丹参酮ⅡA对自发性高血压大鼠左心室肥厚心肌细胞凋亡蛋白的作用

目的：观察丹参的脂溶性成分丹参酮ⅡA对自发性高血压大鼠左室肥厚心肌凋亡蛋白的作用。方法：实验于2005—03／2005—07在华中科技大学同济医学院急诊科实验室完成。①选用8周龄自发性高血压大鼠18只。随机将大鼠分为3组：对照组、丹参酮组、高血压组，每组6只。②对照组：饲养至第8周处死；丹参酮组：从饲养至第8周开始，丹参酮ⅡA（中国药品生物制品检定所，批号S02001300，1kg/包）以1mL／（kg&;#183;d）剂量腹腔注射，持续用药10周，第18周处死；高血压组：以相同容量蒸馏水替代丹参酮ⅡA腹腔注射，余同丹参酮组。③用药结束后用MRS2Ⅲ型大鼠电脑血压心率测量仪测量大鼠清醒状态下尾动脉收缩压。④处死后。迅速取出心脏，称量左心室（包括室间隔）的湿重，计算左室质量指数[左室质量（mg）／体质量（g）]。⑤采用免疫印迹法检测心肌细胞Bcl-2，Bax及p53蛋白表达。⑥计量资料差异比较采用单因素方差分析。结果：自发性高血压大鼠18只均进入结果分析。①高血压组大鼠左心室心肌组织Bel-2蛋白表达明显低于对照组（t=2．405，P〈0．05）。而p53和Bax蛋白表达明显高于对照组（t=14．51，10．26，P〈0．01）。丹参酮组Bcl-2表达明显高于高血压组（t=2．359，P〈0．05），而p53和Bax蛋白表达明显少于高血压组（t=11．74，7．13，P〈0．01）。②高血压组大鼠的收缩压和左室质量指数明显高于对照组（t=6．68，3．84,P〈0．01），左室质量指数明显高于丹参酮组（t=2．80，P〈0．05）。结论：长期应用丹参酮ⅡA治疗可预防自发性高血压大鼠左室肥厚的形成，其机制可能与丹参酮ⅡA上调心肌细胞凋亡蛋白Bcl-2、下调Bax蛋白及抑制p53蛋白的表达有关。     

细胞间黏附分子-1在高血压左室肥厚发病中的作用及丹参酮ⅡA对其表达的影响

目的:探讨细胞间黏附分子-1(ICAM-1)在高血压左室肥厚发生中的作用及丹参酮ⅡA对其表达的影响.方法:12周龄雄性Wistar-Kyoto(WKY)大鼠和自发性高血压大鼠(SHR)共30只,随机分为对照组、高血压组、丹参酮ⅡA组.丹参酮ⅡA组经尾静脉连续注射丹参酮ⅡA 治疗12周.断头处死大鼠后留取心肌标本,进行苏木素-伊红(HE)、范吉逊(VG)染色,观察心肌细胞形态和胶原分布情况;免疫组化染色及ED1标记显示心肌巨噬细胞浸润;逆转录-聚合酶链反应检测心肌ICAM-1 mRNA表达;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测ICAM-1的蛋白表达.结果:与对照组WKY大鼠比较,SHR组肥厚心肌中ICAM-1的mRNA及蛋白表达均显著增加(P<0.01和P<0.05),巨噬细胞浸润明显(P<0.01).应用丹参酮ⅡA治疗后,SHR组的心肌ICAM-1的mRNA及蛋白表达水平均显著下调(P<0.01和P<0.05),巨噬细胞浸润数减少(P<0.05),心肌细胞肥大和间质纤维化程度明显减轻.结论:心肌ICAM-1过度表达及其介导的炎性细胞浸润在高血压左室肥厚的发病过程中具有重要作用;丹参酮ⅡA抑制左室肥厚的效应可能与其下调ICAM-1表达,减少炎性细胞的心肌浸润有关.     

