阿托伐他汀对兔急性心肌梗死后心肌miR-221/miR-222表达及血管新生的影响

目的:探讨阿托伐他汀对兔急性心肌梗死后梗死心肌组织miR-221/miR-222表达以及血管新生的影响。方法:40只新西兰大白兔随机选取8只设为假手术组,只在左冠状动脉前降支下穿线不结扎,剩余32只兔建立急性心肌梗死模型后随机均分为2组:模型组和他汀组。他汀组给予阿托伐他汀钙片1mg·kg-1·d-1,连续灌胃4周;假手术组和模型组给予等量助溶剂连续灌胃4周。4周后处死,取梗死心肌组织,采用免疫组织化学法检测梗死区心肌组织微血管密度(MVD),采用RT-PCR法检测miR-221/miR-222的表达水平。结果:与模型组MVD(3.450±1.036)相比,他汀组(7.640±1.804)明显增加(P0.05)。与假手术组miR-221/miR-222表达水平(0.716±0.083/0.692±0.069)比较,模型组miR-221/miR-222表达水平(1.010±0.043/1.009±0.042)明显升高,他汀组(0.431±0.111/0.374±0.118)明显降低(P0.05)。他汀组梗死组织MVD和miR-221/miR-222的表达水平呈显著负相关(r=-0.755,P0.01;r=-0.804,P0.01)。结论:阿托伐他汀可能通过抑制miR-221/miR-222的表达促进心肌梗死后梗死心肌组织的血管新生。     

miR-221/222在肝癌细胞抵抗内质网应激凋亡中的作用

目的 研究内质网应激对miR-221/222的调控及其在肝癌细胞抵抗内质网应激诱导细胞凋亡中作用.方法 采用miR-221/222抑制物和miR-221/222类似物分别阻断或模拟内源性miR221/222的功能,并利用Western blot和流式细胞技术分析内质网应激条件下miR-221/222对肝癌细胞周期和凋亡的调控作用.结果 内质网应激诱导miR-221/222表达下调,miR-221/222类似物和抑制物分别抑制和促进内质网应激诱导的p27Kip1表达上调,干扰p27Kip1不仅抑制了内质网应激诱导的肝癌细胞G0/G1期阻滞,也促进了内质网应激介导的肝癌细胞凋亡.结论 内质网应激诱导miR-221/222下调能够通过促进p27Kipl表达对内质网应激条件下肝癌细胞周期和凋亡起重要调控作用.

Abstract：

Objective To investigate the role of miR-221/222 in inhibiting endoplasmic reticulum stress-induced human hepatocarcinoma cells apoptosis. Method miR-221/222 mimics and inhibitors were used to mimic or block the function of endogenous miR-221/222 respectively. Western blot and flow cytometry were used to test the effects of miR-221/222 on cell cycle and apoptosis under endoplasmic reticulum stress in human hepatocellular carcinoma cells. Results Endoplasmic reticulum stress resulted in miR-221/222down-regulation in human hepatocellular carcinoma cells. miR-221/222 mimics and inhibitors inhibited and promoted respectively endoplasmic reticulum stress-mediated p27Kip1 induction. Moreover, p27Kip1 suppression not only resulted in reduction in the fraction of G1 phase cells, but also promoted the endoplasmic reticulum stress-mediated apoptosis in human hepatocellular carcinoma cells. Conclusions miR-221/222 were downregulated by endoplasmic reticulum stress in human hepatocellular carcinoma cells, which subsequently protected human hepatocellular carcinoma cells against endoplasmic reticulum stress-induced apoptosis through p27KiP1 regulation.     

miR-221/222与肿瘤发生发展关系的研究进展

微小RNA-221/222(miR-221/222)是一类与肿瘤发生密切相关的微小RNA,异常表达存在于机体多系统、多步骤、多位点肿瘤的分化发展进程中。miR-221/222通过靶向不同靶基因的信号转导途径发挥着抑癌基因或促癌基因的作用,有望成为恶性肿瘤的生物学标志物和新型治疗靶点。该文就miR-221/222与肿瘤发生发展关系的研究进展作一综述。     

