叶酸靶向超顺磁性氧化铁-多巴胺-叶酸纳米复合物的制备及体外MR成像

目的 探讨叶酸靶向超顺磁性氧化铁-多巴胺-叶酸(NP-DPA-FA)纳米复合物对叶酸受体(FR)阳性肝癌细胞的靶向性及利用MRI对其进行监测的可行性。方法 ①制备NP-DPA-FA纳米复合物。②对Bel-7402细胞进行普鲁士蓝染色及体外竞争抑制试验。③将NP-DPA-FA复合物与Bel-7402人肝癌细胞及HL-7702正常人肝细胞孵育2 h后,进行普鲁士蓝染色及体外MR成像,观察其T2WI信号强度变化,并计算信号强度变化率。结果 普鲁士蓝染色显示Bel-7402细胞内可见大量铁颗粒沉积,HL-7702细胞内铁颗粒沉积少见。Bel-7402细胞抑制竞争试验显示细胞内铁颗粒极少。铁浓度不同的NP-DPA-FA复合物分别与Bel-7402细胞及HL-7702细胞孵育后,MRI显示Bel-7402细胞的信号强度随NP-DPA-FA复合物铁浓度的升高而明显减低,HL-7702细胞信号强度减低相对不明显。结论 叶酸介导的磁性纳米颗粒复合物对Bel-7402人肝癌细胞具有靶向性,应用MRI可对其进行监测。     

叶酸介导靶向高分子造影剂的制备及体外识别研究

目的 合成叶酸介导靶向的聚乳酸共聚物,以其为靶向膜材制备靶向造影剂,表征造影剂性质.方法 以自制的叶酸-脯氨酸-乳酸共聚物(Fa-PLLA-Hpr)为膜材,应用双乳化-冷冻干燥法制备叶酸介导靶向高分子造影剂(MB-Fa-PLLA).采用激光粒径测量仪检测微泡的粒径,通过光镜观察该靶向造影剂(靶向造影剂实验组)对人卵巢癌SKOV3细胞的体外寻靶情况,并与游离叶酸干预组及空白对照组(普通微泡)比较.结果 FT-IR表征了靶向膜材的结构.成功制备叶酸介导靶向聚乳酸共聚物MB-Fa-PLLA.MB-Fa-PLLA在光镜下大小分布均匀,形态圆整,65％的微粒直径分布为500～800 nm,呈单峰分布,其亲水性较普通高分子微泡更好.体外寻靶实验显示,MB-Fa-PLLA可以较多并牢固地聚集到SKOV3细胞表面,而普通微泡未见特异性结合.结论 MB-Fa-PLLA亲水性好,对高表达叶酸受体的SKOV3细胞具有较强特异性亲合力,其有望成为靶向显像叶酸高表达肿瘤的理想造影剂.     

叶酸偶联聚合物靶向胶束的制备和表征

背景:聚合物胶束具有对难溶性药物的增溶作用,是抗肿瘤药物的良好载体,在聚合物胶束表面修饰以靶识别分子叶酸,可以促进叶酸受体阳性的肿瘤细胞对载药聚合物胶束的摄取.目的:制备载疏水性小分子的叶酸偶联胶束并对其进行表征.方法:利用膜水化法制备载香豆素6的聚合物胶束,即将香豆素6的氯仿/甲醇溶液、甲氧基聚乙二醇-磷脂酰乙醇胺的氯仿/甲醇溶液和叶酸-聚乙二醇-磷脂酰乙醇胺的氯仿/甲醇溶液混合,旋蒸除去有机溶剂,形成药膜,真空干燥过夜,然后在 50 ℃水浴下加入Hepes缓冲液并磁力搅拌30 min,载药胶束即形成;同时制备不含叶酸-聚乙二醇-磷脂酰乙醇胺的普通载药胶束.对获得的普通胶束和叶酸偶联胶束利用透射电镜观察形态及粒径、动态光散射法检测粒径分布和高效液相色谱法分析载药量与包封率.结果与结论:载药的叶酸偶联胶束及普通胶束在透射电镜下粒径约为60 nm,粒径分布较均匀;动态光散射法检测到溶液中的胶束平均粒径约100 nm;利用高效液相色谱法检测得到胶束载药量和包封率分别在0.7%和15%左右.结果显示叶酸偶联载药胶束对于难溶性药物具有明显的增溶作用,可用于细胞及肿瘤模型评价其叶酸受体靶向性.     