丹参酮ⅡA抑制高血压状态下心脏醛固酮合成及其相关基因的表达

背景醛固酮是左心室肥厚的主要致病因子,有效抑制其生物合成可防治高血压左室肥厚.目的观察丹参酮ⅡA对自发性高血压大鼠心肌醛固酮合成及其相关基因CYP11B1和CYP11B2表达的作用,以及其抑制高血压左室肥厚的可能途径.设计以自发性高血压大鼠为实验对象,以正常血压的WKY大鼠为对照,完全分组设计,随机对照实验,各组间均数的比较用方差分析.单位华中科技大学同济医学院附属同济医院急诊科和中西医结合研究所.材料实验于2003-01/2004-02在华中科技大学同济医学院附属同济医院急诊科实验室完成.选用12周龄雄性正常血压WKY大鼠10只为对照组,将12周龄雄性自发性高血压大鼠20只随机分为2组,每组10只,分别为高血压组和丹参酮ⅡA组.方法丹参酮ⅡA组经腹腔每天注射1.5 mg/kg丹参酮ⅡA,高血压组和对照组均腹腔注射相当容积的蒸馏水.实验12周后断头处死大鼠留取心肌标本,心肌组织醛固酮和血管紧张素Ⅱ含量采用放射免疫法测定,心肌醛固酮合成相关基因CYP11B1和CYP11B 2mRNA表达水平采用反转录聚合酶链反应检测.主要观察指标实验12周后各组大鼠心肌组织醛固酮和血管紧张素Ⅱ含量及CYP11B1和CYP11B2基因的mRNA表达量比较.结果自发性高血压大鼠20只和正常血压WKY大鼠10只均进入结果分析.①实验12周后大鼠心肌组织醛固酮含量高血压组和丹参酮ⅡA组均明显高于对照组[(0.056±0.014),(0.031±0.010),(0.018±0.009)ng/g,P＜0.01,0.05],丹参酮ⅡA组明显低于高血压组(P＜0.05).②实验12周后大鼠心肌组织血管紧张素Ⅱ含量高血压组和丹参酮ⅡA组均明显高于对照组[(0.093±0.016),(0.088±0.024),(0.043±0.012)ng/L,P＜0.01].③实验12周后大鼠心肌组织CYP11B1基因的表达量高血压组和丹参酮ⅡA组均明显高于对照组(2.774±0.138,2.533±0.127,1.973±0.102,P＜0.05).④实验12周后大鼠心肌组织CYP11B2基因的表达量高血压组和丹参酮ⅡA组均明显高于对照组(1.573±0.106,1.024±0.113,0.786±0.121,P＜0.01,0.05),丹参酮ⅡA组明显低于高血压组(P＜0.05).⑤各组大鼠心肌组织CYP11B1和CYP11B2及参照基因甘油醛-3-磷酸脱氢酶基因的反转录聚合酶链反应产物电泳带的位置与理论值相符.结论丹参酮ⅡA抑制高血压左室肥厚的效应可能与其下调心肌醛固酮合成相关基因CYP11B2的表达水平,减少心脏局部醛固酮的生物合成有关.     

丹参酮ⅡA预防自发性高血压大鼠左室肥厚的机制

目的观察丹参酮ⅡA对自发性高血压大鼠左室肥厚的作用，并研究其对心肌bcl-2蛋白表达的影响。方法18只8周龄的自发性高血压大鼠随机分成3组：对照组、丹参组和高血压组，每组6只。测量大鼠尾动脉收缩压（SBP）及左心室重量指数（LVMI）。应用HE染色、VG染色、免疫组织化学的方法，结合计算机图像分析技术，检测心肌细胞的直径和面积、心肌组织胶原体积比例（CVF）、血管周围胶原面积和管腔面积比例（PVCA）。用Western blot法检测心肌细胞bcl-2蛋白的表达。结果与对照组相比，高血压组大鼠的SBP、LVMI、心肌细胞的直径和面积、CVF、PVCA显著增加，bcl-2蛋白的表达降低（P〈0．05），丹参酮ⅡA治疗可抑制左心室肥厚（LVH）的发展和上调bcl-2蛋白的表达，但收缩压无明显改变。结论长期应用丹参酮ⅡA治疗可预防自发性高血压大鼠左室肥厚的形成，其机制可能与丹参酮ⅡA上调心肌细胞凋亡蛋白bcl-2的表达有关。     

氯沙坦对心力衰竭大鼠骨骼肌萎缩中细胞凋亡、抗凋亡蛋白Bcl-2和促凋亡蛋白Bax表达的作用

目的:观察氯沙坦对心力衰竭大鼠骨骼肌萎缩程度的影响,分析抗凋亡蛋白Bcl-2和促凋亡蛋白Bax在该影响中的作用。方法:实验于2003-04/2004-04在郑州大学病理生理学教研室完成。①选用清洁级健康成年SD大鼠24只,雄性。按随机抽签法将大鼠分为3组:对照组、模型组和治疗组,每组8只。通过颈部一次性皮下注射野百合碱30mg/kg建立心力衰竭模型。治疗组:造模2周后灌胃氯沙坦混悬液10mg/(kg·d),共2周;对照组和模型组(造模)以等量生理盐水灌胃2周。②计算右心室肥大程度判定指标右心室壁质量/左心室 室间隔质量、右心室壁质量/体质量。计算骨骼肌萎缩程度的判定指标腓肠肌质量/体质量。采用脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记法原位标记法计算凋亡指数。采用蛋白免疫印迹法检测腓肠肌Bcl-2和Bax蛋白的表达,并计算Bax/Bcl-2。③组间计量资料差异比较采用单因素方差分析和独立样本t检验。结果:SD大鼠24只均进入结果分析。①模型组右心室壁质量/左心室 室间隔质量和右心室壁质量/体质量明显高于对照组(t=4.64,5.63,P<0.01);模型组腓肠肌质量/体质量明显低于对照组(t=3.72,P<0.01);治疗组右心室壁质量/体质量明显低于模型组(t=2.48,P<0.05)。治疗组腓肠肌质量/体质量虽与模型组比较,差异不明显,但有增高的趋势。②模型组大鼠腓肠肌细胞凋亡率和Bax蛋白表达明显高于其他2组(t=3.75～17.48,P<0.05～0.01),模型组Bcl-2蛋白表达明显低于其他2组(t=6.19,4.49,P<0.01)。结论:氯沙坦可明显提高Bcl-2蛋白表达,降低Bax蛋白表达和骨骼肌细胞凋亡,从而达到减轻心力衰竭大鼠骨骼肌萎缩的趋势。     

