化学发光法测定二氢青蒿素

二氢青蒿素与鲁米诺在碱性条件下不需过氧化氢就能直接发生化学发光反应，氯化血红素对这一新的体系同样具有强烈的催化作用。运用这一新的发光体系建立了灵敏度高，特异性强，操作方便的测定抗疟新药二氢青蒿素的化学发光新方法，线性范围为０～３０００ｎｇ／ｍｌ，线性方程为Ｙ＝１．１４６Ｘ＋２．９３（０～１００ｎｇ／ｍｌ），ｒ＝０．９９４，Ｙ＝２．１７Ｘ－１３９（１００～３０００ｎｇ／ｍｌ），ｒ＝０．９９９，，检出     

二氢青蒿素联合顺铂对胃癌细胞生长的影响

目的 探讨二氢青蒿素(DHA)联合顺铂(CDDP)对人胃癌SGC7901细胞生长的影响及作用机制.方法 体外培养人胃癌SGC7901细胞,分为对照组、DHA组、CDDP组和DHA+DDP联用组,MTT比色法检测细胞增殖情况;流式细胞仪检测细胞周期分布情况及凋亡的百分比;RT-PCR和Western blotting分别测定Cyclin D1、P21、Caspase-3的mRNA和蛋白的表达水平.结果 DHA和CDDP都能明显抑制SGC7901细胞增殖,DHA+CDDP组抑制强度明显高于单一药物处理组,二者具有协同抑制作用;与对照组相比,DHA和CDDP均能使细胞周期阻滞于G1期,细胞凋亡率明显增加(P＜0.05),DHA+CDDP作用组停滞在G1期细胞比例及细胞凋亡率均显著高于单独DHA或CDDP处理组(P＜0.05);与对照组相比,DHA或CDDP处理组Cyclin D1 mRNA和蛋白表达下降、P21和Caspase-3 mRNA和蛋白表达上升(P＜0.05),DHA+CDDP组细胞Cyclin D1 mRNA和蛋白水平显著低于单用组(P ＜0.05);P21和Caspase-3 mRNA和蛋白水平显著高于单用组(P＜0.01).结论 DHA与CDDP联用对胃癌细胞的抑制具有协同作用,其作用机制可能与下调Cyclin D1和上调P21、Caspase-3基因表达,阻滞细胞周期进程和促进细胞凋亡有关.     

青蒿素抗肿瘤作用的研究进展

青蒿素是一种高效、低毒的抗疟药物。近年来的研究表明,青蒿素对多种肿瘤细胞均有抑制作用,且对正常组织细胞的毒性很低。进一步的研究揭示了其作用机制,发现青蒿素通过多种途径抑制癌细胞的生长、增殖与转移,最终诱导其凋亡。本文就近年来有关青蒿素抗肿瘤机制的研究进展作一综述。     

二氢青蒿素对衰老细胞的作用及机制

目的 探究二氢青蒿素对衰老细胞的作用及其机制。方法 利用双氧水诱导小鼠成纤维细胞(NIH3T3)构建应激早衰模型(SIPS),通过衰老特异性标记物SA-β-半乳糖苷酶染色、蛋白质印迹技术进行SIPS鉴定;细胞实验分为对照组(磷酸盐缓冲液+二甲基亚砜)、模型组(双氧水+二甲基亚砜)、药物组(双氧水+二氢青蒿素),采用Cell Counting Kit-8(CCK-8)法、乳酸脱氢酶法、SA-β-半乳糖苷酶染色、细胞内铁含量测定、蛋白质印迹技术、荧光探针染色及流式细胞术检测二氢青蒿素对衰老细胞的影响。结果 CCK-8结果显示,二氢青蒿素作用模型组24 h的半数抑制浓度(IC50)为(8.26±0.66)μmol/L;与对照组相比,模型组存活率降低,且呈剂量依耐性;蛋白质印迹结果显示,与模型组相比,药物组铁蛋白重链(FTH)及谷胱甘肽过氧化酶4(GPX4)蛋白表达水平降低(P<0.05),细胞内铁、活性氧(ROS)含量增加(P<0.05)。结论 二氢青蒿素可特异性诱导衰老细胞死亡,其机制与铁死亡有关。     

