裂果薯醇提物对人肝癌裸鼠移植瘤生长与血管生成的影响

目的: 探讨裂果薯乙醇提取物对人肝癌裸鼠移植瘤生长与肿瘤血管生成的影响及其抗肿瘤的作用机制。方法: 采用80%乙醇回流提取制备裂果薯块茎醇提物;建立人肝癌细胞SMMC-7721裸鼠移植瘤模型,成瘤BALB/c裸鼠随机分为模型组、索拉非尼组和裂果薯醇提物高、中、低剂量组;裂果薯高、中、低剂量组和索拉非尼组给药量分别为107,71,54,30 mg·kg^-1·d^-1,每日ig给药1次,连续给药21 d,模型组不给药,对比观察裂果薯醇提物对肿瘤生长的影响;免疫组化法测定裸鼠肿瘤中CD34,血管内皮生长因子(VEGF)的表达,观察裂果薯醇提物对肿瘤血管生成的影响。结果: 与模型组相比,裂果薯醇提物高、中剂量组和索拉非尼组能够明显降低肿瘤瘤重和相对体积,其抑瘤率分别为47.71%,21.27%,51.75%;同时,裂果薯高剂量组、索拉非尼组能明显降低肿瘤微血管密度(MVD),(P<0.01),明显降低肿瘤组织中VEGF的表达(P<0.01);裂果薯中剂量组降低MVD(P<0.05)。结论: 裂果薯醇提物可抑制SMMC-7721细胞裸鼠移植瘤和瘤组织中血管生长,其作用可能与下调VEGF的表达有关。     

辣椒碱对乳腺癌MDA-MB-231细胞裸鼠移植瘤生长的抑制作用

目的：观察辣椒碱对乳腺癌MDA-MB-231细胞裸鼠移植瘤生长的抑制作用及其机制。方法：通过皮下注射MDA-MB-231细胞的方法建立乳腺癌裸鼠移植瘤模型,待肿瘤体积达到约100 mm³,将裸鼠随机分为模型组和辣椒碱低、中、高剂量（5,10,20 mg·kg^-1）组,每组5只。辣椒碱低、中、高剂量（5,10,20 mg·kg^-1）组裸鼠分别腹腔注射相应剂量的辣椒碱,模型组注射等体积的磷酸缓冲盐溶液（PBS）溶剂,3 d/次,连续给药8次。每次给药前先检测裸鼠体质重和肿瘤体积,末次给药24 h后处死各组裸鼠,计算肿瘤体积,称肿瘤质量,并计算抑瘤率。应用免疫组化法和蛋白免疫印迹法（Western blot）检测辣椒碱治疗后各组肿瘤组织中高迁移率族蛋白B1（HMGB1）和Toll样受体4（TLR4）蛋白表达水平。结果：与模型组比较,辣椒碱低、中、高剂量（5,10,20 mg·kg^-1）组裸鼠体质量无明显变化,但肿瘤体积显著缩小（P<0.01）,肿瘤质量显著减小（P<0.01）,抑瘤率显著增大（P<0.01）,且呈剂量依赖性;与模型组比较,辣椒碱低、中、高剂量（5,10,20 mg·kg^-1）组肿瘤组织HMGB1和TLR4蛋白表达明显降低,且呈剂量依赖性。结论：辣椒碱对乳腺癌MDA-MB-231细胞裸鼠移植瘤生长具有明显的抑制作用,其机制可能与下调HMGB1和TLR4蛋白表达有关。     

