大肠癌患者外周血中细胞角蛋白19和癌胚抗原的表达及临床意义

目的:应用巢式逆转录聚合酶链反应（nested RT-PCR）技术检测大肠癌患者外周血中CK19 mRNA、CEA mRNA的表达及临床意义,探讨其作为大肠癌微转移检测分子标记物的可能性。方法:应用巢式RT-PCR技术检测20例健康人、20例大肠腺瘤疾病患者和90例大肠癌患者外周血CK19 mRNA和CEA mRNA的表达。结果:大肠癌组CK19 mRNA和CEA mRNA表达的阳性率为58.89%（53/90）和53.33%（48/90）;20例健康人外周血中无CK19 mRNA和CEA mRNA的表达; 20例大肠腺瘤疾病患者有1例CK19 mRNA的表达,阳性率为5.00%（1/20）,无CEA mRNA的表达。大肠癌患者中CK19 mRNA、CEA mRNA的阳性率与肿瘤分期及肿瘤转移有显著相关性（P＜0.05)。结论:CK19 mRNA和CEA mRNA作为检测大肠癌患者外周血微转移的分子标记物具有良好的敏感度和特异性,同时可作为判断大肠癌患者的预后指标。     

实时荧光定量PCR检测大肠癌腹腔微转移及其临床意义

[目的]应用实时荧光定量PCR技术检测大肠癌腹腔内游离癌细胞并探讨其临床意义。[方法]2003年5月至2004年1月，收集在日本爱知癌症中心手术81例大肠癌病例的腹腔冲洗液．每个样本的cDNA均应用两种引物合成（随机引物和寡核苷酸引物），并在罗氏实时荧光定量PCR（LightCyckr）上进行定量分析。每个样本同时进行常规细胞学检查。所有病例术后经过平均为1年的随访。[结果]CEA mRNA和CK-20 mRNA的阳性率和阳性值均与肿瘤的浸润深度（T）、分期以及淋巴结转移相关。在一个合理界定值上，CEA和CK-20检测的敏感度与特异度均为100％，而常规的细胞学检查则为33％和100％。[结论]CEA和CK-20 mRNA定量分析是检测大肠癌腹腔微转移的敏感和特异的方法，CEA和CK-20 mRNA水平的异常与术后的无瘤生存率显著相关。     

大肠癌术后腹腔引流液中CEA、CA125和CA19-9的水平及其临床意义

目的 探讨大肠癌术后腹腔引流液中癌胚抗原（CEA）、糖类抗原125（CA125）和糖类抗原19-9（CA19-9）的水平及其与临床分期和腹腔微转移的关系。方法 收集经手术治疗的86例大肠癌患者（大肠癌组）和30例肠道良性疾病患者（对照组）术后第1天的腹腔引流液,检测腹腔引流液中CEA、CA125和CA19-9的水平,并分析其与大肠癌临床病理特征的关系。结果 大肠癌组腹腔引流液的CEA水平高于对照组（P＜0.05）,CA125和CA19-9水平两组差异均无统计学意义（P＞0.05）;腹腔引流液中CA125和CA19 9水平与大肠癌临床病理特征无关（P＞0.05）,而CEA水平与淋巴结转移、浸润深度和临床分期有关。结论 大肠癌术后腹腔引流液CEA检测可用于预测临床分期、腹腔微转移并判断预后。     

巢式RT-PCR检胃癌患者外周血循环癌细胞的研究

目的　分析胃癌患者外周血中CK 2 0mRNA及CEAmRNA的异常表达及意义。方法　采用RT PCR方法检测 5 2例胃癌患者术前外周血中CK 2 0mRNA及CEAmRNA的表达。结果　胃癌患者外周血中CK 2 0mRNA、CEAmRNA阳性表达率分别为 42 .3 % (2 2 /5 2 )及 5 1.9% (2 7/5 2 ) ,CK 2 0mRNA和CEAmRNA两者中至少 1个基因为阳性的表达率为 63 .5 % (3 3 /5 2 )。胃癌患者外周血中CK 2 0mRNA表达与胃癌的远处转移有关 ,CEAmRNA表达、CK 2 0mRNA和CEAmRNA都表达、CK 2 0mR NA和CEAmRNA两者中至少 1个表达与胃癌的浸润深度、淋巴结转移和远处转移相关 (P <0 .0 5 )。结论　胃癌患者外周血CK 2 0和CEA的RT PCR检测有助于患者预后的判断 ;联合检测CK 2 0mRNA和CEAmRNA可增加外周血循环癌细胞检测的敏感性     

结直肠癌患者肿瘤静脉血CTCs和CEA mRNA水平对异时性肝转移的预测价值

目的:探讨检测结直肠癌患者肿瘤静脉血CTCs、CEA mRNA对异时性肝转移的预测价值.方法:选取2017年3月至2018年12月无同时性肝转移的结直肠癌患者75例,检测患者肿瘤静脉血CTCs和CEA mRNA水平,随访半年,分析CTCs和CEA mRNA水平与异时性肝转移和TNM分期的关系.结果:CTCs、CEA m...     

