱导凋亡中起主要作用。结论 RHL通过激活JNK-caspase-PARP信号通路抑制HeLa细胞增殖,并诱导其凋亡,赖氨大黄酸解决了大黄酸不溶于水的问题,有望成为临床肿瘤辅助化疗药物。     

沉默Smo基因对人宫颈癌HeLa细胞活力及凋亡的影响

目的:使用RNA干扰技术沉默Smoothened(Smo)基因,探讨其对宫颈癌He La细胞活力和凋亡的影响。方法:采用Smo shRNA转染宫颈癌He La细胞;采用RT-PCR和Western blot技术检测各组He La细胞Smo和转录因子Gli1的mRNA和蛋白表达;采用MTT比色法测定沉默Smo后细胞生长的情况;流式细胞术检测Smo shRNA对细胞周期和凋亡的影响。结果:与对照组比较,Smo shRNA转染细胞72 h后,Smo和Gli1的mRNA和蛋白表达水平均明显降低(P0.05)。Smo基因沉默后,He La细胞的活力明显降低,细胞明显阻滞于G0/G1期,细胞凋亡率显著升高。结论:沉默Smo基因可有效抑制人宫颈癌He La细胞生长,并诱导其凋亡。     

靶向hTERT RNA干涉促进人宫颈癌HeLa细胞凋亡的研究

目的：利用RNA干涉技术抑制肿瘤细胞端粒酶表达，探讨其对肿瘤细胞凋亡的诱导作用。方法：将成功构建的针对hTERT的siRNA(small interferencing RNA)表达载体转染HeLa细胞，通过透射电镜、免疫印迹和流式细胞术(FCM)等方法检测人宫颈癌HeLa细胞的凋亡情况。结果：构建的siRNA表达载体可以诱导HeLa细胞发生凋亡。结论：针对人端粒酶逆转录酶的siRNA表达载体稳定转染HeLa细胞，可诱导HeLa细胞发生凋亡。     

白藜芦醇诱导人宫颈癌细胞凋亡的作用

目的观察白藜芦醇对人宫颈癌Hela细胞凋亡的影响。方法采用TUNEL法检测不同浓度的白藜芦醇诱导体外培养的Hela细胞凋亡情况。结果浓度大于50μmol／L的白藜芦醇处理Hela细胞后,细胞凋亡特征明显可见,并呈时间和剂量依赖关系。结论白藜芦醇对人宫颈癌Hela细胞有明显的促凋亡作用。     

Roscovitine促进增殖期PC12细胞凋亡

目的探讨细胞周期蛋白依赖激酶（CDK）抑制剂Roscovitine导致增殖期PC12细胞死亡的性质和CDK调控的细胞周期与细胞凋亡的关系。方法利用培养的增殖期PC12细胞模型，进行MTT细胞活性检测、Hoechst 33342胞核荧光染色和倒置显微镜观察。结果分别用5、10、20、50和100μmol／L浓度的Roscovitine溶液处理细胞12h，细胞存活率呈剂量依赖性下降；另外，50μmol／L浓度的Roscovitine分别处理细胞4、12、24和48h，细胞死亡也呈现时间依赖性。细胞死亡的形态学表现是细胞皱缩、核染色体固缩和核碎片形成。结论Roscotivine导致的增殖期PC12细胞凋亡与CDK调控的细胞周期蛋白有关。     

小蘖碱诱导宫颈癌HeLa细胞系凋亡机制

目的探讨小蘖碱(BR)诱导宫颈癌(He La)细胞系凋亡机制。方法用不同浓度BR和时间处理He La细胞,CCK-8法检测He La细胞增殖效率;流式细胞术(FCM)检测He La细胞周期;Real-time PCR检测细胞内STAT3、CYCLIN B1、CDC2和C-MYC基因的表达量;Wstern blot检测He La细胞内STAT3、CYCLIN B1、CDC2和C-MYC蛋白表达量。结果随着BR浓度增加及作用时间延长,He La细胞的增殖率逐渐降低;BR组中G2/M期He La细胞比值显著高于组(P0.05);He La细胞经BR处理后STAT3、CYCLIN B1、CDC2和C-MYC基因表达量和蛋白表达量均显著低于对照组(P0.05)。结论 BR可通过作用于STAT3信号通路来阻滞He La细胞周期,从而诱导细胞凋亡。     