病毒性脑炎患儿脑脊液外泌体中miR-221/222检测及其临床意义

目的检测病毒性脑炎患儿脑脊液外泌体中微小RNA-221/222(miR-221/222)水平,并探讨miR-221、miR-222与病毒性脑炎发生及预后的关系。方法选取2018年3月–2019年6月于本院住院治疗的79例病毒性脑炎患儿为病脑组,并根据预后评定将患儿分为预后良好组50例,预后不良组29例。选取同期68例以头痛为主诉而脑脊液正常患儿作为对照组。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测脑脊液外泌体中miR-221、miR-222表达水平;分析病毒性脑炎患儿脑脊液外泌体中miR-221与miR-222的相关性;分析脑脊液外泌体中miR-221、miR-222检测对病毒性脑炎的诊断价值及其对病毒性脑炎患儿预后的影响。结果透射电镜观察病脑组和对照组患儿脑脊液中均存在中间较周围淡染、边界较清晰的椭圆形或类圆形囊泡,且囊泡内可见致密低电子影;病脑组患儿脑脊液外泌体中miR-221、miR-222相对表达量分别为1.02±0.27和1.03±0.26,对照组分别为1.49±0.33和1.60±0.43,差异均有统计学意义(t值分别为9.354和9.531,均P0.01),且miR-221与miR-222水平呈正相关(r=0.540,P0.05)。脑脊液外泌体miR-221、miR-222诊断病毒性脑炎的AUC分别为0.846、0.879,截断值分别为1.393、1.436,特异性分别为87.9%、74.9%,敏感度分别为65.6%、85.1%;二者联合诊断的AUC为0.914,特异性为83.5%,敏感度为86.8%。预后不良组病脑患儿脑脊液外泌体中miR-221、miR-222相对表达量分别为1.59±0.41和1.79±0.49,预后良好组分别为1.59±0.41和1.79±0.49,差异均有统计学意义(t值分别为4.314和3.846,均P0.01)。多因素Logistic回归分析miR-222是影响病毒性脑炎患儿预后不良的独立危险因素(P0.05)。结论病毒性脑炎患儿脑脊液外泌体中miR-221、miR-222水平显著升高,两者对诊断病毒性脑炎及其预后评估可能有重要价值。     

前列腺癌组织miR-221和miR-222的表达及临床意义

目的探讨前列腺癌(PCa)组织中miR-221和miR-222的表达及其临床意义。方法采用茎环RT-PCR的方法检测8例正常前列腺组织、74例PCa组织及其对应的癌旁组织中miR-221和miR-222的表达情况,并结合临床病理资料进行统计学分析。结果 miR-221和miR-222在PCa组织中的表达显著高于其对应癌旁组织(P<0.05)及正常前列腺组织(P<0.05),其中miR-221的水平还与癌组织分化程度(P<0.05)以及远端转移情况(P<0.05)相关。结论 miR-221和miR-222在PCa组织中表达量升高,其中miR-221的水平还与癌组织分化程度与转移相关,可能作为PCa诊断和预后的指标。     

MicroRNA和动脉粥样硬化的关系

MicroRNA是一组生物进化过程中高度保守的非编码的小RNA,在转录后水平调节基因表达.研究显示MircoRNA在心血管系统中高度表达,在动脉粥样硬化中起重要的作用.MicroRNA126,MicroRNA221/222,MicroRNA92-a参与调节内皮细胞功能与血管生成, MicroRNA217促进内皮细胞的衰老,MicroRNA221/222,MicroRNA34对内皮祖细胞有调节作用,MicroRNA145/143,MicroRNA221/222参与调节血管平滑肌细胞的表型转化,增殖和迁移.MicroRNA-125a-5p参与巨噬细胞对致动脉粥样硬化脂质的炎症应答.本文简要介绍近年有关MicroRNA与动脉粥样硬化关系研究的部分进展.     

