虎杖对肺纤维化大鼠肺组织中SOD、GSH、MDA的影响

目的：通过观察虎杖干预后肺纤维化大鼠肺组织中超氧化物歧化酶（SOD）活性及谷胱甘肽（GSH）、丙二醛（MDA）含量的影响,探讨虎杖防治肺纤维化的作用机制。方法健康雄性SD大鼠120只,随机分为5组：模型组30只,气管内一次性注入博莱霉素50.5mg/100g制作肺纤维化大鼠模型,当日予0.9%氯化钠溶液5ml/100g灌胃;预防组30只,于造模前2d开始予虎杖5ml/100g灌胃;肺泡炎组20只,于造模后第7天开始虎杖灌胃;肺纤维化组10只,于造模后第28天开始虎杖灌胃;对照组30只,于造模当日开始0.9%氯化钠溶液5ml/100g灌胃。各组大鼠灌胃均1次/d。5组大鼠分别于第3、7、14、28、42或56天分阶段处死5只,取肺组织制成匀浆,测定SOD活性及GSH、MDA的含量。结果模型组第3、7、14天肺组织中SOD活性及GSH含量低于对照组（均P＜0.05）,预防组上述指标较模型组升高（P＜0.05或0.01）,肺泡炎组、肺纤维化组与模型组的差异均无统计学意义（均P＞0.05）。模型组第7、14天肺组织中MDA含量明显高于对照组和预防组（均P＜0.05）。结论虎杖能通过增强肺组织局部抗氧化能力,减轻博莱霉素诱导的肺泡炎和肺纤维化程度,可能是治疗肺纤维化的有效药物。     

肺宁对大鼠博莱霉素肺损伤早期治疗作用的机制研究

目的:观察中药肺宁对博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化早期的防治作用. 方法:以博莱霉素气管内注入建立肺纤维化模型,次日始分别给与中药肺宁和强的松灌胃治疗,于给药第7, 14日处死动物,右肺组织行病理组织学检查,左肺组织匀浆进行超氧化物歧化酶(SOD)活力、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、肿瘤坏死因子(TNF-α)含量检测. 结果:与博莱霉素对照组相比,肺宁不同剂量组肺泡炎的程度均明显减轻;7 d时肺宁各组肺组织匀浆MDA, TNF-α含量降低(P＜0.05),肺宁高剂量组(4 g/kg)、强的松组肺组织匀浆GSH含量升高(P＜0.05);14 d时肺宁各剂量组、强的松组肺组织匀浆SOD活力、GSH含量均增高(P＜0.05),MDA含量降低(P＜0.05),肺宁中剂量组(2 g/kg)、高剂量组(4 g/kg)TNF-α含量降低(P＜0.05). 结论:肺宁抗肺纤维化的作用机制与提高SOD的活性,降低脂质过氧化物(LPO)损伤有关,通过提高清除氧自由基能力,改善氧化/抗氧化平衡,对大鼠肺泡炎具有有效的治疗作用.     

