鹿龙再生汤对再障小鼠外周血单个核细胞及脾teff细胞T-bet和GATA-3基因表达的影响

目的 探讨鹿龙再生汤对再生障碍性贫血(简称再障)模型小鼠外周血单个核细胞以及脾CD4+CD25-细胞(teff细胞)中T-bet、GATA-3基因表达的影响.方法 通过IFN-γ腹腔注射加白消安灌胃的方法建造40只再障小鼠模型,分别予同体积的生理盐水、一般浓度、5倍浓度和10倍浓度的鹿龙再生汤进行灌胃治疗,分别归为再障组、再障小剂量组、再障中剂量组和再障大剂量组(n=10);另取40只正常小鼠按上述方法进行分组处理,分别归为正常组、正常小剂量组、正常中剂量组和正常大剂量组(n=10).通过骨髓活检病理学检查观察用药后各组小鼠的骨髓造血变化,免疫磁珠分选各组小鼠脾teff细胞,利用RT-PCR技术检测各组小鼠外周血单个核细胞以及脾teff细胞T-bet、GATA-3基因mRNA的表达情况.结果 (1)与再障组相比,再障中剂量组和再障大剂量组小鼠的骨髓造血有所恢复,尤其是再障大剂量组.(2)再障大剂量组小鼠的外周血单个核细胞以及脾teff细胞T-bet基因mRNA的表达、T-bet/GATA-3的比值较再障组均明显下降(P＜0.05),而GATA-3基因mRNA的表达明显上调(P＜0.05).结论 大剂量鹿龙再生汤可改善再障小鼠骨髓造血功能,可能是通过调节再障小鼠外周血单个核细胞及脾teff细胞的T-bet、GATA-3基因的表达来实现.     

补髓生血颗粒对CAA患者骨髓单个核细胞c-met受体mRNA表达水平的影响

目的探讨补髓生血颗粒对慢性再生障碍性贫血（CAA）患者骨髓单个核细胞C-metmRNA表达的影响。方法采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测CAA患者治疗前后骨髓单个核细胞c-metmRNA表达水平的变化。结果CAA患者骨髓c-metmRNA表达水平高于正常组,治疗后二者表达水平均有不同程度下降,并且补髓生血颗粒对二者表达水平的下调程度优于再障生血片（P〈0．05）。结论CAA患者骨髓c-metmRNA的表达存在异常,补髓生血颗粒剂可能通过调节骨髓c-metmRNA的表达来改善CAA患者的骨髓造血功能,促进骨髓造血功能恢复。     

再生障碍性贫血患者外周血单个核细胞T-bet表达及其意义

目的:探讨外周血单个核细胞T-bet表达与再生障碍性贫血(aplastic anemia,AA)发病之间的关系。方法:半定量RT-PCR法检测17例初诊AA患者和20名健康者外周血单个核细胞(PBMC)T-bet的表达,ELISA法检测血浆干扰素-γ(IFN-γ)水平。结果:初诊AA患者PBMC中T-bet表达和血浆IFN-γ水平均显著高于正常对照组(P<0.01),两者呈正相关关系(P<0.05)。结论:T-bet和IFN-γ表达的增高在AA的免疫病理学中可能起着重要作用。     

再生障碍性贫血患儿骨髓T-bet、GATA3蛋白和外周血细胞因子表达及意义

目的 检测调节Th1/Th2细胞分化的T-bet,GATA3蛋白在不同程度获得性再生障碍性贫血患儿骨髓中的表达,同时比较其治疗前外周血IL-2、IL-4、IFN-γ细胞因子水平,探讨获得性再生障碍性贫血的免疫病理机制.方法 将49例获得性再生障碍性贫血患儿根据临床表现分为非重型组和重型与极重型组.利用免疫组织化学方法检...     

生血合剂及其拆方对免疫介导再生障碍性贫血小鼠作用的实验研究

建立免疫介导再障小鼠模型，观察生血合剂及其拆方对再障模型小鼠的作用。结果：生血合剂能降低再障小鼠死亡率，增加外周血象，骨髓有核细胞，增高Th(CD4)百分值，Th/Ts(CD4/CD8)比值，IL－3，ISL－2R；降低Ts(CD8)IL2,IFN-γ水平和脾细胞IFN－γ基因表达。生血I号的作用优于生血Ⅱ号和CsA；单用健脾，补肾，活血方药对上述指标均有不同程度的作用，其中温肾药优于滋肾药和活血药；活血药优于健脾药。     