丹参酮ⅡA对自发性高血压大鼠左室肥厚的影响及机制

目的观察丹参酮ⅡA对自发性高血压大鼠左室肥厚的作用,并探讨其作用机制.方法18只8周龄的自发性高血压大鼠随机分成3组一组于8周处死,另两组分别经腹腔注射丹参酮IIA和蒸馏水(1 g·kg-1·d-1),共10周.测量大鼠尾动脉收缩压(SBP)及左心室重量指数(LVMI).应用HE染色、VG染色、免疫组织化学的方法,结合计算机图像分析技术,检测心肌细胞的直径和面积、心肌组织胶原体积比例(CVF)、血管周围胶原面积和管腔面积比例(PVCA)以及蛋白激酶C(PKC)的表达.结果与8周龄的自发性高血压大鼠相比,18周龄大鼠的SBP、LVMI、心肌细胞的直径、面积、CVF、PVCA显著增加,PKC表达上调,丹参酮IIA治疗可抑制LVH的发展和心肌组织PKC的表达,但收缩压无明显改变.结论长期应用丹参酮ⅡA治疗可预防自发性高血压大鼠左室肥厚的形成,其机制可能与丹参酮ⅡA降低了心脏PKG的表达有关.     

复方丹参与福辛普利联用影响高血压大鼠左室肥厚与心肌细胞的凋亡

目的:观察具有抗凝血、抗氧化、扩张冠状动脉等作用的复方丹参及其与福辛普利联用对自发性高血压大鼠左室肥厚及心肌细胞凋亡的影响。方法:实验于2003-02/2004-06在福建省高血压研究所完成。①选用48只8周龄雄性SPF级自发性高血压大鼠。按随机摸球法将大鼠分为6组:复方丹参小、大剂量组,福辛普利组,复方丹参小、大剂量 福辛普利组,对照组,每组8只。②复方丹参小、大剂量组:分别按300和450mg/(kg·d)剂量灌胃复方丹参滴丸溶解液,该滴丸主要由丹参、三七、冰片组成(由天津天士力制药股份有限公司惠赠,生产批号:20010415,100粒/瓶);福辛普利组:按10mg/(kg·d)剂量灌胃福辛普利(购自上海施贵宝医药公司,10mg/片)混悬液;复方丹参小、大剂量与福辛普利联用组:灌胃与前组相同剂量2种药物;对照组:灌胃蒸馏水,2mL/d。连续给药8周。③分别在药物干预前、药物干预4及8周后采用血压心率仪监测尾部动脉收缩压。④药物干预结束后,称心肌质量、左心室(含室间隔)湿重,计算左心室肥厚指数(左心室湿重/体质量)。采用S-P免疫组化法检测心肌组织Bcl-2及Bax蛋白表达。免疫组化切片进行计算机图像分析,测定Bcl-2,Bax灰度值,计算Bcl-2与Bax灰度比值(灰度值越高表示相关蛋白表达越低)。采用原位末端标记技术检测大鼠左心室细胞凋亡情况。计算每个高倍视野(×400)的平均凋亡率,即为心肌细胞凋亡率。用透射电子显微镜观察心肌超微结构。结果:自发性高血压大鼠48只均进入结果分析。①干预4周后,福辛普利及其与复方丹参联用组大鼠尾动脉压明显低于对照组(P<0.01),复方丹参小、大剂量组与对照组比较,差异不明显(P>0.05)。干预8周后,复方丹参小、大剂量组大鼠尾动脉压明显低于对照组(P<0.01),但效果不及福辛普利及其与复方丹参联用组(P<0.01)。复方丹参小、大剂量组和对照组大鼠尾动脉压明显高于福辛普利组(P<0.01)。对照组大鼠尾动脉压明显高于其他5组(P<0.01),复方丹参大剂量 福辛普利组明显低于福辛普利组(P<0.05)。②对照组大鼠左室心肥厚指数明显高于其他5组(P<0.01),复方丹参大剂量 福辛普利组明显低于福辛普利组(P<0.05)。③对照组大鼠心肌组织Bcl-2灰度值和Bcl-2/Bax及心肌细胞凋亡率明显高于其他5组(P<0.05～0.01),Bax灰度值明显低于其他5组(P<0.05～0.01)。复方丹参小、大剂量 福辛普利组大鼠心肌组织Bcl-2灰度值和Bcl-2/Bax明显低于福辛普利组(P<0.05～0.01),复方丹参小、大剂量 福辛普利组大鼠心肌组织Bax灰度值明显高于福辛普利组(P<0.01)。④治疗后大鼠心肌细胞肌丝排列紊乱与闰盘增多聚集现象明显减轻,肌溶灶与心肌细胞凋亡样改变未见;间质纤维化及毛细血管瘀血、内皮细胞水肿明显改善,并在两药联用时效果最明显。结论:复方丹参可减轻自发性高血压大鼠左室肥厚,减少心肌细胞凋亡情况发生,同时可增强福辛普利抗左室肥厚与心肌细胞凋亡的效应。     

