冬虫夏草对COPD模型大鼠肺功能及Th1/Th2的影响

目的：探讨冬虫夏草对大鼠慢性阻塞性肺病（COPD）模型的肺功能及Th1／Th2的影响。方法：42只大鼠随机分为模型、治疗和对照三组，各14只。前两组采用SD大鼠反复被动吸烟和气道内注入脂多糖的方法建立COPD模型。8周后每组随机取7只做肺功能测定，观察肺组织病理变化。每组剩下的7只行支气管肺泡灌洗。取支气管肺泡灌洗液（BALF）做细胞计数及分类；用ELISA法测定BALF中的IL-2、IL-4及Th1／Th2的水平。结果：光镜下，对照组大鼠肺组织结构正常：模型组大鼠的肺组织支气管壁柱状纤毛倒伏、粘连，杯状细胞增生，支气管壁及周围组织有大量炎症细胞浸润，部分肺泡间隔破坏，肺泡孔扩大；治疗组大鼠的肺组织支气管及其周围组织损伤明显减轻。与对照组比较，模型组大鼠BALF中的炎症细胞数明显升高，气道阻力增加，肺顺应性下降：BALF中IL-2水平和IL-2／IL-4比值显著降低；与模型组比较，治疗组BALF中的炎症细胞数明显降低，气道阻力下降，而肺顺应性上升，BALF中IL-2／IL-4比值升高。结论：冬虫夏草有抑制COPD气道炎症反应、改善肺功能及纠正气道Th1／Th2比例失衡的作用。     

阿托伐他汀减轻博莱霉素诱导的肺纤维化及其机制

目的 研究阿托伐他汀对博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化的调节作用及其机制.方法 雄性Wistar大鼠32只随机分为阿托伐他汀干预组(A组)、博来霉素组(B组)及正常对照组(C组)大鼠气管内灌注博来霉素5 mg/kg建立肺纤维化模型,A组在博莱霉素后给予阿托伐他汀灌胃10 mg/(kg·d),分别于第7、28天处死一半,病理学观察肺泡灸及肺纤维化程度,生化法测定肺组织羟脯氨酸含量,ELISA法检测肺泡灌洗中IFN-y、IL-4的浓度,比较组间变化.结果 与C组相比,B组大鼠出现明显的肺泡炎及纤维化,而阿托伐他汀可显著减轻肺纤维化程度.BALF中,B组IL-4升高而IFN-y降低,阿托伐他汀干预可部分逆转这种变化.结论 阿托伐他汀可能通过调节Th1/Th2平衡而减轻博菜霉素诱导的大鼠肺纤维化.     

Th1/Th2型细胞因子在小鼠肺纤维化发病中的作用

目的:了解Th1/Th2型细胞因子在小鼠肺纤维化中的作用。方法:雄性昆明小鼠40只,随机分为3组。对照组8只小鼠气管内注入0.9%氯化钠注射液,第7天将小鼠一次性处死;模型组16只小鼠气管内注入博来霉素;干预组16只在造模次日给予γ干扰素腹腔注射,卡托普利胃管内注入,在注药后第3、7、14、28天各处死4只,分别取支气管肺泡灌洗液(BALF),ELISA法检测BALF中白介素(IL)-4、IL-12水平;取对照组和模型组小鼠右肺标本,病理半定量分析肺泡炎程度。结果:与对照组比较,模型组BALF中IL-12水平显著降低(P<0.01),IL-4水平明显升高(P<0.01),呈Th2相对优势表达;与模型组比较,干预组BALF中IL-12水平升高(P<0.01),IL-4水平降低(P<0.01),部分恢复Th1/Th2的动态平衡;与模型组比较,干预组小鼠第3、7天肺泡炎程度较相应的模型组差异均无统计学意义(P>0.05),第28天肺泡炎明显减轻(P<0.01)。结论:Th1/Th2型细胞因子平衡失调是博来霉素所致肺纤维化的发病机制之一;γ干扰素联合卡托普利可以部分恢复Th1/Th2型细胞因子平衡失调,减轻后期肺泡炎和肺纤维化的形成。     