叶酸靶向超声造影剂的制备及体外寻靶实验研究

目的 制备偶联叶酸的靶向超声微泡造影剂,鉴定其基本性质,并探讨体外寻靶能力.方法 将DSPE-PEG(2000)Folate溶入微泡成膜材料中,制备叶酸靶向超声微泡造影剂.用DFY型超声图像定量分析诊断仪检测微泡粒径和浓度.通过光镜和激光共聚焦显微仪观察该靶向造影剂对SKOV3细胞的体外寻靶情况,以普通超声微泡作对照.结果 靶向超声微泡的大小、粒径及分布与普通超声微泡相似.体外寻靶试验显示,该靶向微泡可以较多并牢固地聚集到SKOV3细胞表面,而普通微泡对照组未见特异性结合.结论 成功制备出偶联叶酸的靶向超声微泡造影剂.该造影剂在体外对高表达叶酸受体的SKOV3细胞具有较强的特异性亲合力,有望成为靶向显像卵巢癌的理想造影剂.     

叶酸受体靶向液态氟碳纳米粒造影剂的制备及体外寻靶

目的 制备叶酸受体靶向的被脂质包裹的液态氟碳纳米粒造影剂,鉴定其基本性质,观察其体外靶向性能.方法 以氯仿将偶联叶酸的磷脂[DSPE-PEG(2000)]按照一定比例溶解在成膜材料中,用旋转蒸发仪去除有机溶剂成膜,加入磷酸盐缓冲液重新水合后,在悬液中逐滴加入适量液态氟碳,均质乳化后得到叶酸受体靶向的纳米粒造影剂.在人卵巢癌SKOV3细胞中验证该造影剂的靶向性能(靶向造影剂组),并与不带叶酸的普通造影剂组和游离叶酸干预组相比较.结果 叶酸受体靶向液态氟碳纳米粒造影剂外观与普通造影剂无明显差别.体外靶向实验发现此纳米粒造影剂聚集且牢固地黏附于SKOV3细胞,而普通造影剂组和游离叶酸干预组则未见明显特异性结合.结论 成功制备了偶联叶酸的被脂质包裹的液态氟碳纳米粒造影剂,该造影剂对高表达叶酸受体的SKOV3细胞具有较强的亲和力,有望成为卵巢癌靶向显影与治疗的理想分子探针.     

叶酸受体介导的药物靶向投递系统研究进展

目的　肿瘤细胞膜上表达一些正常细胞不表达或低表达的受体 ,它可成为肿瘤治疗的靶点。一些肿瘤组织高水平表达叶酸受体 ,利用多聚阳离子为载体 ,结合药物 /DNA形成叶酸交联复合物 ,通过叶酸受体介导的基因转移方式 ,将药物 /DNA靶向投递到肿瘤组织或细胞 ,具有转移效率高和靶向性投递的特点。现就叶酸受体、叶酸受体介导的内化机理、基因药物、蛋白毒素、放射性药物靶向投递等方面作一综述     

同型半胱氨酸、叶酸与妊娠

血浆中同型半胱氨酸（Hcy）升高是心血管疾病的独立危险因素之一，也与脑血管疾病，糖尿病的血管并发症，肾血管病等的发生和进展有关。Hcy升高与叶酸、VB12等B族维生素缺乏有关，也是此类维生素缺乏的指标之一。在妇产科领域，Hcy升高和叶酸减低与妊娠并发症和新生儿先天缺陷的关系也引起广泛关注。     

叶酸受体及其在介导药物靶向肿瘤细胞治疗中的应用

肿瘤细胞表面过度表达一系列受体,能与特异性的配体结合并诱导细胞内化.以这些受体为作用靶点,使药物与特异性配体结合即可将药物主动靶向肿瘤细胞.叶酸受体在多种肿瘤细胞特别是髓细胞白血病细胞中都有过度表达,它可通过介导细胞内化将叶酸摄取入细胞胞浆,利用叶酸受体进行肿瘤,特别是白血病的靶向性治疗颇有应用前景.本文就叶酸受体生物学性质、染色体定位及与配体的相互作用,叶酸受体在正常组织、肿瘤组织,特别是白血病细胞中的分布特点,以及叶酸受体介导主动靶向肿瘤细胞,特别是白血病细胞的研究进展进行了概述.     