血府逐瘀汤对裸鼠食管癌移植瘤的放射增敏作用及机制

目的 探讨血府逐瘀汤对食管癌皮下移植瘤放射增敏的可能作用机制。方法 建立人食管癌ECA-109裸鼠皮下移植瘤模型，将其随机分为模型组、单纯照射组、血府逐瘀汤组、联合组，每组6只。干预结束后剥除移植瘤并称量其质量，计算各组抑瘤率；然后用免疫组化法（IHC）检测缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）、血管内皮生长因子A（VEGFA）蛋白表达，蛋白免疫印迹法（Western blot）检测移植瘤中人哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）、HIF-1α、VEGFA、血管内皮生长因子受体2（VEGFR2）蛋白表达；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测移植瘤中mTOR、HIF-1α、VEGFA mRNA表达。结果 与模型组比较，单纯照射组、血府逐瘀汤组瘤质量明显下降（P<0.05），联合组瘤质量显著下降（P<0.01）；与单纯照射组比较，联合组瘤体质量明显下降（P<0.05），该组抑瘤率达到57.37%；与模型组比较，单纯照射组、血府逐瘀汤组、联合组VEGFR2、p-mTOR、HIF-1α、VEGFA蛋白水平明显降低（P<0.05，P<0.01），单纯照射组、血府逐瘀汤组、联合组mTOR、HIF-1α，VEGFA mRNA水平明显降低（P<0.05，P<0.01）；与单纯照射组比较，联合组VEGFR2、p-mTOR、HIF-1α、VEGFA蛋白表达明显下降（P<0.05，P<0.01），联合组mTOR、HIF-1α、VEGFA mRNA表达明显下降（P<0.05，P<0.01）。结论 血府逐瘀汤可以抑制食管癌ECA109裸鼠移植瘤的生长，与放疗联用具有明显的放射增敏作用，其机制可能与抑制mTOR/HIF-1α/VEGFA乏氧信号通路的表达相关。     

蝙蝠葛酚性碱对人胰腺癌荷瘤裸鼠移植瘤形态学的研究

目的: 观察蝙蝠葛酚性碱(PAMD)对人胰腺癌细胞BxPC-3裸鼠移植瘤的抑制作用及其病理形态学影响。 方法: 雌性的裸鼠40只,被接种人源性的胰腺癌细胞株BxPC-3于裸鼠的右腋皮下,主要用于建立人胰腺癌皮下异位移植瘤的实验动物模型。24 h后用随机法将其分为5组,每组8只,分别为PAMD高、低剂量组(20,10 mg ·kg^-1)5-氟尿嘧啶(5-FU)组(20 mg ·kg^-1),模型组和正常组。PAMD与5-Fu组ip给药,模型组与正常组则给予同体积的生理盐水,但正常组不接种瘤株,给药20 d后,按照相关的公式计算其抑瘤率;在光镜和透射电镜下,观察PAMD对移植瘤组织病理形态学的影响。 结果: 与正常组比较,模型组瘤重明显增加(P<0.01), 肿瘤组织的病理形态和超微结构瘤细胞胞体变大,核浆比例失调,病理性核分裂象增大,核浆比例增大;与模型组比较,PAMD高、低剂量组和5-Fu组对胰腺癌BxPC-3荷瘤裸鼠的瘤组织生长都有一定的抑制作用(P<0.05),其抑瘤率分别为51.67%,37.26%,33.58%,通过光镜和透射电镜显示,PAMD对肿瘤组织的病理形态和超微结构均有一定的改善作用。 结论: PAMD能够有效的抑制胰腺癌细胞株BxPC-3荷瘤裸鼠肿瘤细胞的生长,PAMD高、低剂量组对BxPC-3荷瘤裸鼠瘤组织的病理形态学变化,具有一定的改善作用。     

α-双炔失碳酯抗激素依赖型与非激素依赖型前列腺癌的作用比较

 目的 比较α-双炔失碳酯（α-Ano）对激素依赖型与非激素依赖型前列腺癌体内外作用强弱的差别。方法 应用SRB细胞染色法检测α-Ano对人前列腺癌激素依赖型细胞LNCaP、RV1、L1A和非激素依赖细胞DU145、PC-3生长的影响;裸鼠皮下接种人前列腺癌细胞RV1、PC-3,构建实体瘤模型,成瘤后分组并灌胃给药,观察测量肿瘤体积及质量变化,计算肿瘤增长百分率和抑瘤率,比较α-Ano对激素依赖型和非激素依赖型人前列腺癌裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用。结果 α-Ano作用后,LNCaP、RV1和L1A细胞生存率均低于DU145、PC-3细胞;α-Ano高低剂量组均对裸鼠皮下RV1细胞移植瘤具有较强的抑制生长作用,而对PC-3细胞移植瘤作用较弱,仅高剂量组有一定抑制作用。 结论 α-Ano对激素依赖型前列腺癌的抑制作用强于非激素依赖型前列腺癌。     