丹参酮ⅡA对自发性高血压大鼠左室肥厚的作用及其机制

目的:观察丹参酮IIA对自发性高血压大鼠左室肥厚的作用,并研究其对心肌原癌基因c-fosmRNA表达的影响。方法:18只8周龄的自发性高血压大鼠随机分成3组:对照组于8周处死,另两组分别经腹腔注射丹参酮IIA1mL/(kg·d)(丹参组)(和蒸馏水1mL/(kg·d)(高血压组),共10周。测量大鼠尾动脉收缩压(SBP)及左心室重量指数(LVMl)。应用HE染色、VG染色、免疫组织化学的方法,结合计算机图像分析技术,检测心肌细胞的直径和面积、心肌组织胶原体积比例(CVF)、血管周围胶原面积和管腔面积比例(PVCA)。用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测心肌细胞原癌基因c-fosmRNA的表达。结果:与对照组的自发性高血压大鼠相比,高血压组大鼠的SBP、LVMI、心肌细胞的直径、面积、CVF、PVCA显著增加,c-fos表达明显,丹参酮IIA治疗可抑制左室肥厚(LVH)的发展和心肌细胞c-fosmRNA的表达,但收缩压无明显改变。结论:长期应用丹参酮IIA治疗可预防自发性高血压大鼠LVH的形成,其机制可能与丹参酮IIA抑制了心肌细胞c-fosmRNA的表达有关。     

丹参酮ⅡA抑制高血压状态下心脏醛固酮合成及其相关基因的表达

背景：醛固酮是左心室肥厚的主要致病因子，有效抑制其生物合成可防治高血压左室肥厚。目的：观察丹参酮ⅡA对自发性高血压大鼠心肌醛固酮合成及其相关基因CYP11B1和CYP11B2表达的作用，以及其抑制高血压左室肥厚的可能途径。设计：以自发性高血压大鼠为实验对象，以正常血压的WKY大鼠为对照，完全分组设计，随机对照实验，各组问均数的比较用方差分析。单位：华中科技大学同济医学院附属同济医院急诊科和中西医结合研究所。材料：实验于2003-01／2004-02在华中科技大学同济医学院附属同济医院急诊科实验室完成。选用12周龄雄性正常血压WKY大鼠10只为对照组，将12周龄雄性自发性高血压大鼠20只随机分为2组，每组10只，分别为高血压组和丹参酮ⅡA组。方法：丹参酮ⅡA组经腹腔每天注射1．5mg／kg丹参酮ⅡA，高血压组和对照组均腹腔注射相当容积的蒸馏水。实验12周后断头处死大鼠留取心肌标本，心肌组织醛固酮和血管紧张素Ⅱ含量采用放射免疫法测定。心肌醛固酮合成相关基因CYP11B1和CYP11B 2mRNA表达水平采用反转录聚合酶链反应检测。主要观察指标：实验12周后各组大鼠心肌组织醛固酮和血管紧张素Ⅱ含量及CYP11B1和CYP11B2基因的mRNA表达量比较。结果：自发性高血压大鼠20只和正常血压WKY大鼠10只均进入结果分析。①实验12周后大鼠心肌组织醛固酮含量：高血压组和丹参酮ⅡA组均明显高于对照组[(0.056&;#177;0．014)，(0．031&;#177;0．010)，(0．018&;#177;0.009)ng／g，P&;lt;0．0l，0．05]，丹参酮ⅡA组明显低于高血压组(P&;lt;0．05)。②实验12周后大鼠心肌组织血管紧张素Ⅱ含量：高血压组和丹参酮ⅡA组均明显高于对照组(0．093&;#177;0．016），(0．088&;#177;10．024)，（0．043&;#177;0．012)ng／L，P&;lt;0．01]。③实验12周后大鼠心肌组织CYP11B1基因的表达量：高血压组和丹参酮ⅡA组均明显高于对照组(2．774&;#177;0．138，2．533&;#177;0．127，1．973&;#177;0．102，P&;lt;0．05)。④实验12周后大鼠心肌组织CYP11B2基因的表达量：高血压组和丹参酮ⅡA组均明显高于对照组(1．573&;#177;0．106．1．024&;#177;0．113,0．786&;#177;0．121．P&;lt;0．01，0．05)，丹参酮ⅡA组明显低于高血压组(P&;lt;0．05)。⑤各组大鼠心肌组织CYP11B1和CYP11B2及参照基因甘油醛-3-磷酸脱氢酶基因的反转录聚合酶链反应产物电泳带的位置与理论值相符。结论：丹参酮ⅡA抑制高血压左室肥厚的效应可能与其下调心肌醛固酮合成相关基因CYP11B2的表达水平，减少心脏局部醛固酮的生物合成有关。     

