THE EFFECTS OF MA-XING-GAN-SHI-TANG ON RESPIRATORY RESISTANCE AND AIRWAY LEUKOCYTE INFILTRATION IN ASTHMATIC GUINEA PIGS

Ma-Xing-Gan-Shi-Tang (MXGST), a traditional Chinese medicine, has been used in treatment of the bronchial asthma for several centuries. However, the therapeutic mechanisms of this Chinese medicine are still far from clear. To understand the mechanism of anti-asthmatic property of MXGST, a guinea pig model of allergic asthma was used to investigate the effects of MXGST on Dermatophagoides pteronyssinus-induced early and late asthmatic responses and airway inflammation, and examine direct β₂-adrenoceptor agonist activity in guinea-pig isolated trachea. Administration of MXGST (10 g/kg) extracts significantly inhibited the antigen induced immediate asthmatic responses (IAR) in actively sensitized guinea pig. MXGST caused concentration-dependent relaxation in strips of guinea pig trachea contracted with carbachol, and ICI-118551, a selective β₂-adrenoceptor antagonist, significantly inhibit the relaxation caused by MXGST. Furthermore, examination of bronchoalveolar lavage fluid (BALF) revealed that MXGST significantly inhibited the increase in neutrophil in the airway at 1, 6 and 24 hr after antigen challenge. Histopathologic examination results showed that MXGST suppressed the neutrophil infiltration into lung tissue. In conclusion, we suggest that the anti-asthmatic effects of MXGST are mainly due to its stimulation of β₂-adrenoceptors on bronchial smooth muscle and its anti-inflammatory ability to inhibit the neutrophil into the airway. The precise mechanism of action of MXGST in asthma remains to be elucidated.     

实验性哮喘下呼吸道神经激肽B免疫反应纤维

用免疫组织化学方法研究了神经激肽B免疫反应纤维在实验性哮喘豚鼠下呼吸道的变化。在气管和支气管,实验组一抗最佳稀释浓度为1:1500,对照组为1:1000,当两组的一抗浓度均为1:1500时,两者的神经激肽B免疫反应纤维见于平滑肌层,上皮内、上皮和平滑肌交界处以及外膜层,实验组的纤维数量明显多于对照组。在肺组织,实验组一抗最佳稀释浓度为1:2000,对照组为1:1500,当一抗稀释浓度均为1:2000时,两组的神经激肽B免疫反应纤维主要见于肺内各级支气管平滑肌层、血管壁平滑肌层、血管周围结缔组织和肺泡隔内,但实验组的阳性纤维数量明显比对照组多。     

地塞米松对哮喘豚鼠肺内脏感觉传入部位TrkA表达的抑制作用

为了探讨地塞米松对哮喘豚鼠肺内脏感觉传入系统(C7T5脊神经节及对应的脊髓后角)TrkA表达的影响,我们利用免疫组织化学和Westernblot方法,研究了哮喘豚鼠C7T5脊神经节及对应的脊髓后角TrkA的免疫反应变化。结果显示:哮喘组豚鼠C7T5脊神经节及对应的脊髓后角TrkA表达明显高于对照组(P<0.01),而地塞米松组则明显低于哮喘组(P<0.01)。结果提示TrkA可能参与哮喘的发病过程,地塞米松抑制哮喘豚鼠TrkA的表达可能是其治疗哮喘的作用机制之一。     

INFLUENCE ON THE INDUCTION AND ELICITATION OF CONTACT-DERMATITIS IN GUINEA PIGS

In the present experiment the authors investigated whether the previously found influence of exteroceptive stimulation of the extremities on the elicitation of an allergic or secondary reaction of the skin in guinea-pigs to DNCB is elaborated via the toxic or primary reaction. An influence of the stimulation on the primary reaction was found too. The experiment was conducted in two parts: 1) Two experimental groups were stimulated electrically on different schedules, continuous or repetitive. A 48 hour interval between stimulation and application of DNCB was added. The skin reactions were rated by 4 observers on a 5-point rating scale. 2) Two experimental groups were stimulated on the same schedules as above. The corticoid levels were measured at different times after stimulation. The experiment showed that the probability of a skin reaction on the allergic (secondary) contact to a threshold dose was greater for the continuously stimulated group than for the control group. Relationships between corticoid levels and skin reactions were discussed. The hypothesis that stimulation has a direct influence on the allergic contact was supported.     