STAT1反义寡核苷酸对肺纤维化大鼠肺组织TGF-β1和Smad4表达的影响

目的：观察信号转导子与转录活化子1（STAT1）反义寡核苷酸雾化吸入对博来霉素致肺纤维化大鼠肺组织TGF-β1和Smad4表达的影响。方法：将45只雌性Wistar大鼠按随机数字表法分为对照组、模型组和干预组,每组15只,对照组大鼠气管内灌注生理盐水、模型组和干预组大鼠气管内灌注博来霉素。于气管内灌注药物后0、2、4、6天对照组和模型组大鼠给予雾化吸入生理盐水,而干预组大鼠则雾化吸入STAT1反义寡核苷酸/DOTAP复合物。分别于气管内灌注药物后第7天、第14天和第28天每组各处死5只大鼠。肺组织HE染色和Masson染色观察肺泡炎和肺纤维化改变,收集支气管肺泡灌洗液（BALF）行细胞总分数测定、ELISA测定BALF中TGF-β1的浓度、免疫组织化学SP法测定肺组织中TGF-β1、Smad4表达。结果：（1）干预组大鼠各时间点的肺泡炎和肺纤维化程度均较模型组明显减轻。（2）干预组大鼠各时间点的细胞总数和中性粒细胞比例较模型组减少,巨噬细胞比例增加。（3）模型组大鼠BALF的TGF-1水平在第7d表达明显升高,14d、28d仍持续高于对照组。干预组大鼠各时间点BALF中TGF-β1含量均低于模型组。（4）模型组和干预组大鼠肺组织中TGF-β1、Smad4表达水平均明显高于对照组,模型组和干预组大鼠第7天TGF-β1、Smad4的表达值明显高于对照组,随后下降,第28天时仍高于对照组;干预组大鼠各时间点肺组织TGF-β1、Smad4表达水平均低于模型组。（5）干预组大鼠肺组织中羟脯氨酸含量明显低于模型组。（6）BALF中TGF-β1蛋白浓度、肺组织中TGF-β1蛋白表达、Smad4蛋白表达均与肺组织匀浆中羟脯氨酸含量呈正相关。结论：STAT1反义寡核苷酸雾化吸入能减轻博来霉素致肺纤维化大鼠肺泡炎和肺纤维化,其机制可能与抑制TGFβ-Smads信号转导通路中的TGF-β1和Smad4有关。     

白细胞介素-12通过调整Th1／Th2细胞因子平衡抑制肺纤维化

目的:研究白细胞介素-12(Interleukin-12,IL-12)对博莱霉素(Bleomycin,BLM)致大鼠肺纤维化的治疗作用及机制.方法:采用完全随机设计将雌性Wistar大鼠60只随机分为4组,即BLM模型组(1组)、IL-12干预组(2组)、BSA治疗对照组(3组)及生理盐水(NS)对照组(4组).第1,2,3组经气管注入BLM制备肺纤维化(PF)大鼠模型,第4组给予同等体积的NS.制模后第1-12日腹腔注射干预药物.第2组为IL-12溶液,第3组为牛血清白蛋白(Bovine Serum Albu-min,BSA)溶液,制模后第7,14,28日每组各处死5只大鼠,观察其病理改变、肺脏重量、肺组织匀浆中羟脯氨酸(Hydroxyproline,Hyp)水平及肺系数的变化,对病理切片进行肺泡炎和纤维化评分和灰度百分比分析.测定支气管肺泡灌洗液(Bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中自细胞介素-4(In-terleukin-4,IL4)、γ-干扰素(Interferon-gamma,INF-γ)水平,计算IL-4/INF-γ比值.结果:(1)与第4组比较,第1组出现明显肺泡炎及纤维化,肺脏重量、肺系数、肺组织匀浆中Hyp含量增加,肺泡炎及纤维化评分增高,BALF中IL-4增加、IL-4/INF-γ比值增高,差异有统计学意义(均P<0.05);灰度分析示7,14 d深染区百分比增加(P<0.01),7 d时浅染区百分比增加(P<0.05),但是BALF中INF-γ减少(P<0.05);(2)第3组各个指标同第1组比较差异无统计学意义;(3)第2组与第1,3组比较肺泡炎及纤维化程度均减轻,7,14 d时的肺泡炎评分、深染区百分比以及28 d时肺纤维化评分、浅染区百分比减少,肺脏重量(7 d时)、肺系数、Hyp含量,BALF中IL-4含量减少,IL-4/INF-γ比值减低,差异有统计学意义(均P<0.05),但是INF-γ含量增加(P<0.01).结论:IL-12能通过调整Th1/Th2型细胞因子的平衡而对BLM所致大鼠肺纤维化发挥抗肺纤维化作用.     

