VEGF和CK20mRNA联合检测在大肠癌病人中的意义

目的探讨大肠癌病人外周血细胞角蛋白(CK20 mRNA)和肿瘤组织VEGF蛋白作为大肠癌肿瘤细胞血行播散标志的临床意义。方法应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术和免疫组织化学方法检测63例大肠癌术中抽取的外周血CK20 mRNA和手术切除肿瘤组织中VEGF蛋白的表达,并对所测结果进行分析和比较。结果高、中分化和低、未分化大肠癌病人的CK20 mRNA和VEGF的阳性率分别为30.0%、50.0%和84.6%、92.3%,均有非常显著性差异(P<0.01)。DukesA、B期和C、D期大肠癌病人CK20 mRNA和VEGF的阳性率分别为32.4%、56.8%和53.8%、61.6%,无显著性差异(P>0.05)。CK20 mRNA与VEGF作为单项指标测定的阳性率分别为41.3%和58.3%,联合检测时阳性率升至69.8%,有非常显著性差异(P<0.01)。结论大肠癌病人外周血CK20 mRNA和肿瘤组织VEGF可作为衡量术后复发转移的有效指标;两者联合检测时,敏感性显著提高。     

实时定量逆转录聚合酶链反应检测大肠癌患者术前外周血CK20 mRNA和CEA mRNA的临床意义

目的探讨大肠癌患者外周血CK20 mRNA和CEA mRNA的表达及其临床意义。方法采用实时定量逆转录聚合酶链反应（QRT-PCR）技术,对68例大肠癌患者及30例健康志愿者（对照组）术前外周血CK20 mRNA和CEA mRNA水平进行检测。结果在对照组中CK20 mRNA和CEA mRNA均无表达,而在大肠癌组中CK20 mRNA阳性表达率为45．6％,CEA mRNA阳性表达率为39．7％,二者联合检测阳性率为55．9％,较单项检测阳性率高（P〉0．05）,二者的表达与性别、肿瘤部位和肿瘤分化程度无明显相关,与肿瘤临床分期、淋巴结转移和肝脏转移明显相关。结论CK20 mRNA和CEA mRNA可作为大肠癌细胞血行播散的标志,联合检测有助于提高肿瘤微转移的检出率及判断预后。     

结直肠癌早期肝转移的预测

目的研究CK20 mRNA、CD44v6、血管内皮生长因子（VEGF）与结直肠癌肝转移的关系,探讨临床预测结直肠癌早期肝转移的有效的客观指标。方法应用荧光定量逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）法检测50例结直肠癌患者回流门静脉血中CK20 mRNA,并同时应用免疫组织化学方法测定结直肠癌癌组织中CD44v6、VEGF的表达;并与良性病变对照组10例和正常组织对照组10例比较。结果结直肠癌患者门静脉血CK20 mRNA;癌组织中CD44v6、VEGF表达阳性率明显高于良性病变对照组（P〈0．01）和正常对照组（P〈0．01）;结直肠癌组织中CIM4v6及VEGF的表达与门静脉血中CK20 mRNA的表达有显著相关性（r．=0．933,r2=0．906,P〈0．05）;同时肝转移组CK20 mRNA、CD44v6、VEGF阳性表达率均高于非肝转移组（P〈0．05）。结论联合检测CD44v6、VEGF及CK20 mRNA预测结直肠癌肝转移,可提高预测的灵敏度及特异性,对于结直肠癌早期肝转移监测具有较高的临床价值。     