微小RNA与糖尿病血管新生

微小核糖核酸(miRNA)是一类具有转录后调节活性的高度保守的非编码小分子RNA,参与多种生理过程,包括血糖的调节.血管新生和重塑在人体的生长发育和机体功能的修复中起重要作用,为正常机体所必须,如伤口的愈合、女性周期性子宫内膜的变化、血管闭塞后侧支循环的建立等.糖尿病患者体内存在多种miRNA的表达异常,如促进血管新生的miR-210、miR-93和miR-126的表达明显下降；相反,抑制血管新生的miR-320和miR-503的表达则明显上调,这些miRNAs参与了糖尿病多种血管并发症的发生.因此,它们可能为糖尿病血管病变如心、脑血管病变,视网膜病变和糖尿病足病的治疗提供新的分子靶点.     

新生儿先天性心脏病相关微小核糖核酸表达及与临床特征的研究

目的:研究新生儿先天性心脏病微小RNA-222-3p(miR-222-3p)、微小RNA-1(miR-1)、微小RNA-324-5p(miR-324-5p)表达及与临床特征的相关性。方法:选取2020年3月至2021年3月收治的88例先天性心脏病新生患儿作为疾病组，另选取同期健康体检新生儿50例作为对照组，采用荧光定量PCR法检测所有研究对象miR-222-3p、miR-324-5p、miR-1表达量。结果:与对照组比较，疾病组miR-222-3p、miR-1、miR-324-5p表达均显著升高，有肺动脉狭窄、主动脉狭窄、房间隔缺损患儿miR-222-3p、miR-1、miR-324-5p表达量升高，预后不良组miR-222-3p、miR-1、miR-324-5p表达均显著上升，与miR-1、miR-222-3p、miR-324-5p比较，3项联合对疾病组患儿预测及诊断价值较高，差异有统计学意义(P<0.05)。miR-222-3p、miR-1、miR-324-5P的相关性分析显示，miR-222-3p与miR-1呈正相关(r=0.269,P=0.018);miR-1与miR-3...     

VEGFR2在血管新生与重塑中的调控作用

<正>血管的新生与重塑作为血管发生,损伤与修复过程中的重要病理变化,在维护机体血管的结构与功能正常方面具有重要作用。尤其是在机体血管发生损伤情况下,血管的新生与重塑往往成为影响机体损伤发展及修复的重要影响因素。在机体损伤的急性期,相应损伤因子或炎症因子可通过促进损伤部位周围血管结构损伤或者重塑,从而改变局部的血液流变学特性,从而促进损伤组织炎症反应的发生,进而加重组织的损伤~([1]);而在恢复期,血管新生及新生血管结构重塑又是机体损     

微小RNA对血管重塑的调节作用及研究进展

血管壁结构的适应性改变称为血管重塑,这种适应性改变可在动脉高血压、动脉瘤、血管介入术后再狭窄和动脉粥样硬化中出现。微小RNA(miR)对参与动脉血管重塑过程中的主要细胞因子有重要调节作用,其可能会促进或抑制血管壁结构的变化,调节平滑肌细胞(SMC)的表型,控制内皮细胞和巨噬细胞的炎症反应。不同类型的miR分别诱导SMC转化为收缩型或合成型;在动脉重塑过程中主要诱导SMC转化为合成型。因此,通过miR靶向重编程SMC表型可以调节重塑过程。此外,诱导内皮细胞重塑的刺激,如剪应力、血管紧张素Ⅱ、氧化低密度脂蛋白和细胞凋亡等,都是由miR介导的。例如,内皮细胞特异性miR-126在凋亡的内皮细胞的微泡中被转移,并在动脉粥样硬化的形成过程中发挥保护作用;特别是通过巨噬细胞的固有免疫系统的炎症反应,其会促进动脉重塑。miR-155诱导炎性细胞因子的表达;而miR-146a和miR-147则参与炎症的消除。然而,关于miR在血管重塑中的作用的数据仍然缺乏,因为这还需测试目前可获得的、高效的miR抑制剂对心血管疾病的治疗潜力。     

