局灶性皮质发育障碍模型鼠大脑皮质病灶组织的超微结构观察

目的探讨皮质发育障碍(d isorders of cortical developm ent,DCD s)模型鼠小脑回(又名小的脑回或微脑回)周围病灶组织的电镜、病理特征,分析其与癫痫发生的关系。方法9只健康新生W istar雄性大鼠分为正常对照组、液氮损伤组和假手术组,每组3只,建立液氮损伤诱导的局灶性DCD s模型大鼠,观察其行为学和脑电图的变化,行HE、N issl染色,在解剖镜下取材,透射电镜下观察并照像。结果正常对照组和假手术组大鼠无任何抽搐发作,液氮损伤组偶有抽搐发作,但大多表现为活动增多、兴奋躁动、搔抓和“洗脸样活动”频繁。皮层电极EEG示小波幅节律为主,无典型的尖波、棘波、尖慢波、棘慢综合波发放。电镜所见DCD s鼠微脑回周围锥体神经元内线粒体肿胀,内质网扩张,胶质细胞肿胀,毛细血管周围水分积聚,部分髓鞘退变,异常神经纤维网,突触未见明显异常。结论小脑回周围病灶组织的超微结构病变可为局灶性DCD s所致癫痫提供病理基础。     

谷氨酸在实验诱导皮质发育障碍大鼠脑皮质中的分布

目的观察液氮损伤诱导皮质发育障碍大鼠脑皮质中谷氨酸的分布,探讨其与癫痫发生的关系.方法实验随机分为液氮损伤组、假手术组和正常对照组,建立皮质发育障碍模型,常规HE和Nissl染色,免疫组织化学方法用SABC法.结果在大鼠脑嘴尾方向形成了一小的脑回,小脑回Glu阳性着色细胞在损伤组较假手术组表达增加,却无显著差异(q检验,P＞0.05),然而在小脑回周围区Glu阳性细胞表达显著增加(q检验,P＜0.05),其他脑皮质区没有明显改变.结论小脑回周围兴奋性神经递质谷氨酸的增加可能是导致癫痫发生机制之一.     

局灶性脑缺血再灌注后大鼠脑组织HIF-1α表达的观察

目的探讨局灶性脑缺血再灌注后大鼠脑组织缺氧诱导因子-1α（hypoxia inducible factor—1α,HIF—1α）的表达及意义。方法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,动物分为缺血2h再灌注6h、1、2、3、4d及假手术对照组。应用免疫组化法检测HIF-1α蛋白、原位杂交及RT—PCR法检测HIF-1α mRNA的表达变化。结果免疫组化及原位杂交法检测显示：大鼠缺血再灌注6h,缺血侧脑组织梗死灶周边HIF-1α及HIF-1α mRNA阳性反应已出现,随再灌注时间的延长阳性表达增强,一直持续到第3天,第4天显著下降;RT—PCR检测HIF-1α mRNA在6h后已有表达,随再灌注时间的延长,HIF-1α mRNA的表达呈上升的趋势,在第3天达高峰,第4天显著下降。结论脑缺血再灌注损伤可以诱导HIF-1α表达增强,提示HIF-1α对缺血性脑损伤有保护作用。     

GABAARα1在弥漫性皮质发育障碍鼠大脑皮质和海马中的表达

目的：观察γ-射线辐照诱导的弥漫性皮质发育障碍（DCD）模型鼠大脑皮质和海马结构中γ-氨基丁酸A受体α1亚型（GABAARα1）的表达,探讨其与癫痫发生的关系。方法：建立弥漫性皮质发育障碍大鼠模型,察看其行为、EEG改变,喂养到14～16周处死,采用常规HE染色、Nissl染色和Timm’s硫化银组织化学方法染色,免疫组织化学方法用SABC法,肉眼观察,光镜下观察大脑皮质和海马结构形态及CA3苔藓纤维发芽情况,大脑皮质和海马中GABAARα1阳性细胞形态结构及表达情况,免疫组化图象系统分析。结果：F1代组大鼠有自发性癫痫发作,头皮EEG示小波幅节律为主。小脑畸形、胼胝体发育不全、大脑皮质和海马CA1结节状物,皮质下灰质异位,海马异位神经元。双侧海马CA3区均有苔藓纤维发芽,与正常对照组和假手术组比较有显著差异（P〈0．05）。GABAARα1阳性细胞在F1代组的Fr、HL、Par1、Par2、CA1、CA2、CA3和DG区GABAARα1阳性细胞较母鼠组及正常对照组显著减少,有统计学意义（P值均〈0．05）。结论：大脑皮质和海马结构异常及抑制性GABAARα1的下调可能是弥漫性皮质发育障碍导致癫痫发作的重要因素之一。     