哮喘豚鼠下呼吸道及内脏传入部位NGF表达的研究

目的　探讨哮喘豚鼠下呼吸道和内脏传入系统神经生长因子 (NGF)的作用。　方法　利用免疫组织化学和原位杂交结合显微图像分析 ,研究哮喘豚鼠下呼吸道和内脏传入系统NGF免疫反应及mRNA表达的变化。　结果　与对照组相比 ,哮喘豚鼠NGF免疫反应在气道上皮、C7～T5段脊神经节及脊髓背角明显上调 (P <0 0 1) ,NGFmRNA表达在气道上皮明显增多 (P <0 0 1) ,而在C7～T5段脊神经节及脊髓背角却未见明显改变。　结论　气道上皮、C7～T5段脊神经节及对应节段脊髓背角的NGF可能参与哮喘的发病过程 ;C7～T5段脊神经节细胞及对应节段脊髓背角神经细胞本身能合成NGF。     

地塞米松对哮喘豚鼠肺内、脊神经节及脊髓背角内蛋白激酶C表达的抑制作用

目的探讨地塞米松对哮喘豚鼠肺内、C7～T5脊神经节及对应节段脊髓背角内蛋白激酶C（PKC）表达的抑制作用。方法利用免疫组织化学和Western blotting方法。研究哮喘豚鼠肺内、C7～T5脊神经节及对应节段脊髓背角内PKC的免疫反应变化。结果哮喘组豚鼠肺内、C—L脊神经节及对应节段脊髓背角内PKC平均光密度值明显高于对照组（P〈0．01）,而地塞米松组则明显低于哮喘组（P〈0．01）。结论PKC可能参与哮喘的发病过程,地塞米松抑制哮喘豚鼠PKC的表达可能是其治疗哮喘的作用机制之一。     

BDNF、NGF对体外培养的胚胆碱能神经元生长发育的影响

本文用AChE组化方法，研究了BDNF、NGF对培养的胚鼠基底前脑胆碱能神经元的作用及BDNF和NGF的协同作用。结果表明BDNF和NGF都具有增加AChE阳性神经元数量的作用，二者的不同在于BDNF作用出现的时间较早、强度较小；而NGF作用出现的时间较迟但强度较大。并发现BDNF对体外培养的胚胆碱能神经元胞体早期的生长发育作用比较明显，而NGF的作用则不甚显著。BDNF对胚胆碱能神经元发出突起和突起的延伸作用较NGF强。BDNF和NGF的联合作用较单独使用BDNF或NGF为好。本文的结果提示在体外培养中两种营养因子联合应用较只用一种因子有益。     

冈田酸对大鼠学习记忆功能及脑内ChAT和GFAP表达的影响

为了研究冈田酸(OA)对大鼠认知能力的影响及其可能的机制,采用冈田酸进行海马CA1区微量多次注射,通过Morris水迷宫观察大鼠行为学变化,免疫组化法观察海马及皮层中ChAT和GFAP的表达。结果发现:OA注射后,大鼠平均逃避潜伏期明显延长(P<0.01),原站台象限活动时间明显缩短(P<0.01),穿越原站台次数明显减少(P<0.01)。海马及皮层中ChAT表达减少(P<0.01),而GFAP阳性反应物表达明显增多(P<0.01)。以上结果提示:OA的神经毒性可以诱导大鼠学习记忆能力的降低,其可能机制是OA导致胆碱能神经元损伤,功能低下,以及反应性星形胶质细胞的增生肥大。     

