小窝蛋白-1和NF-κB在机械通气肺损伤大鼠肺组织中的表达

目的通过观察小窝蛋白-l(cav-1)及NF-κB p65、IL-8在大潮气量机械通气大鼠肺组织中的表达变化,探讨cav-1在通过对NF-κB信号转导通路的影响而导致对肺组织的损伤作用。方法将雄性SD大鼠随机分为三组:对照组、大潮气量通气0.5 h组(H-VT0.5h组)和大潮气量通气2 h组(H-VT2h组)。光镜下观察各组大鼠肺组织病理学改变;免疫组织化学染色法检测肺组织中cav-1的蛋白含量;反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测NF-κB p65的m RNA表达;计算肺湿/干重比值(W/D);酶联免疫吸附试验(ELISA)测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中IL-8的含量,并对cav-1及NF-κB p65进行相关性分析。结果 H-VT2h组肺组织中肺W/D比值、cav-1的蛋白表达、NF-κB p65 m RNA的表达水平及BALF中IL-8的含量均大于H-VT0.5h组,差异有统计学意义(均P<0.05);H-VT0.5h组肺组织中肺W/D比值、cav-1的蛋白表达、NF-κB p65 m RNA的表达水平以及BALF中IL-8的含量均大于对照组,但差异无统计学意义(均P>0.05)。相关性分析结果显示,各组大鼠肺组织cav-1蛋白表达水平与NF-κB p65 m RNA表达水平之间呈正相关(r=0.820,P<0.01)。结论 cav-1在机械通气导致肺损伤发生中可能起损伤作用。这种损伤作用可能与cav-1经过多种途径激活NF-κB炎症信号通路,使IL-8等细胞因子释放有关,最终导致炎症的加重和肺组织损伤。     

高浓度氧对成年大鼠肺组织NF-кB和IL-8表达的影响

目的通过观察不同持续时间高浓度吸氧对大鼠肺组织NF-кB和IL-8的影响,探讨高浓度氧所致肺组织损伤(HILI)的发生时间和机制。方法 40只成年雄性Wistar大鼠按随机数字表法分为5组,即对照组(吸入空气)、吸氧48 h组、72 h组、96 h组和120 h组,吸入氧浓度均在95%以上。测定肺组织湿干重比值(W/D)和支气管肺泡灌洗液(BALF)中性粒细胞计数;采用免疫组织化学法检测肺组织NF-кB和IL-8的表达水平。结果随着高浓度氧暴露时间延长,肺组织W/D、肺组织NF-кB和IL-8蛋白表达水平及BALF中性粒细胞计数均逐渐增加,其中96 h组和120 h组增加最明显,与对照组、48 h组及72 h组比较均有统计学意义(均P<0.01),而对照组、48 h和72 h组之间,以及96 h组和120 h组之间各项指标比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。相关性分析表明,肺组织NF-кB与IL-8蛋白表达水平之间呈正相关(r=0.856,P<0.001)。结论高浓度吸氧持续96 h以上即可引起肺组织损伤,其发生可能与高浓度氧激活肺组织细胞NF-кB,上调IL-8表达,导致中性粒细胞聚集、活化引起的炎症反应有关。     

脂氧素对机械通气所致肺损伤的实验研究

目的 研究脂氧素对机械通气致肺损伤的保护作用及相关保护机制.方法 36只健康雄性SD大鼠按随机数字表分组.采用大潮气量通气制作大鼠VILI模型.麻醉和气管切开及气管内插管后,对照组(Control组)保留自主呼吸;大潮气量组(HV组)采用大潮气量通气[潮气量(VT)30 mL/kg,呼吸频率(RR)40次/min];大潮气量组+脂氧素处理组(HV+LX组)于机械通气前5 min静脉注射脂氧素10 μg/kg,其余两组注射等量生理盐水.通气时间均为2 h.每组大鼠实验过程中监测血流动力学和动脉血气;通气2 h后处死大鼠取肺组织,测定肺湿/干质量(W/D)比值和髓过氧化物酶(MPO)活性,酶联免疫吸附法(ELISA)测定肺泡灌洗液(BALF)中核转录因子(NF-κB)和白细胞介素-8(IL-8)含量;苏木素-伊红(HE)染色观察肺组织病理学改变并进行肺泡损伤评分(DAD损伤评分).结果 与Control组相比,HV组和HV+LX组的动脉血氧分压(PaO2)、动脉血二氧化碳分压(PaCO2)、平均动脉压(MAP)均呈下降趋势;动脉血pH值呈上升趋势.HV+LX组MAP显著高于HV组(P<0.05).与Control组相比,HV组肺组织W/D比值、MPO活性、DAD评分、NF-κB、IL-8显著升高(P<0.05或P<0.01);与HV组相比,HV+LX组肺组织W/D比值、MPO活性、DAD评分及NF-κB和IL-8显著降低(P<0.05或P<0.01).结论 脂氧素在大鼠机械通气模型中可减少肺泡蛋白质的渗出,可抑制肺组织中NF-κB、IL-8的产生,减少中性粒细胞在肺泡内的浸润和黏附,从而减轻大容量机械通气造成的肺组织损伤.     

