人巨细胞病毒抑制粒-单及红系祖细胞的体外增殖及干预研究

探讨人巨细胞病毒 (HCMV)抑制脐血粒 -单系祖细胞的 (CFU GM)、红系爆式祖细胞 (BFU E)及红系祖细胞 (CFU E)的体外增殖和黄芪注射液与更昔洛韦(GCV)对此的干预作用 ,采用造血祖细胞体外培养、聚合酶链反应 (PCR)技术 ,培养、观察、计数CFU GM、BFU E及CFU E集落产率、抑制率、提高率 ,集落峰值时间和集落维持时间 ,并用PCR检测集落细胞内HCMV DNA。结果显示 :①HCMVAD169对CFU GM、BFU E及CFU E均有抑制作用 ,其抑制作用与HCMV浓度有关 ,高浓度 ( 1∶1 0 ,1 1 0 0 )感染组与对照组比较集落产率明显下降 (P <0 0 1 ) ,集落维持的时间明显缩短 (P <0 0 1 ) ,集落峰值时间无明显差异 (P >0 0 5) ,而低浓度组 ( 1∶1 0 0 0 )无此作用 ;②PCR检测发现在HCMV感染的造血祖细胞内存在HCMV DNA ;③在 1∶1 0感染组中 ,加入黄芪注射液与更昔洛韦后 ,HCMVAD169感染的CFU GM、BFU E及CFU E集落产率明显增加 (P <0 0 1 )。结论 :①造血祖细胞是HCMVAD169的宿主细胞之一 ,HCMVAD169能直接感染造血祖细胞 ;②在体外HCMVAD169对CFU GM、BFU E、CFU E的生长 ,集落形成有明显的抑制作用 ;③黄芪与更昔洛韦有抗HCMV作用 ,能促进受HCMV感染的造血祖细胞集落增殖     

巨细胞病毒抑制多向祖细胞的增殖及干预研究

目的　在体外已证实人巨细胞病毒 (HCMV)能抑制骨髓造血祖细胞的增殖。该研究观察HCMV对脐血多向造血祖细胞 (CFU Mix)体外增殖的影响及黄芪和更昔洛韦 (GCV)对此的干预作用。方法　采用造血祖细胞体外培养技术 ,观察HCMV AD1 69感染的CFU Mix集落数、抑制率、提高率、集落峰值及集落维持时间 ;用聚合酶链反应 (PCR)技术检测集落细胞内HCMV AD1 69DNA。在 1∶1 0HCMV感染组中分别加入黄芪和 /或GCV ,观察黄芪和GCV干预HCMV AD1 69对CFU Mix增殖的抑制作用。结果　① 1∶1 0 ,1∶1 0 0 ,1∶1 0 0 0三种滴度HCMV AD1 69感染的CFU Mix集落数较对照组明显减少 (P <0 .0 5 ) ,集落数随病毒感染滴度的增高而减少 ,抑制率随病毒感染滴度的增高而逐渐增加 ;②各组集落峰值出现时间无明显差异 (P >0 .0 5 ) ,但感染组集落维持时间明显短于对照组 (P <0 .0 1 ) ;③ 1∶1 0 ,1∶1 0 0 ,1∶1 0 0 0病毒感染组中检测到HCMV AD1 69DNA ;④ 1∶1 0感染组中加入黄芪和 /或GCV后 ,HCMV AD1 69感染的CFU Mix集落数明显高于未加药 1∶1 0感染组 (P <0 .0 5 )。结论　CFU Mix是HCMV的宿主细胞之一 ,HCMV能直接感染造血祖细胞 ;在体外HCMV AD1 69对CFU Mix生长和集落形成有明显抑制作用 ;黄芪和GCV有明显的抗HCMV作用 ,二者联     