氧化苦参碱对肺纤维化大鼠肺内Th1/Th2平衡的影响

目的：观察博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化肺内Th1/Th2状态,以及氧化苦参碱（OMT）对肺纤维化大鼠的干预作用。方法：气管内注射博来霉素制作大鼠肺纤维化模型。将72只雄性SD大鼠分组为正常对照组、模型组、氧化苦参碱治疗组。治疗组于造模后第2天起予腹腔注射氧化苦参碱注射液,直至处死。每组在造模后第3、7、14、28天随机处死6只,观察肺组织病理变化,计算机图形自动分析系统（C IAS）评估肺纤维化程度;检测肺组织羟脯氨酸（HYP）含量及肺组织匀浆γ-干扰素（IFN-γ）及白介素-4（IL-4）。结果：与正常组比较,模型组表现为明显肺泡炎,炎性细胞浸润、严重肺纤维化。治疗组与模型组比较,肺泡炎和肺间质的纤维胶原组织增生均减轻（P〈0.05）。模型组第14、28天肺HYP含量高于同期正常组（P〈0.05）;治疗组第28天肺HYP含量明显低于同期模型组（P〈0.05）。与正常组比较,模型组IFN-γ均降低（P〈0.05）,但治疗组各时间点IFN-γ水平较模型组升高（P〈0.05）,且与正常组比较无统计学差异（P〉0.05）。正常组、治疗组和模型组各时间点IL-4含量均无统计学差异（P〉0.05）。结论：博莱霉素肺纤维化大鼠体内存在Th1反应不足现象,氧化苦参碱能减轻博莱霉素导致的大鼠肺纤维化程度,其可能与纠正肺纤维化大鼠Th1/Th2的失衡有关。     

屋尘螨诱导气道上皮TLR4表达和影响T淋巴细胞分化在哮喘气道炎症中的作用

目的研究屋尘螨（HDM）对于气道上皮Toll样受体4（TLR4）表达及T淋巴细胞分化的影响,以进一步探讨其在哮喘小鼠气道炎症中作用。方法雌性BALB/c小鼠30只随机分为OVA哮喘模型组（OVA组）、HDM组和生理盐水对照组（对照组）。OVA组用卵白蛋白（OVA）致敏与激发建立小鼠哮喘模型,HDM组给予HDM提取液替代OVA致敏与激发,对照组用生理盐水替代OVA。观察小鼠气道及肺组织病理炎症浸润情况,支气管肺泡灌洗液（BALF）中细胞总数及细胞分类计数。ELISA检测小鼠BALF上清中IL-4、IL-5、IL-13、IFN-γ和IL-17的含量。实时荧光定量PCR法测定气道上皮TLR4 mRNA的表达,免疫印迹法测定气道上皮TLR4蛋白的表达。流式细胞技术检测小鼠外周血Th1、Th2及Th17淋巴细胞占CD4＋T淋巴细胞百分率情况。结果 OVA组支气管黏膜下水肿,黏液腺增生,以嗜酸粒细胞为主的炎症细胞浸润;HDM组出现肺泡腔及间质充血,中性粒细胞等炎症细胞浸润;对照组小鼠气道上皮无增厚,无炎症细胞浸润,肺泡壁完整。与OVA组比较,HDM组BALF细胞总数及分类计数除嗜酸粒细胞无显著差异外（P〉0.05）,其余均显著升高（P〈0.05）;HDM组BALF上清中IL-4、IL-5、IL-13及IL-17水平较OVA组明显增高（P〈0.05）,IFN-γ的表达无显著差异（P〉0.05）;HDM组气道上皮TLR4 mRNA及TLR4蛋白的表达明显增高（P〈0.05）,OVA组与对照组差异无统计学意义（P〉0.05）。与OVA组比较,HDM组外周血Th2、Th17细胞显著增高（P〈0.05）,而Th1细胞无明显变化（P〉0.05）。结论 HDM诱导气道上皮TLR4表达增高,使Th2与Th17淋巴细胞活化,气道内炎症细胞浸润,可能在哮喘气道炎症中起重要作用。     