阿司匹林增强TRAIL诱导的HepG-2细胞凋亡

目的:研究阿司匹林能否增强肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)诱导的HepG-2细胞凋亡,并初步探讨其作用机制。方法:HepG-2细胞放入含15%胎牛血清的DMEM培养液中培养,改良苯酚-品红染色观察细胞形态变化,MTT法检测细胞增殖程度,TUNEL法检测细胞凋亡指数,RT-PCR检测细胞中survivinmRNA的表达水平,FCM检测细胞凋亡率和细胞周期。结果:不同浓度的阿司匹林联合TRAIL实验组细胞增殖抑制率明显高于空白对照组及TRAIL和阿司匹林单独用药组,且细胞凋亡指数也明显提高,凋亡率与阿司匹林的浓度呈现剂量依赖关系,联合用药组凋亡相关基因survivin的表达与空白对照组和TRAIL和阿司匹林单用组相比明显下调。结论:阿司匹林能够增强TRAIL诱导的HepG-2细胞凋亡,其作用机制可能与survivin基因的表达下调有关。     

Caspase 3在PAB诱导宫颈癌HeLa细胞凋亡中的作用

目的研究Caspase 3在土荆皮酸诱导宫颈癌HeLa细胞凋亡中的作用。方法使用不同浓度的PAB处理He-La细胞，应用流式细胞仪检测细胞周期的分布，采用Western Blot方法检测HeLa细胞经PAB作用前后Bcl-2和Caspase3蛋白的表达变化。结果经PAB作用后，HeLa细胞出现剂量依赖性G2／M期阻滞伴随细胞凋亡，随药物浓度增加Bel-2蛋白表达逐渐下降，Caspase 3蛋白表达上调，Caspase 3活化百分率增高。结论PAB能通过调节Bcl-2蛋白的表达激活Caspase 3，从而诱导HeLa细胞发生凋亡。     

Nutlins类似物NL-86诱导HeLa细胞凋亡的研究

目的 观察新型Nutlins类似物NL-86在体外诱导宫颈癌HeLa细胞凋亡的作用,并初步探讨其作用的分子机制.方法 采用MTT法检测NL-86化合物对HeLa细胞增殖的影响;用 FITC-Annexin V及碘化丙锭(PI)双染法,通过流式细胞仪(FCM)检测NL-86诱导HeLa细胞凋亡情况;用Western 印迹...     

天花粉蛋白抑制HeLa细胞生长及诱导细胞凋亡之机制探讨

目的研究天花粉蛋白（TCS）对人宫颈癌HeLa细胞生长抑制作用及其机制,探讨HeLa细胞凋亡发生的分子机制.方法采用CCK-8的方法,检测TCS对HeLa细胞的抑制作用;流式细胞仪检测TCS对细胞周期的影响;电子显微镜和Annexin法观察TCS对HeLa细胞诱导凋亡的作用;应用Western blotting观察HeLa细胞caspase-3酶原的变化;用caspases活性检测试剂盒,检测caspase-3,8,9的活性.结果1.TCS对HeLa细胞的生长具有明显的抑制作用;2.TCS可以将HeLa细胞阻滞于S期;3.TCS诱导HeLa细胞发生凋亡,HeLa细胞出现典型的凋亡特征--染色质浓缩和凋亡小体,且凋亡率具有时间依赖性;4.caspase-3酶原表达的降低呈现时间和浓度依赖性,而caspase-3活性随时间依赖性的增高,提示在TCS诱导HeLa细胞凋亡的过程中caspase-3被激活;5.caspase-8,9的活性增高,有时间依赖性,且具有时间顺序.100 mg/L TCS处理24h后,caspase-8早于caspase-3被激活,提示活化的caspase-8可能对caspase-3起到激活作用.结论TCS对HeLa细胞的抑制作用是通过将HeLa细胞阻滞于S期和诱导细胞凋亡来实现的.caspase-3的激活是介导TCS诱导HeLa细胞发生凋亡的通路,同时,活化的caspase-8,9可能参与了caspase-3的激活和凋亡的诱导.     

Myricetin and methyl eugenol combination enhances the anticancer activity,cell cycle arrest and apoptosis induction of cis-platin against HeLa cervical cancer cell lines