双氢杨梅树皮素对博来霉素诱导小鼠肺纤维化的影响

目的通过体内模型研究双氢杨梅树皮素的抗肺纤维化作用,为寻找抗肺纤维化药物奠定基础。方法将60只BALB/c小鼠按体重随机数表法随机分为6组,每组10只,即生理盐水空白对照组、博来霉素模型组(3 mg/kg)、地塞米松组(2.5 mg/kg),以及双氢杨梅树皮素不同剂量干预组(200、100、50 mg/kg)。除空白对照组外,各组以博来霉素为诱导剂诱导BALB/c小鼠肺纤维化模型,采用无创气管内滴注法肺部滴注博来霉素溶液(3 mg/kg)分别于第1 d和第14 d各滴注1次,实验周期为28 d。各干预组在模型构建期间分别使用地塞米松(2.5 mg/kg)与双氢杨梅树皮素(200、100、50 mg/kg)进行干预,空白对照组与模型组同法给予生理盐水。28 d后分别测定小鼠各项指标,肺功能测定仪测定呼吸功能(吸气阻力、肺动态顺应性、每分钟最大通气量),计算肺脏器系数,测定肺组织羟脯氨酸水平,并进行肺组织病理学检查。结果模型组小鼠呼吸功能较空白对照组显著下降(P0.05),药物高剂量干预能显著改善呼吸功能(P0.05);模型组小鼠肺脏器系数显著增加(P0.05),其余各组肺脏器系数均显著下降(P0.05);模型组肺部羟脯氨酸水平显著升高(P0.05),而药物干预组羟脯氨酸含量显著降低(P0.05);模型组小鼠肺泡壁显著增厚,胶原纤维显著增加,肺泡炎症与纤维化评分明显升高(P0.05),而药物干预组症状减轻。结论双氢杨梅树皮素能抵抗由博来霉素诱导的小鼠肺纤维化,改善呼吸功能衰退的症状,减少胶原蛋白的形成,产生抗小鼠肺纤维化的作用。     

博莱霉素诱导大鼠肺纤维化过程中羟脯氨酸及氧化应激指标的变化

目的:观察博莱霉素诱导的肺纤维化模型中组织羟脯氨酸(Hyp)及各氧化应激指标的变化,探讨氧化-抗氧化失衡在该病发生发展中的作用. 方法:二级SD大鼠40只,随机分为模型组与对照组,每组20只. 气管内注入博莱霉素A5(BLMA5)溶液,建立肺纤维化模型. 分别于3,7,14和28 d每组随机抽出5只,处死后取肺脏行HE, Masson染色鉴定模型并测定Hyp含量. 同时分别以八木国夫荧光法测定肺组织脂质过氧化产物(MDA);改良盐酸羟胺法测定组织总超氧化物歧化酶(SOD)的酶活力;改良荧光法测定还原型谷胱甘肽(GSH)含量;荧光法测定氧化型谷胱甘肽(GSSG)含量. 并计算GSH/GSSG值. 结果:成功建立博莱霉素诱导的肺纤维化模型. 各指标在不同时间点出现变化. 模型组Hyp含量于7 d时高于对照组,28 d达到最高(P<0.05). 模型组MDA含量随时间延长而增加,其中14 d时显著高于对照组(P<0.05),但在28 d时有下降. SOD活力在7 d, 14 d均降低,28 d时上升. 模型组GSH/GSSG在3 d, 7 d显著低于对照组(P<0.05),14 d, 28 d又回升. 结论:Hyp可作为博莱霉素诱导的肺纤维化的一个指标. 博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化伴有氧化损伤,且在不同阶段细胞内、外的氧化-抗氧化出现失衡.     

益肺抗纤方对博莱霉素诱导大鼠肺纤维化的防治作用

目的 :观察益肺抗纤方抗肺纤维化的作用。方法 :实验用雄性Wistar大鼠分为 4组 ,对照组、模型组、益肺抗纤方组、地塞米松组 ;对照组气管内注入生理盐水 ,其余 3组气管内注入博莱霉素制作大鼠肺纤维化模型。造模后 ,益肺抗纤方组给益肺抗纤方 10ml/kg灌胃 ,地塞米松组给地塞米松 1.5mg/kg腹腔注射 ,模型组和对照组均给生理盐水灌胃 ,均给药 1次 /d。观察各组大鼠肺部病理变化 ,测定各组第 7d、2 8d肺组织超氧化物歧化酶(SOD)、脂质过氧化物 (LPO)和羟脯氨酸 (HP)的含量。结果 :气管内注入博莱霉素第 2 8d时 ,模型组多呈 3级肺纤维化和 1级肺泡炎改变 ;益肺抗纤方组多呈 1级纤维化改变 ,肺泡炎不明显 ;地塞米松组多呈 1级纤维化和 1～ 3级肺泡炎改变 ;对照组呈正常肺结构。第 2 8d时 ,模型组和地塞米松组肺组织SOD活性均较对照组明显下降 (P <0 .0 1和P <0 .0 5 ) ,地塞米松组较模型组SOD活性下降更明显 (P <0 .0 5 ) ;益肺抗纤方组与对照组之间SOD活性无明显差别。对照组、模型组、益肺抗纤方组肺组织LPO含量明显低于地塞米松组 (P <0 .0 1) ;益肺抗纤方组与对照组和模型组之间无明显差别。结论 :益肺抗纤方可通过提高SOD活性 ,降低脂质过氧化 ,减轻氧自由基损伤 ,抑制胶原沉积 ,保护肺组织     