胃肠道癌患者外周血和骨髓中微转移检测的意义

目的：探讨胃道肠癌患者外周血和骨髓中微转移的检测及其意义。方法：以CK19作指标，用巢式RT－PCR方法检测75例胃、结肠癌患者术前外周血中癌细胞，同时对其中33例患者骨髓进行检测。结果：75例中，24例（32.0％）外周血中检测出CK19mRNA的表达，其中60例胃癌患者的检出率为30.0%(18/60)，15例结肠癌的检出率为40.0%(6/15)。外周血阳性率随着肿瘤分期的增加而增加。其中33例的骨髓阳性率为48.5%，高于这些患者的血液中阳性率（33.3%)。结论：检测外周血和骨髓中微 转移可提高胃结肠癌患者临床分期的准确性，帮助判断患者的预后。     

Nobel genes improve accuracy in detection of peritoneal micro-metastasis of gastric cancer to decide indication for chemotherapy

Peritoneal metastasis is the most frequent form of recurrence for advanced gastric cancer. We previously performed a global analysis of the gene expression of gastric cancer cell lines established from peritoneal metastasis with cDNA microarray. One of the up-regulated genes is L-3 phosphoserine phosphatase (L3-PP). We have examined its potential as a novel marker for the detection of peritoneal micrometastasis of gastric cancer. L3-PP mRNA in peritoneal wash in 93 gastric cancer patients was quantified for comparison of carcinoembryonic antigen (CEA) mRNA by means of real-time RT-PCR to predict peritoneal recurrence. The quantity of L3-PP and CEA correlated with wall penetration. Eleven out of 18 cases with peritoneal dissemination were L3-PP+ (61% sensitivity). For three out of 18 cases of peritoneal dissemination, only L3-PP could detect micrometastasis of gastric cancer. Consequently, free cancer cells that cannot be detected by CEA mRNA could be detected using L3-PP mRNA. Although CEA alone was not sufficient, L3-PP and CEA in combination can attain a higher accuracy of detection.     

胃癌患者外周血及骨髓微转移检测的临床意义

目的:探讨检测胃癌患者外周血和骨髓CK20 mRNA表达的敏感性、特异性及临床意义.方法:采用RTPCR技术,同时对照检测49例胃癌患者、5例胃良性病变患者及5例健康志愿者骨髓与外周血中的CK20 mRNA表达.结果:49例胃癌患者中,骨髓和外周血CK20阳性表达率分别为49.0%(24/49),32.7%(16/49),二者差异有统计学意义(P＜0.05).其中2例外周血CK20表达阳性,骨髓表达阴性.健康志愿者及良性病变患者外周血及骨髓中未检测到CK20表达.本实验中CK20 mRNA RT-PCR技术的灵敏度为10～-5.胃癌的微转移状况与组织分化程度和肿瘤TNM分期有关.结论:应用RT-PCR法以CK20为标志物检测胃癌微转移细胞特异性高.骨髓检测胃癌微转移较单次采血更敏感,但外周血检测仍能提供一些有价值的资料.     

hMAM RNA 和CEA RNA T-PCR检测乳腺癌外周血微转移

目的应用RT-PCR法检测乳腺癌患者外周血中的human ammaglobin(MAM)mRNA和CEA RNA表达情况.方法用RT-PCR法,检测52例乳腺癌患者外周血中hMAM RNA和CEA RNA的表达情况,另抽取28例乳腺良性疾病患者和10例健康志愿者外周血标本作为对照.结果 52例乳腺癌患者外周血中hMAM RNA和CEA RNA的阳性率分别为30.8％、34.6％.28例乳腺良性疾病患者和10例健康志愿者外周血中hMAM RNA、CEA RNA表达均为阴性.两者的阳性表达均与患者的腋淋巴结状况、TNM分期差异有显著性意义(P<0.05).而与患者的年龄、原发肿瘤大小、病理类型以及激素受体状况等均无显著性差异(P＞0.05).结论 hMAM RNA、CEA RNA均可作为标志物来检测乳腺患者外周血中微转移,联合检测可增加外周血中循环肿瘤细胞的检测率.     