下调MiR-221对胃癌顺铂耐药细胞增殖及顺铂敏感性的影响及其相关机制

背景晚期胃癌(gastric cancer, GC)患者通常接受化疗作为主要治疗方法.然而,化疗的有效性受到GC细胞耐药性的限制.本研究旨在探讨microRNA-221(miR-221)在顺铂(cisplatin, DDP)耐药GC细胞中的生物学作用和潜在机制,以期为临床治疗提供参考.目的研究下调Mi R-221对GC DDP耐药细胞增殖及DDP敏感性的影响及相关机制.方法采用AGS和MGC-803细胞构建出DDP耐药AGS/DDP和MGC-803/DDP细胞. RT-qPCR检测GC及癌旁组织、DDP化疗敏感组织、DDP化疗耐药组织、GC细胞和GC DDP耐药细胞的miR-221表达水平;用LVmiR-221-shRNA慢病毒转染AGS/DDP和MGC-803/DDP细胞后,MTT检测细胞增殖以及对DDP的化学敏感性; Annexin V-FITC/PI染色检测细胞凋亡;进行生物信息学分析以寻找miR-221的潜在靶基因,应用RT-qPCR和Western blotting检测细胞中CCND1的m RNA和蛋白表达.结果在GC组织和GC细胞细中miR-221明显上调,且DDP耐药组织和DDP耐药细胞中miR-221表达更高.下调miR-221抑制了AGS/DDP和MGC-803/DDP细胞增殖,促进了细胞凋亡和细胞对DDP的化学敏感性;CCND1是miR-221的直接靶基因,转染LV-miR-221-sh RNA抑制CCND1 mRNA和蛋白表达水平.结论下调miR-221可以抑制GC DDP耐药细胞增殖,促进其对DDP的化学敏感性,这一作用可能通过抑制靶基因CCND1表达来实现的.     

miR-221-3p在下肢缺血性疾病中的表达变化

目的探讨miR-221-3p在下肢缺血性疾病中的表达变化。方法临床试验:收集西南医科大学附属医院血管甲状腺外科2014年至2015年间55例动脉硬化闭塞症(ASO)患者和54例健康对照人群血浆,24例ASO截肢患者的正常血管及病变血管。选取3对年龄、性别相近的ASO患者和正常健康人血浆用Microarray筛选出ASO患者血浆中差异性表达在2倍以上的24种microRNA,其中miR-221-3p的表达量明显降低。用实时荧光定量PCR检测临床55例ASO患者和54例健康对照人群血浆及24例ASO截肢患者正常血管和病变血管中miR-221-3p的表达量。动物实验:选取SD大鼠,结扎组分离结扎大鼠股动脉制备下肢缺血模型,假手术组仅暴露分离股动脉不做结扎。分别于术前、术后即刻、术后7天、49天行激光多普勒扫描监测下肢皮肤血流变化。于术后7天、49天行激光多普勒扫描后处死各组大鼠,收集大鼠术侧腓肠肌及下腔静脉血,采用实时荧光定量PCR检测各组血浆和腓肠肌内miR-221-3p的表达量。结果临床试验显示:与健康对照组相比,ASO患者血浆中miR-22-3p的含量明显降低(1.078±0.119比0.617±0.121);与正常血管相比,病变血管中miR-221-3p的表达量也明显降低(1.017±0.113比0.625±0.136)。动物实验显示:与假手术组相比,结扎组7天时血浆和腓肠肌内miR-221-3p的含量明显降低(血浆1.04±0.07比0.31±0.07、腓肠肌1.01±0.07比0.64±0.09),49天时miR-221-3p的含量有所上升但仍低于对照组。结论 miR-221-3p在下肢缺血性疾病中明显降低,有望成为下肢缺血性疾病一个新的诊断方式及治疗靶点。     