胆碱能抗炎通路对大鼠呼吸机相关性肺损伤的影响

目的 研究胆碱能抗炎通路对呼吸机相关性肺损伤(VILI)的影响.方法 36只SD大鼠按随机数字表法分为自主呼吸对照组、机械通气组、烟碱治疗组,每组12只.采用大潮气量(VT)通气制作大鼠VILI模型.于机械通气前10 min腹腔注射烟碱生理盐水2 mg/kg,其余两组注射等量生理盐水.各组大鼠均行血流动力学和动脉血气监测;通气2 h处死大鼠取肺组织,测定肺湿/干重(W/D)比值和髓过氧化物酶(MPO)活性,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞介素-8(IL-8)含量及肺组织匀浆细胞间黏附分子-1(ICAM-1)含量;苏木素-伊红(HE)染色观察肺组织病理改变,按修改后弥漫性肺泡损伤评分系统(DAD)进行评分.结果 机械通气期间,机械通气组和烟碱治疗组动脉血pH值呈升高趋势,动脉血氧分压(PaO2)、动脉血二氧化碳分压(PaCO2)、平均动脉压(MAP)均呈下降趋势.机械通气2 h,烟碱治疗组PaO2(mm Hg,1 mm Hg=0.133 kPa)显著高于机械通气组(85±4比76±3,P<0.05).机械通气组肺W/D比值和MPO活性显著高于对照组[W/D比值:5.66±0.33比4.53±0.21,P<0.01;MPO(U/g):1.73±0.50比0.89±0.17,P<0.05];烟碱治疗组肺W/D比值(5.02±0.37)和MPO活性(1.11±0.33)显著低于机械通气组(均P<0.05).与对照组比较,机械通气组和烟碱治疗组DAD评分(分:10.40±1.85、7.90±1.67比1.60±1.20)、IL-8(ng/L:1 625.3±271.7、965.5±310.5比428.5±120.6)及ICAM-1(μg/L:589.4±87.5、452.5±89.3比247.5±73.7)显著升高(均P<0.01),但烟碱治疗组各指标明显低于机械通气组(P<0.05或P<0.01).结论 胆碱能抗炎通路可抑制VILI大鼠肺组织中IL-8、ICAM-1的表达,减少中性粒细胞在肺内的黏附与渗出,从而减轻肺损伤.     