促肾上腺皮质激素释放因子在Meynert基底核中对大鼠学习记忆的影响

为了探讨Meynert基底核内促肾上腺皮质激素释放因子对学习记忆的影响,本实验采用脑内埋管微量注射技术,把促肾上腺皮质激素释放因子(0,0.01,0.1和0.4nmol四个剂量组)分别注入大鼠双侧的Meynert基底核内,采用Morris水迷宫对大鼠进行空间辨别性学习记忆能力的测试。结果发现:0.1和0.4nmol剂量促肾上腺皮质激素释放因子均能使大鼠训练时寻找平台的时间(逃避潜伏期)延长,第12d的空间探索试验,0.1和0.4nmol剂量组的大鼠找到平台的时间也显著延长。结果提示:促肾上腺皮质激素释放因子在Meynert基底核内可损害大鼠的空间辨别性学习能力和记忆的巩固。     

CGRP和NGF对全脑缺血再灌注大鼠脑组织Erk mRNA表达的调节作用

目的　检测大鼠脑缺血再灌注后细胞外信号调节蛋白激酶信使RNA(ErkmRNA)的表达,探讨降钙素 基因相关肽(CGRP)和神经生长因子(NGF)对脑组织的保护作用。　方法　采用颈动脉负压分流法制作大鼠脑缺 血再灌注模型,采用原位杂交及显微图像分析方法检测海马及皮质内Erk的表达。　结果　大鼠缺血再灌注海马 及皮质内ErkmRNA较正常组增多(P<0.05),而注射CGRP或NGF后ErkmRNA明显高于缺血再灌注组(P< 0.01),两者联合应用效果更加显著(P<0.05)。　结论　CGRP及NGF可能参与缺血神经元ErkmRNA的调节,两 者对缺血神经元有协同修复作用。     

镉对大鼠精囊腺超微结构及硫胺素焦磷酸酶细胞化学和血清睾酮含量的影响

以超微结构形态计量学及硫胺素焦磷酸酶（ＴＰＰａｓｅ）细胞化学和血清睾酮放射免疫测定等，探讨镉对大鼠精囊腺的影响及其作用机理。结果表明，大鼠腹腔内注射氯化镉（２ｍｇ／ｋｇ体重）后１ｈ，主细胞超微结构出现改变，ＴＰＰａｓｅ反应产物开始减少，１５￣３０ｄ退变最明显，６０ｄ呈恢复趋势。主要改变为线粒体肿胀，高尔基复合体囊泡扩大，髓样结构及脂滴增多。注射后１５ｄ，主细胞大分泌颗粒体密度、面数密度明显减少，３     

Laminin和Fibronectin对周围神经中的再生轴突及非神经元细胞的作用和影响

本文用近交克隆系(Close cloned)大鼠研究了内源性Laminin和Fibronectin对周围神经的再生轴突及非神经元的雪旺氏细胞、成纤维细胞等的作用和影响。将从供体鼠获得的坐骨神中段经冷冻、加热处理后再用Laminin或Fibronectin抗血清处理;对照组则用正常兔血清处理。将处理后的神经段(10mm)分别植入三组受体鼠体内,术后不同时期取材,电镜观察。术后15天,抗Laminin组和抗Fibronectin组的轴突总数,只有对照组的50%左右。对照组和抗Fibronectin组约90%的轴突走在基底膜管内,而抗Laminin组,再生轴突似不能识别基底膜而生长在基底膜管外。轴突生长总是先于雪旺氏细胞的迁移,而后雪旺氏细胞才生长粘附并包绕轴突。成纤维细胞能够识别伴随有雪旺氏细胞的轴突,并形成神经周膜包绕这些轴突,但它们不能识别空陷的基底膜管,只有当组织中缺乏Fibronectin时,增生的成纤维细胞方在基底膜管外形成神经周膜。在缺乏Laminin的神经段内,巨噬细胞不仅大量增生,还有包随走在基底膜管外单个轴突的趋向。这些结果提示在神经再生的早期,内源性Laminin和Fibronectin不但调节再生神经纤维的生长,对在神经损伤和再生中起重要作用的巨噬细胞和成纤维细胞也有积极的影响。     