微小RNA-221对HepG2细胞增殖及其凋亡的影响

目的 探讨微小RNA-221(miR-221)对肝癌细胞株HepG2细胞增殖与凋亡的影响.方法 将miR-221阻遏物及模拟物转染至HepG2后,用实时荧光定量RT-PCR检测miR-221的表达水平;用细胞增殖试剂盒、Hoechst 33342及碘化丙啶(PI)双重染色、流式细胞仪及caspase3/7活性试剂盒检测HepG2细胞增殖与凋亡情况.对数据进行多样本的单因素方差分析,两两比较采用LSD法;相关性比较用Pearson检验.结果 RT-PCR结果显示,转染miR-221阻遏物后其表达受到抑制,而转染miR-221模拟物可促进其表达.细胞增殖试剂盒及Hoechst 33342/PI染色结果显示,48 h后miR-221阻遏物明显抑制HepG2细胞增殖(P＜0.05),而miR-221模拟物促进HepG2细胞增殖(P＜0.05),两种方法结果呈正相关(r=0.993,P＜0.01).流式细胞仪检测细胞周期显示,miR-221模拟物组G1期细胞比例(47.6%±1.53%)明显低于空白对照组(59.00%±1.00%)及阴性对照组(58.00%±1.00%,F=81.77,P＜0.01); S期细胞比例(20.33%±1.15%)明显高于空白对照组(11.00%±1.00%)及阴性对照组(12.00%±1.00%,F=70.90,P＜0.01).Hoechst 33342/PI染色、流式细胞仪膜联蛋白V凋亡试剂盒检测均显示,转染miR-221阻遏物48 h后,细胞凋亡和坏死增加(P＜0.05),差异有统计学意义.Caspase-3/7试剂盒检测caspase-3/7活性变化结果显示,转染miR-221阻遏物24 h后,细胞caspase3/7活性明显增高(P＜0.05),差异有统计学意义.结论 miR-221可促进肝癌细胞生长增殖,抑制miR-221表达可诱导细胞凋亡.miR-221有望成为治疗肝癌新的分子靶点之一.     

退行性心脏瓣膜病患者血清微小RNA-222和白细胞介素6水平变化及其临床意义

目的探讨退行性心脏瓣膜病患者血清微小RNA-222(miR-222)、白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)水平变化及其临床意义。方法选择2016年1~11月徐州医科大学附属淮安医院老年科住院的退行性心脏瓣膜病患者100例,其中单瓣膜病变组48例,多瓣膜病变组52例;健康体检者30例作为对照组。比较3组血清miR-222和IL-6水平。直线相关性分析退行性心脏瓣膜病患者血清miR-222与IL-6的相关性。结果单瓣膜病变组和多瓣膜病变组血清miR-222和IL-6水平明显高于对照组[0.136±0.013、0.205±0.018 vs 0.029±0.005,(3.814±0.108)ng/L、(4.479±0.104)ng/L vs(2.351±0.116)ng/L,P0.01],且多瓣膜病变组血清miR-222和IL-6水平明显高于单瓣膜病变组,差异有统计学意义(P0.01)。退行性心脏瓣膜病患者血清miR-222与IL-6呈正相关(r=0.586,P0.01)。结论血清miR-222和IL-6可能参与了退行性心脏瓣膜病的发生、发展。     

炎症条件下miR-222-3 p靶向CD4对肺泡巨噬细胞IL-6分泌水平的影响

目的研究miR-222-3p靶向CD4对肺泡巨噬细胞炎症因子分泌水平的影响,探讨其具体作用机制。方法 CCK8法检测0、1、2、4、8μg/mL的炎症诱导剂LAMPS对MH-S细胞的毒性影响。LAMPS处理MH-S细胞0、30、60、90、120 min后,RT-qPCR检测miR-222-3p和IL-6的表达水平的变化,Western blot检测CD4的蛋白表达水平。miRDB软件预测和双荧光素酶报告实验检测miR-222-3p对CD4基因的靶向作用。siR-222-3p转入MH-S细胞后,Western blot检测CD4的表达水平变化,RT-qPCR检测细胞内的IL-6的mRNA表达水平。结果 LAMPS对MH-S细胞的生长具有抑制作用,具有浓度依赖性。2μg/mL的LAMPS作用于MH-S细胞后,miR-222-3p和IL-6上调表达,CD4下调表达,具有时间依赖性。miRDB软件预测CD4为miR-222-3p的靶基因,双荧光素酶实验验证了靶向关系。siR-222-3p能够促进CD4的表达,降低IL-6的表达水平。结论 miR-222-3p可通过靶向CD4来调控肺泡巨噬细胞炎症因子的分泌水平。     

微小核糖核酸与心血管系统的生理病理关系

微小核糖核酸参与人体的多种生理、病理活动.最近的研究表明,一些微小核糖核酸仅存在于心肌和骨骼肌中,病变心脏或血管申的微小核糖核酸表达谱与正常组织有较大差异.微小核糖核酸1、微小核糖核酸133和微小核糖核酸221/222等一些微小核糖核酸与心脏或血管的生成、形态发育及功能密切相关,在心血管系统生理和病理中发挥重要的作用.     

