幽门螺杆菌细胞毒素相关蛋白、空泡毒素基因与儿童胃十二指肠疾病的关系

目的　探讨幽门螺杆菌 (Hp)细胞毒素相关蛋白 (cagA)、空泡毒素 (vacA)与儿童胃十二指肠疾病类型及胃黏膜炎症程度的关系。方法　采用免疫印迹法测定 88例Hp相关性慢性胃炎 (CG)、4 6例Hp相关性消化性溃疡 (PU)患儿血清cagA、vacA抗体 ,并观察胃黏膜病理变化。 结果　 1.CagA、vacA抗体总检出率分别为 85 .0 7%、91.0 4 % ,cagA抗体在CG与PU中检出率分别为 84 .0 9%与 86 .96 % ,两组相比无显著性差异 (P>0 .0 5 ) ;vacA抗体在CG与PU中检出率分别为 89.77%与 93.4 8% ,两组相比无显著性差异 (P >0 .0 5 )。 2 .134例Hp感染患儿cagA、vacA抗体均阳性 (Ⅰ型菌 ) 113例 ,cagA、vacA抗体均阴性 (Ⅱ型菌 ) 11例 ,cagA、vacA抗体仅一项阳性 (中间型 ) 10例 ,各型菌株在CG、PU中的检出率无明显差异 (P均 >0 .0 5 )。 3.113例Hp Ⅰ型菌株感染引起胃黏膜中重度炎症占 88.5 0 % ,而Ⅱ型菌株、中间型菌株感染引起胃黏膜中重度炎症分别为 4 5 .4 5 %及 5 0 .0 0 % ,两组有显著性差异 (P <0 .0 1)。结论　CagA、vacA与CG、PU发病均有关 ,不能作为区分Hp感染致不同胃十二指肠疾病的特异性指标。本地区儿童感染的Hp主要为cagA和vacA阳性的Ⅰ型菌株 ,能引起胃黏膜较重的炎症     

幽门螺杆菌毒素与儿童胃十二指肠疾病关系的研究

目的 探讨幽门螺杆菌（Hp）毒素与儿童胃十二指肠疾病的关系及Hp毒素参与胃十二指肠粘膜病变的机制,并评价Hp毒素抗体检测的临床意义。方法 采用免疫印迹法测定39例Hp阳性和32例Hp阴性患儿血清多种Hp毒素抗体。观察胃十二指肠粘膜病理变化。结果 Hp阳性患儿,Hp毒素抗体相对分子质量为116000、30000、26500、19500和现症感染标志（CIM）的阳性率均为100％。相对分子质量为89000、61000、58000、37000和35000的阳性率分别为94．9％、87．2％、53．9％、87．2％和46．2％。HpI型菌株占94．9％,未检出Ⅱ型菌株。Hp阴性患儿各抗体的检出率为0％－28．1％。各种抗体在不同疾病之间的检出率无显著差异。细胞毒素相关蛋白（CagA）、空泡细胞毒素（VacA)和尿素酶A、D、E抗体阳性者胃十二指肠膜无一例正常,中重度炎症发生率为94．9％－97．3％。尿素酶B抗体阳性者胃粘膜中性粒细胞浸润比阴性者多见,差异有显著性。结论 本地区儿童主要感染HpI型毒力菌株,引起的胃十二指肠粘膜炎症较严重。尿素酶B抗体阳性提示胃粘膜有活动性炎症。CagA、VacA等Hp毒素抗体可能不是儿童十二指肠溃疡的特异标志物。     

幽门螺杆菌相关性胃肠粘膜病患儿血清CagA抗体、VacA抗体检测及其临床意义

为了解幽门螺杆菌（elicobacter pylori,H.pylori)相关性胃肠粘膜病患儿血清中细胞毒素相关基因抗原（CagA)、空泡毒素抗原（VasA)的有无及其临床意义，应用免疫印迹法对46例慢性胃炎和25例消化性溃疡患儿血清CagA抗体、VacA抗体进行了检测。结果：（1）慢性胃炎小儿血清H.Pylori CagA抗体（＋）、VacA抗体（＋）检出率为28．3％，消化性溃疡患儿为64．0％，两组比较差异有显著性（P＜0．05）；（2）对慢性胃炎炎症活动程度进行分组检测，中、重度急性活动性胃炎患儿中H.Pylori CagA抗体（＋）、VacA抗体（＋）检出率为50．0％，与轻症者比较差异有显著性（P＜0．05）。提示H.pylori菌株存在不同致病能力，CagA、VasA是致小儿H.Pylori相关性胃肠粘膜病重要的毒力因素；通过检测CagA、VacA抗体，可及时指导临床治疗。     