Drug combination therapies are common practice in the treatment of cancer. In this study, we evaluated the anticancer effects of myricetin (MYR), methyl eugenol (MEG) and cisplatin (CP) both separately as well as in combination against cervical cancer (HeLa) cells. To demonstrate whether MYR and MEG enhance the anticancer activity of CP against cervical cancer cells, we treated HeLa cells with MYR and MEG alone or in combination with cisplatin and evaluated cell growth and apoptosis using MTT (3 (4, 5 dimethyl thiazol 2yl) 2, 5 diphenyltetrazolium bromide) assay, LDH release assay, flow cytometry and fluorescence microscopy. The results revealed that, as compared to single drug treatment, the combination of MYR or MEG with CP resulted in greater effect in inhibiting cancer cell growth and inducing apoptosis. Cell apoptosis induction, Caspase-3 activity, cell cycle arrest and mitochondrial membrane potential loss were systematically studied to reveal the mechanisms of synergy between MYR, MEG and CP. Combination of MYR or MEG with CP resulted in more potent apoptosis induction as revealed by fluorescence microscopy using Hoechst 33258 and AO-ETBR staining. The combination treatment also increased the number of cells in G0/G1 phase dramatically as compared to single drug treatment. Mitochondrial membrane potential loss (ΛΨm) as well as Caspase-3 activity was much higher in combination treatment as compared to single drug treatment. Findings of this investigation suggest that MYR and MEG combined with cisplatin is a potential clinical chemotherapeutic approach in human cervical cancer.     

干扰ADAM17抑制人宫颈癌细胞系HeLa细胞增殖

目的 探讨干扰去整合素-金属蛋白酶17(ADAM17)对人宫颈癌细胞系HeLa细胞增殖的影响,并对其作用机制进行初步探索.方法 在HeLa细胞中转染ADAM17干扰质粒,荧光定量PCR和Western blot验证转染效率;CCK-8法检测细胞增殖,划痕实验和Transwell小室法检测细胞迁移及侵袭;Western ...     

不同浓度柚皮苷对人宫颈癌HeLa 细胞体外增殖及其COX-2 表达影响

目的:研究柚皮苷对人宫颈癌Hela 细胞体外增殖的影响及相关机制研究。方法:用不同浓度的柚皮苷处理体外培养人宫颈癌Hela 细胞,采用MTT 法检测处理24、48、72 h 后Hela 细胞的增殖情况,流式细胞仪测定细胞凋亡率,Hoechst 33258 染色观察细胞凋亡情况,同时Western blot 观察环氧合酶-2(COX-2)表达的相对量。结果:与对照组相比,柚皮苷低剂量组细胞抑制率无显著差异(P>0.05),柚皮苷中剂量组和高剂量组细胞抑制率显著增高(P<0.05);柚皮苷低剂量组细胞凋亡率无显著差异(P>0.05),柚皮苷中剂量组和高剂量组细胞凋亡率显著增高(P<0.05),同时柚皮苷中剂量和高剂量组可观察到明显的细胞凋亡现象;柚皮苷低剂量组细胞COX-2 表达的相对量无显著差异(P>0.05),柚皮苷中剂量组和高剂量组细胞COX-2 表达的相对量显著降低(P<0.郾05);结论:柚皮苷能抑制宫颈癌细胞生长,且随其浓度增加抑制作用增强,其机制可能与其抑制COX-2 蛋白表达,促进细胞凋亡相关。     

敲除EZH2抑制人宫颈癌细胞系迁移和侵袭

目的 研究zeste基因同源蛋白2(EZH2)对人宫颈癌细胞系迁移和侵袭的影响,并初步探讨其作用机制.方法 利用CRISPR/Cas9敲除人宫颈癌HeLa和人子宫颈鳞癌SiHa细胞系中EZH2的表达.划痕实验检测细胞迁移;Transwell小室法检测细胞体外迁移和侵袭;实时荧光定量PCR检测STAT3 mRNA水平;W...     

Comprehensive molecular cytogenetic characterization of cervical cancer cell lines

We applied a combination of molecular cytogenetic methods, including comparative genomic hybridization (CGH), spectral karyotyping (SKY), and fluorescence in situ hybridization (FISH), to characterize the genetic aberrations in eight widely used cervical cancer (CC) cell lines. CGH identified the most frequent chromosomal losses including 2q, 3p, 4q, 6q, 8p, 9p, 10p, 13q, and 18q; gains including 3q, 5p, 5q, 8q, 9q, 11q, 14q, 16q, 17q, and 20q; and high-level chromosomal amplification at 3q21, 7p11, 8q23-q24, 10q21, 11q13, 16q23-q24, 20q11.2, and 20q13. Several recurrent structural chromosomal rearrangements, including der(5)t(5;8)(p13;q23) and i(5)(p10); deletions affecting chromosome bands 5p11, 5q11, and 11q23; and breakpoint clusters at 2q31, 3p10, 3q25, 5p13, 5q11, 7q11.2, 7q22, 8p11.2, 8q11.2, 10p11.2, 11p11.2, 14q10, 15q10, 18q21, and 22q11.2 were identified by SKY. We detected integration of HPV16 sequences by FISH on the derivative chromosomes involving bands 18p10 and 18p11 in cell line C-4I, 2p16, 5q21, 5q23, 6q, 8q24, 10, 11p11, 15q, and 18p11 in Ca Ski, and normal chromosome 17 at 17p13 in ME-180. FISH analysis was also used further to determine the copy number changes of PIKA3CA and MYC. This comprehensive cytogenetic characterization of eight CC cell lines enhances their utility in experimental studies aimed at gene discovery and functional analysis.     