喘消雾化液对博莱霉素诱导大鼠肺纤维化模型IL-8、TNF-α水平的影响

目的:研究喘消雾化液(CXW)对博莱霉素(BLM)致大鼠肺纤维化模型血清及支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平的影响。方法:将实验大鼠随机分为5组,即生理盐水(NS)组、模型组(BLM组)、CXW干预组(CXWⅠ、Ⅱ、Ⅲ组)。分别于造模完成后第1、14、28天每组各处死10只大鼠,采用放射免疫法分别测定血清及BALF中IL-8、TNF-α水平。结果:BLM组的肺组织炎症反应较明显;BLM组及CXW各组的肺泡壁厚度均明显大于NS组(P<0.05);第14天BLM组肺羟脯氨酸(HYP)含量明显高于NS组(P<0.05);各时间段各组间血清中IL-8、TNF-α水平比较差异均无统计学意义(P>0.05);与NS组比较,BLM组BALF中IL-8、TNF-α水平第1、14天均明显升高(P<0.05);与BLM组比较,CXWⅠ、Ⅱ组BALF中IL-8、TNF-α水平在第1、14天均明显下降(P<0.05);第28天各组间比较差异均无统计学意义(P>0.05);CXWⅢ组与BLM组比较,BALF中IL-8、TNF-α水平差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:CXW能降低BLM致大鼠肺纤维化模型早期BALF中IL-8、TNF-α水平,可能通过下调上述细胞因子水平而发挥抗肺纤维化作用。     

氨茶碱对平阳霉素致大鼠肺纤维化的干预作用

目的:探讨氨茶碱对平阳霉素诱发的大鼠肺纤维化的干预作用及机制.方法:48只Wistar大鼠随机分为对照组、模型组和氨茶碱组,每组16只.后2组气管内滴入平阳霉素(5 mg·kg-1)制备肺纤维化模型,滴入前1d分别经腹腔注入生理盐水和氨茶碱溶液(60 mg·kg-1),对照组仅给予生理盐水;气管内滴药后第7 d、28 d分2批处理动物,收集血浆、支气管肺泡灌洗液(BALF)和肺组织标本.肺组织病理切片行HE和Masson染色,观察肺泡炎和肺纤维化程度;光镜下计数BALF中炎症细胞的数量;根据血浆与BALF上清中总蛋白的含量计算肺通透系数.采用放免法测定BALF中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平和血浆中环腺嘌呤单核苷酸(cAMP)浓度,比色法测定肺匀浆中丙二醛(MDA)和羟脯氨酸(HYP)水平.结果:第7 d,模型组肺泡炎明显,氨茶碱组病变较轻微;模型组BALF中炎症细胞总数、肺通透系数均高于对照组和氨茶碱组(P＜0.01);模型组BALF中TNF-α活性和肺匀浆中MDA和HYP水平均高于对照组,氨茶碱组以上各指标均较模型组降低(P＜0.05或0.01).第28 d,模型组出现肺纤维化和蜂窝肺,氨茶碱组病变明显减轻.模型组肺匀浆HYP水平明显高于氨茶碱组;但氨茶碱组血浆中cAMP浓度不论第7 d、28 d均高于模型组.结论:氨茶碱对平阳霉素诱发的肺纤维化有阻断作用,其机制可能与增加cAMP从而缓解肺泡炎有关.     