生脉注射液对人鼻咽癌CNE-2细胞抗拒株的放射增敏作用＊

目的 探讨生脉注射液对人鼻咽癌CNE-2细胞抗拒株及其裸鼠移植瘤的放射增敏作用以及对STAT3、p-STAT3蛋白表达的影响。方法 通过细胞毒性实验筛选生脉注射液的最佳浓度，克隆形成实验检测用药前后放射敏感性；建立人鼻咽癌裸鼠移植瘤模型，荷瘤鼠随机分为空白组，生脉注射液低、高剂量组，生脉注射液低、高剂量联合照射组，照射组和姜黄素联合照射对照组。计算肿瘤体积抑制率和抑瘤率。蛋白免疫印迹法检测基因表达。结果 生脉注射液给药后，CNE-2R细胞放射敏感性增加；与单纯照射组比较，高剂量联合照射组肿瘤体积抑制率及抑瘤率明显升高，其STAT3、p-STAT3表达亦显著下调。结论 生脉注射液对人鼻咽癌CNE-2细胞抗拒株CNE-2R及其裸鼠移植瘤具有放射增敏作用，其增敏作用可能与抑制STAT3表达与活化相关。     

桔梗皂苷D通过Bax/Bcl-2/Caspase-3信号通路抑制细胞凋亡保护急性肺损伤的机制研究＊

目的 探讨桔梗皂苷D对脂多糖诱导的大鼠急性肺损伤的保护机制。方法 35只雄性SPF级SD大鼠，随机分为假手术组、桔梗皂苷D对照组、模型组、桔梗皂苷D给药组和地塞米松组，每组7只。除假手术组和桔梗皂苷D对照组外，其余各组采用脂多糖诱导大鼠急性肺损伤模型。造模24 h后，牺牲大鼠并称体重及两肺重量，计算肺指数；脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记（TUNEL）法检测肺组织细胞凋亡并计算凋亡指数（Apoptosis Index，AI）；透射电镜下观察大鼠肺组织超微结构的改变；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测肺组织凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-2（Bcl-2），Bcl-2相关X蛋白（Bax），半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（Caspase-3），多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶1（PARP1）蛋白及活化的天冬氨酸蛋白水解酶-3（Cleaved Caspase-3），Cleaved PARP1的表达水平。结果 与假手术组比较，模型组大鼠肺指数显著升高（P < 0.01），肺组织细胞凋亡指数（AI）显著升高（P < 0.01），肺组织Bcl-2及Bcl-2/Bax蛋白表达显著下调（P < 0.01），Bax，Cleaved Caspase-3/Caspase-3，Cleaved PARP1/PARP1蛋白表达均显著升高（P < 0.01）；透射电镜下可见到凋亡小体，影响并改变了肺组织细胞超微结构；与模型组比较，桔梗皂苷D给药组及地塞米松组肺指数明显降低（P < 0.01），肺组织AI明显降低（P < 0.01），肺组织中Bcl-2及Bcl-2/Bax蛋白表达显著上调（P < 0.01），Bax，Cleaved Caspase-3/Caspase-3，Cleaved PARP1/PARP1蛋白表达均显著降低（P < 0.01）；透射电镜下，桔梗皂苷D给药组和地塞米松组肺组织细胞超微结构状态较好。结论 桔梗皂苷D对脂多糖诱导的大鼠急性肺损伤具有保护作用，其作用机制与抑制Bax/Bcl-2/Caspase-3信号通路，减轻肺组织细胞凋亡密切相关。     

猕猴桃多糖对前胃癌MFC细胞及其原位移植瘤细胞凋亡的影响

目的 探索猕猴桃多糖对前胃癌（MFC）细胞及其原位移植瘤细胞凋亡的分子机制。方法 采用MTT法检测猕猴桃多糖对MFC细胞增殖抑制率,Western blotting法检测MFC细胞Mcl-1、Bcl-2、Bak和Bcl-xl蛋白的表达;OB吻合胶粘贴法建立胃癌原位移植瘤模型,采用TUNEL法检测肿瘤组织中细胞凋亡情况,免疫组织化方法检测Bcl-2、Bax的表达情况。结果 MTT实验表明随着猕猴桃多糖质量浓度的增加对MFC细胞增殖的抑制作用增强,且随着作用时间的延长,其抑制作用增强;Western blotting实验表明猕猴桃多糖作用于MFC细胞24 h下调Mcl-1、Bcl-2、Bcl-xl蛋白的表达,上调Bak蛋白的表达;体内实验表明：与模型组比较,猕猴桃多糖中、高剂量组及5-氟尿嘧啶（5-Fu）阳性对照组中TUNEL检测细胞凋亡的平均阳性指数明显升高（P＜0.01）;各给药组均能够显著下调Bcl-2的表达、上调Bax的表达（P＜0.01）。结论 猕猴桃多糖能够诱导胃癌MFC细胞凋亡,下调MFC细胞Mcl-1、Bcl-2、Bcl-xl蛋白和上调Bax、Bak蛋白表达,提示猕猴桃多糖的抗肿瘤机制与其通过Bcl-2家族蛋白所参与的细胞凋亡途径有关。     