青蒿素及其衍生物抗肿瘤作用实验研究进展

青蒿素类抗疟药具有多种药理活性,近年来其抗肿瘤作用逐渐引起人们的关注,大量体外和动物体内实验结果及一些初步的临床实验研究显示:青蒿素类药物可通过抑制或杀伤肿瘤细胞、阻滞细胞周期、诱导肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤血管生成来发挥其抗肿瘤作用,并且对肿瘤细胞有选择杀伤作用,可对抗肿瘤多药耐药及对放疗和化疗具有增敏作用,提示青蒿素类药物有望成为新型抗肿瘤药物。     

青蒿素类药抗肿瘤机制研究进展

青蒿素（artemisinin）是从黄花蒿中提取的有效抗疟成分，为一种含内过氧化基团的倍半萜内酯化合物，在临床上广泛应用于疟疾的治疗。现代医学研究表明青蒿素及其衍生物不仅有治疗疟疾的作用，而且具有明显的抗肿瘤作用，其抗癌机制更是成为近年来国内外学者的研究热点。现将近几年有关青蒿素类药抗肿瘤机制的研究进行综述如下。     

青蒿素及其衍生物抗肿瘤研究进展

青蒿素(artemisinin)是目前最常用的抗疟特效药,尤其是脑型疟疾和抗氯喹疟疾。近年来发现青蒿素及其衍生物具有较强的抗肿瘤作用,关于青蒿素抗肿瘤作用机制,以及能否将其开发为抗肿瘤新药的研究已成为青蒿素研究的热点。1青蒿素发展史1971年,中医研究院发现青蒿乙醚提取物的中性部分具有显著的抗疟作用,1972年从青蒿中分离出了青蒿素,1973年青蒿素首次作为抗疟药应用于临床,1997年世界卫生组织(WHO)在马尼拉会议上制定了青蒿琥酯的标准剂量疗程,1999年WHO将青蒿琥酯和蒿甲醚列入国际药典之后,标志着我国独立创制的新药首次得到了国际承认…     

青蒿素及其衍生物抗肿瘤作用综述

通过查阅近15年的国内外相关文献,综述了青蒿素类药物在抗肿瘤方面的作用和应用前景：抗疟药青蒿素及其衍生物在体外对多种肿瘤细胞有明显的选择性杀伤作用,在荷瘤动物体内亦有确切的抑瘤作用,其作用机制可能与促进肿瘤细胞凋亡有关,但具体凋亡机制尚未明了。对青蒿素类药物抗瘤作用及其作用机制进行深入的研究,可望使其成为有效、低毒、价廉的新型抗肿瘤药。     

青蒿琥酯及二氢青蒿素逆转耐药结核分枝杆菌的初步研究

[目的]了解青蒿素类中药单体(二氢青蒿素、青蒿琥酯)单独或联合利福平(RVP)及异烟肼(INH)对耐药结核分枝杆菌的作用,初步研究此类单体是否具有逆转细菌耐药性的作用.[方法]刃天青显色法判断各中药单体是否有抑菌或杀菌作用;MB/BACT系统(生物梅里埃)检测RFP或INH联合中药单体是否有逆转细菌耐药的作用.[结果]单独使用时各单体均不能杀灭结核分枝杆菌;RFP联合青蒿琥酯(200μg/mL)或二氢青蒿素(200μg/mL)可使11株耐RFP菌株中的9或6株变为敏感,敏感率分别为82%或55%;INH联合上述中药单体则亦可使11株耐INH菌株中的10或7株变为敏感,敏感率分别为90%或64%.[结论]青蒿琥酯及二氢青蒿素有较强的协同相应抗结核药或逆转结核菌的耐药性的作用,但青蒿琥酯敏感率较二氢青蒿素更高.     