大鼠局灶性脑缺血早期脑内HO-1 蛋白的表达

目的　研究局灶性脑缺血血红素氧合酶 (HO)在脑内的表达。方法　采用大鼠大脑中动脉栓塞致脑缺血 ,对缺血早期不同时间点进行HO 1免疫组化及病理学研究 ,并应用计算机图像分析技术计算HO 1表达的强弱。结果　栓塞后 3 0min皮质及海马即有HO 1阳性神经元和胶质细胞 ,且随着时间推移 ,HO 1的表达逐渐增强 ,HO 1主要分布在灶周皮质、梗死皮质区、梨状皮质内的神经元及胶质细胞 ,丘脑、下丘脑、海马齿状回的神经元及对测海马也出现HO 1的表达。结论　脑缺血时脑内HO 1迅速而强烈的表达可能是脑组织对自身损伤的恢复机制     

皮质发育障碍所致儿童癫痫176例手术治疗的临床分析

目的分析不同类型皮质发育障碍(malformation of cortical dysplasia,MCD)所致儿童癫痫的临床特征、术前评估和预后,探讨不同类型儿童MCD的外科干预策略。方法回顾性分析我中心采用外科手术治疗176例MCD伴儿童癫痫的临床资料,致痫灶定位情况和外科手术结果,并对不同类型MCD的结果进行比较分析。结果 MCD占同期儿童癫痫病因的34.2%。术后疗效按Engel分级,Ⅰ级106例,Ⅱ级31例,Ⅲ级21例,Ⅳ级14例,有效率89.8%,优良率77.8%,平均智商(IQ)从术前的66.5分提高到72.9分。在不同类型MCD中,半巨脑、结节性硬化、局灶性皮质发育障碍、无/巨脑回畸形、灰质异位和多小脑回的术后癫痫控制优良率依次为100%、90.9%、76.8%、75.0%、66.7%和62.5%,Ⅱ型局灶性皮质发育障碍(focal cortical dysplasia,FCD)疗效优于Ⅰ型FCD(84.2%vs 70.5%),合并肿瘤的FCD的优于单纯的FCD(86.4%vs 76.6%),伴海马硬化的患儿疗效较佳(85.7%vs 76.7%)。智力评估结果显示,FCD和结节性硬化患儿均得到显著提高,其他类型智力改善不明显。结论不同类型MCD具有不同的临床特点、影像学特点、电生理特点、功能学和外科预后,因此需要重视针对不同类型MCD,进行差异化、个体化的外科评估程序和手术处理。     

大鼠局灶性脑缺血后脑组织Ref-1蛋白的表达

脑缺血后细胞死亡方式有 2种 :一是坏死 ,二是凋亡。在脑梗死中心区 ,细胞死亡以坏死为主 ,在脑梗死周边部 ,即半暗带区 ,则以凋亡为主。Ｒｅｆ 1(氧化还原因子 1,ＡＰＥ) ,是ＤＮＡ碱基切除修复通路中的多功能蛋白酶 ,在缺血性脑损伤过程中 ,由于兴奋性氨基酸增加 ,钙离子内流升高 ,大量自由基产生 ,造成了ＤＮＡ损伤 ,Ｒｅｆ 1蛋白酶免疫活性同时也下降 ,造成ＤＮＡ修复丧失 ,导致细胞凋亡[1] 。我们采用免疫组织化学方法 ,对大鼠局灶性持久性脑缺血不同时程脑组织Ｒｅｆ 1蛋白酶的表达进行了观察 ,同时采用ＴＵＮＥＬ染色 (ＴｄＴ ｍｅｄ…     