白细胞介素13可能通过转化生长因子β1途径致肺纤维化

目的探讨白细胞介素13(IL-13)在急性肺损伤/肺纤维化发病过程中的作用,并试图阐明IL-13可能通过转化生长因子(TGF)β1途径致肺纤维化.方法选择健康雄性Wister大鼠,经气管一次性灌注博来霉素(BLM)建立急性肺损伤/肺间质纤维化模型.对照组气管内灌注无菌生理盐水.分别于给药后第1、3、7、14、28天处死动物.右肺行支气管肺泡灌洗(BAL),留取支气管肺泡灌洗液(BALF),计数BALF细胞总数,并用HE染色方法计数细胞分数.用免疫组织化学技术,在显微镜下计数BALF中IL-13和TGF β1免疫阳性细胞百分数.右肺组织匀浆后测羟脯氨酸(HYP)含量.结果肺组织HE染色显示BLM第7天肺泡腔内有大量炎性细胞浸润,第28天时肺泡结构破坏,出现斑片状纤维组织灶.BLM第14天时HYP含量较盐水组显著增加,第28天时达最高值.IL-13、TGFβ1在BALF中的巨噬细胞(AM)、嗜酸细胞及淋巴细胞上均有表达,在博莱霉素组表达增强.其中BLM第7天时IL-13、TGF β1表达阳性的AM百分数最高,而且两者阳性细胞百分数呈正相关(r=0.86,P＜0.05).结论IL-13与肺纤维化关系密切,IL-13在急性肺损伤期主要来源于AM.IL-13可能通过TGF β1途径发挥致肺纤维化作用.     

还原型谷胱甘肽对大鼠肺纤维化的干预作用

目的探讨不同浓度的还原型谷胱甘肽(GSH)对大鼠肺纤维化的抗氧化干预作用并与传统激素进行比较。方法将健康的SD大鼠108只随机分为对照组、模型组、地塞米松干预组、小剂量GSH干预组、中剂量GSH干预组和大剂量GSH干预组,每组18只。除对照组外,其余组大鼠均经气管内注入博来霉素制造肺纤维化模型,根据组别予以相应的地塞米松或不同剂量GSH干预。各组分别于造模后第7、14、28 d随机抽取6只处死。通过HE染色、Masson胶原染色分析肺泡炎和肺纤维化程度,并通过比色法检测各组测肺组织匀浆GSH、羟脯氨酸、超氧化物歧化酶(SOD)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)浓度。结果在造模第7 d和14 d时,模型组和干预组大鼠肺泡炎程度较对照组显著增加(P0.05),第28 d时干预组肺纤维化程度均较模型组显著减轻(P0.05)。第7 d时模型组肺组织GSH含量显著低于对照组(P0.05),干预组较模型组显著升高(P0.05),地塞米松干预组和小剂量GSH干预组显著低于对照组(P0.05),大剂量GSH干预组显著高于地塞米松干预组(P0.05)。造模后第7、14、28 d地塞米松干预组和GSH干预组羟脯氨酸含量较模型组显著降低(P0.05),第14 d时中、高剂量GSH干预组显著低于地塞米松干预组(P0.05)。与对照组比较,模型组各时间点肺组织匀浆液中SOD和GSH-Px水平均显著降低(P0.05),给予不同剂量GSH干预后,肺组织匀浆SOD及GSH-Px水平较模型组显著增加(P0.05)。结论还原型GSH能显著降低大鼠肺纤维化程度,但与地塞米松比较其效果并无明显优势。     

γ干扰素对实验性肺纤维化大鼠肺泡炎和肺纤维化的影响

目的探讨γ干扰素(IFN-γ)在博莱霉素诱导的实验性大鼠肺纤维化治疗中的作用及其机制。方法雄性健康Wistar大鼠80只,随机分为正常对照组、实验模型组、氢化可的松组及IFN-γ组,在给予实验药物后第3、7、14及28 d,每组取5只大鼠麻醉后处死,左肺行支气管肺泡灌洗术收集支气管肺泡灌洗液(BALF),测定其IFN-γ及转化生长因子β1(TGF-β1)浓度;取右肺中叶行石蜡包埋,观察肺泡炎及肺纤维化程度,测定肺组织羟脯氨酸含量。结果BALF中IFN-γ浓度在实验模型组于第3和7 d明显增高(P均<0.05),在IFN-γ组第3、7、14及28 d均较实验模型组明显增高(P均<0.05),并于第3、7及14 d高于氢化可的松组(P均<0.05);BALF中TGF-β1浓度在实验模型组第3、71、4及28 d均较正常对照组明显增高(P均<0.001),在IFN-γ组于第3 d明显高于实验模型组,但于第71、4及28 d与实验模型组相似(P>0.05),于第3、7及14 d明显高于氢化可的松组(P均<0.01)。IFN-γ组肺泡炎、肺组织纤维化评分及羟脯氨酸含量均与实验模型组相近。结论早期应用IFN-γ肺组织IFN-γ含量增加,但并不能抑制肺组织TGF-β1和羟脯氨酸的产生,也不能预防和阻止实验性大鼠肺泡炎和肺纤维化的形成。     