再障生血片联合雄激素及环孢素治疗慢性再生障碍性贫血30例效果观察

目的 :研究再障生血片联合雄激素(安特尔)及免疫抑剂(环孢素)治疗慢性再生障碍性贫血(CAA)的临床效果。方法:慢性再生障碍性贫血60例随机分成观察组和对照组各30例,对照组用环孢素A、安特尔口服治疗,观察组在环孢素A、安特尔的基础上加用再障生血片口服治疗,比较两组用药后临床疗效及不良反应发生情况。结果:(1)总有效率:观察组为86.7%,对照组为70.0%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。(2)两组治疗后白细胞、血红蛋白、血小板比较:观察组分别为(3.7±1.0)×109/L,(77.0±29.8)g/L,(67.2±25.8)×109/L。对照组分别为(2.4±0.9)×109/L,(52.6±25.1)g/L,(46.1±20.7)×109/L,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 :再障生血片联合环孢素A、安特尔的联合治疗CAA的方案更佳。     

环孢霉素A联合雄激素及生血合剂治疗再生障碍性贫血25例临床观察

我院从1997年5月至2002年4月用环孢素A(CSA)联合雄激素及生血合剂治疗再生障碍性贫血(再障)25例,效果良好,报告如下。1临床观察1.1一般资料选择此间在我院就诊的再障患者50例。随机分为两组。治疗组:男性14例,女性11例。急性再障9例,慢性再障14例,纯红细胞再障2例。对照组:男性15例,女性10例,急性再障8例,慢性再障17例。所有病例均符合血液病诊断及疗效标准[1]。全部患者就诊时血常规如下:WBC0.5×109/L~3.1×109/L,平均1.3×109/L;Hb30g/L~68g/L,平均42g/L;PLT5.0×109/L~62×109/L,平均29×109/L,网织红细胞计数0.001~0.014。骨髓…     

70例再障外周血单个核细胞对正常粒单系祖细胞的影响

本文采用单层琼脂培养法,用胎肌浸出液作刺激因子作粒单集落形成单位(CFu—GM)培养。将再生障碍性贫血患者外周血单个核细胞(PBMNC)与正常骨髓(NBM)作共同培养,同时用不加PBMNC的NBM作对照,观察CFu-GM数量。检测了21例重再障(SAA)和49例慢性再障(CAA)患者的PBMNC对NBM的CFu—GM产率的影响。结果发现CAA的抑制率明显高于SAA,(P<0.01).若以抑制事≥30％为有显著抑制的标准.抑制率≥30％者70例再障中有40％呈阳性,其中CAA患者的阳性率为51％,SAA患者的阳性率仅为14.3％。两者相比CAA显著抑制的阳性率明显高于SAA(P<0.005),提示细胞免疫反应在CAA患者中较为严重和普遍。     

慢性再生障碍性贫血患者中医证型与外周血microRNA、淋巴细胞亚群及细胞因子的关系研究

目的:分析慢性再生障碍性贫血(CAA)患者外周血microRNA、淋巴细胞亚群、细胞因子水平与不同肾虚证型的关系。方法:纳入60例CAA患者,辨证分为肾阴虚组30例、肾阳虚组14例、肾阴阳两虚组16例,另选择20例健康志愿者作为正常对照组。采用实时荧光定量PCR方法检测受试者外周血单个核细胞miRNA-155-5p、miRNA-1260b表达情况,采用流式细胞术检测外周血淋巴细胞亚群[包括总T淋巴细胞(T)、辅助T淋巴细胞(Th)、细胞毒T淋巴细胞(Tc)、B淋巴细胞(B)、自然杀伤细胞(NK)],采用酶联免疫吸附法检测血浆干扰素-γ(IFN-γ)、白介素-12(IL-12)p70、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、转化生长因子-β1(TGF-β1)水平。结果:与正常对照组比较,肾阴虚组、肾阴阳两虚组、肾阳虚组患者的miRNA-155-5p、miRNA-1260b表达及Tc比例、IFN-γ、IL-12 p70、TNF-α水平均明显升高(P0.01,P0.05),NK细胞比例、Th比例、Th/Tc比值及TGF-β1水平均明显降低(P0.05,P0.01)。与肾阳虚组比较,肾阴虚组、肾阴阳两虚组患者的miRNA-155-5p、miRNA-1260b表达及Tc比例、IFN-γ、IL-12 p70、TNF-α水平均明显升高(P0.01,P0.05),Th比例、Th/Tc比值及TGF-β1水平均明显降低(P0.05,P0.01);肾阴虚组患者的Th比例低于肾阴阳两虚组(P0.05),血浆IFN-γ、IL-12 p70、TNF-α水平高于肾阴阳两虚组(P0.05)。结论:肾阴虚型、肾阴阳两虚型较肾阳虚型患者存在更严重的细胞免疫功能亢进及miRNA-155-5p、miRNA-1260b表达失调,而肾阴虚型较肾阴阳两虚型患者存在更严重的造血负调控因子紊乱。     