微小RNA-106b参与内皮细胞介导的血管新生作用机制研究

目的研究微小RNA(microRNA,miR)-106b是否参与动脉粥样硬化相关的血管新生,明确miR-106b在内皮细胞中参与血管新生的作用机制。方法内皮细胞培养并转染miR-106b,分为miR-106b组、空白对照组和阴性对照组。提取RNA、反转录及实时定量PCR检测miR-106b相对表达量以明确转染效率。观察各组内皮细胞在凝固的基质胶中管腔形成情况。TUNEL法检测转染后细胞凋亡状况并进行靶基因的预测,采用Western blot法检测筛选的蛋白相对表达量变化。结果与空白对照组和阴性对照比较,miR-106b组在基质胶中管腔形成明显减少;与阴性对照组比较,miR-106b组管腔比值、信号转导及转录激活因子3mRNA相对表达量及蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01)。阴性对照组与miR-106b组细胞凋亡率比较,差异无统计学意义(1.19%vs 3.39%,P>0.05)。结论 miR-106b在内皮细胞抑制血管新生可能是通过下调信号转导及转录激活因子3,与血管内皮生长因子无直接关系。     

MicroRNA及其异常表达在支气管哮喘发生与发展中的作用

MicroRNA（ miRNA）是一类内源性高度保守的单链小分子非编码RNA,长度约18～22个核苷酸（nt）,具有组织特异性和时序特异性,在转录后水平调控靶基因的翻译或表达。 miRNA在细胞生长、增殖、代谢、凋亡等生物学过程中发挥重要作用。研究表明, miRNA与支气管哮喘（哮喘）的发生发展存在密切关系,现已发现,若干miRNA,如Let-7家族、miR-125家族、miR-26家族、miR-155、miR-21、miR-133a、miR-26a、miR-221等的异常表达与哮喘相关。该文综述miRNA在哮喘的病理生理学基础及其以持续气道炎症、气道高反应性和气道重塑为特征的发病机制中的作用。     

血管新生在肥胖发生中的作用

肥胖的发生伴随着脂肪组织结构的重塑,脂肪生成和血管新生是其中重要的环节.脂肪生成与血管新生是时间及空间上相互耦联的进程.血管新生涉及促血管性因子(包括瘦素、血管内皮生长因子等)、血管生成抑制因子(如脂联素、内皮抑素等)及细胞外蛋白酶解系统等诸多因素的相互作用.此外,过氧化物酶体增殖物活化受体(PPARs)配体亦在血管新生过程中扮演重要的角色.调节脂肪组织的血管新生,为预防及治疗肥胖及其相关代谢紊乱提供新的治疗观念.     

循环微小RNA识别冠状动脉粥样硬化不稳定斑块的价值研究

目的:探讨循环微小RNA(miRNA)对冠状动脉粥样硬化斑块特征的识别价值。方法:入选的120例急性冠脉综合征(ACS)患者,按斑块特点分为钙化斑块组(n=65)、非钙化斑块组(n=55),另选取同期60名健康体检者作为正常组。采集3组空腹静脉血检测miRNA(miR-16、miR-126、miR-155、miR-21、miR-221、miR-222)的表达水平,采用受试者工作特征曲线进行分析并计算各种循环miRNA诊断非钙化斑块患者的曲线下面积(AUC)。结果:非钙化斑块组、钙化斑块组及正常组的miR-16、miR-126、miR-155、miR-21、miR-221表达水平差异均具有统计学意义,非钙化斑块组的miR-21水平显著低于钙化斑块组和正常组;非钙化斑块组的miR-16水平显著高于钙化斑块组和正常组,差异均具有统计学意义(P均0.05);循环miRNA诊断非钙化斑块均具有一定的价值,miR-16+miR-21联合应用可以显著提高AUC。结论:外周血miR-16、miR-21水平表达与ACS患者的冠状动脉不稳定性斑块有关,可以作为判定斑块性质的诊断指标之一。