人巨细胞病毒感染对脐血巨核系祖细胞体外增殖的影响

目的　探讨人巨细胞病毒 (HCMV)对脐血巨核系祖细胞 (CFU Mk)体外增殖的影响及其机制。方法　采用造血祖细胞体外培养技术 ,观察、计数HCMV AD169感染的CFU Mk集落产率、抑制率、集落峰值及维持时间 ;并采用聚合酶链反应 (PCR)技术检测集落细胞内HCMV AD169DNA。结果　 1.HCMV AD169感染组集落产率较对照组明显减少 ,HCMV对CFU Mk集落的抑制程度与病毒滴度有关 ,集落产率随病毒感染滴度增高而减少 ,抑制率随病毒感染滴度增高而渐增加 ;各组集落峰值出现时间无明显差异 (P均 >0 .0 5 ) ,但各感染组集落维持时间明显短于对照组 (P <0 .0 1) ;2 .用PCR在集落细胞内检测到HCMV AD169DNA。结论　CFU Mk是HCMV的宿主细胞之一 ,HCMV能直接感染CFU Mk ;在体外HCMV AD169对CFU Mk的增殖和集落形成有明显抑制作用 ,此作用可能与临床HCMV感染后患者血小板减少有关     

更昔洛韦和黄芪对巨细胞病毒感染所致造血祖细胞增殖抑制的影响

目的　探讨更昔洛韦 (GCV)和黄芪对巨细胞病毒 (CMV)感染所致脐血粒 巨噬系祖细胞 (CFU GM)、红系早、晚期祖细胞 (CFU E、BFU E)、多向造血祖细胞 (CFU Mix)及巨核系祖细胞(CFU Mk)体外增殖抑制的影响。方法　采用造血祖细胞培养技术 ,培养、观察、计数巨细胞病毒AD169株 (CMV AD169)感染CFU GM、CFU E、BFU E、CFU Mix和CFU Mk后各祖细胞集落、峰期及维持时间 ;用聚合酶链反应 (PCR)检测集落细胞内CMV DNA ;根据细胞毒性实验结果 ,将GCV和黄芪作用于CMV感染的CFU GM、CFU E、BFU E、CFU Mix及CFU Mk祖细胞 ,再分别计数集落、峰期及维持时间。结果 ( 1)CMV感染组CFU GM、CFU E、BFU E、CFU Mix及CFU Mk集落数较对照组明显减少 (P <0 0 1) ;集落维持时间CMV感染组较对照组明显缩短 ;( 2 )用PCR在感染组集落细胞内检测到CMV DNA的存在 ;( 3)黄芪和 (或 )GCV作用于CMV感染的祖细胞后 ,与病毒组比较集落维持时间明显延长 ,集落数和集落增殖率明显提高 (P <0 0 1) ,黄芪组集落增殖率分别为 2 7 2 %、4 5 2 %、4 9 1%、39 0 %、11 9% ;GCV组分别为 37 4 %、74 2 %、71 7%、6 7 4 %、38 9% ;GCV 黄芪组分别为 5 3 6 %、83 8%、88 7%、87 8%、6 1 5 %。结论　CMV AD169在体外能明显抑制CFU GM、CFU E、BFU     

人巨细胞病毒感染对人骨髓粒－单系祖细胞生长的影响

目的探讨人巨细胞病毒(HCMV)对人骨髓粒－单系祖细胞(GM－CFUc)集落形成能力的影响。方法采用造血祖细胞培养技术，以HCMVAD169持续攻击骨髓GM－CFUc，观察计数GM－CFUc集落、簇的产率及集落的大小和维持的时间。结果①HCMV感染组GM－CFUc集落和簇的产率明显低于对照组(P＜0.01)；②HCMV感染GM－CFUc后，大集落的产率明显低于对照组；③集落维持的时间缩短，而集落出现峰值的时间无明显差异。结论在体外HCMV对GM－CFUc生长、集落的形成有明显抑制作用，提示HCMV感染患儿粒细胞减少可能与HCMV损伤GM－CFUc有关。     

黄芪注射液对人巨细胞病毒感染的粒-单系祖细胞体外增殖的影响

目的：探讨黄芪注射液对人巨细胞病毒(HCMV)感染的粒—单系祖细胞(CFU-GM)体外增殖的影响。方法：采用造血祖细胞体外培养技术,用黄芪干预HCMV感染的CFU-GM,观察计数CFU-GM的产率,大小,峰期及维持时间。结果：①黄芪组每2×105个细胞中CFU-GM簇和集落的产率分别为 333.33±12.69 和81.23±4.93,病毒组每2×105个细胞中簇和集落的产率分别为 167.80±16.63,53.70±1.67,两者相比差异有显著性(P<0.01)。②黄芪组大集落的比例占(9.5±0.8)%,明显高于病毒组(2.7±1.0)%,P<0.01。③黄芪组大集落峰期出现早,集落和大集落维持时间长。结论：在体外黄芪注射液可以促进HCMV感染的CFU-GM增殖。     