金属硫蛋白和FasL在大肠癌组织中表达及临床意义的研究

目的探讨金属硫蛋白（MT）和FasL表达与大肠癌淋巴结及肝转移的关系。方法采用免疫组化和定量RT-PCR方法检测93例大肠癌原发灶、正常结肠黏膜、转移淋巴结和肝转移灶MT、FasL表达。结果大肠癌原发灶、正常结肠黏膜、转移淋巴结和肝转移灶中MT表达阳性率分别为：58．1％、32．3％、81．1％、64．3％。FasL表达阳性率分别为：41．9％、19．4％、62．3％、92．9％。癌原发灶、肝转移灶和转移淋巴结中MT、FasL表达阳性率高于正常肠黏膜组织（X^2=35．2421、57．5152,P〈0.01）。转移淋巴结MT表达阳性率高于癌原发灶（X^2=8．0565,P〈0.01）。肝转移灶FasL表达阳性率高于转移淋巴结和癌原发灶（X^2=8．6674、22．4455,P〈0．01）。Dukes′C、D期MT、FasL表达阳性率高于Dukes′A、B期（X^2=18．8871、25．1650,P〈0．01）。低分化腺癌和黏液腺癌MT、FasL表达阳性率高于高分化和中分化腺癌（X^2=11．1546、9．2239,P〈0．05）。转移淋巴结中MT mRNA表达高于FasL mRNA表达。肝转移灶中FasL mRNA表达水平高于MT mRNA表达。结论MT、FasL增强表达与大肠癌淋巴结转移和肝转移有关,检测MT、FasL表达可作为大肠癌预后评价指标。     

CK20mRNA、CD44v6和PCNA对大肠癌早期肝转移预测的研究

目的:研究CK20mRNA、CD44v6和PCNA与大肠癌肝转移的关系,探讨临床预测大肠癌早期肝转移的客观指标。方法:应用荧光定量RT-PCR法检测50例大肠癌患者回流门静脉血中 CK20mRNA,同时应用免疫组织化学方法测定大肠癌癌组织中CD44v6、PCNA的表达,并与对照组比较。结果:大肠癌患者门静脉血CK20mRNA、癌组织中CD44v6、PCNA表达阳性率明显高于良性病变对照组(P<0．01)和正常对照组(P<0．01);大肠癌组织中CD44v6及PCNA的表达与门静脉中 CK20mRNA的表达有显著相关性(γ1=0．933,γ2=0.906,P<0．05);肝转移组CK20mRNA、CD44v6、 PCNA阳性表达率均高于非肝转移组(P<0.05)。结论:联合检测CD44v6、PCNA及CK20mRNA预测大肠癌肝转移,可显著提高预测的灵敏度及特异性,对于大肠癌早期肝转移监测具有很高的临床价值。     

胰腺癌外周血中CK20mRNA的表达及临床意义

目的应用荧光定量逆转录聚合酶联反应（RT-PCR）检测胰腺癌外周血中cK20mRNA的表达及其临床意义。方法用荧光定量RT-PCR检测40例作根治术的胰腺癌病人外周血中CK20mRNA，并与病人的临床病理学指标、随访结果进行相关性研究。结果40例胰腺癌外周血中CK20mRNA阳性率57．5％（23／40），CK20mRNA的表达与年龄、性别、肿瘤大小无关，与肿瘤分化程度、淋巴结转移、临床分期有相关性。随访发现CK20mRNA阳性病人术后6个月（P=0．043）或1年内（P=0．02）肿瘤转移的可能性明显大于阴性病人。外周血中CK20mRNA阳性病人预后不良，其生存率明显低于阴性病人（Log Rank=13．31，P=0．0003）。结论CK20mRNA是检测胰腺癌外周血中微转移的敏感指标，CK20mRNA的表达与肿瘤的生物学行为有关，并能预测胰腺癌预后和决定采用更有效的辅助治疗。     

大肠癌组织中LYVE-1、HIF-1α和VEGF的表达及其临床意义

为探讨淋巴管内皮细胞透明质酸受体1（LYVE-1）、缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）和血管内皮生长因子（VEGF）在大肠癌组织中的表达及其与大肠癌临床病理特征的关系,本研究应用免疫组化法检测78例大肠癌组织中LYVE-1、HIF-1α和VEGF蛋白的表达,并与38例正常大肠组织进行比较。结果显示,LYVE-1、HIF-1α和VEGF在大肠癌组织中的表达率分别为64．10％、56．41％和61．54％,均明显高于正常对照组21．05％、0和31．57％（P〈0．05）。三者表达与大肠癌患者性别、年龄、肿瘤大小、分化程度、远处转移均无关（P〉0．05）,与淋巴结是否转移和Dukes分期有关（P〈O．05）。HIF-1α与LYVE-1和VEGF均显著相关（P〈0．01）。结果表明,LYVE-1、HIF-1α及VEGF在肿瘤淋巴管、血管生成和转移过程中起重要作用,联合检测LYVE-1、HIF-1α和VEGF可作为判断大肠癌转移和预后的重要指标。     