血红素加氧酶-1表达对大鼠呼吸机相关性肺损伤的作用及机制研究

目的 观察呼吸机相关性肺损伤(VILI)模型大鼠肺组织中血红素加氧酶-1(HO-1)表达的变化,探讨HO-1诱导剂血晶素拮抗VILI的作用机制.方法 56只雄性SD大鼠按照随机数字表法分成对照组(C组),VILI模型组(M组),诱导剂血晶素1、2、3、4组(H1、 H2、H3、H4组,制模前24 h分别腹腔注射血晶素40、80、120、160 μmol/kg)和抑制剂Z组[制模前24 h腹腔注射锌原卟啉(ZnPP)10 μmol/kg].除C组外各组机械通气4 h后处死大鼠,收集支气管肺泡灌洗液(BALF),测定总蛋白、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-10(IL-10)含量;取肺组织,测定肺湿/干重(W/D)比值、乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)水平及HO-1蛋白表达;光镜下行肺组织病理观察.结果 与C组相比,M组大鼠肺病理损伤严重,BALF中总蛋白、TNF-α、IL-10,肺组织W/D比值、MDA、LDH及HO-1蛋白表达均明显增加, VILI模型复制成功.与M组比较,随着血晶素剂量的增加,H1、H2、H3组总蛋白(g/L)显著下降(0.74±0.06、0.73±0.07、0.70±0.07比0.84±0.08,均P<0.01);W/D比值下降(4.93±0.27、4.91±0.24、4.87±0.23比5.53±0.48,均P<0.01);SOD活性(U/mg)显著升高(85±9、82±15、93±11比55±12,均P<0.01);MDA含量(nmol/mg)显著降低(15±3、15±3、13±2比18±4,P<0.05或P<0.01);IL-10含量(pg/L)逐渐升高(0.42±0.06、0.46±0.06、0.47±0.05比0.36±0.07),TNF-α含量(pg/L)逐渐降低(0.18±0.07、0.14±0.03、0.10±0.07比0.23±0.06),但只有H2、H3组差异有统计学意义(均P<0.01);LDH活性(U/g)降低(11 353±1 317、11 516±1 613、9 631±1 520比12 361±1 841),但仅H3组差异有统计学意义(P<0.01);HO-1蛋白表达[吸光度(A)值]逐渐增强(0.164±0.010、0.190±0.149、0.205±0.018比0.122±0.016,均P<0.01);肺病理损伤逐渐减轻.而随着剂量进一步增加,H4组肺组织损伤较H1、H2、H3组加重.给予HO-1抑制剂ZnPP后HO-1的保护作用消失.结论 血晶素诱导HO-1适度表达可以减轻VILI,其适度表达的最佳剂量为120 μmol/kg,其机制可能通过抗炎和抗氧化应激发挥对肺组织的保护作用.     

不同潮气量机械通气对大鼠肺小窝蛋白-1及其相关信号链酶表达的影响

目的 研究小窝蛋白-1(cav-1)及其相关信号链酶在不同潮气量(VT)机械通气大鼠肺组织中的表达变化.方法 按随机数字表法将SD大鼠分为5组,每组8只.对照组(A组)仅切开气管保留自主呼吸;保护性机械通气1h、2h组(B1组、B2组)VT为6 ml/kg;大VT通气1h、2h组(C1组、C2组)VT为30 ml/kg.A组在气管切开即刻,通气组分别于通气1h或2h末处死大鼠,光镜下观察肺组织病理学改变;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测cav-1、eNOS的mRNA表达;免疫组化法检测肺组织中cav-1、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、白细胞介素-1受体相关激酶4(IRAK4)及核转录因子-κB(NF-κB)p65的蛋白表达;比色法测定髓过氧化物酶(MPO)活性;计算肺湿/干质量比值(W/D);酶联免疫吸附试验(ELISA)测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量.结果 A组、B1组、B2组之间肺组织cav-1、eNOS的mRNA表达,cav-1、eNOS、IRAK4、NF-κBp65的蛋白表达,肺W/D比值,MPO和TNF-α水平差异均无统计学意义.与相应B1、B2组比较,C1、C2组cav-1 mRNA(A值比值)和cav-1、IRAK4、NF-κBp65蛋白表达(A值)明显增加(cav-1 mRNA:0.833±0.085比0.384 ±0.011,1.162±0.166比0.388±0.014;cav-1蛋白:0.188±0.011比0.140±0.052,0.210±0.013比0.125±0.014;IRAK4蛋白:0.181 ±0.009比0.150±0.008,0.205±0.085比0.155 ±0.012;NF-κBp65蛋白:0.294±0.011比0.236±0.015,0.304±0.012比0.239±0.005),eNOS的mRNA(A值比值)和蛋白表达(A值)明显减少(eNOS mRNA:0.174±0.016比0.278=0.021,0.107±0.014比0.262±0.045;eNOS蛋白:0.180±0.017比0.211±0.010,0.161±0.016比0.216±0.013),肺W/D比值、MPO活性(U/g)和TNF-α含量(ng/L)明显升高(W/D:5.64±0.42比4.63±0.12,6.73±0.83比4.70±0.15;MPO:1.86±0.26比0.85±0.11,2.14±0.24比0.88±0.18; TNF-α:386.53±29.12比50.57±10.98,455.77±37.78比52.11±9.92),差异均有统计学意义(均P＜0.05).随通气时间延长,C2组各指标较C1组改变更为明显(均P＜0.05).结论 cav-1及其相关信号链酶在机械通气中的表达参与了呼吸机相关性肺损伤.     