特发性血小板减少性紫癜巨核系祖细胞巨细胞病毒感染的临床研究

目的特发性血小板减少性紫癜（ITP）是儿童常见的出血性疾病,其病因尚不十分清楚。很多研究表明,该病的发生与病毒感染密切相关。探讨人类巨细胞病毒（HCMV）感染巨核系祖细胞致ITP血小板减少的发病机制及其有效的治疗方法。方法HCMV相关ITP骨髓巨核细胞集落形成单位（CFU-MK）体外培养技术收集集落细胞,采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测HCMV晚期抗原基因mRNA,并给予更昔洛韦治疗。结果46例血清HCMV-DNAPCR阳性或血清HCMV-IgM阳性的ITP骨髓巨核细胞集落形成单位（CFU-MK）集落细胞HCMV晚期抗原基因mRNA阳性19例,更昔洛韦治疗有效16例;mRNA阴性27例,更昔洛韦治疗有效4例。阳性组疗效高于阴性组,P〈0．01,差异有统计学意义。结论HCMV可感染CFU—MK而成为1TP血小板减少的原因之一。巨核系祖细胞HCMV晚期抗原基因mRNA检测阳性者更昔洛韦治疗有效,能使血小板上升或恢复正常。     

巨细胞病毒感染对淋巴系祖细胞增殖的影响及其干预措施

目的探讨人类巨细胞病毒（HCMV）对淋巴系祖细胞（CFU-TL）体外增殖的影响、作用机制及其干预措施。方法本实验共分为空白对照组、灭活对照组、HCMV感染组、更昔洛韦（GCV）干预组、黄芪注射液（AMI）干预组5组。采用甲基纤维素半固体培养CFU-TL集落，不同浓度HCMV-AD169持续攻击CFU-TL，用AMI、GCV粉剂干预，观察CFU-TL集落形成：用四甲基偶氮唑盐法测HCMV对宿主细胞增殖活性的影响；用PCR检测CFU-TL集落细胞内HCMV-AD169DNA。结果1．与空白对照组及灭活对照组比较，各病毒感染组CFU-TL集落产率明显减少、维持时间明显缩短（P均〈0．01），抑制程度与病毒感染滴度呈剂量依赖关系；2．HCMV感染48、72、96、120h对宿主细胞增殖活性的影响与对照组比较均有显著差异（F分别为11．412，18．058，13．259，56．360 P均〈0．01）。3．PCR检测到HCMV感染组CFU-TL集落细胞内HCMV-AD169DNA。4．与HCMV感染组比较，HCMV＋AMI组、HCMV＋GCV组CFU-TL集落产生率明显增加，集落维持时间均显著延长（P均〈0．01）。结论HCMV在体外能抑制CFU-TL集落的增殖和分化；HCMV感染患儿免疫功能低下可能与HCMV直接抑制CFU-TL有关；GCV、AMI在体外能有效干预HCMV感染所致的CFU-TL增殖抑制的发生。     

人巨细胞病毒对造血系统的影响

目的 探讨人巨细胞病毒(HCMV)对造血系统的影响及其机制。方法 采用造血祖细胞体外半固体培养技术,研究HCMV AD169株对粒-巨噬系祖细胞(CFU-GM)、红系祖细胞(CFU—E)、多向造血祖细胞(CFU—Mix)及巨核系祖细胞(CFU-MK)集落生长的影响;分别用原位聚合酶链反应(IS-PCR)和聚合酶链反应(PCR)检测CFU-GM、CFU-Mix、CFU-MK及CFU-E集落细胞中的HCMV DNA;用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测CFU-E集落细胞中的晚期抗原(late antigen,LA)mRNA及CFU-MK集落细胞中的前早期抗原(immediate early antigen,IEA))mRNA;用免疫组化方法检测CFU—Mix集落细胞中HCMV早期蛋白P52。结果 HCMV AD169株在体外能明显抑制CFU—GM、CFU—E,CFU—Mix及CFU—MK的生长,抑制程度与病毒感染滴度呈剂量依赖关系;经IS-PCR或PCR检测发现病毒感染组CFU-GM,CFU-E,CFU-Mix及CFU-MK细胞中有HCMV DNA存在;RT—PCR检测发现病毒感染组CFU-MK细胞中有IEA mRNA的表达,而CFU-E细胞中的LA mRNA为阴性;免疫组化(IHC)检测发现病毒感染组CFU-Mix集落细胞中有HCMV P52的表达。结论 HCMV AD169可抑制CFU-GM,CFU-E,CFU-Mix及CFU-MK的分化和增殖;HCMV AD169对造血系统有直接损害作用。此作用可能是HCMV感染所致的粒细胞和血小板减少及贫血的原因之一。     