幽门螺杆菌毒素因子与儿童胃十二指肠疾病的相关性研究

目的　研究贵阳地区儿童幽门螺杆菌感染的CagA蛋白及VacA蛋白的感染状况 ,以及不同Hp菌株类型与胃肠黏膜病理组织学改变的关系。方法　采用免疫印迹法 (WesternBlot)对 6 7例Hp阳性及 32例Hp阴性患儿血清进行Hp毒素因子的测定及血清学菌株分型 ,参照悉尼胃炎分类标准 ,对不同Hp菌株类型进行病理组织学对比研究。结果　本地区Ⅰ型高毒力Hp菌株检出率 6 8.6 % ,中间型Hp菌株为 2 6 8% ,Ⅱ型Hp低毒力菌株为 4 4 %。Ⅰ型Hp菌株 1 0 0 %存在胃肠黏膜组织学改变 ,胃窦黏膜以中度炎症为主 ,占 73 9% ,重度炎症占 1 1 % ,活动性占 73 9%。十二指肠球部黏膜以中 重度炎症为主 ,占77 3% ,活动性占 6 6 4 %。中间型Hp菌株 72 %存在黏膜组织学改变 ,胃窦黏膜以轻度炎症为主 ,占 5 5 6 % ,活动性占 5 5 % ,十二指肠球部黏膜以轻 中度炎症为主 ,占 5 5 1 % ,活动性占 1 1 1 %。Ⅰ型Hp菌株与中间型Hp菌株在致黏膜炎症改变程度及活动性方面有差异性 (P <0 0 5 )。在淋巴滤泡形成方面 ,Ⅰ型Hp菌株较中间型Hp菌株有显著性差异 (P <0 0 1 )。结论　本地区Hp感染菌株类型以Ⅰ型为主 ,占 6 8 6 % ,同时存在 2 6 8%的中间型菌株及 4 4 %的Ⅱ型菌株的感染。Ⅰ型Hp菌株及中间型菌株在黏膜炎症程度及活动性上有差异性     

儿童幽门螺杆菌感染的菌株类型及治疗

目的评估幽门螺杆菌(H.pylori)不同菌株对儿童胃粘膜炎症程度和治疗效果。方法对94例经胃镜和活检确诊H.pylori相关性胃炎的5～14岁儿童,用免疫印迹试验测血清细胞毒相关蛋白(CagA)、细胞空胞毒素(VacA)、尿素酶(urase)亚型抗体;抗H.pylori三联疗法10d,67例分A组(LAC组,用奥美拉唑 克拉霉素 阿莫仙治疗)和B组(BCF组,用果胶铋 克拉霉素 呋喃唑酮治疗),停药4周后用13C-UBT测定H.pylori根除率。结果①94例中检出CagA和/或VacA阳性86.2%,CagA和/或VacA阴性13.8%;慢性胃炎(CSG)27%,CSG 十二指肠球炎(DG)48%,CSG DG 十二指肠溃疡(DU)21%,胃溃疡(CU) DU4%,滤泡样改变56%,各种疾病检出菌株差异无显著性(χ2=2.551,P>0.05)。②94例H.pylori根除率76%,其中A组90.32%(28/31例),消化性溃疡(PU)根除率100%(12/12例)、CSG根除率84.21%(16/19例);B组H.pylori根除率为88.89%(32/36例),PU76.00%(6/8例),CSG92.86%(26/28例),两组差异无显著性(P>0.05)。各菌株根除率差异无显著性(P>0.05)。症状消退慢、难治及未能根除者大多为阳性菌。结论H.pylori蛋白印迹法简单、可靠,是流行病学筛选H.pylori细胞毒素的指标;阳性患儿必须予以根治。以下各组患儿推荐根治:①慢性活动性胃炎H.pylori阳性者;②胃十二指肠溃疡病患者;③产细胞毒素CagA阳性者。LAC三联根治H.pylori相关性胃炎疗程短、副作用小和根除率高,值得推广。     