黄芪甲苷对肺纤维化小鼠α-SMA、Ⅰ型和Ⅲ型胶原表达影响

目的:观察黄芪甲苷对肺纤维小鼠肺组织α-平滑肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型和Ⅲ型胶原表达的影响,并初步探讨黄芪甲苷对小鼠肺纤维化抑制作用的机制。方法:通过于气管内滴注博来霉素(10 mL/kg)建立肺纤维化模型,空白组为正常饲养的小鼠,假手术组用生理盐水代替。造模后的C57bl/6小鼠随机分成空白组(正常饲养)、模型组(博来霉素造模+0.5%羧甲基纤维素钠溶液灌胃)、假手术组(生理盐水造模+0.5%羧甲基纤维素钠溶液灌胃)、黄芪甲苷组(博来霉素造模+黄芪甲苷灌胃)和阳性对照地塞米松组(博来霉素造模+地塞米松灌胃),分别于第14天和第28天处死小鼠后取肺组织,行HE染色和Masson染色,观察小鼠肺组织肺纤维化程度,碱性水解法检测小鼠肺组织内羟脯氨酸的含量,免疫组织化学染色法检测小鼠肺组织α-SMA的表达,免疫蛋白印记法检测小鼠肺组织α-SMA、COL1、COL3的表达。结果:与空白组、假手术组相比,模型组肺纤维化分级较高,肺组织炎症反应明显,羟脯氨酸含量明显升高(P0.05)。与模型组相比,黄芪甲苷组内的羟脯氨酸含量降低(P0.05),肺组织内α-SMA、COL1、COL3的表达减少(P0.05),地塞米松组的表达降低不明显(P0.05)。结论:黄芪甲苷对肺纤维化的干预作用明显,其机制可能与减少成纤维细胞的生成和抑制胶原蛋白的沉积有关。     

1,25-(OH)2D3治疗肺纤维化的动物实验研究

目的观察1,25-(OH)2D3对博来霉素诱导的小鼠肺纤维化模型的干预效果。方法将C57BL/6雄性小鼠110只分为对照组(n=30),模型组(n=40),干预组(n=40)。对模型组及干预组小鼠用博来霉素(3.5mg/kg)气管内滴入构建肺纤维化模型,对照组滴入等量生理盐水。干预组小鼠每日予罗盖全0.5μg/kg灌胃,对照组及模型组以等体积蓖麻油灌胃。在造模第7、14、28天分批处死各组一定数量小鼠,取右上肺组织行苏木精-伊红(HE)染色观察肺组织纤维化程度并评分,除此之外,在第28天增加检测肺组织羟脯氨酸含量。结果造模第7和14天,干预组与模型组肺纤维化评分无明显差别;第28天,干预组小鼠肺纤维化评分低于模型组(P<0.05),干预组小鼠肺组织羟脯氨酸含量低于模型组(P<0.05)。结论 1,25-(OH)2D3可减轻博来霉素诱导的小鼠肺纤维化程度。     