粒-巨噬细胞集落刺激因子联合白细胞介素-2活化的脐血造血细胞抗肿瘤作用的研究

为探讨粒 巨噬细胞集落刺激因子 (GM CSF)联合白细胞介素 2 (IL 2 )活化的脐血造血细胞体外杀伤白血病细胞株HL 6 0细胞的作用 ,以及对脐血粒 -巨噬造血祖细胞 (CFU GM)生成活性的影响 ,采用MTT比色法测定经GM CSF和 (或 )IL 2激活的脐血造血细胞的抗肿瘤活性及半固体培养法检测活化脐血CFU GM生成活性。结果显示 ,IL 2或GM CSF +IL 2组均可活化脐血产生对体外培养的白血病细胞株HL 6 0细胞的杀伤作用 ,杀伤率分别为 ( 6 7 2± 1 5 1 % )和 ( 6 3 4± 2 3 9% ) ;GM CSF单独应用不能活化脐血产生对白血病细胞株HL 6 0细胞的杀伤作用 :GM CSF或GM CSF +IL 2均可扩增脐血CFU GM ,其产率分别为 ( 1 36 1± 4 2 9) / 1 0 5MNC和 ( 90 1±30 3) / 1 0 5MNC ;IL 2单独应用对CFU GM产率有减少的趋势。结果表明 ,IL 2或GM CSF +IL 2均能活化脐血产生明显的抗肿瘤活性 ;GM CSF或GM CSF +IL 2组使脐血CFU GM得到了明显的扩增 :脐血造血祖细胞治疗和免疫治疗相结合将是肿瘤高剂量化疗中一种有希望的治疗方法。     

儿童心前区疼痛原因探讨

目的：探讨小儿心前区疼痛的临床特点。方法：对１０５例心前区疼痛患儿采用统一方法，包括详细的病史调查，物理诊断，胸部Ｘ线、常规心电图、Ｈｏｌｔｅｒ心电图、超声心动图检查，心肌酶谱、总血脂及胆固醇测定，并对部分患儿施行了脑电图（ＥＥＧ）检查。结果：心前区疼痛由心脏病所致者少见（占９５％），精神负担过重及过分溺爱的患儿心前区疼痛症状往往比较明显。结论：心源性心前区疼痛，必然有Ｈｏｌｔｅｒ心电图缺血性改变存在。心前区疼痛９０％以上属特发性，病因是良性的，呈自限性，而预后良好。     

多发性抽动患儿的智力水平和智力结构缺陷研究

目的：了解多发性抽动（ＴＳ）的智力水平和智力结构情况，并探讨氟哌啶醇等药物对ＴＳ患儿的智力功能有无影响。方法：采用韦氏儿童智力量表（ＷＩＳＣ－ＣＲ），对３９例（未用药组２２例和用药组１７例）ＴＳ患儿的智力功能进行测试，并与１８例年龄和性别相匹配的正常对照组儿童比较。结果：ＴＳ组的总智商（ＦＩＱ）、言语智商（ＶＩＱ）和操作智商（ＰＩＱ）与对照组相比无显著性差异，但其背数和译码分测验量表分显著低于对照组；用药组各项智力测验结果与未用药组相比无显著性差异。结论：ＴＳ患儿总的智力水平正常，但其智力结构中的记忆和（或）不分心因子存在一定的缺陷。氟哌啶醇等药物对ＴＳ患儿的智力功能无明显影响。     