地塞米松对哮喘大鼠Th1/Th2失衡及嗜酸细胞fas、bcl-2 mRNA表达的影响

目的:观察地塞米松(DXM)对哮喘大鼠Th1/Th2失衡以及嗜酸细胞(EOS)fas、bcl-2 mRNA表达的影响,探讨糖皮质激素治疗哮喘气道炎症的作用机制.方法:清洁级雄性SD大鼠30只,随机分为3组:正常对照组(C),哮喘组(A),地塞米松治疗组(T),每组10只.采用卵清白蛋白制作大鼠哮喘模型.用夹心酶联免疫吸附试验(sandwich ELISA)法检测血浆及支气管肺泡灌洗液(BALF)中IL-4、IFN-γ的水平;用原位杂交法检测fas和bcl-2 mRNA在气道壁EOS上的表达.结果:A组大鼠IFN-γ表达水平较C组明显下调(P＜0.01),同时IL-4表达水平则有明显上调(P＜0.01),表现出明显的Th1/Th2失衡.fas mRNA的表达在A组明显下降(P＜0.01),bcl-2 mRNA的表达则有明显上调(P＜0.01).地塞米松治疗在纠正A组大鼠Th1/Th2失衡的同时可上调fas mRNA的表达,下调bcl-2 mRNA的表达.结论:纠正哮喘大鼠Th1/Th2失衡,调节EOS fas、bcl-2 mRNA的表达是地塞米松减轻哮喘气道炎症的可能机制之一.     

肺纤维化大鼠肺泡灌洗液中碱性磷酸酶的动态变化及其意义

目的 :探讨碱性磷酸酶在肺纤维化中的作用。方法 :采用博莱霉素致肺纤维化大鼠模型 ,应用酶学方法对支气管肺泡灌洗液中碱性磷酸酶 (ALP)进行动态观察。结果 :(1)博莱霉素 (BLM )组支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数、中性粒细胞第 1d即开始增加 ,第 3d达高峰 ,14d后逐渐恢复正常 ;淋巴细胞在第 7d达高峰。 (2 )BLM组BALF中ALP的绝对值增加 (P <0 .0 5～ 0 .0 1) ;总蛋白第 3d达到高峰 (P <0 .0 1) ,第 14～ 2 8d逐渐恢复正常 ;ALP和总蛋白比率第 7d开始增加 (P >0 .0 5 ) ,第 14～ 2 8d逐渐达到高峰 (P <0 .0 5 )。血清中ALP两组无统计学差异。 (3)BALF中ALP绝对值与炎症细胞总分数以及总蛋白无明显相关 ,BALF中ALP和总蛋白比率与炎症细胞总分数也无明显相关。结论 :博莱霉素致肺纤维化大鼠BALF中ALP明显增加 ,ALP和总蛋白比率随着肺纤维化进展而增加 ,其比率的增加可以作为反映肺纤维化进展的一项指标     

γ干扰素后期干预对大鼠肺纤维化影响

目的：观察γ干扰素（IFN-γ）对博莱霉素（BLM）诱导的肺纤维化大鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）中肿瘤坏死因子α（TNF-α）、IFN-γ和白细胞介素10（IL—10）的变化，探讨IFN-γ可能的调节作用。方法：将大鼠随机分为正常对照组、BLM组和IFN-γ组。一次性气管内注入BLM造模后，于第15d开始给药，分别于第17、21和28d处死，对苏木精-伊红染色（H-E）病理结果行半定量分析；用酶联免疫吸附实验（ELISA）测定BALF中TNF-α、IFN-γ和IL-10的含量；用消化法测定肺组织中羟脯氨酸含量。结果：①IFN-γ组和BLM组于造模后第17d起肺泡炎症和肺纤维化的程度及羟脯氨酸含量显著重于正常对照组（P〈0．01）；②IFN-γ组BALF中TNF-α含量于造模后第17d起显著高于正常对照组和BLM组（P〈0．01）；IFN-γ于造模后第21和28d显著高于其余两组（P〈0．05）；IL-10于造模后第17d显著高于对照组（P〈0．01）。结论：IFN-γ在BLM致大鼠肺纤维化的形成阶段增加BALF中的TNF-α、IFN-γ和IL-10含量，对肺纤维化无明显改善作用。     