谷氨酰胺对脓毒症大鼠心肌细胞Bcl-2/Bax表达的影响

目的 研究脓毒症大鼠心肌细胞凋亡与Bcl-2/Bax基因及蛋白表达的关系,探讨谷氨酰胺(Gin)对脓毒症心肌细胞凋亡的保护作用.方法采用内毒素(LPS 4 ms/ks)腹腔注射法制作脓毒症大鼠模型,实验地点在中山大学北校区动物实验中心.健康Sprague-Dawley(sD)大鼠72只随机分为对照组、LPS组及LPS+Gln(0.3g/kg)组,再分为0 h,6 h,12 h,24 h亚组(腹腔注射后每组成功存活至观察时间点的大鼠累积达到6只,n=6),检测各时点心肌细胞凋亡率和Bcl-2及Bax蛋白的含量,同时检测心肌Bcl-2及Bax mRNA表达.对结果进行方差分析和相关性统计分析.结果 LPS组大鼠心肌细胞凋亡率6 h、12 h及24 h均明显高于埘照组(F=186.786,P<0.01);心肌细胞Bax蛋白表达术后6 h降低(F=9.027,P<0.01),之后高于对照组;而Bcl-2蛋白表达6 h,12 h及24 h均低于对照组(F=301.142,P<0.01);Bax/Bcl-2蛋白表达比明显高于对照组(F=527.373,P<0.01);BaxmRNA和Bcl-2 6 h,12 h及24 h较对照组均明显上调(F=126.157,80.745,P<0.01).LPS+Gln组与LPS组比较,6 h,12 h及24 h心肌细胞凋亡率明显低于LPS组(F=75.187,P<0.01);Bax蛋白表达下降(F=20.981,P<0.01),而Bcl-2蛋白却升高(F 164.969,P<0.000);Bax/Bcl-2蛋白表达比降低(F=141.426,P<0.01);Bax mRNA和Bcl-2 6 h,12 h及24 h组较LPS组均明显下调(F=103.463,89.373,P<0.01).结论 Bcl-2抗凋亡基因及Bax促凋亡基因及其蛋白的表达参与脓毒症心肌细胞凋亡;应用Gln能影响凋亡相关基因及蛋白表达,减轻脓毒症心肌细胞的凋亡,改善脓毒症预后.     

丹参酮ⅡA对压力超负荷大鼠心肌肥厚的抑制作用及机制研究

目的 观察丹参酮ⅡA磺酸钠(sodium tanshinone ⅡA sulfonate,TSN) 对腹主动脉缩窄高血压大鼠肥厚心肌的作用以及对细胞内游离钙离子浓度、Janus激酶及其信号转导子和激活子(JAK/STAT)的影响.方法 SD大鼠行腹主动脉缩窄术建立高血压左室心肌肥厚模型,随机分为心肌肥厚组(n=8)、丹参酮ⅡA组(n=8)和缬沙坦组(n=8);另取8只行假手术.用药8周后通过超声心动图测定左室后壁、室间隔的厚度;测量大鼠的尾动脉收缩压(SBP)和左室质量指数(LVMI);HE染色检测心肌细胞的直径(MDF);激光共聚焦显微镜测定心肌细胞内游离Ca2+浓度的变化;Western blot方法测定各组大鼠JAK1和STAT3的表达.结果 ①TSN对血压没有影响,显著高于假手术组和缬沙坦组(P<0.01).②TSN组和缬沙坦组的左室后壁、室间隔厚度、LVMI、MFD虽然高于假手术组(P<0.05),却显著低于手术组(P<0.01).③TSN与缬沙坦均可显著降低肥厚心肌的[Ca2+]i,丹参酮对[Ca2+]i 的影响显著超过缬沙坦(P<0.05).④与假手术组相比,肥厚心肌的JAK1和STAT3蛋白表达显著升高(P﹤0.05);丹参酮ⅡA、缬沙坦均可显著降低肥厚心肌JAK1和STAT3的蛋白水平.结论 JAK/STAT的表达在心肌肥厚的信号通路中起着重要的作用;丹参酮ⅡA可能是通过降低心肌细胞[Ca2+]i浓度、阻滞JAK/STAT信号通路的转导,起到抑制心肌肥厚的作用.     