端粒酶逆转录酶及c-myc基因反义寡核苷酸对HL-60细胞端粒酶活性的影响

目的研究端粒酶逆转录酶（hTERT）与c-myc基因反义寡核苷酸（ASODN）对HL-60细胞端粒酶活性的影响,探讨HL-60细胞端粒酶活性与hTERT和c-myc基因表达的关系。方法应用反义寡核苷酸（ASODN）分别封闭HL-60细胞hTRET与c-myc基因,RT-PCR方法检测基因表达;分别使用TRAP-ELISA法、PAGE-银染法检测细胞端粒酶活性。结果ASODN作用细胞72h后。hTERT、c-mycmRNA的表达受到不同程度抑制。以30μmol／L作用组表达量最低。TRAP-ELISA检测：hTERT ASODN10、20、30μmol／L作用组,c-myc ASODN20、30μmol／L作用组与未作用组比较,端粒酶活性明显降低（P〈0．05）;c-myc ASODN 10μmol／L作用组及c-myc、hTERTSODN作用组与未作用组比较无显著差异（P〉0．05）。PCR-PAGE检测：hTERT与c-myc ASODN作用组较SODN作用组端粒酶条带明显减少,以30μmol／L作用组条带最少,而同浓度hTERT ASODN作用组较c-mycASODN作用组条带减少。结论hTERT与c-myc基因ASODN能够分别抑制该基因mRNA的表达,同时具有下调端粒酶活性作用。     

豚鼠胃肠壁内神经丛的能量代谢的酶和基本物质的组织化学观察

本文研究了正常成年豚鼠胃肠壁内神经丛神经元(简称肠神经元)的镁激活的三磷酸腺苷酶(Mg~(++)-ATPase)、钙激活的三磷酸腺芏酶(Ca~(++)-ATPase)、细胞色素氧化酶(CCO)、琥珀酸脱氢酶(SDH)、乳酸脱氢酶(LDH)、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6 PDH)和葡萄糖-6-磷酸酶(G 6Pase),并对糖类、蛋白质、脂类和核酸做了观察。除光镜的半定量观察外,并用显微光度计对两种ATPase做了定量测量。光镜的半定量结果和显微光度计测得的数据经计算机做了统计学处理。本文的结果表明,肠神经元具有上述各种酶活性,提示神经元与这些酶有关的代谢活跃。但粘膜下丛与肠肌丛酶活性差异显著,前者SDH活性较强,后者LDH、G6 PDH和两种ATPase活性较强。据此推测,两神经丛神经元的主要糖代谢方式、能量代谢以及机能活跃程度有明显的差别。此外,胃肠各段肠肌丛酶活性强度不一,十二指肠和近端结肠各种酶活性最强,盲肠最弱。本文的结果表明,肠神经元的代谢和功能确有相当的差别,但酶活性的差异同神经元类型的关系如何,有待继续研究。     

MK-801和L-NA对成年仓鼠视网膜节细胞轴突损伤后存活与再生的影响

目的 研究NMDA受体阻断剂MK-801和一氧化氮合酶抑制剂L-NA对成年仓鼠视网膜节细胞(下称节细胞)轴突切断后存活和再生的影响。方法 切断动物左侧视神经后分两组：存活组存活2、7或14d；再生组视神经眶侧断端同一段坐骨神经吻合后存活28d。所有实验动物自视神经切断前1d开始，每日接受腹腔注射MK-801和／或LNA直至处死。结果存活节细胞均数在MK-801组与对照组间无显著性差异，但L-NA组在术后2和7d节细胞数较对照组显著增加，合用MK-801／LNA较单用MK-801或L-NA使更多节细胞存活。而MK-801或L-NA对节细胞轴突在周围神经移植物内的再生均无明显作用。结论 lmg／kg剂量的MK-801对节细胞的存活无明显作用，但同时阻断NMDA受体和抑制一氧化氮合酶比单纯抑制一氧化氮合酶对节细胞有更强的神经保护作用。1．0mg／kgMK-801或4．5mg／kgL-NA对节细胞轴突的再生无明显促进作用。     