淋巴结微转移及相关蛋白检测在大肠癌患者Dukes分期、治疗和预后中的意义

目的 探讨淋巴结微转移（LNMM）和nm23-H1、基质金属蛋白酶9（MMP9）、金属蛋白酶2组织抑制因子（TIMP2）蛋白检测及其相关性在大肠癌患者Dukes分期、治疗和预后中的意义。方法 应用免疫组化SABC法检测30例DukesB期大肠癌淋巴结细胞角蛋白20（CK20）和癌组织nm23-H1、MMP9、TIMP2蛋白表达,另对同期30例DukesC和D期大肠癌患者检测nm23-H1、MMP9和TIMP2;随访、记录患者的临床病理参数和生存资料,分析其相关性。结果 （1）26．7％DukesB期大肠癌患者、7．8％DukesB期大肠癌淋巴结存在CK20阳性。（2）DukesB期大肠癌nm23-H1、MMP9表达与DukesC和D期差异显著（P〈0．05）;nm23-H,表达下降和（或）MMP9表达增强与LNMM相关（P〈0．05）,两者预测大肠癌LNMM敏感性和特异性分别为62．5％和81．8％、75．0％和69．8％,联合检测特异性则达90．9％;而TIMP2与Dukes分期、LNMM无关。（3）DukesB期LNMM（＋）患者癌复发转移率明显高于同期LNMM（-）组（P〈0．05）,而生存率则降低（P〈0．05）;nm23-H1（-）LNMM（＋）、MMP9（＋）LNMM（＋）患者生存期明显短于nm23-H1（＋）LNMM（-）、MMPq（＋）LNMM（-）组（P〈0．05）。结论 CK20免疫组化可检出大肠癌LNMM;DukesB期大肠癌nm23-H1、MMP9表达与LNMM相关,且表达异常LNMM患者预后差;联合检测淋巴结CK20和癌组织rim23-H1、MMP9表达,对大肠癌Dukes分期、术后辅助化疗和预后判断有重要意义。     

大肠癌中VEGF和PTEN的表达及意义

目的探讨VEGF和PTEN蛋白在大肠癌中的表达情况以及临床病理意义。方法采用免疫组织化学方法检测95例大肠癌、20例正常大肠组织中VEGF和PTEN蛋白的表达情况。结果 95例大肠癌组织中VEGF和PTEN蛋白阳性表达率分别为67.4%和30.5%。大肠癌组织中VEGF表达阳性率显著高于正常大肠组织对照组（χ2=15.34,P〈0.01）,而PTEN表达阳性率显著低于正常大肠组织对照组（χ2=32.61,P〈0.01）。VEGF高表达和PTEN蛋白低表达与大肠癌的浸润深度、淋巴结转移及Dukes分期密切相关,而与肿瘤的位置、组织学分级、患者年龄和性别无关。大肠癌组织中VEGF与PTEN表达呈负相关（χ2=13.76,P〈0.01）。结论在大肠癌组织中VEGF的高表达与PTEN的低表达与大肠癌的发生、发展、浸润转移密切相关,检测VEGF和PTEN蛋白表达可作为评价大肠癌生物学行为及判断预后的参考指标,具有一定的临床意义。     