高血压左室肥厚发病中细胞间黏附分子1的表达及丹参酮ⅡA的抑制效应

背景细胞间黏附分子1作为炎症反应的可靠标志物在动脉粥样硬化发病中具有重要的作用.近年来研究认为其介导的慢性炎症反应可能参与高血压左室肥厚的发病过程,但也有报道持相反观点.丹参酮ⅡA是丹参的一种脂溶性提取性,动物实验证明其具有抑制高血压左室肥厚发生的作用.目的探讨细胞间黏附分子1在高血压左室肥厚发生中的作用及丹参酮ⅡA对其表达的影响.设计随机对照观察.单位华中科技大学同济医学院附属同济医院.材料实验于2002-10/2004-01在华中科技大学同济医学院附属同济医院急诊科实验室完成,选用12周龄雄性WKY大鼠10只、自发性高血压SHR大鼠20只,分为对照组(WKY大鼠10只)、高血压组(SHR大鼠10只)、丹参酮ⅡA组(SHR大鼠10只).方法丹参酮ⅡA组经尾静脉注射丹参酮ⅡA 1.5 mg/(kg·d)治疗,其他两组分别注射等量的蒸馏水.12周后断头处死所有大鼠留取心肌标本,应用苏木精-伊红染色、VG染色,免疫组化染色及心肌ED1标记检测心肌巨噬细胞浸润数,心肌细胞间黏附分子1 mRNA及蛋白的表达应用反转录-聚合酶链反应及酶链免疫吸附实验等方法.主要观察指标各组大鼠心肌巨噬细胞浸润数,心肌细胞间黏附分子1mRNA及蛋白表达.结果20只SHR和10只WKY大鼠被纳入实验,并全部进入结果分析,无脱失值.①与对照组比较,高血压组大鼠肥厚心肌中细胞间黏附分子1的mRNA及蛋白表达显著增加(0.176±0.087,0.537±0 195;0.104±0.011,0.173±0.027,P＜0.01或P＜0.05),巨噬细胞浸润明显(0.62±0.07,1.85±0.23,P＜0.01).②与高血压组比较,丹参酮ⅡA组大鼠心肌细胞间黏附分子1的mRNA及蛋白表达水平显著下调(0.537±0.195,0.291±0.106;0.173±0.027,0.125±0.014,P＜0.01或P＜0.05),巨噬细胞浸润数减少(1.85±0.23,1.16±0.17,P＜0.05),心肌细胞肥大和间质纤维化程度明显减轻.结论心肌细胞间黏附分子1的过度表达及其介导的炎性细胞浸润在高血压左室肥厚的发病过程中具有重要作用.丹参酮ⅡA抑制左室肥厚的效应可能与其下调细胞间黏附分子1表达,减少炎性细胞的心肌浸润有关.     

丹参酮IIA对自发性高血压大鼠左室肥厚的影响及机制

目的 :观察丹参酮IIA对自发性高血压大鼠左室肥厚的作用 ,并探讨其作用机制。方法 :18只 8周龄的自发性高血压大鼠随机分成 3组 :一组于 8周处死 ,另两组分别经腹腔注射丹参酮IIA和蒸馏水 (1g·kg-1·d-1) ,共 10周。测量大鼠尾动脉收缩压 (SBP)及左心室重量指数 (LVMI)。应用HE染色、VG染色、免疫组织化学的方法 ,结合计算机图像分析技术 ,检测心肌细胞的直径和面积、心肌组织胶原体积比例 (CVF)、血管周围胶原面积和管腔面积比例 (PVCA)以及蛋白激酶C(PKC)的表达。结果 :与 8周龄的自发性高血压大鼠相比 ,18周龄大鼠的SBP、LVMI、心肌细胞的直径、面积、CVF、PVCA显著增加 ,PKC表达上调 ,丹参酮IIA治疗可抑制LVH的发展和心肌组织PKC的表达 ,但收缩压无明显改变。结论 :长期应用丹参酮IIA治疗可预防自发性高血压大鼠左室肥厚的形成 ,其机制可能与丹参酮IIA降低了心脏PKG的表达有关     

缬沙坦对自发性高血压大鼠心肌Bcl-2和Bax蛋白表达的影响

背景高血压的心肌肥厚(cardiomyopathy hypertrophy)是对于慢性动脉压力超负荷的一种代偿反应,压力负荷持续性增高将导致心肌收缩力下降.在心肌代偿性肥厚发展为心力衰竭机制的众多研究中,心肌细胞进行性丢失日益受到重视.目的探讨遗传性高血压及左室肥厚过程中心肌组织凋亡调节蛋白Bcl-2,Bax表达的变化及血管紧张素Ⅱ1型受体(angiotensinⅡtype 1 receptor,AT1R)拮抗剂缬沙坦的影响.设计随机对照实验研究.单位一所大学医学院心内科,一所大学医院心内科.材料本实验在北京大学人民医院中心实验室完成.实验选用8周龄自发性高血压大鼠(SHR)30只,按随机数字法将其分为缬沙坦组和非治疗组;以8周龄Wistar鼠15只作为对照组.干预所有动物饲养8周,取左心室组织,称质量备用.部分心肌组织置100 mL/L甲醛液中固定6 h后常规石蜡包埋备形态学研究.计算心脏指数.采用免疫组化、Western印迹等方法检测凋亡调节蛋白Bcl-2,Bax表达.主要观察指标心肌细胞Bcl-2及Bax蛋白Western blot条带吸光度(A值)扫描值及Bcl-2/Bax比值.结果SHR心肌中存在Bax高表达,缬沙坦治疗8周后,SHR心肌组织Bax蛋白表达显著降低至接近对照组.缬沙坦组及对照组Bcl-2蛋白表达与非治疗组比较,差异无显著性意义(P＜0.05).缬沙坦组及对照组Bcl-2/Bax比值(6.71±1.10,5.86±0.70)明显高于非治疗组(0.63±0.23)(P＜0.05).结论心肌细胞凋亡是代偿性心肌肥厚发展为心力衰竭的可能机制之一.高血压早期缬沙坦在降压同时有效抑制心肌细胞凋亡.     