二氢青蒿素抑制c-FLIP的表达增强TRAIL对肺癌细胞的凋亡诱导活性

目的: 探讨天然药物二氢青蒿素对TNF相关凋亡诱导配体(TRAIL)抗肺癌活性的影响并研究其机制。方法: 将PC9人肺癌细胞按对照组,二氢青蒿素组,TRAIL组,二氢青蒿素+TRAIL组及二氢青蒿素+TRAIL+c-FLIP质粒组进行分组,MTT法检测二氢青蒿素及TRAIL对PC9细胞的杀伤活性,流式细胞术检测PC9细胞的凋亡和活性氧簇(ROS)的释放,Western blot实验检测PC9细胞c-FLIP的表达、细胞色素c的释放及caspase-8、caspase-9和caspase-3的活化。结果: 二氢青蒿素能显著抑制PC9细胞中c-FLIP蛋白的表达。二氢青蒿素+TRAIL组PC9细胞的相对细胞活力(0.41±0.04)显著低于TRAIL组(0.83±0.06, P<0.05)和二氢青蒿素+TRAIL+c-FLIP质粒组(0.75±0.06, P<0.05)。二氢青蒿素+TRAIL组PC9细胞的凋亡率(35.4±2.6)显著高于TRAIL组(8.7±0.8, P<0.05)和二氢青蒿素+TRAIL+c-FLIP质粒组(13.5±1.1, P<0.05)。二氢青蒿素能显著促进TRAIL诱导的ROS的产生和细胞色素c从线粒体中的释放。二氢青蒿素能显著促进TRAIL诱导的PC9细胞中caspase-8、caspase-9和caspase-3的活化。结论: 二氢青蒿素抑制c-FLIP的表达增强TRAIL对肺癌细胞的凋亡诱导活性。     

二氢青蒿素对大鼠系膜细胞增生的抑制作用

目的 :观察二氢青蒿素 (DHA)对大鼠系膜细胞 (MC)增生的抑制作用 .方法 :采用MTT掺入方法 ,观察不同浓度DHA和不同作用时间各组体外培养的MC增生水平 .结果 :DHA对MC增殖有显著的抑制作用 ,其抑制作用呈浓度依赖性和时间依赖性 .LD50 为 19 7μmol/L .DHA作用 72h后 ,从 0到 10 0 μmol/L浓度梯度 ,以10 0 μmol/L对MC增生的抑制作用最为显著 ;DHA 30 μmol/L作用 0～ 72h ,以 72h对MC增生的抑制作用最为显著 (P <0 0 1) .结论 :DHA能够抑制大鼠MC增生     

活性氧在青蒿素及其衍生物抗肿瘤作用机制中的研究进展

青蒿素及其衍生物目前已成为抗疟的一线药物,近年来,很多研究已经证实青蒿素及其衍生物具有明显的抗肿瘤作用。其细胞毒性效应主要与活性氧(ROS)的产生有关。其可能作用靶点包括血红素、线粒体及某些特定的蛋白等。其抗肿瘤作用包括抑制肿瘤细胞增殖、抑制肿瘤新生血管生成、抗肿瘤细胞侵袭和转移,以及促进肿瘤细胞凋亡等。青蒿素类药物广谱、高效、低毒,能选择性杀伤肿瘤细胞,逆转肿瘤的多重耐药现象,与多种化疗药物具有协同、增效作用,有望被开发成为新型抗肿瘤药。     

青蒿素及其衍生物抗肿瘤作用机制的研究进展

青蒿素是从菊科植物黄花蒿叶中提取分离到的一种具有过氧桥结构的倍半萜内酯类化合物.近年来发现青蒿素及其衍生物能够抑制多种实体瘤生长、抑制多种肿瘤细胞增殖和诱导肿瘤细胞凋亡,但作用机制尚不完全明确.就青蒿素及其衍生物对活性氧、抗血管生成、多药耐药、耐药基因、凋亡和胀亡等方面作用的研究进展进行综述.     