N-乙酰半胱氨酸对博来霉素诱导的大鼠肺纤维化的干预作用

目的探讨N-乙酰半胱氨酸（N acetylcysteine,NAC）对博来霉素诱导的大鼠肺纤维化的干预作用及可能的机制.方法 100只SD雄性大鼠随机分为健康对照组、肺纤维化模型组、地塞米松干预组和NAC干预组,每组25只.各组分别于第1,3,7,14,28 d各处死5只,收集肺组织作切片行HE和Masson染色判断肺组织肺泡炎和肺纤维化程度,行免疫组化测定肺组织转化生长因子β1（TGF-β1）,收集血清和支气管肺泡灌洗液行Elisa检测TGF-β1,收集肺组织检测羟脯氨酸含量.结果与模型组比较,两个干预组的肺泡炎及肺纤维化程度均明显减轻（P〈0.05）,肺组织TGF-β1的蛋白表达水平明显降低（P〈0.05）,血清和支气管肺泡灌洗液的TGF-β1的蛋白表达水平明显降低（P〈0.05）,其中NAC干预组较地塞米松干预组更为显著（P〈0.05）,与模型组比较,两个干预组的羟脯氨酸含量也明显降低（P〈0.05）,其中NAC干预组较地塞米松干预组更为显著（P〈0.05）.结论 NAC具有与地塞米松相似的较强的抗纤维化效应,机制可能为通过抑制细胞因子TGF-β1的表达来抑制肺纤维化.     

柴胡渗湿汤对肺纤维化大鼠肺组织TGF-β_1、NF-κB影响的研究

目的探讨柴胡渗湿汤对肺纤维化模型大鼠肺组织中转化生长因子-β1、核因子-κB表达的影响,揭示其治疗肺纤维化的可能作用机理。方法将90只雄性Wistar大鼠随机分成正常对照组、模型对照组、泼尼松组、柴胡渗湿汤组、柴胡渗湿汤+泼尼松组,每组18只。除正常对照组外,其余各组以支气管内注入博莱霉素的方法建立肺纤维化动物模型,于造模后第2天给予相应药物干预;于给药后14 d、28 d在光镜下观察部分大鼠肺组织的病理变化情况,并用免疫组化法检测大鼠肺组织中TGF-β1及NF-κB的表达。结果光镜下模型对照组较正常组肺组织炎症细胞浸润、结构破坏、肺纤维化明显,正常对照组大鼠肺组织TGF-β1和NF-κB的含量较模型对照组显著降低(P0.05),提示造模成功;分别与柴胡渗湿汤相比,模型对照组肺组织TGF-β1和NF-κB的含量显著增高(P0.05),泼尼松组两种指标的含量差异无统计学意义(P0.05),而柴胡渗湿汤+泼尼松组两种指标的含量显著降低(P0.05)。结论柴胡渗湿汤可能通过抑制肺纤维化大鼠肺组织中TGF-β1及NF-κB的表达,从而延缓大鼠肺纤维化的进展。     

γ干扰素对实验性肺纤维化大鼠肺泡炎和肺纤维化的影响

目的探讨γ干扰素(IFN-γ)在博莱霉素诱导的实验性大鼠肺纤维化治疗中的作用及其机制。方法雄性健康Wistar大鼠80只,随机分为正常对照组、实验模型组、氢化可的松组及IFN-γ组,在给予实验药物后第3、7、14及28 d,每组取5只大鼠麻醉后处死,左肺行支气管肺泡灌洗术收集支气管肺泡灌洗液(BALF),测定其IFN-γ及转化生长因子β1(TGF-β1)浓度;取右肺中叶行石蜡包埋,观察肺泡炎及肺纤维化程度,测定肺组织羟脯氨酸含量。结果BALF中IFN-γ浓度在实验模型组于第3和7 d明显增高(P均<0.05),在IFN-γ组第3、7、14及28 d均较实验模型组明显增高(P均<0.05),并于第3、7及14 d高于氢化可的松组(P均<0.05);BALF中TGF-β1浓度在实验模型组第3、71、4及28 d均较正常对照组明显增高(P均<0.001),在IFN-γ组于第3 d明显高于实验模型组,但于第71、4及28 d与实验模型组相似(P>0.05),于第3、7及14 d明显高于氢化可的松组(P均<0.01)。IFN-γ组肺泡炎、肺组织纤维化评分及羟脯氨酸含量均与实验模型组相近。结论早期应用IFN-γ肺组织IFN-γ含量增加,但并不能抑制肺组织TGF-β1和羟脯氨酸的产生,也不能预防和阻止实验性大鼠肺泡炎和肺纤维化的形成。     