氯沙坦对心力衰竭大鼠骨骼肌萎缩中细胞凋亡、抗凋亡蛋白Bcl-2和促凋亡蛋白Bax表达的作用

目的：观察氯沙坦对心力衰竭大鼠骨骼肌萎缩程度的影响，分析抗凋亡蛋白Bcl-2和促凋亡蛋白Bax在该影响中的作用。 方法：实验于2003—04／2004—04在郑州大学病理生理学教研室完成。①选用清洁级健康成年SD大鼠24只，雄性。按随机抽签法将大鼠分为3组：对照组、模型组和治疗组，每组8只。通过颈部一次性皮下注射野百合碱30mg／kg建立心力衰竭模型。治疗组：造模2周后灌胃氯沙坦混悬液10mg/（kg&;#183;d），共2周；对照组和模型组（造模）以等量生理盐水灌胃2周。②计算右心室肥大程度判定指标右心室壁质量／左心室＋室间隔质量、右心室壁质量／体质量。计算骨骼肌萎缩程度的判定指标腓肠肌质量／体质量。采用脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记法原位标记法计算凋亡指数。采用蛋白免疫印迹法检测腓肠肌Bcl-2和Bax蛋白的表达，并计算Bax／Bcl-2。③组间计量资料差异比较采用单因素方差分析和独立样本t检验。 结果：SD大鼠24只均进入结果分析。①模型组右心室壁质量／左心室＋室间隔质量和右心室壁质量／体质量明显高于对照组（t=4．64,5．63，P〈0.01）；模型组腓肠肌质量／体质量明显低于对照组（t=3．72，P〈0．01）；治疗组右心室壁质量／体质量明显低于模型组（t=2．48,P〈0.05）。治疗组腓肠肌质量／体质量虽与模型组比较，差异不明显，但有增高的趋势。②模型组大鼠腓肠肌细胞凋亡率和Bax蛋白表达明显高于其他2组（t=3．75-17．48，P〈0.05-0.01），模型组Bcl-2蛋白表达明显低于其他2组（t=6．19,4．49，P〈0．01）。 结论：氯沙坦可明显提高Bcl-2蛋白表达，降低Bax蛋白表达和骨骼肌细胞凋亡，从而达到减轻心力衰竭大鼠骨骼肌萎缩的趋势。     

促红细胞生成素对大鼠脑出血神经的保护作用

目的 研究促红细胞生成素(EPO)对脑出血神经保护作用的机制.方法 用立体定向技术,将自体小凝血注入大鼠尾状核区制备脑出血模型.110只Wistar雄性大鼠,随机分成四组:正常组、假手术组、ICH对照组、rhEPO治疗组.应用免疫组化及原位细胞凋亡检测脑出血灶周组织Bcl-2、Bax表达及凋亡细胞.统计学方法采用LSD-t检验及Pearson相关分析.结果 ICH对照组及rhEPO治疗组术后6 h血肿周围皮质TUNEL,Bcl-2,Bax阳性细胞明显增加,72 h达到高峰,120 h下降,各时间点与假手术组比较,差异具有统计学意义(P<0.01).rhEPO治疗组TUNEL、Bax阳性细胞数明显少于同时点ICH对照组(P<0.01),但Bcl-2阳性细胞数明显增加(P<0.01).Bax蛋白表达及Bax/Bcl-2均与细胞凋亡呈正相关(P<0.01).结论 凋亡机制参与脑出血后继发性损伤过程,EPO通过上调Bcl-2蛋白表达,下调Bax蛋白表达,对脑出血后神经损伤起保护作用.     

厄贝沙坦对大鼠心肌细胞凋亡及Bcl-2/Bax蛋白表达的影响

目的观察自发性高血压大鼠(spontaneouslyhypertensiverats,SHR)心肌细胞凋亡和Bax/Bcl-2蛋白的表达;同时观察血管紧张素Ⅱ-1型受体(angiotensinⅡ1typereceptor,AT1R)拮抗剂-厄贝沙坦对SHR大鼠心肌细胞凋亡和BcL-2/Bax蛋白表达的影响。方法24只16周龄SHR大鼠(上海市高血压研究所提供,医动字02-37-1号)分为SHR治疗组[沙坦30mg/(kg·d),20周]和SHR对照组,另选16周龄Wistar大鼠12只作为正常对照组。分别采用SP免疫组化法和末端脱氧核苷酸转移酶介导dUTP缺口末端标记法方法检测心肌细胞凋亡指数和BcL-2/Bax蛋白水平的表达,放射免疫法检测血浆和组织血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)。结果SHR治疗组与正常对照组比较收缩压明显增高[(243±13)和(151±11)mmHg,1mmHg=0.133kPa],左心室质量与体质量比(leftventricularmass/bodymass,LVW/BW)明显增加[(4.05±0.33)和(2.90±0.23)g/kg];血浆和心肌组织AngⅡ增高[血浆(31.8±5.4)和(22.2±18.5)ng;心肌(13.2±2.1)%和(8.3±1.2)%];心肌细胞凋亡指数明显增加[(4.75±0.70)%和(2.84±0.60)%];心肌细胞Bax蛋白的表达明显增强[(5.02±0.34)%和(2.85±0.29)%],Bcl-2/Bax比率明显降低(0.65±0.13和1.05±0.18),差异有显著性意义(P<0.05～0.01);而Bcl-2蛋白的表达[(3.2     