24 大肠癌组织中EphA2，VEGF和MMP9蛋白的表达及其相关性研究

为探讨大肠癌组织中EphA2，VEGF和MMP9蛋白的表达及其与大肠癌生物学行为的关系。笔者应用免疫组织化学S-P法检测69例大肠癌组织及30例远癌肠黏膜中EphA2，VEGF，MMP9蛋白的表达。结果示,大肠癌组织中EphA2蛋白（100%）表达显著高于远癌肠黏膜（80.0%）（P<0.01）,且与Dukes分期、肿瘤组织分化程度及肉眼类型有关（P<0.05），而与年龄无关（P>0.05）。VEGF蛋白及MMP9蛋白在大肠癌中的表达均显著高于远癌肠黏膜(均P<0.01)，与Dukes分期有关（P<0.05），但与年龄、肿瘤组织分化程度及肉眼类型等无关（均P>0.05）。EphA2蛋白在大肠癌中的表达与VEGF，MMP9呈正相关（r1=0.404，P1=0.000;r2=0.282，P2=0.000）。提示联合检测EphA2,VEGF和MMP9有助于对大肠癌侵袭及转移能力的评估，对大肠癌的预后判断可能具有一定的临床意义。     

大肠癌术中门静脉血CK20 mRNA检测临床意义的探讨

目的检测大肠癌患者门静脉和外周血中细胞角蛋白(CK20)mRNA,探讨它作为大肠癌肿瘤细胞血行播散标志的临床意义。方法应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,检测63例大肠癌患者术中抽取的门静脉和外周血中CK20 mRNA和癌胚抗原(CEA)表达的阳性率,并对所测结果进行分析和比较。结果Ducks A,B期和Ducks C,D期患者门静脉血CK20 mRNA阳性表达均明显高于外周血,差异有统计学意义。随着病情进展,门静脉和外周血中CK20 mRNA表达均显著提高(65% vs 96%;33% vs 54%),但仅门静脉结果差异有统计学意义(P<0.005,χ2=8.65)。比较不同时期不同部位CK20 mRNA与CEA表达差异时,除Ducks A,B期患者门静脉血中CK20 mRNA阳性率较CEA阳性率为高且具有统计学意义外,Ducks C,D期门静脉组和各期外周血组中CK20 mRNA阳性率和CEA阳性率差异无统计学意义。结论大肠癌患者门静脉中CK20 mRNA含量高于外周血,门静脉和外周血中CK20 mRNA的阳性表达可随病情进展而增加,因此可作为大肠癌肿瘤细胞血行播散标志,应用于手术后预后判断。     

大肠癌患者门静脉血癌细胞的检测及临床意义

目的 探讨门静脉血管癌细胞与大肠癌肝转移的关系。方法 以非核素ＲＴ－ＰＣＲ方法,对５４例大肠癌患者门静脉血中结肠癌细胞的标志物细胞角质蛋白２０（ＣＫ２０）进行了检测。结果 ５４例中,４１例门静脉血中检出ＣＫ２０阳性表达,阳性率７５．９％,ＣＫ２０阳性检出与Ｄｕｋｅｓ分期,肝转移存在显著性相关,随着Ｄｕｋｅｓ分期的进展ＣＫ２０阳性率显著增加,随访发现,门静脉血ＣＫ２０扩增阳性者,术后发生肝转移机会增     

CK19/20检测对结直肠癌微转移的诊断意义

目的 探讨 CK19/20mRNART-PCR检测对结直肠癌微转移的诊断意义。方法 采用RT-PCR逆转录多聚酶链反应）方法检测42例结、直肠癌患者及对照组6例非恶性病变腹部手术患者骨髓血、门静脉血和外周血CK19mHNA及 CK20 mRNA的表达。结果 对照组6例患者无 CK19及 CK20阳性表达,CK19及CK20在42例结、直肠癌患者骨髓血、门静脉血及外周血中阳性表达分别为24/42、21/42、11/42及27/42、18/42、11/42,两间无显著差异（P>0.05）,骨髓和门静脉中表达比外周血高（P<0.01）,Dukes　C 期患者表达高于Dukes A、B期（P<0.05）。结论 CK19、CK20的RT-PCR检测是较敏感和特异的结、直肠癌微小转移指标,阳性表达患者有较高发生远处转移的危险。     