汉字阅读障碍患儿临床特点的研究

目的　探讨汉字阅读障碍患儿的临床特点。方法　运用《修订后阅读测验》、自制病史调查表及Ａｃｈｅｎｂａｃｈ 儿童行为量表对４０ 例阅读障碍患儿和８０ 例正常儿童进行对照研究。结果　病例组患儿智商和阅读成绩均低于对照组（ｔ 分别为５．８８９、１５．３１７，Ｐ＜０．００１） ；病例组患儿在单字（ 词）的辨认及发音、朗读、阅读理解中出现各种问题的次数均多于对照组（ Ｐ均＜ ０．０５） ；病例组合并语言发育问题、拼音学习困难、书写问题、多动的比率均高于对照组（ Ｐ均＜０ ．０５）；起病时间与症状严重程度呈负相关（ｒｓ′＝ －０．６０１，Ｐ＜ ０．０１）。结论　汉字阅读障碍中阅读技能的损害涉及阅读中各个环节；起病越早，症状越重；患儿容易合并语言发育问题、拼音学习困难、书写问题和多动。     

预防性皮质激素吸入与三联雾化吸入治疗哮喘急性发作疗效观察

目的　评价缓解期预防性吸入皮质激素必可酮对儿童哮喘急性发作时博利康尼、普米克和爱全乐三联雾化治疗效果的影响。方法　对 36例哮喘急性发作儿童联合应用三联药物压力雾化吸入治疗 ,采用配对t检验观察治疗前后的疗效 ,采用秩和检验分析缓解期预防性吸入皮质激素对急性发作时压力雾化吸入治疗效的影响果。结果　缓解期规则预防性吸入皮质激素组哮喘急性发作时 ,三联药物压力雾化吸入治疗效果优于不吸入和不规则吸入组 ,P <0 0 5 ;急性发作期三联药物压力雾化治疗疗效满意 ,P <0 0 1。结论　缓解期预防性吸入皮质激素与急性发作期三联压力雾化吸入结合是目前治疗哮喘最理想、最安全有效的方法。     

系膜增生性肾炎患儿肾组织血小板源性生长因子及其受体表达的临床研究

目的研究系膜增生性肾炎患儿肾组织血小板源性生长因子(PDGF)及其受体(PDGFR-α、β)的表达及意义.方法采用免疫组化染色法检测弥漫性系膜增生性肾小球肾炎(MsPGN)、局灶性节段性肾小球硬化(FSGS)肾活检组织中PDGF、PDGFR的表达.结果PDGF在MsPGN中的表达明显高于正常肾和FSGS,PDGFR-α、β的表达高于正常肾(P＜0.01);PDGF在FSGS中的表达与正常肾相比无差异,但PDGFR-α、β表达升高(P＜0.01);MsPGN与FSGS的PDGFR-α、β表达无明显差异(P＞0.05).结论肾组织PDGF及其受体的过度表达可能在MsPGN的发病中起重要作用.     

肝素治疗儿童肾炎性肾病综合征尿纤维蛋白降解产物变化与远期疗效观察

目的　评价肝素对儿童肾炎性肾病综合征（ＮＮＳ） 的远期疗效。方法　在常规治疗的基础上,治疗组３５ 例患儿加用肝素钙５０Ｕ／（ｋｇ·ｄ） 静滴,同期未用肝素的３０ 例为对照组。观察两组治疗前后的尿纤维蛋白降解产物（ＦＤＰ）变化并随访１－５～５－５ 年。结果　治疗４～６ 周后尿ＦＤＰ水平治疗组显著低于对照组（ Ｐ＜０－０１）,完全缓解者显著低于部分缓解者（ Ｐ＜０－０１）。完全缓解率为治疗组８８－５７％ ,对照组５３－３３％ ,两组对比差异显著（ Ｐ＜０－０５）。结论　对ＮＮＳ患儿加用肝素钙治疗可使尿ＦＤＰ减少,缓解率提高且治疗后尿ＦＤＰ降低明显者远期疗效较好。     