丹参酮ⅡA对血管紧张素Ⅱ诱导的心肌细胞肥大及Bcl-2和Bax蛋白表达的影响

目的:在原代培养的新生大鼠心肌细胞上,观察丹参酮ⅡA(tanshinoneⅡA,TSN)对血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)诱导的心肌细胞肥大和凋亡的影响。方法:应用细胞培养技术培养新生大鼠心肌细胞,采用相差显微镜测量细胞大小,测定心肌细胞3H-亮氨酸掺入作为心肌细胞肥大的指标;用Westernblot法检测心肌细胞Bcl-2、Bax蛋白的表达;流式细胞术检测细胞凋亡率。结果:TSN能抑制AngⅡ诱导的心肌细胞凋亡和心肌细胞增大,使心肌细胞3H-亮氨酸掺入率的显著降低(P<0.05)、心肌细胞促凋亡蛋白Bax的表达明显降低(P<0.05),心肌细胞抑制凋亡蛋白Bcl-2的表达明显增高(P<0.05),其效果与AngⅡ受体阻滞剂缬沙坦(valsartan)相似。结论:TSN可以抑制AngⅡ诱导的心肌细胞肥大,这可能与其同时抑制了心肌细胞的凋亡有关。     

参附注射液影响大鼠缺血再灌注心肌Bcl-2,Bax与c-Fos蛋白的表达

背景:研究证实,参附注射液对各种休克、心力衰竭、心肌缺血以及室上性/室性心律失常均有改善治疗作用,对大鼠心肌缺血再灌注损伤具有良好的保护作用。目的:观察参附注射液对急性缺血再灌注损伤大鼠心肌凋亡相关基因Bcl-2,Bax和c-Fos蛋白表达的影响。设计:完全随机分组设计,对照实验。单位:重庆医科大学附属第二医院麻醉科。材料:实验于2004-04/12在重庆医科大学附属第二医院麻醉教研室完成。选用健康成年Wistar大鼠35只,由解放军第三军医大学大坪医院实验动物中心提供。参附注射液是中医“回阳救逆”参附汤的中药配方,其主要成分是人参皂甙及乌头类生物碱(雅安三九药业有限公司出品,规格10mL/支,批号:030110)。方法:采用在体心脏缺血再灌注模型,35只大鼠按随机数字表法分为5组,每组7只。①假手术组:只穿线不结扎,静脉注射生理盐水8mL/kg,观察120min。②参附注射液30min组:结扎前15min静脉注射参附注射液8mL/kg,结扎左冠状动脉前降支40min,再灌注30min。③参附注射液120min组:再灌注120min,余同参附注射液30min组。④生理盐水30min对照组:结扎左冠状动脉前降支前15min静脉注射生理盐水8mL/kg,结扎左冠状动脉前降支40min,再灌注30min。⑤生理盐水120min对照组:再灌注120min,余同生理盐水30min组。应用免疫组化法检测各组大鼠心肌凋亡相关基因Bcl-2,Bax和c-Fos蛋白的表达量。主要观察指标:各组大鼠心肌凋亡相关基因Bcl-2,Bax和c-Fos蛋白的表达量。结果:35只大鼠全部进入结果分析,无脱失。①与假手术组比较,生理盐水30min组和120min组大鼠心肌Bcl-2,Bax和c-Fos蛋白表达水平显著升高(P<0.01),Bcl-2/Bax比率显著降低(P<0.01)。②与相应生理盐水组比较,参附注射液30min组和120minBcl-2蛋白表达水平显著升高(P<0.01),Bax和c-Fos蛋白表达水平显著降低(P<0.01),Bcl-2/Bax比率显著升高(P<0.01)。结论:参附注射液对缺血再灌注心肌保护效应可能与其促进Bcl-2蛋白高表达、抑制Bax与c-Fos蛋白表达、增加Bcl-2/Bax比率,从而抑制心肌细胞凋亡有关。     

腺苷预处理对缺血/再灌注心肌细胞凋亡和凋亡蛋白Bcl-2/Bax的影响

目的 研究腺苷预处理对大鼠缺血/再灌注心肌细胞凋亡和凋亡蛋白Bcl-2/Bax的影响.方法 制备缺血/再灌注损伤(I/R)和腺苷预处理的大鼠模型,采用流式细胞仪检测心肌细胞凋亡率和凋亡蛋白Bcl-2和Bax.结果 ①缺血/再灌注组和腺苷组心肌细胞凋亡率均显著高于对照组(P<0.01),而腺苷组凋亡率显著低于缺血/再灌注组(P<0.01).②缺血/再灌注组抗凋亡蛋白Bcl-2表达与对照组比较无明显差别,而腺苷组Bcl-2显著高于缺血/再灌注组和对照组(P<0.01);缺血/再灌注组和腺苷组促凋亡蛋白Bax表达显著高于对照组(P<0.01),而腺苷组Bax低于缺血/再灌注组(P<0.01);缺血/再灌注组和腺苷组Bcl-2/Bax比值显著低于对照组(P<0.01),而腺苷组Bcl-2/Bax比值显著高于缺血/再灌注组(P<0.01).结论 腺苷预处理明显抑制大鼠缺血/再灌注后心肌细胞的凋亡,并使Bcl-2/Bax比值增加.