IGF-1对大鼠局灶性脑损伤Bcl-2表达的影响

目的:研究胰岛素样生长因子-1(IGF-1)对大鼠局灶性脑缺血再灌注后Bcl-2表达的影响及与缺血时间关系,探讨IGF-1对脑缺血再灌注损伤的保护作用.方法:制作SD大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型.将55只SD雄性大鼠随机分为假手术组(n=5)、对照组(n=25)、IGF-1治疗组(n=25),其中后两组按缺血再灌时间(6h,12h,1d,3d,7d)不同可分为5个亚组,每组5只,治疗组于缺血2h再灌注1h后经腹腔注入40μg/kg稀释为1ml 的IGF-1,假手术组及对照组同时腹腔注入生理盐水1ml.以上动物均在再灌注后规定时间点用4%多聚甲醛经心脏灌注固定,取大鼠脑组织,应用免疫组化S-P法和HE染色检测Bcl-2蛋白表达及脑组织结构病理变化.结果:与对照组相比,治疗组大鼠脑组织Bcl-2表达明显增加,其神经细胞坏死程度明显减轻.结论:IGF-1在大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤中起保护作用,其作用机制包括增加Bcl-2蛋白的表达,发挥其神经保护作用.     

38例局灶性皮质发育不良继发癫痫临床分析

目的 探讨儿童局灶性皮质发育不良(focal cortical dysplasia,FCD)继发癫痫的临床特征.方法 回顾性分析2014年1月至2016年12月我院神经外科收治的38例FCD继发癫痫患儿的临床表现、影像学特点、脑电图特点以及手术疗效.结果 FCD患儿癫痫发作类型以全身性强直-阵挛发作为主(50％);FCD最多见于颞叶,各病理类型FCD分布部位无特殊性.磁共振波谱分析(MRS)提示病灶区氮-乙酰门东氨酸(NAA)峰降低见于所有类型的FCD,而胆碱复合物(Cho)峰升高仅见于部分FCDⅡb型.发作间期头皮脑电图(EEG)痫样放电部位与FCD病灶生长部位有较高一致性,术中皮层脑电(ECoG)检测与病灶吻合率100％.术后癫痫发作控制总有效率为71％,各型FCD的手术疗效无统计学差异.各型FCD术后1年的神经心理学评分均有明显改善.结论 儿童FCD所致癫痫可表现为全面性发作,发作间期头皮脑电图检测对致痫灶的定位有一定准确性,而ECoG定位的准确性更高,各种病理类型FCD的术后疗效均较满意.     

大鼠局灶性脑缺血转化生长因子β1表达的研究

目的:探讨大鼠局灶性脑缺血转化生长因子β1(TGF-β1)表达的变化及其意义.方法:采用免疫组化法检测TGF-β1在缺血中心区及半暗区的变化情况.结果:TGF-β1在缺血中心区和半暗区均有TGF-β1免疫组化染色阳性细胞,尤以半暗区最多.TGF-β1表达高峰在缺血1～3 d.结论:TGF-β1与脑缺血的病理生理过程密切相关.     

大鼠局灶性脑缺血再灌注模型的改进

参照有关方法，成功地制作经颈外脉至颈内动脉尼龙线栓大鼠大脑中动脉缺血模型，适当做了改进，并初步进行了病理学研究，该模型无需开颅即能观察再灌注损伤，较好地模拟大脑中动脉区缺血的病理状态。     