脑梗死患者血浆同型半胱氨酸变化及叶酸的干预作用

目的:了解同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)、叶酸水平与脑梗死的关系,观察叶酸干预治疗高Hcy血症的疗效。方法:脑梗死组患者26例以及非脑梗死对照组患者18例,用酶免分析法检测血浆Hcy水平,放免法测定叶酸浓度。脑梗死组中高Hcy血症患者给予叶酸5mg,每日3次,连续1周,观察服药前后血浆Hcy水平变化。结果:脑梗死组患者血浆Hcy浓度明显高于对照组,叶酸浓度低于对照组,而且伴有颈动脉斑块患者的Hcy浓度高于无颈动脉斑块者;高Hcy血症的脑梗死患者用叶酸治疗1周,血浆Hcy浓度平均下降4μmol/L。结论:脑梗死患者血浆Hcy水平明显升高,叶酸干预治疗能使高Hcy血症脑梗死患者血浆Hcy浓度明显下降。     

叶酸靶向液态氟碳脂质纳米粒的制备及其超声分子显像卵巢癌实验

目的 制备叶酸修饰的液态氟碳脂质纳米粒,并探讨其在不同温度下的稳定性及在体内外模型中靶向结合卵巢癌SKOV3细胞的效能。方法 应用薄膜水化法和旋转蒸发法制备叶酸靶向液态氟碳脂质纳米粒。观察纳米粒的基本特性及在4℃和37℃水浴条件下的稳定性。分为靶向组（叶酸靶向）、非靶向组（普通磷脂）及拮抗组（游离叶酸干预）,通过卵巢癌SKOV3细胞,进行脂质纳米粒的体外靶向实验。并将8只荷SKOV3肿瘤裸鼠分为A组（靶向）和B组（非靶向）,进行脂质纳米粒的体内靶向实验。结果 本实验制备的纳米粒大小均匀,粒径约（321.20±67.21）nm,表面电位-50 mV。在4℃条件下,纳米粒可稳定保存48 h;在37℃水浴条件下,1 h内纳米粒的粒径无明显改变。靶向组纳米粒与SKOV3细胞的结合率最高,拮抗组最低。靶向组肿瘤细胞内可见大量被荧光染料DiI标记为红色的纳米粒;非靶向组和拮抗组仅见少量红色荧光。A组裸鼠肿瘤局部可见较多被荧光染料DiR标记为红色的纳米粒,而B组肿瘤局部未见明显红色荧光。且A组裸鼠各重要脏器离体荧光成像肿瘤荧光明显强于B组。结论 本实验制备的叶酸靶向液态氟碳脂质纳米粒具有一定的稳定性,能够靶向结合于卵巢癌SKOV3细胞。     

同型半胱氨酸及叶酸检测在脑血管疾病中的临床评价

目的探讨脑血管疾病血液同型半胱氨酸（Hcy）浓度与叶酸水平的关系。方法选取脑血管疾病住院患者63例,其中脑出血组24例、脑梗死组39例,同年龄健康体检人群的对照组40例,应用循环酶法测定血清Hcy,用化学发光法检测血清叶酸的浓度,并进行比较。结果脑出血组和脑梗死组与对照组比较,血清Hcy和叶酸水平的差异均有统计学意义（P〈0.05）;脑出血组和脑梗死组的血清叶酸的水平随着血清Hcy的浓度的升高而下降,呈负相关关系（r=-0.14和-0.17）。结论脑血管疾病组患者血清Hcy升高,而叶酸水平降低,说明高Hcy血症是脑血管疾病的危险因素之一,对脑血管疾病高危人群应定期进行Hcy和叶酸水平检测,通过补充叶酸等治疗措施,使Hcy水平控制在正常范围内,以降低脑血管疾病的发生。     

血液透析降低同型半胱氨酸、叶酸效果分析

慢性肾衰竭(CRF)患者血浆同型半胱氨酸(Hcy)明显升高,Hcy是CRF患者心血管事件发生的独立危险因素.本文就血液透析对 Hcy、叶酸影响报道如下.     