非小细胞肺癌微转移及其检测

检测非小细胞肺癌(NSCLC)微转移可以更准确地进行分期、指导治疗、判断预后.目前NSCLC微转移标志物的研究主要集中在细胞角蛋白(CK)19、人类肺组织特异性基因(LUNX)、癌胚抗原(CEA)mRNA、癌基因和抑癌基因等.NSCLC微转移部位的研究以淋巴结和骨髓多见,胸膜腔报道较少,外周血的报道逐渐增多.     

Seropositivity for MIA and S100 in patients with gastrointestinal carcinomas

Serum levels of melanoma inhibiting activity (MIA) and S100, both markers in malignant melanoma, are increased only in few patients with non-melanocytic tumors. We examined a series of serum samples from patients with colorectal (CRC) (N=56), gastric (GC) (N=43), pancreatic (PC) (N=29), hepatocellular (HCC) (N=30), cholangiocellular and gallbladder carcinoma (CCC) (N=18). MIA and S100 were measured by commercially available assays. Positive serum levels for MIA and S100 were found in 16.1% and 5.4% of the patients with CRC, 11.6% and 9.3% with GC, 34.5% and 13.8% with PC,0% and 30% with HCC and 16.7% with CCC, respectively. All patients with sera positive for either MIA or S100 suffered from advanced tumors and received palliative treatment. Elevated serum levels of MIA and S100 are frequentin patients with gastrointestinal cancer. Further investigation is warranted to define the role of MIA or S100 seropositivity in gastrointestinal cancer with regard to follow-up.     

肺癌患者三种微转移标志物临床意义的比较研究

目的评价肺癌患者外周血LUNX mRNA 、CK19 mRNA、CEA mRNA诊断微转移的特异性、敏感性,探索肺癌患者微转移的早期诊断.方法以肺部良性疾病30例、健康人10例的外周血为对照,以LUNX mRNA 、CK19 mRNA、CEA mRNA的表达为指标,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测48例肺癌患者外周血、手术切除区域44个淋巴结的微转移,并根据淋巴结病理切片、临床分期、随访过程中复发转移率评价微转移的临床意义.结果①LUNX mRNA、CK19 mRNA、CEA mRNA在肺癌组织的表达率均为100%(35/35).②48例肺癌患者外周血中LUNX mRNA阳性30例(62.5%),CK19 mRNA阳性24例(50.0%),CEA mRNA阳性32例(66.7%);44枚肺癌患者手术切除的区域淋巴结,LUNX mRNA阳性16枚(36.4%),CK19 mRNA阳性12枚(27.3%),CEA mRNA阳性18枚(40.9%).③30例肺部良性疾病患者外周血中,CK19 mRNA表达阳性2例(6.7%),LUNX mRNA或CEA mRNA表达均阴性;10例健康人外周血和11枚取自肺良性疾病患者的淋巴结,3个指标检测结果均为阴性.④44枚肺癌区域淋巴结中,普通病理组织学检出6枚(13.6%)有癌转移,阳性率明显低于RT-PCR检测结果(P<0.05).⑤3种微转移指标的阳性率均随TNM分期的增加而升高(P=0.01).⑥随访发现外周血微转移阳性患者的复发率高于阴性患者.结论 LUNX mRNA、CK19 mRNA 、CEA mRNA有可能成为监测肺癌微转移的分子标志.     

非小细胞肺癌患者外周血CEA mRNA表达及临床意义

 目的：检测非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血CEA表达情况,探讨其作为分子标志物检测 NSCLC微转移的可行性。方法：应用RT-PCR技术检测48例NSCLC患者,15例肺良性疾病(BLD)患者 和10例健康人外周血CEA mRNA的表达。结果：NSCLC患者CEA mRNA的阳性表达率明显高于BLD患 者和健康对照组(P<0.01)。Ⅰ~Ⅳ期NSCLC患者外周血中CEA mRNA阳性表达率分别为27.8%、 83.3%、61.5%和100%。NSCLC患者外周血CEA阳性表达与临床分期及淋巴结转移密切相关 (P<0.05),而与病理类型及分化程度无关(P>0.05)。结论：检测外周血CEA mRNA表达可作为诊 断NSCLC患者微转移的一个有价值的参考指标。     

10例大肠癌患者外周血中CK20mRNA检测

目的：检测大肠癌患者外周血中的癌细胞，以确定其肿瘤是否有微转移发生。方法：应用逆转录酶链反应(RT-PCR)，检测10例大肠癌患者癌组织和外周血中CK20mRNA的表达。结果：10例大肠癌患者中有5例外周血检测出CK20mRNA，阳性率为50％。结论：外周血中CK20mRNA检测可作为大肠癌病人肿瘤微转移的参考指标，有助于肠癌转移的早期发现和选择更好的化疗方案。     