弥漫性轴突损伤合并局灶性脑挫伤动物模型

OBJECTIVE: To establish a rather ideal experimental brain injury model in rats, in which diffuse axonal injury(DAI) and focal brain contusion were made concurrently. METHODS: The pathophysiological changes were monitored, and the histological changes were observed under naked eye, microscope and electric microscope. RESULTS: 1. The mortality in the group suffering from DAI with focal contusion(Group A) was much higher than that in DAI(Group B) and sham group(Group C); 2. The time of post-injury primary coma in Group A [(5.19 +/- 0.49) h] was longer than that in Group B [(2.75 +/- 0.16) h] and Group C [(2.77 +/- 0.20) h] significantly(P < 0.01); 3. Immunohistological examination showed that the diffuse axonal injury could be seen in several parts of the brain(subcortical, corpus callosum and brainstem) in Group A; 4. We observed in Group A under electric microscope that the axons were swollen and degenerated fragmently, neurofilaments ranged disorderly and there was vacuolation. CONCLUSION: The model is cheap, simple and can be easily repeated. Furthermore it can be used to research the changes of pathophysiology, histology and moleculobiochemistry of head injury in human beings.     

血红素氧合酶-1、诱导型一氧化氮合成酶在局灶性脑缺血中的表达

目的观察两种不同信使分子CO／NO的限速酶血红素氧合酶-1（HO～1）、诱导型一氧化氮合成酶（iNOS）在局灶性脑缺血中的表达，初步探讨HO-1、iNOS在局灶性脑缺血中的不同作用。方法采用免疫荧光技术，观察HO-1、iNOS在局灶性缺血脑组织中不同时间点的表达及分布。结果iNOS在海马、皮质、基底节均有分布以灶周皮质最多。HO-1在同侧海马、皮质、基底节、丘脑均有分布，以灶周皮质为最多。iNOS的表达在缺血后2h出现，24～48h达最高峰，以后逐渐下降。HO-1表达在缺血后0．5h即出现，缺血后6～12h达最高峰。在缺血皮质半暗带的某些神经细胞有iNOS及HO-1的共同表达。结论脑缺血早期即有HO-1的表达，而iNOS表达则较晚出现，其表达的高峰期晚于HO-1。在半暗带的某些神经细胞可见有HO-1和iNOS的同时表达。     

局灶性脑缺血损伤后低氧诱导因子1α促神经元凋亡的作用机制

大脑是对缺氧非常敏感的器官,氧浓度降低可以诱导低氧诱导因子1α(HIF-1α)的快速大量表达,尤其在缺血半暗带,及时挽救该部位的神经元是减轻缺血性损伤的关键。HIF-1α是一种核转录因子,能够诱导胱天蛋白酶、p53、诱导型一氧化氮合酶、Bcl-2等促凋亡基因的转录表达、促进氧自由基的产生以及影响血脑屏障的通透性。近年来,许多研究阐述了HIF-1α在局灶性脑缺血损伤的病理生理机制中,尤其是促神经元凋亡方面,扮演着非常重要的角色。     

皮质发育障碍模型鼠脑γ-氨基丁酸的表达

目的 建立Wistar大鼠大脑皮质发育障碍(DCDs)模型,探讨γ-氨基丁酸(GABA)与皮质发育障碍所致癫痫发作的关系.方法 采用γ-射线照射孕15d大鼠的方法制作皮质发育障碍模型,免疫组化方法观察GABA在脑组织的表达.结果 模型组大鼠脑质量低于健康对照组大鼠,皮质变薄,皮质层状结构紊乱,皮质下神经元呈结节状异位,海马锥体神经元呈团状分布,GABA免疫阳性神经元减少,差异有统计学意义(P<0.05).结论 皮质发育障碍模型大鼠GABA阳性神经元减少,差异有统计学意义(P<0.05),可能是皮质发育障碍所致癫痫的发病机制之一.     