三氧化二砷对胰腺癌BXPC-细胞移植瘤的体内抑制作用

目的探讨三氧化二砷在体内对胰腺癌BXPC-3细胞移植瘤的抑制作用, 并探讨其初步机制。方法建立胰腺癌裸鼠移植瘤模型, 随机分为4组:模型组, 低剂量、高剂量(2.5、5.0 mg/kg)三氧化二砷组和吉西他滨组, 各组ip给药, 作用2周后, 检测实验前后裸鼠体质量变化, 观察药物对肿瘤生长的影响, 免疫组化检测肿瘤细胞增殖因子ki-67的表达, TUNEL法检测移植瘤组织的细胞凋亡。结果给药2周后, 各组裸鼠体质量变化差异不显著, 三氧化二砷和吉西他滨均可抑制裸鼠移植瘤的体积和质量, 且三氧化二砷(5 mg/kg)组作用较强;免疫组化结果显示三氧化二砷可明显降低细胞增殖因子ki-67的阳性表达;TUNEL检测表明三氧化二砷可明显诱导移植瘤肿瘤细胞凋亡。结论三氧化二砷可抑制胰腺癌BXPC-3细胞在裸鼠体内的生长;作用机制可能为抑制肿瘤细胞增殖及促进肿瘤细胞凋亡。     

加味当归贝母苦参丸对H22肝癌荷瘤小鼠抑瘤及T细胞免疫调节作用

目的 探讨加味当归贝母苦参丸对H22肝癌荷瘤小鼠抑瘤及T细胞免疫调节作用,为加味当归贝母苦参丸联合免疫检查点抗体治疗肝癌提供依据。方法 建立H22肝癌荷瘤小鼠模型,随机分为模型组、顺铂组、加味当归贝母苦参丸低、中、高剂量组（4、8、16 g·kg^-1·d^-1）,连续给药14 d,第15天处死小鼠。给药第0、4、8、12、15天测量肿瘤体积;称取瘤重、计算胸腺指数和脾指数;将脾脏淋巴细胞与H22肝癌细胞共培养,细胞增殖与活性检测（CCK-8）法检测肿瘤细胞增殖抑制率;实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测脾脏和肿瘤组织中程序性细胞死亡蛋白-1（PD-1）、淋巴细胞活化基因-3（LAG-3） mRNA的表达情况;免疫组织化学法（IHC）检测脾脏和肿瘤组织中CD4⁺、CD8⁺ T细胞数量及PD-1、LAG-3蛋白的表达情况。结果 给药后第8天,各给药组肿瘤体积较模型组均有不同程度下降,第15天肿瘤体积和瘤重均较模型组显著降低（P<0.01）,其中顺铂组下降最为明显。与模型组、顺铂组比较,加味当归贝母苦参丸中、高剂量组胸腺指数显著升高（P<0.01）;与模型组比较,各用药组脾脏指数均明显升高（P<0.05,P<0.01）,其中顺铂组升高最为显著;与模型组、顺铂组比较,加味当归贝母苦参丸各组脾脏、肿瘤组织中CD4⁺、CD8⁺ T细胞数量和肿瘤细胞杀伤率均显著增高（P<0.01）,LAG-3 mRNA和蛋白表达均明显降低（P<0.05,P<0.01）;加味当归贝母苦参丸高剂量组肿瘤组织中PD-1 mRNA表达较模型组、顺铂组显著降低（P<0.01）。结论 加味当归贝母苦参丸可能通过下调LAG-3表达,促进H22肝癌荷瘤小鼠CD4⁺、CD8⁺ T细胞的增殖并向肿瘤微环境浸润,从而改善T细胞免疫活性、抑制肿瘤生长,为加味当归贝母苦参丸与免疫检查点抗体联用治疗肝癌提供实验依据。     