生血宝合剂对妊娠合并地中海贫血患者妊娠结局的影响

目的探讨生血宝合剂对妊娠合并地中海贫血患者妊娠结局的影响。方法选取博罗县妇幼保健院2015年3月至2016年3月收治的妊娠合并轻型地中海贫血患者40例作为观察组,给予生血宝合剂治疗,另选取同期妊娠合并轻型地中海贫血患者40例为对照组,给予安慰剂平行对照,治疗期间均给予营养饮食指导,均治疗3个月,分别于治疗前后检测两组患者的外周血清学指标血红蛋白(Hb)、红细胞(RBC)、平均红细胞体积(MCV)、平均血红蛋白含量(MCH)水平。结果两组患者治疗后Hb、RBC、MCV及MCH水平均比治疗前升高,且观察组治疗后Hb、RBC、MCV及MCH水平较对照组高,差异有统计学意义(P<0.05);观察组患者的低出生体质量儿及产后出血率与对照组比较均降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论生血宝合剂有效改善妊娠合并地中海贫血患者贫血状况,不良反应少,且有良好的妊娠结局。     

再生障碍性贫血外周血单核细胞中肿瘤坏死因子基因表达的研究

本文报道了用Ｎｏｒｔｈｅｍｂｌｏｔ方法检测再障患者、正常人ＰＢＭＣ和经删Ｒａｄ６０Ｃｏ－ｙ全身照射、正常对照小鼠脾细胞的ＴＮＦｍＲＮＡ的表达。结果显示：７例再障患者中有３例测不到ＴＮＦｍＲＮＡ，２例含量极低（共占７０．４％）；而正常对照８例中除１例外其余均较高（占１２．５％）。在小鼠中照射组１０例除１例外其余均明显降低（占９０％）；对照组仅１例降低（占１０％）．结果提示再障时ＰＢＭＣ中的ＴＮＦｍＲＮＡ表达是降低的（Ｐ＜０．０１）。     

生血汤配合脐血输注治疗慢性再生障碍性贫血24例

慢性再生障碍性贫血是临床常见病、疑难病 ,治疗效果不佳。笔者近几年采用脐血输注配合中药生血汤治疗再生障碍性贫血 2 4例 ,疗效较好。现总结报告如下。1　一般资料2 4例病人均为我院住院病人 ,诊断依据 1 981年廊坊全国再障会议拟定的诊断标准[1 ] 。其中男 1 0例 ,女 1 4例     

慢性肾衰患者外周血单个核细胞产生肿瘤坏死因子的观察

采用ＥＬＩＳＡ方法对２５例慢性肾功衰竭（Ｃｈｒｏｎｉｃｒｅｎａｌｆａｉｌｕｒｅ，ＣＲＦ）非透析治疗患者，６例健康对照者外周血单个核细胞（Ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌｂｌｏｏｄｍｏｎｏｎｕｃｌｅａｒｃｅｌ，ＰＢＭＣ）产生肿瘤坏死因子（Ｔｕｍｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒ，ＴＮＦ）的水平进行了观察。结果：ＣＲＦ患者ＰＢＭＣ在有无细菌脂多糖（Ｌｉｐｉｄｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ，ＬＰＳ）刺激下均较正常对照组产生ＴＮＦ明显升高；氮质血症期、尿毒症期的ＣＲＦ患者ＰＢＭＣ分泌ＴＮＦ的水平无显著性差异。揭示ＣＲＦ患者ＰＢＭＣ处于激活状态并分泌ＴＮＦ。     

慢性粒细胞白血病患者外周血单个核细胞诱生树突细胞的体外研究

目的 :体外诱生慢性粒细胞白血病 ( CML)患者外周血单个核细胞 ( PBMNCs)为树突细胞( DCs)。方法 :CML患者 PBMNCs在含 GM- CSF、IL- 4、TNF- α的培养液中培养 1 4d,倒置显微镜、电镜下观察细胞形态 ,流式细胞仪检测细胞的表面标志 ,免疫磁珠 ( MACS)富集所诱生的 DCs,用D- FISH、RT- PCR方法检测 DCs的白血病源性。利用 MTT法检测所诱生 DCs刺激 T细胞增殖能力。结果 :所诱生的细胞高表达 CD80 、CD86、CD1a、HLA- DR,电镜下细胞表面有丰富突起 ,细胞浆内有丰富线粒体 ,D- FISH、RT- PCR检测所诱生的 DCs具有 bcr/abl融合基因。CML DCs具有刺激 T细胞增殖能力。结论 :体外利用 CML患者 PBMNCs成功诱导生成了来源于 CML细胞的 DCs( CML DCs)。     