机械通气致肺损伤的防护

[目的]通过研究大潮气量机械通气引起的肺损伤(VILI),提出机械通气时通气机所致VELI的护理防护.[方法]将24只健康雄性SD大鼠随机等分为对照组与实验组,对照组小潮气量通气(VT=8mL/kg);实验组为致伤组大潮气量通气(VT=40mL/kg).通气时间均为4 h,每小时行1次动脉血气分析.通气后行支气管肺泡灌洗液(BAIF)中性粒细胞计数,血清和BALF中TNF-α、IL-1β含量测定.[结果]实验组大鼠氧合指数较对照组显著下降,BALF中性粒细胞计数、血清和BALF中TNF-α、IL-1β水平较对照组显著增加.[结论]大潮气量机械通气能引起明显的VILI,临床上对于机械通气的病人,应尽量避免大潮气量通气,加强对通气机所致VILI的护理防护.     

糖皮质激素对大潮气量机械通气大鼠肺组织巨噬细胞炎症蛋白-1 α和核因子-κB表达的影响

目的 观察大潮气量机械通气大鼠血浆和支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)巨噬细胞炎症蛋白-1α(MIP-1α)含量以及肺组织MIP-1α mRNA和NF-κBp65 mRNA表达水平.方法 32只健康雄性Wistar大鼠随机(随机数字法)分为对照组,机械通气致肺损伤(VILI)组、地塞米松干预(DEX)组和布地奈德干预(BUD)组.给与相应处理后分别采用ELISA法检测各组大鼠BALF和血浆MIP-1α含量,采用RT-PCR法检测其肺组织MIP-1αmRNA和NF-κB p65mRNA表达水平,比较4组之间的差异,并将VILI,DEX,BUD组间MIP-1α mRNA与MIP-1α含量,MIP-1α mRNA与NF-κB p65 mRNA表达水平间进行直线相关分析.结果 DEX组和BUD组BALF及血浆中MIP-1α含量及肺组织MIP-1αmRNA和NF-κBp65 mRNA表达水平均明显低于VILI组(P＜0.05),同时肺组织损伤程度明显减轻;BUD组BALF和血浆中MIP-1α含量及肺组织MIP-1α mRNA和NF-κB p65 mRNA表达水平虽高于DEX组,但差异无统计学意义(P＞0.05).相关分析结果表明,肺组织MIP-1α mRNA表达量与BALF中MIP-1α含量呈正相关(r=0.895,P＜0.05);肺组织MIP-1α mRNA表达量与NF-κB p65 mRNA表达量呈正相关(r=0.801,P＜0.05).结论 糖皮质激素可能通过抑制NF-κB的活性而下调肺组织MIP-1α的表达,对VILI有一定防治作用;局部应用糖皮质激素对VILI的保护作用与全身用药的作用相似,且副作用小.     

TNF-α和TLR-4在呼吸机相关肺损伤大鼠肠道细菌移位中的作用

目的研究TNF-α和TLR-4在呼吸机相关肺损伤大鼠肠道细菌移位中的作用。方法将24只SD大鼠随机分为3组,健康对照组(C组)、呼吸机相关肺损伤组(VILI组)、肠道抗生素组(AMP+VILI组),VILI组、AMP+VILI组以大潮气量机械通气制造大鼠呼吸机相关肺损伤模型,通气1 h后,改为小潮气量机械通气,AMP+VILI组在胃内灌入氨苄西林,3~4 h一次,共3次,造模后12 h,测大鼠回肠组织湿/干重比值,取肺脏、肝脏、胰腺、脾脏、肾脏、肠系膜淋巴结组织及回肠内容物行细菌培养及菌种鉴定,用real-time PCR检测回肠组织中TNF-αm RNA表达,ELISA测定回肠组织及0 min,30 min,1 h,2 h,4 h,6 h,8 h,12 h血清中TNF-α浓度,Western blot检测回肠黏膜组织中TLR-4的表达。结果 VILI组回肠组织TNF-αm RNA的表达较健康对照组上调(P<0.05),TNF-α、TLR-4浓度较C组升高(P均<0.05),细菌移位至肺及肠系膜淋巴结,其他器官未检测到移位的细菌;AMP+VILI组回肠组织中TNF-αm RNA的表达较VILI组下调(P<0.05),TNF-α、TLR-4浓度较VILI组降低,细菌移位减少(P均≥0.05)。结论呼吸机相关肺损伤中肠道细菌主要移位到损伤的肺,TNF-α、TLR-4浓度在呼吸机相关肺损伤大鼠肠道细菌移位中可能具有重要作用。抑制肠道细菌移位可能缓解呼吸机相关肺损伤。     