大肠癌患者外周血CEAmRNA、HNP1-3的检测及临床意义

目的：研究大肠癌患者外周血中CEAmRNA、HNP1-3的表达及临床意义。方法：采用NestedRT-PCR法检测外周血CEAmRNA、ELISA法检测血清HNP1-3在大肠癌患者术前组、术后组及正常对照组中的表达。结果：外周血CEAmRNA在大肠癌患者术前组、术后组及正常对照组的阳性率分别为54%、34%、5%,术前组和术后组相比存在显著差异（P=0.044）,二者与正常对照组比较,有统计学差异（P〈0.001、P=0.012）;CEAmRNA与患者性别、年龄、肿瘤部位及分化程度无关,但与Dukes＇分期、淋巴结转移有关;外周血CEAmRNA对大肠癌的诊断敏感性和特异性分别为54%、95%。大肠癌患者术前组血清HNP1-3浓度中位数为20.33ng/ml,正常对照组7.69ng/ml,术后组14.35ng/ml;术前组、术后组血清HNP1-3水平均明显高于正常对照组,差异有统计学意义（P〈0.001、P=0.005）;并且血清HNP1-3水平也与Dukes＇分期、淋巴结转移有关;血清HNP1-3对大肠癌的诊断敏感性、特异性分别为62%、95%。联合检测外周血CEAmRNA与血清HNP1-3的敏感性（72%）及特异性（100%）均高于单一指标。结论：大肠癌患者外周血中CEAmRNA表达较正常对照组明显增高,且与Dukes＇分期、淋巴结转移密切相关。HNP1-3在大肠癌患者血清中呈高表达,且具有较高的敏感性及特异性,有望成为一种新的大肠癌肿瘤标志物。联合检测外周血CEAmRNA表达及血清HNP1-3水平可提高检测敏感性和特异性,对发现大肠癌微转移可能有重要的临床意义。     

大肠癌患者外周血癌细胞CK20检测及其意义

目的:探讨大肠癌患者外周血癌细胞角蛋白20(cytokeratin,CK20)检测与转移复发的关系。方法:以非同位 素RT-PCR方法,检测30例大肠癌患者术前和术后外周血中大肠癌细胞的标志物CK20,同时检测20例健康者外周血作对 照。结果:30例患者外周血中查出CK20阳性表达23例,阳性率76.67%,20例健康者外周血均无CK20表达。CK20阳性检 出与Dukes分期、淋巴结转移和肝转移存在显著性差异(P<0.05),术后3天内外周血CK20阳性检出较术前多出2例。随访 发现,外周血CK20扩增阳性者,术后发生肝转移的机会增加(33.3%)。结论:检测大肠癌患者外周血微转移癌细胞CK20可 提高大肠癌临床分期的准确性,帮助综合判断患者的预后,且可能有助于早期诊断大肠癌肝脏微小转移。     

结直肠癌外周血和腹膜腔微转移影响因素分析

目的 探讨结直肠癌患者外周血和腹膜腔微转移及其影响因素.方法 收集施行手术治疗的90例结直肠癌患者和25例结直肠良性疾病患者外周血及腹腔灌洗液,RT-PCR方法检测CK-20mRNA和CEAmRNA表达;手术切除标本常规病理学分析.结果 (1)结直肠癌患者外周血CK-20mRNA和CEAmRNA表达率分别为45.6%(41/90)和54.4%(49/90),两者联合检测表达的阳性率为64.4%(58/90);腹膜腔CK-20mRNA和CEAmRNA表达阳性率分别为51.1%(46/90)和58.9%(53/90),两者联合检测表达的阳性率为68.9%(62/90);上述指标均随肿瘤的浸润深度、PS因素的递进,以及淋巴结及肝脏转移而增高(P<0.05);在结直肠良性疾病患者外周血及腹腔灌洗液标本中均未检出CK-20mRNA和CEAmRNA的表达.(2)腹腔灌洗液中CK-20mRNA和(或)CEAmRNA表达的阳性率与同一指标在外周血中的表达相比无差异;外周血及腹腔灌洗液中CEAmRNA的表达与CK-20mRNA表达相比也无差异.结论 采用RT-PCR方法检测结直肠癌患者外周血和腹膜腔CK-20mRNA和CEAmRNA的表达,有助于筛选亚临床转移和预测病理分期;两者的联合检测更有意义.