重型再生障碍性贫血患者行非清髓性异基因外周血造血干细胞移植治疗的疗效分析

目的:探究重型再生障碍性贫血患者行非清髓性异基因外周血造血干细胞移植治疗效果及其并发症。方法:为9例年轻的重型再生障碍性贫血患者进行了同胞HLA结合外周血造血干细胞移植。观察移植后造血功能恢复情况及临床并发症情况,移植后观察近期情况,采用40d、180d以及360d短片段重复序列进行动态监测。结果:所有患者需接受供者外围MNC细胞数以及CD34~+细胞,ANC平均增加到0.5×10~9/L用时为14.5d,PLT平均增加到20×10~9/L用时为23.5d。所有患者中有2例发生Ⅱ度急性移植物抗宿主病,1例发生Ⅰ度急性移植物抗宿主病,3例局限性慢性移植物抗宿主病,CMV血症出现5例,更昔洛韦治疗出现效果,1例曲霉菌性肺炎和2例念珠菌肠炎,抗真菌治疗后治愈,2例出血性膀胱炎,2例口腔溃疡。结论:非清髓性异基因外周血造血干细胞造血功能恢复快,移植效率高,并发症少,为了在其他重型再生障碍性贫血患者中取得良好的效果,进一步的临床验证是必要的。     

SLE患者外周血单个核细胞凋亡的研究

目的　探讨SLE患者外周血单个核细胞 (PBMC)凋亡率异常是否与其自身抗体产生高低有关。方法　采用碘化丙锭 (PI)染色法 ,在流式细胞仪下定量检测 2 0例SLE患者及 10名正常人PBMC体外凋亡情况 ,同时观察了SLE患者自身抗体的表达及与凋亡率的关系。结果　SLE患者PBMC体外培养 0、2 4、48、72h后凋亡率较正常人明显增高 (P <0 .0 5 ) ,且活动期SLE高于非活动期 (P <0 .0 5 )。SLE患者自身抗体产生越多者较自身抗体产生少者的凋亡率明显增高 (P <0 .0 1)。结论　SLE患者PBMC的凋亡加速 ,与其自身抗体产生增高有关 ,可能在SLE的发病机制中起一定作用     

哮喘患者外周血单个核细胞A_3腺苷受体mRNA表达的研究

目的 :通过研究腺苷、白细胞介素 (IL) 1及茶碱对哮喘患者外周血单个核细胞 (PBMCs)A3 腺苷受体 (A3 AR)mRNA表达的影响 ,探讨A3 AR在哮喘发病中的作用 ,从基因水平为茶碱应用于治疗提供理论依据。方法 :用Ficoll Hypaque液分离PBMCs ,并将其分成对照组、腺苷组、腺苷加IL 1组及腺苷加茶碱组 ,体外培养 18h ,收集细胞 ,采用逆转录 多聚酶联反应 (RT PCR)法和图像分析半定量法检测PBMCsA3 ARmRNA表达。结果 :哮喘患者PBMCs腺苷加IL 1组A3 ARmRNA表达较对照组、腺苷组明显增加 (P <0 .0 1) ;腺苷加茶碱组A3 ARmRNA表达减少 ,与腺苷加IL 1组比较差异显著 (P <0 .0 1)。哮喘患者PBMCs各组A3 ARmRNA表达与正常人对应组比较 ,差异均有显著性 (P <0 .0 1)。腺苷或IL 1对哮喘患者PBMCs表达A3 ARmRNA的影响与血清总免疫球蛋白 (TIg)E水平呈显著正相关 (r =0 .65 ,P <0 .0 5 ;r =0 .78,P <0 .0 1) ,哮喘患者PBMCs表达A3 ARmRNA及腺苷、IL 1对其的影响与第 1秒用力呼气容积实测值占预计值的百分比 (FEV1% )呈明显负相关 (r =-0 .72 ,P <0 .0 5 ;r=-0 .91,P <0 .0 1;r=-0 .64 ,P <0 .0 5 )。结论 :哮喘患者PBMCs表达A3 ARmRNA增加 ;腺苷、IL 1对哮喘患者PBMCsA3 ARmRNA表达的影响与机体过敏状态及气道阻塞程度有关     

颅内动脉瘤信号传导相关基因的筛选

 【目的】基因芯片技术建立颅内动脉瘤患者血液单核细胞基因表达谱,筛选与信号传导相关的基因表达情况。【方法】50例颅内动脉瘤患者外周血,10例正常成人作为对照组,分离血液单核细胞,提取总RNA,与含22215个人类基因的Affymetrix寡核苷酸基因芯片杂交、洗脱、染色和扫描,分析检测的数据。荧光定量RT-PCR验证芯片结果。【结果】检测的22215个基因中,颅内动脉瘤共差异表达的基因有325个,差异水平均达2倍以上的基因有35个,生物信息学分析发现信号传导相关基因有7个,其中上调基因5个,下调基因2个。【结论】血液单核细胞基因表达谱是研究颅内动脉瘤发病机制的新策略,多个信号传导相关基因参与颅内动脉瘤的形成和发展。