缺氧诱导因子-1α基因在成年大鼠局灶性脑缺血中的治疗作用研究

目的构建携带缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)基因的重组腺病毒载体,探索HIF-1α对大鼠局灶性脑缺血的治疗作用。方法应用腺病毒表达系统AdEasySystem构建携带缺氧诱导因子-1α和绿色荧光蛋白(GFP)的重组腺病毒(Ad-HIF-1α)并行PCR鉴定。建立大鼠线栓法大脑中动脉缺血再灌注模型,分为Ad-HIF-1α、腺病毒空载体(Ad)、生理盐水(NS)3组;将Ad-HIF-1α、Ad和NS注射到模型鼠缺血侧侧脑室,观察Ad-HIF-1α的分布和绿色荧光持续时间、三组大鼠神经功能缺失评分和2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)染色评价Ad-HIF-1α对脑缺血的治疗效果。结果在荧光显微镜下绿色荧光蛋白的表达逐渐向远离侧脑室的部位扩展,在14d时荧光最强,随后逐渐减弱,至28d时荧光基本消失。Ad-HIF-1α治疗组24h大鼠神经功能缺失评分为2.4±0.5,与Ad组(2.6±0.5)和NS组(2.7±0.7)比较差异无统计学意义(P>0.05);48及72hAd-HIF-1α治疗组神经功能缺失评分分别为1.6±0.7和0.9±0.6,与Ad组(分别为2.9±0.6和3.2±0.6)和NS组(分别为3.0±0.7和3.2±0.8)比较差异均有统计学意义(P<0.05);72h时脑组织TTC染色显示Ad-HIF-1α治疗组梗死体积为81.2mm3±1.4mm3,与Ad组(173.9mm3±1.3mm3)和NS组(171.7mm3±6.2mm3)比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论Ad-HIF-1α对大鼠局灶性脑缺血具有一定的治疗作用,为HIF-1α基因的进一步研究和临床应用奠定了基础。     

DEPDC5基因突变相关局灶性皮质发育不良并发癫痫手术治疗1例并文献复习

目的观察1例DEPDC5基因突变相关局灶性皮质发育不良(FCD)并发癫痫患者的手术治疗和预后情况。方法 DEPDC5基因突变相关FCD并发癫痫患者1例,经详细的术前评估后进行手术治疗,并结合文献进行分析。结果 DEPDC5基因突变相关FCD并发癫痫患者,行立体定向脑电图(SEEG)明确病灶,手术切除后癫痫控制满意,术后无明显并发症,病理回报为FCDⅡa型。结论 DEPDC5基因突变导致FCD引起难治性局灶性癫痫患者,应考虑手术治疗。     

络泰对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的:观察络泰对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用并探讨其可能机制.方法:将大鼠随机分成六组:假手术组、模型组、络泰5 mg/kg组、50 mg/kg组、100 mg/kg组和阳性对照复方丹参注射液组,应用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型(MCAO),观察缺血2 h再灌注24 h后络泰对大鼠行为、脑梗死面积、脑含水量的影响,用放免法测定血浆中TXB2(血栓素B2)和 6-Keto-PGF1α(6-酮-前列腺素F1α)的水平.结果:络泰50 mg/kg组、100 mg/kg组能明显改善MCAO大鼠行为障碍、脑梗死范围、脑含水量.大鼠血浆的TXB2含量及TXB2/6-Keto-PGF1α(T/P)值较模型组明显降低(P<0.05),6-Keto-PGF1α含量显著增高(P<0.05).结论:络泰能通过降低血栓素A2(TXA2),升高PGI2,使TXA2/PGI2比值降低,达到对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用.     

缝隙连接蛋白43在急性局灶性脑缺血大鼠心室肌中的表达

目的检测缝隙连接蛋白43（Connexin43,Cx43）在大鼠急性局灶性脑缺血模型心室肌中的表达,以探讨其与脑缺血后心律失常的关系。方法用线栓法建立大鼠右侧局灶性脑缺血模型,检测心电,观察心肌细胞电镜下的亚显微结构,用Western blot的方法,检测心室肌中Cx43表达的改变。结果电镜结果显示脑缺血后,心肌组织闰盘内桥粒和缝隙连接结构及分布改变。Western blot结果显示,缺血后2 h心室肌中Cx43的表达明显降低,分布紊乱。缺血后24 h,1 w心室肌中Cx43的表达随时间延长而增加,且均高于正常对照组。结论大鼠右侧局灶性脑缺血所引起的心律失常可能与心室肌Cx43蛋白表达和分布异常有关。