补充叶酸对社区原发性高血压患者同型半胱氨酸的影响

目的了解叶酸对于社区原发性高血压患者同型半胱氨酸水平的影响。方法在两个功能社区内选取原发性高血压患者208名,采用随机数字法分配到干预组和对照组中,分别予以常规降压药物+叶酸(2.5 mg,2次/d)和常规降压药物,连续双盲治疗1年。于给药前测定两组Hcy水平并于治疗1年后进行随访同时测定Hcy水平。结果干预组治疗前基线血浆Hcy水平及常规降压药物+叶酸干预1年后血浆Hcy水平为[(15.3±4.6)μmol/L,(9.1±2.7)μmol/L],干预后Hcy水平较干预前明显降低(P0.05);对照组治疗前后血浆Hcy水平为[(14.2±4.8)μmol/L,(14.9±4.7)μmol/L],差异无统计学意义(P0.05),与干预组基线Hcy水平比较,差异也无统计学意义。结论对于原发性高血压患者补充适当的叶酸能有效降低血Hcy水平,从而降低其心脑血管事件的发生率。     

叶酸、弥可保对冠心病患者的血浆同型半胱氨酸血症的影响

目的研究血浆同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)与冠心病(CHD)的关系及叶酸、弥可保对其的影响.方法测定68例CHD患者和30例健康人血浆Hcy水平,并对32例冠心病合并高Hcy血症的患者用叶酸、弥可保进行干预治疗,每天服用叶酸5 mg,每日1次,弥可保500μg,每日1次,连用4周,4周后再次测定其血浆Hcy水平.结果CHD患者血浆Hcy(24.0±5.5)μmol/L显著高于正常对照组(9.8±2.9)μmol/L,P＜0.01,CHD患者中有32例合并高Hcy血症(36.5±6.6)μmol/L,进行叶酸、弥可保治疗4周后,Hcy明显下降至(11.3±3.1)μmol/L,P＜0.01.结论高Hcy血症与冠心病发病有关,叶酸、弥可保可显著降低冠心病合并高Hcy血症患者的血浆Hcy水平,进而减少冠心病的发病.     

叶酸分子靶向载顺铂磁性纳米药物制备及表征

背景：醛基化海藻酸钠具有良好的水溶性和组织相容性,利用其改性Fe3O4磁性纳米颗粒可增加表面活性和稳定性,叶酸的修饰可赋予载体分子靶向性。目的：制备具有叶酸受体靶向及磁靶向的载顺铂磁性纳米药物（CDDP-FA-ASA-MNPs）。方法：采用高碘酸钠氧化法制备醛基化海藻酸钠,叶酸的羧基经二环己基碳二亚胺和N-羟基琥珀酰亚胺活化后合成FA与双端氨基聚乙二醇的耦连产物FA-PEG,化学共沉淀法制备Fe3O4,海藻酸钠侧链含有大量羧基,85℃下与Fe3O4纳米颗粒表面的羟基形成化学键结合,然后通过雪夫氏碱将FA-PEG与醛基化海藻酸钠相连接,最后根据配位络合的原理,顺铂分子中的-Cl被海藻酸钠的羧基取代,形成稳定的叶酸和醛基化海藻酸钠改性载顺铂磁性纳米复合物。结果与结论：所制备的磁性纳米药物呈颗粒状,稳定分散于水溶液中,Fe3O4磁核平均粒径为（8.116±0.24）nm,流体力学直径为（110.9±1.7）nm,zeta电位为（-26.45±1.26）mV,最大饱和磁化强度为56.2emu/g,顺铂包封率为（49.05±1.58）%,载药量为（14.31±0.49）%。体外实验证实,叶酸分子靶向载顺铂磁性纳米药物能被叶酸受体表达阳性的鼻咽癌细胞HNE-1和喉癌细胞Hep-2选择性摄取,而叶酸受体表达阴性的鼻咽癌细胞CNE-2则不摄取。提示所制备的CDDP-FA-ASA-MNPs具有良好的水溶性和稳定性,能被叶酸受体表达阳性的鼻咽癌和喉癌细胞摄取。     