5种生物碱胃癌多药耐药逆转剂的筛选及机制研究

目的研究骆驼蓬碱、去氢骆驼蓬碱、贝母素甲、贝母素乙和氧化苦参碱对肿瘤细胞多药耐药性(MDR)的逆转作用及机制。方法以胃癌亲本细胞系SGC-7901和MDR细胞系SGC-7901/VCR为细胞模型,采用MTT法检测上述5种生物碱的细胞毒活性及对MDR的逆转效果;用流式细胞仪检测MDR逆转效果最好的贝母素乙对肿瘤细胞内阿霉素(ADR)蓄积的影响;Western blotting法检测P-糖蛋白(P-gp)的表达;Hoechst荧光染色和细胞免疫荧光法检测贝母素乙诱导SGC-7901/VCR细胞凋亡情况。结果骆驼蓬碱、去氢骆驼蓬碱、贝母素甲、贝母素乙和氧化苦参碱均能不同程度地抑制SGC-7901和SGC-7901/VCR细胞的增殖,在非毒剂量下贝母素乙能够显著提高SGC-7901/VCR细胞对ADR的敏感性及细胞内ADR的浓度,降低P-gp表达。贝母素乙联合5-氟尿嘧啶(5-FU)给药可诱导SGC-7901/VCR细胞凋亡,凋亡细胞cleaved caspase-3呈高表达。结论贝母素乙具有作为胃癌MDR逆转剂的潜力,其逆转耐药的机制可能与下调P-gp表达和诱导细胞凋亡有关。     

丹参逆转胃癌耐药细胞的作用及其机制分析

目的探讨丹参对人胃癌耐药细胞系SGC7901/ADR耐药性的逆转作用及其机制。方法以不同浓度的丹参(SAL)处理耐药系SGC7901/ADR及敏感系SGC7901细胞,四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测丹参对两种细胞系的毒性及半数抑制率(IC50),流式细胞仪(FCM)检测丹参对两种细胞内ADM浓度和细胞周期的影响,SP法免疫组化染色检测两种细胞P-糖蛋白(P-gp)和DNA拓扑异构酶Ⅱ(TopoⅡ)的表达。结果丹参的非细胞毒性药物剂量为500 mg/L以下;丹参可逆转SGC7901/ADR细胞对ADM的耐药性,逆转倍数为1.89(P<0.01);提高细胞内ADM浓度,ADM增加1.55倍(P<0.05);丹参使细胞周期阻滞于G1、G2期;对细胞膜P-gp的表达轻度下降、TopoⅡ的表达略有增加,但无显著性差异(P均>0.05)。结论丹参对SGC7901和SGC7901/ADR细胞无杀伤作用。其机制是丹参能增加耐药细胞内化疗药物浓度,使DNA合成期(S期)细胞含量下降。     

圣和散逆转胃癌SGC7901/VCR细胞多药耐药的研究

目的探讨中药圣和散逆转胃癌耐药细胞SGC7901/VCR多药耐药的机制。方法圣和散(浓度2.5、5和10mg/ml)处理胃癌耐药细胞SGC7901/VCR,用流式细胞技术检测P-糖蛋白(P-gp)表达,免疫组织化学SABC法及图像分析技术检测B细胞淋巴瘤/白血病基因-2(Bcl-2)。结果实验组SGC7901/VCR细胞Bcl-2表达A值(121.34±0.16)明显高于对照组(104.37±0.089)(P<0.05),Bcl-2表达减少,P-gp表达也明显降低。结论圣和散能逆转胃癌耐药细胞SGC7901/VCR多药耐药,其作用可能与调节Bcl-2和P-gp表达有关。     

丹参对人胃癌阿霉素耐药细胞SGC7901/ADR蛋白表达的影响

目的应用蛋白质组学技术寻找丹参逆转人胃癌阿霉素耐药细胞SGC7901/ADR相关蛋白分子,探讨丹参逆转胃癌多药耐药机制。方法以人胃癌阿霉素耐药细胞SGC7901/ADR和丹参逆转后的SGC7901/ADR细胞为研究对象,用固相pH梯度等电聚焦二维聚丙烯酰胺电泳技术展示2种细胞表达的全蛋白,凝胶考马斯亮蓝染色,Image Master 2DMelanie 5.0图像分析软件分析并比较差异表达的蛋白分子。结果 SGC7901/ADR中检测到549个蛋白点,丹参逆转后SGC7901/ADR中检测到469个蛋白点,差异点87个,SGC7901/ADR细胞经丹参逆转后表达下调蛋白36个,上调蛋白51个。结论丹参逆转后SGC7901/ADR细胞中差异表达的蛋白质分子可能与丹参对胃癌多药耐药逆转机制相关。     