结直肠癌中抑癌基因ING1的表达研究

目的探讨抑癌基因ING1及其蛋白p33/ING1在结直肠癌中的表达。方法用RT-PCR检测35例散发性结直肠癌中ING1mRNA的表达水平,并应用S-P法检测60例散发性结直肠癌及正常黏膜组织中p33/ING1蛋白的表达。结果结直肠癌组织、正常黏膜组织中p33/ING1蛋白阳性表达率分别为43.3%(26/60)、100%(60/60),两者比较差异有统计学意义(P<0.01)。p33/ING1在无淋巴结转移组及淋巴结转移组中的阳性表达率分别为57.6%(19/33)、25.9%(7/27),两者比较差异有统计学意义(P<0.05)。在DukesA、B期和DukesC、D期患者癌组织中p33/ING1的阳性表达率分别为56.7%(17/30)、30.0%(9/30),两者比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论ING1及p33/ING1蛋白的低表达与散发性结直肠癌发生、发展密切相关,临床分期越差者表达水平越低。     

门静脉血CEA—mRNA、CK20-mRNA动态检测对早期诊断结直肠癌肝转移的意义

目的动态检测结直肠癌患者门静脉血CK20mRNA、CEAmRNA的表达情况，探讨其对早期诊断结直肠癌肝转移的临床意义。方法40例结直肠癌患者随机分为两组（各20例），实验组术中留置门静脉埋植式给药装置（implantable drug delivery system，IDDS），术后常规随访加用荧光定量RT—PCR方法动态检测门静脉血CK20mRNA、CEAmRNA的表达情况；对照组常规术后随访。结果两组病例术后发生肝转移的时间和比例无显著性差异，发生肝转移的病例中，在影像学检查检出病灶的同时，几乎均有外周血CEA的增高，3例未发生肝转移的病例也可见外周血CEA的增高，实验组发生肝转移的病例则在影像学检查检出病灶之前3-9月即有门静脉血CK20mRNA、CEAmRNA的表达阳性。结论门静脉血CEA—mRNA、CK20-mRNA动态检测比外周血CAE检测和影像学检查更敏感、特异性更高，是早期诊断结直肠癌肝转移的有效方法。     

大肠癌患者外周血CK20 mRNA的表达及其意义

目的　探讨大肠癌患者外周血CK2 0mRNA的表达及其意义。方法　用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)方法检测 4 2例大肠癌患者术前、术后外周血及 2 0例大肠癌患者新鲜癌组织标本中CK2 0mRNA的表达 ,另以 2 0例健康成年自愿者作对照。结果　 4 2例大肠癌患者外周血CK2 0mRNA呈阳性表达者术前为 19例(45 .2 4 % ) ,术后为 14例 (33.33% ) ;2 0例大肠癌患者新鲜癌组织中CK2 0mRNA表达均为阳性。而正常对照组2 0例外周血CK2 0mRNA表达均为阴性。且大肠癌外周血CK2 0mRNA阳性表达与组织学类型无关 (P >0 .0 5 ) ,但与有无淋巴结转移、肝转移及Dukes分期有关 (P<0 .0 5 )。结论　检测外周血中CK2 0mRNA表达将有助于大肠癌的早期诊断、预后的判断及治疗方案的制定。     

结直肠癌患者血液中CK20mRNA的表达

目的探讨结直肠癌患者血液中CK20 mRNA表达及其临床意义。方法采用RT-PCR法检测61例结直肠癌患者术前外周血和术中门静脉血以及20例健康自愿者与10例结直肠息肉患者外周血中CK20 mRNA表达。结果 61例结直肠癌患者术前外周血CK20 mRNA表达阳性率为41.0%(25/61),术中门静脉血中CK20mRNA表达阳性率为45.9%(28/61),两者差异无统计学意义(P>0.05)。结直肠癌患者外周血和门静脉血中CK20 mRNA表达均与肿瘤TNM分期?浸润深度?远处转移和区域淋巴结转移有关(P<0.05)。20例健康自愿者和10例结直肠息肉患者外周血中均无CK20 mRNA表达。结论 CK20是结直肠癌患者血液中反映微转移较为特异的肿瘤标志物,结直肠癌患者血液中CK20 mRNA表达与肿瘤的分期、浸润和转移有关。