当归补血汤总苷抗大鼠肺纤维化的实验研究

目的 观察当归补血汤总苷(TGDB)对平阳霉素致大鼠肺间质纤维化模型的保护作用,探讨TGDB抗肺纤维化形成的作用机制.方法 Wistar雄性大鼠105只随机分为对照组、模型组、醋酸泼尼松组、TGDB 13 mg/(kg·d)和39 mg/(kg·d)剂量组,于给药7、14、28 d各组分别处死7只大鼠,Masson染色观察肺组织病理学变化,测定7、14、28 d时大鼠血清中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和肺组织中羟脯氨酸(HYP)含量,以及28 d时血清TGF-β1的水平,肺组织TGF-β1 mRNA的表达情况.结果 TGDB能减轻大鼠肺纤维化程度,提高血清中GSH-Px和SOD含量,降低MDA含量和肺组织中HYP含量,降低血清TGF-β1水平,TGF-β1 mRNA的表达下降.结论 TGDB能调节肺纤维化大鼠体内自由基水平,减轻自由基对肺组织结构的氧化损伤,并能显著降低血清TGF-β1水平,减少TGF-β1 mRNA的表达,这可能是其防治肺纤维化的作用机制之一.     

还原型谷胱甘肽脂质体凝胶剂抗黄褐斑形成作用的研究

目的研究还原型谷胱甘肽(GSH)脂质体凝胶剂抗黄褐斑形成的作用。方法将56只小鼠随机分为空白组,模型组,静脉注射对照组,外用阳性药物组(壬二酸对照组),还原型GSH脂质体凝胶剂高、中、低剂量组(简称GSH低、中、高剂量组),除空白组外,其余组别采用中波紫外线照射法复制小鼠黄褐斑动物模型。造模后静脉注射对照组给予等剂量GSH生理盐水溶液,壬二酸对照组给予壬二酸2 ml/(d·只),GSH高、中、低剂量组分别给予不同浓度的还原型GSH脂质体凝胶剂,空白组和模型组不作治疗。治疗8周后进行取材,测定肝脏和受试皮肤中SOD、MDA含量情况。结果与空白组相比,模型组小鼠受试皮肤和肝脏中SOD活性降低,MDA含量明显升高,差异具有统计学意义(P0.05)。GSH高、中剂量组,壬二酸对照组与模型组相比,小鼠受试皮肤和肝脏中SOD活性升高,MDA含量明显下降,差异有统计学意义(P0.05)。结论还原型谷胱甘肽脂质体凝胶剂中、高剂量能够极显著地淡化小鼠背部灰褐色斑块,表明还原型谷胱甘肽脂质体凝胶剂的中、高剂量组具有显著的祛斑作用,且优于壬二酸祛斑效果,且相对静脉注射方法更方便。     