大潮气量机械通气致兔呼吸机相关肺损伤白介素-1β研究

目的:观察大潮气量机械通气致呼吸机相关肺损伤(ventilator-induced lunginjury,VILI)时炎症因子白介素-1β(IL-1β)蛋白水平的时序性表达规律.方法:按照建立兔的最佳VILI模型,以大潮气量(VT)60 mL/kg机械通气,取0、0.5、1、3、6、12、18、24、48 h 9个时间点观察,免疫组织化学方法检测VILI后不同时间点IL-1β在肺组织中的蛋白表达情况;Western blotting检测VILI后不同时间点IL-1β表达规律.结果:免疫组织化学染色检测IL-1β,与正常对照组比较,在通气后0.5、1 h表达有统计学意义,3、6 h表达至高峰,以后逐渐降低,48 h后仍高于正常对照组.Western blotting检测IL-1β,以β-actin作为内参照,与正常对照组比较,分别在通气后0.5、1 h开始表达,3、6 h表达至高峰,以后逐渐降低,在48 h后仍高于正常对照组.结论:IL-1β可诱导或加重肺损伤,参与了急性肺损伤的早期程序.     

重症急性胰腺炎并发肺损伤促/抗炎症因子的变化及大黄附子汤的干预研究

目的观察大黄附子汤对重症急性胰腺炎并肺损伤（SAP-ALI）时血清促/抗炎症因子的影响。方法健康长白猪,体重25～30kg,13头,随机分成三组：对照组（n=4）、重症急性胰腺炎肺损伤组（模型组,n=4）、大黄附子汤治疗组（治疗组,n=5）。其中模型组采用主胰管内逆行注入4%牛磺胆酸钠（1ml/kg）诱导SAP-ALI模型。三组均于术后即刻、术后6h、12h、24h、48h、72h取血,ELISA法动态检测血清中促炎因子（TNF-α和IL-1β）、抗炎因子（IL-4）浓度变化,同时动态比浊法测定血清内毒素（LPS）含量。术后72h处死动物,计算肺组织湿/干重比,观察胰腺与肺病理形态学变化。结果模型组6～72h血清淀粉酶、内毒素、TNF-α、IL-1β浓度及肺病理组织学评分均较对照组明显升高（P〈0.05）,IL-4浓度在术后24h开始较对照组逐渐升高（P〈0.05）。治疗组各时间点血清淀粉酶、内毒素、TNF-α、IL-1β浓度均较模型组明显下降（P〈0.05）,但血清IL-4浓度于术后12h出现明显升高,48h达到峰值。结论促炎因子（TNF-α、IL-1β）、抗炎因子（IL-4）及内毒素等共同参与了SAP-ALI的发病过程。大黄附子汤通过降低血清LPS水平,进而下调血清TNF-α及IL-1β表达,上调IL-4表达,减轻SAP-ALI的程度。     