不同剂量丙种球蛋白对早产儿血清IgG影响及临床疗效观察

目的探讨早产儿应用两种剂量静脉用丙种球蛋白(IVIG)后血清IgG水平变化及临床疗效.方法将60例早产儿按IVIG剂量随机分为三组A组200mg/kg,B组400mg/kg,C组不用IVIG为对照组.A、B组于生后48h内分别应用1 次IVIG,7 d后分别取血测定其IgG水平,同时观察抗生素应用天数、病情稳定天数、住院天数、第7d摄入奶的热量数及白细胞计数,三组进行比较.结果用IVIG前,胎龄<35周早产儿血清IgG水平低于胎龄≥35周者.A、B两组用药前后IgG水平差异有显著性(t值分别为3.99,5.71,P<0.05).对照组由于IgG消耗,第7d IgG水平低于生后48h内测定值(t=5.73,P<0.05),A、B两组用IVIG后IgG水平均有提高,但两组间差异无显著性(t=2.60,P>0.05).三组间F 检验(F=8.49,P<0.05),提示用IVIG可以提高IgG水平.A、B两组的抗生素应用天数、病情稳定天数、第7d摄入奶的热量数与对照组相比存在统计学差异,但住院天数、白细胞计数均无统计学差异.结论早产儿生后48h内应用IVIG 200mg/kg 或400mg/kg均可提高血清IgG水平,用IVIG剂量200mg/kg、400mg/kg与IgG增加水平无相关性. 此外,用IVIG可缩短早产儿抗生素应用天数、病情稳定天数、提高第7d摄入奶的热量数.     

癫患儿父母心理健康状况调查分析

目的调查了解癫患儿父母心理健康状况.方法采用临床症状自评量表(SCL-90)对一组癫患儿父母的心理状态进行评定,在父母间进行比较,并与对照组、全国常模进行比较.结果癫患儿父母SCL-90总分以焦虑、抑郁、躯体化、恐怖4个因子分值明显高于常模及对照组(P＜0.01),人际敏感、敌对2个因子分值明显低于全国常模及对照组(P＜0.01),母亲组焦虑、抑郁、躯体化、恐怖因子分值明显高于父亲组(P＜0.01),提示癫患儿父母存在不良的心理状态,母亲尤为严重,临床医生在治疗癫患儿时应重视其家长尤其是母亲心理的帮助与支持.     

环磷酰胺静脉冲击治疗儿童激素依赖性肾病综合征32例疗效分析

目的　了解大剂量环磷酰胺静脉冲击疗法 (CTX PT)治疗儿童激素依赖性肾病的近期疗效以及影响疗效的相关因素。方法　总结 1991年 9月至 2 0 0 0年 6月接受CTX PT治疗的激素依赖性肾病 3 2例 ,并就其疾病类型、临床观察指标等与疗效的关系进行了分析。结果　①用CTX PT治疗 2 3例有效 (有效率 71 9% )。②影响疗效的因素主要有疾病的临床、病理类型以及血清肌酐 (SCr)水平。单纯性肾病疗效明显好于肾炎性肾病(有效率分别为 85 0 %和 5 0 0 % ,P<0 0 5 ) ;病理表现为微小病变 (MCNS)者明显好于非MCNS ;SCr水平在治疗前较高者提示可能疗效也差。CTX PT疗效与性别、发病年龄、血清白蛋白、球蛋白、血胆固醇、免疫球蛋白、2 4h尿蛋白排泄量等无关 (P >0 0 5 )。③毒副作用 :11例 (3 4 4% )未见明显CTX毒副作用 ;2 1例 (65 6% )出现不同程度的副作用 ,主要为急性胃肠道反应占 40 6% (3d内缓解 ) ,其它副作用少见 ,而且这些毒副作用均为一过性并很快恢复正常。结论　CTX PT治疗儿童激素依赖性肾病有效率为 71 9% ,影响疗效的因素主要有疾病的临床、病理类型以及SCr水平等。     

儿童功能性消化不良的胃动力学改变与普瑞博思的疗效

目的　探讨儿童功能性消化不良的胃动力学改变与普瑞博思的疗效。方法　采用超声显像仪、胃肠电分析仪及血浆胃动素检测,测定３３ 例功能性消化不良小儿胃动力学指标及治疗后变化,观察了６４ 例普瑞博思的疗效。结果　３３ 例功能性消化不良患儿中２６ 例胃半排空时间显著延长,２５ 例胃电节律异常。用普瑞博思治疗后胃窦收缩频率、收缩幅度、胃半排空时间明显改善,胃电节律紊乱均趋正常,参数离散好转。结论　胃运动功能障碍是小儿功能性消化不良的主要发病机制之一,普瑞博思能明显改善消化不良症状。