Th9细胞相关因子在肺纤维化大鼠中的作用

目的研究Th9细胞相关因子PU.1、干扰素调节因子4(IRF4)、白细胞介素4(IL-4)在肺纤维化大鼠中的作用。方法将90只SPF级SD大鼠分为健康对照组、肺纤维化组和地塞米松干预组,每组30只。每组分别在饲养第7 d、第14 d、第28 d各处死10只。气管内注射博来霉素制作肺纤维化模型。实时荧光PCR检测支气管肺泡灌洗液(BALF)PU.1、IRF4 mRNA的含量,ELISA法检测外周血IL-4含量。结果健康对照组大鼠在各时间点肺组织结构完整,无炎症反应和纤维化改变。肺纤维化组大鼠肺组织早期为肺泡炎表现,肺间质和肺泡腔内可见大量巨噬细胞等炎症细胞浸润;第14 d部分肺泡结构消失,炎症细胞浸润稍减少,肺泡间隔增宽,成纤维细胞增生;第28 d肺泡结构破坏,部分肺泡壁塌陷,肺泡间隔明显增宽,细胞外基质增生,肺组织呈广泛纤维化改变。地塞米松干预组肺泡结构存在,炎症细胞浸润、肺泡间隔增厚、肺纤维化程度明显轻于肺纤维化组。肺纤维化组各时间点BALF中PU.1 mRNA含量明显高于健康对照组。与肺纤维化组比较,地塞米松干预组PU.1 mRNA含量第14 d和第28 d明显减低,差异有统计学意义(P0.05)。肺纤维化组PU.1mRNA在第7 d表达增加,第14 d达到高峰,第28 d有所下降。肺纤维化组各时间点BALF中IRF4mRNA含量明显高于健康对照组,差异有统计学意义(P0.05)。与肺纤维化组比较,地塞米松干预组第28 d IRF4 mRNA含量明显减低,差异有统计学意义(P0.05)。肺纤维化组第14 d BALF中IRF4 mRNA含量与外周血IL-4含量呈正相关(r=0.044,P0.05)。结论 Th9细胞在致大鼠肺纤维化中起作用,该作用与转录因子PU.1和IRF4有关,IL-4可能通过激活IRF4调控Th9细胞。     

润肺治纤汤对实验性肺纤维化模型大鼠肺组织病理变化的影响

目的 探讨润肺治纤汤对实验性肺纤维化大鼠肺组织病理变化的影响.方法 54只Wistar大鼠均分为对照组、模型组、治疗组,14、28 d两个时段处死大鼠做肺系数测定和肺组织羟脯氨酸(HYP)含量检测,28 d肺组织苏木精-依红染色、Van Gieson胶原染色.结果 模型组肺系数和肺组织HYP含量较正常对照组显著增加(P<0.05),肺组织肺纤维化病理变化明显;28 d治疗组肺系数、HYP含量与模型组比较显著降低(P<0.05),肺组织肺纤维化病理变化程度轻于模型组.结论 润肺治纤汤具有减轻实验性肺纤维化大鼠肺组织纤维化的作用.     

氨溴索对实验性肺纤维化的干预作用

目的:探讨氨溴索对博莱霉素所致大鼠肺间质纤维化的干预作用及机制。方法:健康雌性 SD大鼠 45只,随机分为3组。治疗组:15只,气管内一次性注入博莱霉素5 mg·kg-1,当日予氨溴索20 mg·kg-1灌胃,每日一次,于第7,14和28 d各处死5只;模型组:15只,以生理盐水代替氨溴索灌胃,余同治疗组;对照组:15 只,大鼠气管内注入生理盐水0.2~0.3 ml,于第7,14和28 d各处死5只。各组动物处死后提取肺组织,作HE染色,进行病理分析,并测定肺匀浆中谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)和羟脯氨酸(HYP)的含量。结果:对照组无明显病理改变;治疗组7 d时肺泡炎较模型组减轻,28 d时纤维化病变较模型组好转。模型组 7 d肺匀浆中 GSH含量和14 d SOD含量低于对照组(P<0.01),治疗组上述指标较模型组升高(P<0.05, P<0.01)。模型组 28 d时肺匀浆HYP含量均明显高于对照组和治疗组(P<0.05)。结论: 氨溴索能通过增强肺局部抗氧化能力,减轻博莱霉素诱导的肺泡炎和肺纤维化程度,是治疗肺纤维化的可能途径之一。     