半乳凝素-3对哮喘豚鼠肺组织嗜酸性粒细胞凋亡及Bcl-2蛋白表达的影响

目的：探讨半乳凝素-3对哮喘豚鼠肺组织嗜酸性粒细胞凋亡及Bcl-2蛋白表达的影响。方法：36只豚鼠随机分为哮喘组、治疗组及对照组,每组12只。哮喘组及治疗组用卵白蛋白致敏和激发制作哮喘模型,对照组同期予生理盐水。于致敏第15～21日激发前1h治疗组豚鼠予半乳凝素-3腹腔注射,剂量0.5mg/kg,每日1次,连续7d。测定3组豚鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）中IL-5含量、嗜酸性粒细胞计数,苏木素-伊红染色观察肺组织病理变化,TUNEL法检测肺组织嗜酸性粒细胞的凋亡,免疫组织化学检测肺组织Bcl-2蛋白的表达。结果：治疗组豚鼠BALF中IL-5含量和嗜酸性粒细胞计数均低于哮喘组（P〈0.05）;其肺组织炎症反应明显轻于哮喘组,肺组织嗜酸性粒细胞计数低于哮喘组,嗜酸性粒细胞凋亡指数高于哮喘组;肺组织Bcl-2蛋白表达低于哮喘组（P〈0.05）。与对照组比较,治疗组BALF中白细胞计数、嗜酸性粒细胞计数、嗜酸性粒细胞占白细胞的比例、IL-5水平均升高（P〈0.05或0.01）;肺组织嗜酸性粒细胞计数、嗜酸性粒细胞凋亡指数均显著升高（P均〈0.01）;肺组织Bcl-2蛋白表达比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：半乳凝素-3可促进哮喘豚鼠BALF中嗜酸性粒细胞凋亡,减轻肺组织炎症反应,这可能与其降低哮喘豚鼠BALF中IL-5含量、下调肺组织Bcl-2蛋白表达有关。     

血必净注射液对卵蛋白致敏小鼠气道MUC5AC及Th1／Th2细胞因子表达的影响

目的研究血必净注射液对卵蛋白（OVA）致敏小鼠气道MUC5AC及Th1/Th2细胞因子表达的影响,探讨干预气道黏液高分泌的机制。方法卵蛋白腹腔注射致敏小鼠,32只小鼠随机分组为：对照组、哮喘组、地塞米松治疗组和血必净治疗组,每组8只,酶联免疫吸附试验（ELISA）检测小鼠肺泡灌洗液（BALF）中IL-4、IFN-γ的水平变化,实时RT-PCR检测小鼠肺组织MUC5AC mRNA表达变化。结果 （1）与对照组小鼠气道MUC5A mRNA表达（0.377±0.021）相比,哮喘组（1.103±0.087）明显增多（P〈0.01）;地塞米松治疗组（0.403±0.038）及血必净治疗组（0.437±0.031）小鼠气道MUC5A mRNA表达较哮喘组明显降低（P〈0.01）;（2）与对照组小鼠BALF表达IL-4[（22.812±1.978）ng/L]及IFN-γ[（101.232±9.664）ng/L]比较,哮喘组BALF表达IL-4[（87.234±6.901）ng/L]水平升高（P〈0.01）,而IFN-γ表达[（47.231±3.887）ng/L]明显降低（P〈0.01）;与哮喘组比较,地塞米松治疗组（[36.289±3.012）ng/L]及血必净治疗组IL-4水平[（38.112±2.761）ng/L]均显著降低（P〈0.01）;结论血必净注射液降低IL-4和MUC5AC的表达,提示在抑制气道黏液高分泌及控制哮喘方面具有意义。     

大鼠肺移植后高迁移率族蛋白B1表达增强

目的观察大鼠肺移植后肺组织高迁移率族蛋白B1（HMGB1）表达和血清HMGB1水平的改变。方法 42只大鼠随机分为对照组（6只）、移植2h组（12只）、移植6h组（12只）和移植12h组（12只）,三套管法建立大鼠左肺原位移植模型。使用实时荧光定量逆转录多聚酶链反应检测肺组织HMGB1mRNA水平,使用免疫印迹法和免疫荧光染色分析肺组织HMGB1蛋白水平。血清中HMGB1、TNF-α、IL-1β和IL-6含量采用ELISA法检测。结果大鼠肺移植后2h肺组织HMGB1mRNA表达和HMGB1蛋白含量即见显著升高（P〈0.01）,并随时间延长而增强。大鼠肺移植后各时间点血清HMGB1、TNF-α、IL-1β和IL-6水平均明显升高（P〈0.01）。结论大鼠肺移植术后HMGB1表达发生明显改变,HMGB1参与肺移植缺血再灌注损伤过程。     