丹参、川芎嗪联合应用对肺纤维化大鼠肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达的影响

观察丹参川芎嗪合剂腹腔注射给药对博来霉素（bleomycin,BLM）致肺纤维化大鼠肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原mR—NA表达的影响。方法：健康成年SD雄性大鼠90只,随机分为生理盐水（NS）组,BLM组,地塞米松（D）组,丹参川芎嗪合剂小剂量（S）组,合剂中剂量（M）组,合剂大剂量（L）组,每组15只,后五组按照BLM5mg／kg气管内给药制备肺纤维化大鼠模型,NS组气管内灌注同体积的NS。24小时后S组、M组、L组分别腹腔注射丹参川芎嗪合剂药物,NS组、BLM组腹腔注射等体积的NS．连续给药至第7天．第14天,第28天后各组分别处死大鼠5只。取肺组织分别行HE和Masson染色,观察肺泡炎和肺纤维化情况并评分;实时荧光定量PCR（Real—time quantitative Polymerase Chain Reaction,Real Time PCR）测定肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA的表达;血清用于肝、肾功能检测。结果：（1）各组大鼠血清旰、肾功能测定结果两两比较差异无统计学意义。（2）肺组织病理学观察提示：NS组各时间点大鼠未发现肺泡间隔水肿、炎性细胞浸润及肺组织纤维化的形成;BLM组第7天大鼠肺泡炎症改变明显,肺组织纤维化不明显,BLM组第14天、第28天大鼠肺泡结构破坏、间质增生,形成广泛纤维化,同时存在肺泡炎;D组有肺泡炎症改变,但是炎性细胞浸润程度较BLM组轻,纤维化程度和肺泡结构破坏也较BLM组轻;S组肺泡炎和肺纤维化程度均与BLM组类似。M组、L组第7天大鼠肺组织改变与BLM组大致相同;M组、L组第14天肺泡炎程度明显低于BLM组。M组、L组第14天、第28天肺纤维化程度明显低于BLM组（P〈0．05）。（3）实时荧光定量PCR检测肺组织I、Ⅲ型胶原mRNA表达：以NS组为参考标准,BLM组mRNA表达明显增多,D组相对于BLM组表达明显减少：S组与BLM组比较无明显差异,与D组比较其表达增多;M组、L组明显低于BLM组,与S组比较表达也明显减少（均P〈0．05）。结论：丹参川芎嗪合剂腹腔注射能够改善肺纤维化,且对肝、肾功能无明显毒副作用。     

三氧化二砷对支气管哮喘小鼠Th17细胞的影响

目的 观察三氧化二砷（ATO）对支气管哮喘小鼠Th 17细胞和IL-17的影响.方法 30只BALB/c小鼠随机分为对照组、哮喘组和ATO组.末次激发24小时后,测定气道肺阻力,收集支气管肺泡灌洗液（BALF）,细胞分类计数,流式细胞仪检测脾脏Th17细胞阳性率.ATO干预20小时后,检测培养上清液及BALF中IL-17及IL-4水平.结果 ①哮喘组BALF中各类炎症细胞均明显高于对照组（P＜0.05）,而ATO组明显低于哮喘组（P＜0.01）.②哮喘组肺阻力、脾脏CD4＋T细胞总数、Th17细胞阳性率、BALF中IL-17及IL-4均明显高于对照组,而ATO组上述指标均明显低于哮喘组（P＜0.05）.③ATO干预组培养上清液中IL-17、IL-4含量显著低于原液组（P＜0.01）.④Th17细胞阳性率、IL-17含量均与中性粒细胞数量呈显著正相关（P＜0.05）.结论 ATO能够抑制Th17细胞、IL-17的表达,减轻哮喘小鼠气道炎症及高反应性.     