L-精氨酸治疗光气中毒大鼠肺损伤的实验研究

目的 探讨L-精氨酸对光气中毒急性肺损伤的治疗作用.方法 将48只SD大鼠按随机数字表法分为正常对照组、L-精氨酸对照组、光气中毒组、L-精氨酸低剂量治疗组、L-精氨酸中剂量治疗组、L-精氨酸高剂量治疗组、地塞米松治疗组、L-精氨酸+地塞米松治疗组,每组6只,除正常对照组和L-精氨酸对照组外,其余组动物暴露于0.45 g固体光气发生舱室内,染毒5 min,于染毒后立即腹腔注射L-精氨酸、地塞米松及生理盐水.于染毒后2、4、6h用小动物肺功能仪测定各组动物的肺功能指标;染毒6h后处死动物,测定肺组织湿干质量比,血浆还原型谷胱甘肽(reduced glutathione,GSH)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量,超氧化物岐化酶(superoxide dismutase,SOD)及诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)活力;光学显微镜下观察肺组织病理学变化.结果 与正常对照组比较,光气中毒组肺功能指标发生显著变化,肺湿干质量比、血浆MDA含量及iNOS活力显著升高,血浆GSH含量和SOD活力显著下降(P ＜0.05,P＜0.01).与光气中毒组比较,L-精氨酸各剂量治疗组对光气中毒大鼠肺功能指标有一定改善作用,但差异无统计学意义(P＞0.05),肺湿干质量比、血浆MDA含量及iNOS活力显著降低,血浆GSH含量和SOD活力显著升高(P ＜0.05,P＜0.01);地塞米松治疗组血浆MDA含量显著降低,SOD活力显著升高(P＜0.05),但肺湿干质量比、血浆GSH含量及iNOS活力无显著变化(P＞0.05).结论 L-精氨酸对光气致肺损伤有保护作用,其机制可能与清除自由基抗氧化及抑制iNOS有关.     

TGF-β/Smad与Wnt/β-catenin在博莱霉素致大鼠肺纤维化中的表达及相互作用

目的观察TGF-β/Smad和Wnt/β-catenin通路相关基因在肺纤维化大鼠模型肺组织中的表达,探讨两条通路对肺纤维化的影响及其相互作用。方法取Wistar大鼠36只,随机分为正常对照组和肺纤维化模型组,每组18只。采用气管内注入博来霉素(BLM)建立Wistar大鼠肺纤维化模型,每组分别于第14、21和28天处死大鼠各6只;取肺组织称重,测定肺组织中HYP、IL-1β水平,观察肺组织Col-I、IL-1β、TGF-β1、Smad3、α-SMA、Wnt1、β-catenin、LEF-1 mRNA的表达,并进行HE染色和Masson胶原染色。结果 (1)与正常对照组比,造模后14~28 d大鼠肺指数均明显升高(P0.01);肺组织HE染色呈现明显的肺纤维化病理改变,Masson染色结果可见造模后14~28 d肺间质蓝色胶原呈渐进性增加。(2)造模后第14天,肺组织IL-1β含量、IL-1βmRNA相对含量均显著升高(P0.01),随后逐渐降低,至造模后第28天IL-1β表达量接近正常水平(P0.05)。(3)造模后14~28d大鼠肺组织HYP含量、Col-I mRNA相对表达量均明显升高(P0.01)。(4)与正常组相比,模型组中TGFβ1、Smad3、α-SMA、Wnt1、β-Catenin、LEF-1 mRNA表达显著增加(P0.01),且TGFβ1、Smad3 mRNA分别与Wnt1、LEF-1、β-catenin mRNA的表达呈显著正相关。结论 TGF-β/Smad和Wnt/β-catenin通路相关基因在博来霉素致大鼠肺纤维化中表达上调,两条通路对肺纤维化可能有促进作用且它们间可能存在一定联系。     

丙戊酸钠对博莱霉素致肺纤维化大鼠TNF-α表达的影响

目的 探讨组蛋白脱乙酰基转移酶抑制剂丙戊酸钠在博莱霉素诱导肺纤维化大鼠的TNF-α表达的调节.方法 54只雄性SD大鼠随机分为控制对照组(CG)、肺纤维化模型组(MG)、丙戊酸钠干预组(VG).MG组、VG组予以博莱霉素溶液按5mg/kg气管内注入建立大鼠肺纤维化模型,CG组予以等体积0.9% 氯化钠溶液注射.各组于造模后第7、14、28天分3批处死,观察肺组织大体及HE和Masson染色,Szapiel评分,进行大鼠肺组织羟脯氨酸(HYP)及肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)免疫组化检测.结果 与CG组相比,MG组14d和28d肺组织TNF-α及HYP含量明显增高(均P＜0.01),VG组Szapiel评分、HYP受到明显抑制,TNF-α表达下降.结论 丙戊酸钠能抑制TNF-α表达,抑制BLM诱导的大鼠肺纤维化.     