叶酸修饰聚合物和脂质体药物载体及其靶向治疗的研究现状

背景:叶酸介导的靶向药物载体被广泛研究。目的:总结叶酸修饰靶向聚合物和脂质体药物载体的研究现状。方法:由作者应用计算机检索2000-01/2010-12Web of Science和CNKI数据库,选择叶酸修饰靶向聚合物和脂质体药物载体的相关文章,英文检索词为"folic acid,drug carriers,targeted delivery system,polymer,liposome",中文检索词为"叶酸,药物载体,靶向,聚合物,脂质体"。共纳入相关文献19篇进行综述。结果与结论:叶酸受体在多种肿瘤细胞表面过度表达,而在多数正常组织中的表达仅限于一些难于进入血液循环的上皮细胞顶膜。正因为叶酸受体表达的特性,叶酸受体天然配体——叶酸成为将药物靶向到肿瘤细胞的重要分子。叶酸具有与叶酸受体的高亲和力、低免疫原性等优点,这使得叶酸介导肿瘤靶向的研究得到迅速发展。含叶酸靶向的药物载体体系中,主要分为3大类:即人工合成高分子载体体系、脂质体和天然高分子载体体系。     

叶酸分子靶向载顺铂磁性纳米药物制备及表征

背景:醛基化海藻酸钠具有良好的水溶性和组织相容性,利用其改性Fe3O4磁性纳米颗粒可增加表面活性和稳定性,叶酸的修饰可赋予载体分子靶向性。目的:制备具有叶酸受体靶向及磁靶向的载顺铂磁性纳米药物(CDDP-FA-ASA-MNPs)。方法:采用高碘酸钠氧化法制备醛基化海藻酸钠,叶酸的羧基经二环己基碳二亚胺和N-羟基琥珀酰亚胺活化后合成FA与双端氨基聚乙二醇的耦连产物FA-PEG,化学共沉淀法制备Fe3O4,海藻酸钠侧链含有大量羧基,85℃下与Fe3O4纳米颗粒表面的羟基形成化学键结合,然后通过雪夫氏碱将FA-PEG与醛基化海藻酸钠相连接,最后根据配位络合的原理,顺铂分子中的-Cl被海藻酸钠的羧基取代,形成稳定的叶酸和醛基化海藻酸钠改性载顺铂磁性纳米复合物。结果与结论:所制备的磁性纳米药物呈颗粒状,稳定分散于水溶液中,Fe3O4磁核平均粒径为(8.116±0.24)nm,流体力学直径为(110.9±1.7)nm,zeta电位为(-26.45±1.26)mV,最大饱和磁化强度为56.2emu/g,顺铂包封率为(49.05±1.58)%,载药量为(14.31±0.49)%。体外实验证实,叶酸分子靶向载顺铂磁性纳米药物能被叶酸受体表达阳性的鼻咽癌细胞HNE-1和喉癌细胞Hep-2选择性摄取,而叶酸受体表达阴性的鼻咽癌细胞CNE-2则不摄取。提示所制备的CDDP-FA-ASA-MNPs具有良好的水溶性和稳定性,能被叶酸受体表达阳性的鼻咽癌和喉癌细胞摄取。     

服用叶酸、维生素B_6对降低急性脑血管病患者血清同型半胱氨酸水平的结果观察

目的观察叶酸、维生素B6(V it B6)对降低急性脑血管病患者血清同型半胱氨酸(Hcy)水平的影响。方法采用荧光偏振免疫分析法测定急性脑血管患者82例,患者在常规治疗下随机分成叶酸组、V it B6组、叶酸加V it B6组和对照组。结果各组在药物使用前、后血清Hcy浓度下降显著,4组用药后组间比较差异无显著性,但治疗前后比较有差异。结论V it B6加服叶酸后明显降低血清Hcy浓度,可用于急性脑血管病预防。