益气活血法对博莱霉素致肺纤维化小鼠IFN-γ、IL-4的影响

目的研究具有益气活血作用的化纤汤对博莱霉素致肺纤维化小鼠的防治作用,及对肺泡灌洗液(BALF)中干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素4(IL-4)的影响,从而探讨益气活血法治疗肺纤维化的作用机制。方法6～8周龄雄性ICR小鼠分6组,模型组经鼻滴入博莱霉素(BLM)5mg/kg建立肺间质纤维化模型,化纤汤防治组于滴入BLM前48h予化纤汤灌胃,化纤汤治疗组于滴入BLM后第14天化纤汤灌胃;地塞米松防治组及治疗组,并与正常组小鼠进行对照。第28天收获其支气管肺泡灌洗液(BALF)和肺组织,右肺行苏木精-伊红(HE)和马松(Masson)三色染色,并观察电镜下细胞超微结构的改变,左肺经酸解法检测肺组织羟脯氨酸(HYP)含量,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测BALF中IFN-γ、IL-4的浓度。结果各药物干预组与模型组比较,小鼠肺系数明显下降(P<0.05);肺泡炎、纤维化程度均有改善(P<0.05),其中化纤汤防治组改善最明显;肺HYP含量下降(P<0.05);模型组BALF中IFN-γ含量明显下降,应用化纤汤可使IFN-γ含量明显高于模型组(P<0.05),而应用地塞米松则无此作用;模型组BALF中IL-4含量明显升高,各药物干预组均可使之下降(P<0.05),而各组之间无明显差异。结论应用中药益气活血法可以明显减轻小鼠肺纤维化进程,不仅降低Ⅱ型细胞因子(IL-4)含量,而且升高Ⅰ型细胞因子(IFN-γ)含量,从而调整Ⅰ型/Ⅱ型细胞因子平衡达到抗纤维化作用。     

RT-PCR方法分析益气养阴活血法对肺纤维化大鼠肺组织TGF-β1mRNA影响

目的:观察益气养阴法中药组方——抗纤合剂对博莱霉素诱导的肺纤维化大鼠肺组织中TGF-β1 mRNA蛋白质表达的影响,在分子层面探讨抗纤合剂的可能作用机制。方法:将健康雄性Wistar大鼠120只随机分为对照组、模型组、强的松组、抗纤合剂组。每组30只。除正常对照组,其他3组采用博莱霉素(BLM)致肺纤维化大鼠模型。模型建成后,强的松组以6.25 mg·kg~(-1)的强的松溶液灌胃,抗纤合剂组以5 g·kg~(-1)灌胃。正常对照组与模型组以等溶生理盐水灌胃,观察大鼠一般状态,分别于7、14、28 d 3个时间点处死大鼠并取材。每个时间点每组大鼠10只。取肺组织固定包埋切片后,应用病理图像分析系统对病理切片进行扫描,观察大鼠组织病理学改变,用HE染色观察肺组织肺泡炎变化程度,用胶原纤维的特异染色Masson染色观察肺组织纤维化变化程度;用RTPCR方法,动态观察肺组织TGF-β1 mRNA的表达。结果:HE染色及Masson染色显示:正常组肺内结构清晰,肺泡间隔未见增厚,模型组:各时期均表现有程度不等的肺泡炎,大量炎性细胞浸润,28 d时肺组织以胶原沉积为主,呈中、重度肺纤维化改变。强的松组、抗纤合剂组肺组织炎细胞浸润区域较模型组明显减少,28 d时胸膜和肺泡间隔胶原纤维沉积呈束状,显示轻、中度肺纤维化改变。除正常组外,其他各组TGF-β1 mRNA表达于第7天明显增强,模型组14 d达到高峰,其余两组与模型组相比,差异显著,强的松组、抗纤合剂组统计无明显差异。结论:以益气养阴活血法立方的抗纤合剂可降低BLM致肺纤维化大鼠肺组织炎症和肺纤维化程度,下调BLM致肺纤维化大鼠TGF-β1 mRNA表达,对肺纤维化有一定的治疗作用。