幽门螺杆菌菌株类型与儿童上消化道疾病的关系

目的：幽门螺杆菌（Helicobacter pylori,Hp）感染已被确立为是引起慢性浅表性胃炎和消化性溃疡的重要病因，是胃癌和胃黏膜相关性淋巴样组织（MALT）淋巴瘤的重要危险因素。Hp的致病性与毒力有关，而细胞毒素相关蛋白（CagA）和空泡毒素（VcaA）是Hp的主要毒力因子之一。该研究通过了解Hp菌株类型与儿童胃十二指肠疾病类型及胃窦黏膜病理组织学变化的关系，探讨Hp感染的分型诊断是否有助于判断儿童胃十二指肠疾病的严重程度。方法：采用免疫印迹法对115例有上消化道症状的患儿进行Hp的血清学分型，并行胃镜检查，观察胃十二指肠疾病类型。取胃窦黏膜经Harris配方苏木精染色观察胃窦黏膜病理组织学变化、亚甲基蓝染色观察Hp感染情况。结果：115例患儿中检出Hp Ⅰ型菌株84例（73.0%），中间型菌株21例（18.3%），Ⅱ型菌株10例（8.7%）；Ⅰ型菌株引起胃窦黏膜中、重度炎症分别为83例、1例；中间型菌株引起胃窦黏膜中度炎症21例；Ⅱ型菌株引起胃窦黏膜轻度炎症2例，中度炎症8例，经统计学处理，各型菌株在引起胃窦黏膜炎症程度上差异有显著性（χ2=15.444，P<0.01），Ⅰ型菌株感染引起胃窦黏膜炎症程度最重，Ⅱ型菌株感染引起胃窦黏膜炎症程度最轻；而在活动性、萎缩的发生率上，各型差异无显著性（P＞0.05）；在淋巴滤泡形成的发生率上，各型差异有显著性（χ2=10.171，P<0.01）。各型菌株引起胃镜下胃、十二指肠疾病类型的构成比无明显差异（P＞0.05）。结论：该地区儿童Hp感染以Ⅰ型菌株最为多见。各型菌株100%存在胃窦黏膜组织学改变。Ⅰ型菌株感染所致胃窦黏膜炎症程度最重，且引起淋巴滤泡形成的发生率最高。Hp感染的分型诊断无助于对儿童胃、十二指肠疾病类型的判断，但有助于对儿童胃、十二指肠疾病病情的判断，Ⅰ型菌株感染者需要更为积极的治疗，对于Hp感染的儿童无论其血清分型如何，均应引起重视，并长期随访。［中国当代儿科杂志，2007，9（3）：201-204］     

蛋白芯片技术在儿童幽门螺杆菌感染诊断中的应用

目的：探讨幽门螺杆菌（HP）抗体检测蛋白芯片技术在儿童HP感染诊断中的应用价值。方法：本院经胃镜检查的120例患儿,行快速尿素酶试验（RUT）及组织切片Giemsa染色。同时采用HP抗体蛋白芯片检测患儿血清中抗CagA、抗VacA、抗Ure、抗Hsp60及抗RdxA IgG抗体。以RUT及Giemsa染色两项均阳性作为HP感染阳性的诊断金标准。结果：120例患儿中,确诊HP感染阳性者60例。Ure抗体、Ure +CagA抗体、Ure +VacA抗体及Ure +CagA +VacA抗体均阳性对HP感染的诊断价值与金标准比较,吻合度和Kappa一致性检验均有统计学意义（P<0.001）。其中Ure+CagA抗体诊断的敏感性为81.7%,特异性为91.7%,准确度为86.7%,阳性预测值为90.7%,阴性预测值为83.3%,诊断HP现症感染最具临床价值。结论：HP蛋白芯片抗体检测,特别是Ure 结合CagA抗体检测,对诊断HP感染有较高的临床价值,可作为HP现症感染的诊断方法。     