Cytotoxic effects of Cuscuta extract on human cancer cell lines

Cancer is a growing health problem around the world. Although there are different therapeutic methods for cancer such as lymphoma and melanoma cancers, none of them have possessed complete efficacy up to now. Therefore, discovery of novel anti-cancer drugs is important. In this study, the cytotoxic effect of Cuscuta extract, a traditional Iranian medicinal herb, on melanoma cell line (SK-MEL-3) and human Burkitt lymphoma (Raji) is evaluated. MTT assay was performed for cytotoxic effect of Cuscuta extract. The most cytotoxic effects of Cuscuta extract on SK-MEL-3 and Raji cell lines were 80 and 81%, respectively, compared to a control group. According to our data, Raji cells are more sensitive to Cuscuta than the SK-MEL-3 cells. Cuscuta extract seems to be a good candidate as an anti-cancer agent against lymphoma and melanoma cancers. To clarify the effective molecules and their mechanisms, further studies are undertaken in our laboratory on animal models and humans.     

A metastasis map of human cancer cell lines

Here we introduce an in vivo barcoding strategy that is capable of determining the metastatic potential of human cancer cell lines in mouse xenografts at scale.We validated the robustness,scalability and reproducibility of the method and applied it to 500 cell lines1,2 spanning 21 types of solid tumour.We created a first-generation metastasis map(MetMap)that reveals organ-specific patterns of metastasis,enabling these patterns to be associated with clinical and genomic features.We demonstrate the utility of MetMap by investigating the molecular basis of breast cancers capable of metastasizing to the brain-a principal cause of death in patients with this type of cancer.     

卡莫氟对人子宫颈癌细胞系HeLa增殖及侵袭的影响及机制

目的 探讨卡莫氟（carmofur）对人子宫颈癌细胞增殖、侵袭的影响及其机制。 方法 将卡莫氟配置成不同浓度（0.4、0.8和1.2 mg/L）作用宫颈癌HeLa细胞,并设置对照组。使用细胞计数试剂盒8（CCK-8）法检测细胞情况,用Transwell实验检测细胞侵袭情况,通过Western blotting和Real-time PCR法检测基质金属蛋白酶7（MMP-7）、β-连环蛋白（β-catenin）和连环蛋白P120（P120 ctn）和mRNA的表达水平。 结果 与对照组相比,药物处理组随卡莫氟浓度的上升,细胞增殖能力降低,卡莫氟作用24 h即可抑制细胞增殖,且随着作用时间的延长,细胞增殖速率显著降低（均P<0.05）。与对照组相比,卡莫氟组可抑制HeLa细胞的侵袭（P<0.05）。与对照组相比,卡莫氟组可降低MMP-7、β-catenin和P120ctn蛋白水平和mRNA水平（P<0.05）。结论 卡莫氟能抑制HeLa细胞的增殖、侵袭,其机制可能与下调MMP-7、β-catenin和P120ctn表达水平有关。     

黄岑苷对宫颈癌细胞株HeLa的放射增敏作用

 目的: 探讨黄岑苷对宫颈癌细胞株HeLa的放射增敏作用及机制。方法: MTT法检测不同浓度黄岑苷对HeLa细胞的活力抑制能力,并计算IC₅₀筛选实验药物浓度;克隆形成实验检测放射组与联合组在不同照射剂量下细胞的放射增敏作用;流式细胞术检测单药组、放射组与联合组的细胞周期变化;Western blot检测不同组细胞中Akt、p-Akt、Bad和p-Bad的蛋白水平。结果: 黄岑苷呈浓度依赖性抑制HeLa细胞的活力,IC₅₀为43.65 mg/L,采用20% IC₅₀浓度8 mg/L进行放射增敏实验。克隆形成实验结果显示8 mg/L黄岑苷联合放射治疗可使生存曲线左移,D0、Dq值显著小于放射组(P<0.05)。流式细胞仪检测结果显示黄岑苷阻滞HeLa细胞于G₂/M期。联合组细胞中p-Akt和p-Bad的蛋白水平均显著高于其它各组(P<0.05)。结论: 黄岑苷对HeLa细胞具有放射增敏作用,其机制可能与其阻滞细胞于G₂/M期和活化PI3K/Akt信号通路有关。