青蒿素及其衍生物的药理作用研究进展

青蒿素及其衍生物有抗疟、抗肿瘤、抗寄生虫、抗纤维化、抗心律失常、免疫等多方面的药理作用,且具有分布广、毒性低、不良反应少等众多优点,有良好的研究前景。本文就国内外青蒿素及其衍生物药理作用的研究进行了概述。     

基因芯片技术分析二氢青蒿素抑制K562细胞增殖的作用机制

[目的]利用基因芯片检测二氢青蒿素作用于K562细胞后的基因表达情况,从基因水平探讨二氢青蒿素抑制K562细胞增殖的作用机制。[方法]K562细胞经不同浓度二氢青蒿素处理24h,倒置光显微镜和荧光显微镜观察细胞形态学变化,流式细胞仪检测细胞周期变化。提取总RNA,逆转录生成cDNA,同时Cy3标记。标记好的cDNA与基因芯片杂交,用扫描仪检测杂交结果。[结果]倒置光显微镜可见细胞出现不同程度的皱缩,核分裂相减少,细胞密度下降,漂浮细胞增多。荧光显微镜下可观察到染色质高度浓缩、边缘化,凝聚成明亮的团块,即凋亡小体,同时有死亡细胞。流式细胞仪检测显示G2期细胞的比例明显增加。扫描杂交结果数据显示其中13条基因表达有差异。表达上调的基因有chk1,表达下调的基因有：PCNA、cyclinB1、cyclinD1、cyclinE1、cdk4、cdk2、E2F1、DNA-PK、DNA-TopoⅠ、mcl-1、jnk、VEGF。[结论]二氢青蒿素可以抑制K562细胞增殖,作用机制与改变细胞周期某些调控物质的基因表达、诱导K562细胞凋亡等有关。     

青蒿琥酯和二氢青蒿素抑癌作用机理研究

【目的】基因芯片检测青蒿琥酯和二氢青蒿素作用于K562细胞后的基因表达情况,从基因水平上探讨青蒿琥酯和二氢青蒿素抑制K562增殖的作用机制。【方法】K562细胞经不同浓度青蒿琥酯和二氢青蒿素处理,倒置光显微镜和荧光显微镜观察细胞形态变化,流式细胞仪检测细胞周期,MTT检测细胞生长抑制率。提取总RNA,逆转录成cDNA与基因芯片杂交,检测杂交结果。【结果】倒置光显微镜：细胞出现不同程度的皱缩,核分裂相减少,细胞密度下降,漂浮细胞增多。荧光显微镜：染色质高度浓缩、边缘化,凝聚成明亮的团块。流式细胞仪：G2期细胞的比例增加。MTT检测两种药物对K562细胞生长有抑制作用。扫描杂交信号,分析数据,青蒿琥酯组10条基因表达有差异,表达上调的基因有：p21、chk1,表达下调的基因有：cyclinB1、cyclinE1、E2F1、DNA—PK、hTERT、bcl-2、jnk、VEGF;二氢青蒿素组13条基因表达有差异,表达上调的基因有chk1,表达下调的基因有：PCNA、cyclinB1、cyclinD1、cyclinE1、cdk4、cdk2、E2F1、DNA—PK、DNA—TopoⅠ、Mcl-1、ink、VEGF。【结论】青蒿琥酯和二氢青蒿素抑制K562细胞增殖,作用机制与改变细胞周期某些调控物质的基因表达、诱导K562细胞凋亡等有关。     

二氢青蒿素对大鼠牛Ⅱ型胶原蛋白诱导关节炎模型作用的初步研究

【摘要】 目的 建立牛Ⅱ型胶原蛋白(BCⅡ)诱导的大鼠关节炎(collagen Ⅱ-induced arthritis,CIA)动物模型,研究二氢青蒿素对大鼠关节炎的影响。方法 选用雄性Wistar大鼠,在模型组(n=19)大鼠尾根及脊背部皮内注射用弗氏完全佐剂乳化的BCⅡ 0.3 mg,第15 d以同样的剂量在同样的部位加强免疫1次;正常对照组(n=5)以生理盐水按同样的方法和剂量注射。第52 d,将模型组分为单纯模型组（模型空白组,n=7）、二氢青蒿素组〔二氢青蒿素1.5 mL/（kg·d),1 mL含20 mg二氢青蒿素,灌胃;n=12〕。治疗28 d后观察大鼠的关节炎表现。结果 模型组大鼠关节肿胀明显,而正常对照组关节无炎性红肿。二氢青蒿素组:关节肿胀减轻,组织病理检查见只有少量炎性细胞浸润,少量纤维结缔组织和毛细血管增生,关节腔较干净,没有明显的骨质破坏。治疗28 d后,模型空白组关节炎指数较治疗前和正常对照组增加（P<0.05）;二氢青蒿素组与治疗前比较差异无统计学意义（P>0.05）,仍高于正常对照组（P<0.05）。治疗28 d后,模型空白组病理分级高于正常对照组（P<0.05),二氢青蒿素组低于模型空白组（P<0.05）。结论 初步实验表明二氢青蒿素有减轻Ⅱ型胶原诱导的大鼠关节炎病变作用。     