葛根素对胃癌多药耐药的逆转实验研究

目的观察葛根素注射液对人胃癌耐药细胞系SGC7901/VCR的影响。方法采用MTT法进行药敏实验,并通过流式细胞仪检测细胞周期变化、胞浆内药物浓度,荧光显微镜显示荧光强度,免疫细胞化学染色法显示耐药细胞中多药耐药相关蛋白(MRP)和P-糖蛋白(P-gp)的分布,观察化疗药(包括5-FU、VCR、DDP、ADM)和/或葛根素对胃癌裸鼠原位移植瘤的抑瘤率。结果葛根素注射液能够逆转SGC7901/ VCR对5-FU的耐药性,与SGC7901/VCR比较S期和G_2+M期增加,G_1期减少,细胞内的阿霉素荧光强度明显增强,MRP和P-gp的表达明显减弱,葛根素和5-FU联合应用对裸鼠胃癌的抑瘤率明显高于单纯应用5-FU组。结论葛根素注射液能够逆转SGC7901/VCR的多药耐药性,其机理可能是促使MRP和P-gp蛋白表达减少。     

温郁金醇提物对人耐长春新碱胃腺癌细胞SGC-7901皮下移植瘤的逆转作用及对P糖蛋白表达的影响

目的通过建立人耐长春新碱胃腺癌细胞SGC-7901（vincristine-resistant gastric cancer SGC-7901 cells,SGC-7901/VCR）裸鼠皮下移植瘤模型探讨温郁金醇提物逆转人胃癌多药耐药的作用及可能机制。方法运用四甲基偶氮唑蓝法（methyl thiazolyl tetrazolium,MTT）法对SGC-7901/VCR耐药性进行鉴定,50只BALB/c裸小鼠,采用组织块法建立人胃癌SGC-7901/VCR皮下移植瘤模型,2-3周后选取瘤体大小相近裸鼠36只,按随机数字表法分为模型组,长春新碱（vincristine,VCR）组,温郁金低、高剂量组及温郁金低、高剂量联合VCR组,共6组,每组6只。模型组给予生理盐水腹腔注射10m L/kg,2天1次;VCR组给予腹腔注射VCR 0.28 mg/kg,2天1次;温郁金低、高剂量组分别给予灌胃相应药物1.4、2.8 g/kg,1天1次,1次0.2 m L;温郁金低、高剂量联合VCR化疗组分别给予低、高剂量温郁金（1.4、2.8 g/kg）联合VCR（0.28 mg/kg,2天1次）;各组均为14天。观察各组瘤体生长情况,计算抑瘤率,同时采用免疫组化及蛋白印迹法（Western blot）检测瘤体P糖蛋白（P-glycoprotein,P-gp）的定位及表达。结果 SGC-7901/VCR对VCR、阿霉素（ADM）、5-氟尿嘧啶（5-FU）及顺铂（DDP）均有一定耐药性,其中对VCR耐药性最强。SGC-7901/VCR脱药培养后增殖活性明显增强,各组荷瘤裸鼠随着时间的延长,肿瘤体积逐渐增大,以温郁金高剂量联合VCR组体积最小。与模型组、VCR组比较,温郁金高剂量联合VCR组较瘤体明显缩小（P〈0.05）,其抑瘤率（51.56%）明显增高,差异亦有统计学意义（P〈0.05）。Western blot检测显示：与模型组比较,VCR组灰度值升高（P〈0.05）,温郁金高剂量组、温郁金低、高剂量联合VCR组中P-gp的相对表达量均明显减低（P〈0.05）。与VCR组比较,温郁金低、高剂量组及温郁金低、高剂量联合VCR组P-gp的灰度值均降低（P〈0.05）。免疫组化显示：与模型组比较,温郁金高剂量组、温郁金     