重度未控制性失血性休克三种复苏策略的比较

目的：比较重度未控制性失血性休克（UHS）早期延迟复苏、低压液体复苏和垂体后叶素复苏的效果。方法犬24只,采用股动脉穿刺放血使平均动脉压降至50 mm Hg,随机分为三组（n=8）：延迟复苏组（A组）不采用任何复苏措施,低压液体复苏组（B组）静脉输注羟乙基淀粉（HES200/0.5）、垂体后叶素组（C组）每次静注垂体后叶素0.1～0.4 U/kg,使MAP≥50 mm Hg,1 h后全部停止放血行充分容量复苏。监测放血前即刻（T0）、达到目标血压时（T1）、实施三种复苏方法后1 h（T2）、复苏平稳后2 h（T3）各时点的血流动力学指标及动脉血气参数,同时采血样本检测TNF-α和IL-10。观察实验犬出血量、存活率并取死亡或存活超过72 h立即处死后的心肌、肺、肾组织进行病理学检查。结果（1）血流动力学指标：在T2时点,A组的SBP、DBP、MAP、CVP、HR明显低于B组和C组（P〈0.05）,且大多数动物（6/8）死亡。（2）炎症介质及动脉血气参数：T1和 T2时点,三组的碱缺失（BD）、血乳酸（BL）和 SvO2均与T0有明显差别（P〈0.01）;在T3时点,三组的BD和BL仍处在T1和T2之间,但SvO2恢复正常。三组TNF-α和IL-10的变化规律与BD和BL一致,但在T2和T3时点,A组与B、C两组之间有统计学差异（P〈0.05）。（3）出血量及成活率：在未控制性失血期,A组的失血量少于B和C组,但仅与B组有统计学差异（P〈0.05）。A组72 h的成活率为25%,明显低于B组的87.5%和C组的100%（P〈0.01）。（4）病理学检查：A组心、肺、肾病理损害程度都明显重于B、C两组,但C组的损害程度略轻于B组。结论在重度UHS条件下,垂体后叶素和低压液体复苏均为早期有效的复苏方式,两者复苏后的存活率均高且无统计学差异;但低压复苏组的失血和组织损伤程度比垂体后叶素组明显,复苏质量不如后者。延迟复苏不适宜用于重度UHS。     

平喘固本合剂对哮喘小鼠气道急性炎症的影响

目的 探讨平喘固本合剂对哮喘小鼠气道急性炎症的影响及可能的机制。方法 健康雌性昆明小鼠40只,随机分为空白对照组（A组）、哮喘模型组（B组）、平喘固本合剂治疗组（C组）。用卵清清蛋白致敏建立哮喘小鼠气道急性炎症模型,各组分别给予相应药物治疗10 d。对各组小鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）中细胞进行分类与计数,苏木精-伊红（HE）染色观察肺组织的病理变化,同时应用ELISA法测定BALF中白细胞介素4（IL-4）、干扰素γ（IFN-γ）水平的变化。结果 与A组比较,B组BALF中细胞总数、嗜酸性粒细胞、淋巴细胞、巨噬细胞明显增多（F=85.70-127.69,P＜0.05）,哮喘模型制作成功;C组细胞总数、嗜酸性粒细胞、淋巴细胞、巨噬细胞较B组均明显减少,但较A组升高,差异有显著性（q=2.15-10.08,P＜0.05）。与A组比较,B组中IL-4含量、IL-4/IFN-γ明显升高,IFN-γ明显降低,差异有统计学意义（F=186.17-378.06,q=17.02-21.46,P＜0.05）;与B组比较,C组IL-4、IL-4/IFN-γ降低,IFN-γ升高,差异有显著性（q=4.80-7.18,P＜0.05）。HE染色显示,C组炎症细胞浸润、平滑肌肥厚及肺组织黏膜水肿等炎症表现较B组明显减轻。 结论 平喘固本合剂对急性哮喘小鼠气道炎症有明显的抑制作用,其作用机制可能与其抑制IL-4的表达、抑制炎性细胞聚积及促进IFN-γ的表达有关。     