二氢青蒿素对结肠癌细胞系SW480增殖凋亡的影响

目的:研究二氢青蒿素(DHA)对结肠癌细胞系SW480的增殖、凋亡的作用,初步探讨其机制。方法:采用结肠癌细胞SW480为研究对象,观测不同浓度和作用时间的DHA对细胞作用,MTT噻唑蓝比色法检测对细胞的增殖抑制作用,普通光镜观察细胞形态的变化,分别PI单染及Annexin-V双染法流式细胞术分析细胞周期分布和早期凋亡率的变化,免疫细胞化学检测凋亡抑制蛋白Survivin及效应蛋白Caspase-3表达情况。结果:DHA对SW480细胞增殖有抑制作用且呈浓度和时间依赖性。普通光镜下观察SW480呈典型的凋亡形态学改变。流式细胞仪检测细胞阻滞于G0/G1期,随药物剂量增大G0/G1期比例而逐渐增高,S期比例降低,Annexin-V双染法示早期细胞凋亡率呈明显浓度依赖性升高。免疫细胞化学结果示DHA作用48 h后Survivin表达减弱,而Caspase-3表达增强,呈剂量依赖关系。结论:DHA能显著抑制结肠癌细胞生长,影响细胞周期,诱导细胞凋亡,可能与抑制Survivin蛋白表达,促使Caspase-3表达增强有关。     

二氢青蒿素对膀胱癌T24细胞株的抑制作用及其机制研究

目的探讨二氢青蒿素体外抗膀胱癌T24细胞株活性及相关机制。方法采用体外培养的T24细胞株为研究对象,流式细胞仪检测二氢青蒿素作用后T24细胞凋亡率,Caspase-3活性检测试剂盒检测Caspase-3活性,免疫印迹法检测细胞凋亡关键蛋白p53、Bax、Caspase-3、Bcl-2的表达变化。结果二氢青蒿素能够诱导T24肿瘤细胞凋亡（P〈0.01）,且呈剂量-效应关系;二氢青蒿素还可引发T24肿瘤细胞Caspase-3活性水平升高（P〈0.05或P〈0.01）,促凋亡蛋白Caspase-3、Bax高表达（P〈0.01）,抗凋亡蛋白Bcl-2表达降低（P〈0.01）,且均呈现时间-效应关系。p53表达水平无显著改变（P〉0.05）。结论二氢青蒿素具有明确的抑制膀胱癌T24细胞株的效应,其机制可能是激活非依赖于p53的Bcl-2家族介导的细胞色素C途径,进而引发T24细胞凋亡。     

二氢青蒿素通过Akt信号途径诱导类风湿关节炎滑膜细胞凋亡

目的 探讨二氢青蒿素诱导类风湿关节炎滑膜细胞凋亡的信号机制。方法 无菌条件取类风湿关节炎患者膝关节滑膜组织,组织块贴壁法培养关节滑膜细胞。流式细胞仪检测细胞凋亡。Westernblot半定量分析Akt活化。电泳迁移率变动(EMSA)检测NF-κB活性。结果 在2.5μmol/L-1～10μmol/L-1质量浓度范围二氢青蒿素呈剂量依赖性诱导体外培养的关节炎滑膜细胞凋亡。5μmol/L-1和10μmol/L-1的二氢青蒿素与关节滑膜细胞共培养24小时显著抑制Akt激酶473位丝氨酸磷酸化及NF-κB的活化。结论 二氢青蒿素通过Akt信号途径诱导类风湿关节炎滑膜细胞凋亡。 【关键词】二氢青蒿素;类风湿关节炎;滑膜细胞;凋亡;Akt/蛋白激酶B