二氢丹参酮抑制人胃癌SGC7901细胞侵袭迁移作用及机制研究

目的研究二氢丹参酮(DHT)对人胃癌SGC7901细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响,并探讨其作用的分子机制。方法利用不同浓度的DHT处理细胞后,MTT法检测DHT对细胞生长活力的影响,划痕实验观察DHT对细胞运动能力的影响,Transwell小室模型研究DHT对细胞迁移和侵袭的影响,q RT-PCR和Western blotting检测基质金属蛋白酶MMP2、MMP9和Hedgehog通路调控基因Gli1和HHIP的m RNA和蛋白表达水平。结果与对照组相比,DHT可显著抑制SGC7901细胞的体外增殖及迁移能力,Transwell实验表明药物处理后穿膜细胞数明显低于对照组,并且呈剂量依赖性。Western blotting和q RT-PCR实验结果表明,DHT可显著抑制SGC7901细胞中MMP9的表达,降低Gli1基因的m RNA和蛋白表达,并提高HHIP基因的表达水平。结论 DHT能够抑制SGC7901细胞的迁移和侵袭能力,其机制可能与MMP9蛋白的表达降低和Hedgehog通路活性抑制有关。     

加味四君子汤含药血清对胃癌细胞SGC-7901凋亡相关因子表达的影响

目的:研究加味四君子汤含药血清对胃癌细胞SGC-7901凋亡相关因子表达的影响,进一步探讨其具体抗肿瘤作用机制。方法:40只SD大鼠随机分为加味四君子汤低、中、高剂量组(0.213,0.426,0.853 g·kg~(-1)),空白组,每组10只,空白组给予等体积的生理盐水灌胃,各组连续灌胃10 d,末次给药1.5 h后,水合氯醛腹腔麻醉,心脏采血,分离血清,56℃灭菌,0.22μm过滤,制备加味四君子汤高、中、低剂量组含药血清,各剂量组含药血清孵育胃癌细胞SGC-7901,运用流式细胞仪检测细胞早期和晚期凋亡情况,运用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)技术检测肿瘤抑制基因p53,c-核蛋白类基因(c-Myc),半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3),凋亡相关基因B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)mRNA的表达,运用细胞免疫荧光技术检测p53,c-Myc,Caspase-3,Bcl-2蛋白的相对表达量情况。结果:与空白组比较,加味四君子汤含药血清高剂量组细胞凋亡比率显著升高(P0.01),且可使胃癌细胞SGC-7901早期+晚期凋亡率达到22.58%(P0.01)。Real-time PCR结果显示加味四君子汤中剂量组能显著促进Caspase-3 mRNA表达(P0.01),加味四君子汤高剂量组能显著上调p53及c-Myc mRNA表达量(P0.01),加味四君子汤高剂量组显著抑制Bcl-2 mRNA表达(P0.01)。免疫荧光结果显示加味加味四君子汤高剂量组能使c-Myc,Caspase-3,p53蛋白表达水平显著升高(P0.01),而Bcl-2蛋白表达水平显著降低(P0.05)。结论:加味四君子汤含药血清能抑制抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,促进凋亡相关分子p53,c-Myc,Caspase-3的表达,发挥抗肿瘤作用。     

粉防己碱对人胃癌耐药细胞锌指蛋白139、多药耐药基因表达的影响

目的探讨粉防己碱（tetrandrine,TET）对胃癌细胞及耐药细胞中锌指蛋白139（zincfingerprotein139,ZNFl39）及多药耐药（multidrugresistance,MDR）基因的影响。方法MTT法检测不同浓度（0．5、1．0、1．5、2．0、2．5闪,mL）TET对胃癌细胞SGC7901、SGC7901／ADR细胞株的抑制作用;通过RT-PCR法检测TET作用前后SGC7901／ADR细胞内ZNFl39、MRP-1、MDR1、GST-π表达情况,以Spearman相关分析检验ZNF139与各多药耐药因子之间关系并计算相关系数。结果MTT结果显示,2．0μg／mL及以下浓度TET对SGC7901、SGC7901／ADR两种细胞的抑制率均〈10％;在SGC7901／ADR细胞中ZNF139、MRP-1、MDRl、GST-πmRNA表达高于SGC7901细胞（均P〈0．05）;TET能抑制SGC7901／ADR细胞中ZNF139、MRP-1、MDR1、GST-πmRNA的水平（均P〈0．05）;TET作用前SGC7901／ADR细胞中ZNF139与MRP．1、MDR1存在相关关系,作用后这种相关性仍存在（均P〈0．05）。结论TET可能通过抑制ZNF139下调、MDR1、MRP1的表达从而逆转胃癌耐药细胞MDR表型。