阻断toll样受体对脂多糖致急性肺损伤的保护作用

目的：本文旨在探讨阻断toll样受体（TRL4）对脂多糖（LPS）致急性肺损伤（ALI）的保护作用。方法将60只健康雄性清洁级SD大鼠分为正常组、损伤组和阻断组,每组20只。损伤组大鼠采用尾静脉注射LPS（6mg/kg）复制ALI模型;阻断组同时注射TLR4抗体（10mg/mL）;正常组给予等容积生理盐水。3h后处死大鼠,采用凝胶滞留法检测核因子-κB（NF-κB）活性;Westernblot印记分析法检测抑制蛋白（IκB-α）水平;检测肺组织匀浆肿瘤坏死因子α细胞因子（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）和白细胞介素-10（IL-10）水平。结果与正常组相比,损伤组和阻断组肺组织湿质量/干质量比值增高,NF-κB活性升高,IκB-α、TNF-α、IL-1β水平升高（P＜0．05）,而IL-10水平降低（P＜0．05）。而比较损伤组与阻断组发现,阻断组肺组织湿质量/干质量比值降低,NF-κB活性降低,IκB-α、TNF-α、IL-1β水平明显低于损伤组（P＜0．05）,IL-10水平高于损伤组（P＜0．05）。结论采用抗TLR4单克隆抗体阻断TLR4介导的信号传导可明显降低NF-κB活性和IκB-α、TNF-α、IL-1β水平,同时提高IL-10水平阻断TLR4,对LPS致ALI有一定的保护作用。     

细粒棘球蚴B抗原对1型糖尿病牙龈白细胞介素-2、白细胞介素-4表达的影响

目的研究细粒棘球蚴B抗原(EgB)对链脲佐菌素(STZ)诱导的1型糖尿病(T1DM)模型小鼠牙龈组织中白细胞介素-2(IL-2)及白细胞介素-4(IL-4)表达产生的影响。方法雌性10周龄STZ诱导的T1DM模型小鼠20只,随机分为2组,每组10只,处理组给予EgB 100μg/10 g连续5 d腹腔注射,对照组给予同等剂量0.9%氯化钠注射溶液腹腔注射,取其牙龈组织,用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测牙龈中IL-2、IL-4 mRNA表达。结果 IL-2 mRNA在EgB处理组较对照组表达明显下降(P0.05);IL-4 mRNA在EgB处理组较对照组表达明显上升(P0.05)。结论 EgB处理STZ诱导的T1DM模型小鼠,使其牙龈中IL-2 mRNA表达降低,IL-4 mRNA表达升高,影响T1DM免疫应答机制。     

T细胞免疫球蛋白-黏蛋白-1对卵蛋白致敏小鼠气道MUC5AC及Th1/Th2细胞因子表达的影响

目的 研究T细胞免疫球蛋白-黏蛋白-1（TIM-1）对卵蛋白（OVA）致敏小鼠气道MUC5AC及Th1/Th2细胞因子表达的影响,探讨气道黏液高分泌的机制.方法 OVA腹腔注射致敏小鼠,随机分组为：正常对照组（A组）、哮喘组（B组）和哮喘＋ TIM-1抗体处理组（C组）,每组8只,酶联免疫吸附试验（ELISA）检测小鼠肺泡灌洗液（BALD中IL-4、IFN-γ的水平变化,实时RT-PCR检测外周血单个核细胞（PBMCs） TIM-1 mRNA及气道MUC5AC mRNA表达.结果 （1）与A组小鼠外周血PBMCs表达TIM-1 mRNA（0.618±0.043）相比,B组（1.129±1.101）及C组（0.898±0.071）TIM-1 mRNA表达明显增多（P＜0.01）,且C组明显低于B组（P＜0.01）;（2）B组和C组小鼠BALF中IL-4表达分别为（67.123±3.341） ng/L和（44.217±2.201）ng/L,较A组[（23.211±2.142） ng/L]明显增多（P＜0.01）,且C组明显低于B组（P＜0.01）;B组及C组小鼠BALF表达IFN1分别为（53.475±4.776） ng/L和（87.116±5.611）ng/L,均低于A组[（124.624±9.292） ng/L] （P ＜0.01）,而C组与B组相比,有所增加（P＜0.01）;（3）B组（1.004±0.081）及C组（0.673±0.029）小鼠气道MUC5A mRNA表达与A组（0.314±0.027）相比,明显增加（P＜0.01）,且C组低于B组（P＜0.01）;（4）小鼠外周血PBMCs TIM-1 mRNA表达与IL-4、MUC5AC表达呈正相关,而与IFN-γ表达呈负相关.结论 抑制TIM-1表达可减少IL-4和MUC5AC的分泌,提高IFN-γ表达,提示在调节黏液高分泌及哮喘治疗中具有意义.