幽门螺杆菌感染患儿血细胞毒素相关性基因A、空泡毒素蛋白、尿毒酶、热休克蛋白60和硝基还原酶的分布及其诊断价值

目的探讨基因芯片检测幽门螺杆菌(Hp)感染患儿血细胞毒素相关基因A(CagA)、空泡毒素蛋白(VacA)、尿毒酶(Ure)、热休克蛋白60(Hsp60)和硝基还原酶(RdxA)等毒力因子分布情况及胃镜下组织学表现。方法选取2007年10月-2008年5月在本院住院,具有腹痛、呕吐、呕血、黑便等消化系统症状,经2种及2种以上方法确诊为Hp感染的患儿30例。经胃镜诊断分为胃炎组(n=23)和消化性溃疡组(n=7),观察相应的CagA、VacA、Ure、Hsp60和RdxA等毒力因子抗体在不同疾病的分布情况;同时观察其胃镜下胃组织学表现,评估Hp毒力因子抗体与胃镜下表现及相关疾病的关系。比较CagA在胃炎组和消化性溃疡组的分布情况,应用SPSS 17.0软件进行统计学处理。结果 30例Hp感染患儿的致病毒力因子分布情况:CagA阳性29例(占96.7%)、Ure阳性14例(占46.7%)、RdxA阳性7例(占23.3%)、Hsp60 3例(占10.0%)和VacA阳性1例(占3.3%)。消化性溃疡组CagA阳性率(100%)高于胃炎组CagA阳性率(95.7%),但差异无统计学意义(χ2=1.000,P>0.05)。胃镜下胃炎组表现为黏膜充血、水肿、点片状出血斑、颗粒样变性、花斑样变性,消化性溃疡组表现为溃疡、黏膜充血水肿、出血样变,有时伴有食管胃底静脉曲张。抗CagA阳性患儿对应黏膜改变最为广泛。结论 Hp感染与CagA、VacA、Ure、Hsp60和RdxA等毒力因子相关,与CagA关系最为密切,VacA与疾病的严重程度相关。CagA阳性能够增加细胞毒素的活性,但其结果并不能预示疾病发展为胃炎或者消化性溃疡。     

幽门螺杆菌细胞毒素相关蛋白与胃窦黏膜炎症程度、细菌定植密度的关系

目的探讨幽门螺杆菌(Hp)细胞毒素相关蛋白(CagA)与慢性胃炎患儿胃窦黏膜炎症程度、Hp定植密度的关系。方法对79例Hp相关性慢性胃炎患儿采用免疫印迹法检测血清CagA抗体,并行胃镜检查,取胃窦黏膜经HE及改良Giemsa 染色后观察胃窦黏膜炎症程度及Hp定植密度。结果79例Hp相关性慢性胃炎患儿血清CagA抗体阳性67例(84.81%),其中胃窦黏膜轻度炎症9例(13.43%),中重度炎症58例(86.57%),而12例血清CagA抗体阴性患儿胃窦黏膜轻度炎症7例(58 33%),中重度炎症5例(41 67%),两者差异有显著性(x2=10.076 P=0.002),而两组胃窦黏膜Hp定植密度无明显差异(H=0.246 P-0 884)。结论CagA与慢性胃炎患儿胃窦黏膜炎症程度有关.而与Hp在胃窦部的定植密度无关,CagA 阳性Hp菌株能引起胃窦黏膜较重炎症。     

不同菌株类型幽门螺杆菌感染胃肠黏膜的早期病理组织学改变

目的通过对不同菌株类型幽门螺杆菌(Hp)感染儿童胃肠黏膜病理组织学改变进行对比研究,了解其早期致病性。方法采用Western Blot免疫印迹法对Hp阳性72例及Hp阴性36例患儿进行Hp血清学菌株分型,并参照悉尼胃炎分类标准,对Hp菌株类型感染患儿胃肠黏膜进行病理组织学对比研究。通过黏膜病理炎症程度、活动性、淋巴滤泡形成及上皮化生等方面进行评价。结果本组HpⅠ型高毒力菌株检出率68.1%(49例),中间型Hp菌株27.7%(20例),Ⅱ型低毒力菌株4.2%(3例)。对Hp毒力菌株进行病理组织学观察,发现HpⅠ型与中间型菌株在致胃窦黏膜组织炎症活动性方面,有显著性差异(P<0.01);HpⅠ型较中间型菌株在致十二指肠球部黏膜组织炎性及炎症活动性方面均明显增强(P均<0.01)。HpⅡ型感染患儿3例,1例为窦部、2例为球部轻度炎症,均无活动性炎性表现。HpⅠ型高毒力菌株至胃窦黏膜淋巴滤泡发生率44.8%,较中间型(15.0%)显著增高(P<0.05)。HpⅠ型与中间型菌株感染黏膜萎缩、肠上皮化生方面无显著差异。结论本地区儿童Hp感染菌株类型以Ⅰ型高毒力菌株为主,同时存在中间型及Ⅱ型低毒力菌株感染。Hp感染早期阶段已出现胃肠黏膜活动性炎性改变。