柴胡皂甙d对博来霉素诱导肺纤维化小鼠的治疗作用及机制研究

目的 探讨柴胡皂甙d(SSd)抗小鼠肺纤维化的作用及其机制.方法 180只小鼠按随机数字表法分5组.其中4组为博来霉素(BLM)诱导肺纤维化模型组(气管内注射BLM 5 mg/kg),分为单纯造模组(BLM组)、地塞米松(DXM)干预组(DXM组)、SSd干预组(SSd组)和SSd+DXM联合干预组(SSd+DXM组),每组40只;造模后1 h,后3组小鼠分别腹腔注射DXM 5 mg/kg(0.1 ml)、SSd 1.8 mg/kg(0.18 ml)、SSd+DXM(0.1ml+0.18ml),BLM组腹腔注射0.28 ml生理盐水,每天1次,连续28 d.另1组为正常对照组(NC组,20只),同时间按同样方法注入0.28 ml生理盐水.给药第3、7、14、28天每组各处死5只小鼠,取肺组织行常规组织病理学检查,检测肺组织中羟基脯氨酸(HYP)、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量;取外周血检测SOD和MDA含量.造模的4组每组各20只小鼠用于观察自然生存状况.结果 SSd可明显提高肺纤维化小鼠存活率(SSd组和SSd+DXM组存活率均为80.0%,BLM组为50.0%,P<0.05),并显著减轻小鼠肺泡炎和肺纤维化程度.DXM组、SSd组和DXM+SSd组肺组织HYP含量给药第14、28天明显低于BLM组(P<0.05),血清及肺组织MDA含量给药第3、7、14天明显低于BLM组(P<0.05,P<0.01),血清SOD含量给药第3、7、14天、肺组织SOD含量给药第3、7天明显高于BLM组(P<0.05,P<0.01).结论 SSd有很明显的抗肺纤维化作用,其作用机制可能与抗脂质过氧化作用有关.     

P物质在实验性大鼠肺纤维化中的变化及地塞米松的作用

目的 肺纤维化(pulmonary fibrosis, PF)的发病机制尚未完全阐明.神经介质在介导组织炎症并形成纤维化的过程中所起的作用日益受到重视.文中探讨P物质(substance P , SP)在博莱霉素诱导的实验性大鼠PF形成过程中肺组织内的变化及地塞米松对SP的作用. 方法 实验分为博莱霉素(bleomycin, BLM)组、地塞米松组和正常对照组.BLM组和地塞米松组气管内注射BLM(5mg/kg)复制大鼠PF模型,正常对照组以等量等渗盐水替代.气管内注药次日起地塞米松组腹腔注射地塞米松(1mg/kg),隔日1次,BLM组和正常对照组以等量等渗盐水替代.造模后分别于第7、14、28d处死大鼠,测定肺组织内SP和羟脯氨酸(hydroxyproline ,HYP)含量,并观察病理组织学改变. 结果 BLM组大鼠各个时间点肺组织SP水平显著高于正常对照组(P＜0.01),HYP于第28天明显高于正常对照组(P＜0.01),病理表现为PF改变.地塞米松组各时间点肺组织SP水平低于BLM组相应时间点.第7天地塞米松组SP水平与BLM组相比较有统计学意义显著性差异(P＜0.01).地塞米松组各个时间点SP水平与正常对照组相比无显著性差异. 结论 SP可能参与BLM所致PF的形成,地塞米松具有抑制PF形成的作用.