马桑内酯和糖皮质激素对培养脑神经元Glu和GABA免疫反应阳性的影响

为了探讨糖皮质激素与抗癌作用的关系，本研究利用培养的大鼠大脑皮质神经元，在经致痫剂马桑内酯和糖皮质激素处理后，进行Glu和GABA免疫细胞化学染色，观察它们对免疫反应阳性细胞的影响，并对实验结果进行了图象分析。结果发现：马桑内酯处理可使Glu免疫反应阳性神经元增多，使GABA免疫反应阳性神经元减少；而先加马桑内酶再加糖皮质激素，则可使Glu阳性神经元大为减少,GABA阳性神经元比只加马桑内酯组增多。上述改变均有统计学意义。此结果提示：马桑内酯诱发的癫痫可能与Glu和GABA的含量变化有关，糖皮质激素在致痫状态下，可能有降低Glu升高GABA含量的作用，从而具有抗痫效应．     

缺血再灌注对大鼠神经元与星形胶质细胞的影响

应用免疫组织化学单标记法分别观察大鼠在大脑中动脉阻塞再灌注时胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)和Fos蛋白在大脑皮质内表达的时间规律,并用免疫组织化学双重标记法观察GFAP和Fos蛋白表达的相互关系。结果发现在缺血1h再灌注2h时,大脑皮层的星形胶质细胞被激活,细胞体积增大,突起粗大,呈GFAP阳性。星形胶质细胞的反应直至48h依然强烈。被激活的星形胶质细胞和神经元表达Fos蛋白,并呈现时程变化规律。结果提示星形胶质细胞可能和神经元一起参与了大脑皮层缺血再灌注后的变化。     

宫内缺氧对新生鼠顶叶皮质神经元内nNOS表达及对成年小鼠学习记忆能力的影响

目的探讨孕鼠宫内缺氧对生后小鼠发育时期顶叶皮质神经元内神经性一氧化氮合酶(nNOS)表达及对成年小鼠学习记忆能力的影响。方法用低张性缺氧模型致胎龄13d、15d、17d小鼠宫内缺氧,将新生后P1、P7、P14、P28、P90鼠脑组织作Nissl染色及nNOS免疫组织化学反应,观察顶叶皮质神经元数量、形态及nNOS神经元表达,P90小鼠行Morris水迷宫实验。结果与正常组比较,宫内缺氧组小鼠顶叶皮质神经元数量明显减少(P<0.05),顶叶皮质神经元内nNOS表达明显减弱(P1,P<0.01;P7,P<0.05;P14,P<0.05;P28,P<0.01;P90,P<0.01)。宫内缺氧组小鼠逃避潜伏期延长(1d、2d,P<0.05;3d、4d,P<0.01)及穿环次数明显减少(P<0.05)。结论宫内缺氧导致生后小鼠发育时期顶叶皮质神经元数量明显减少,顶叶皮质神经元内nNOS表达明显减弱;宫内缺氧引起成年小鼠学习记忆能力降低。     

EFFECTS OF DEXAMETHASONE ON THE EXPRESSION OF FAS MOLECULES AND APOPTOSIS OF LYMPHOCYTES IN PATIENTS WITH SYSTEMIC LUPUS ERYTHEMATOSUS

Previous studies have shown that the autoimmune phenomenon could be caused by defective apoptosis of autoreactive lymphocytes. Corticosteroids used for treatment of systemic lupus erythematosus (SLE) are potent apoptosis inducers. We examined dexamethasone (DEX)-induced apoptosis and Fas expression in peripheral blood lymphocytes of SLE patients and normal subjects. Peripheral blood lymphocytes were obtained from 40 SLE patients and 18 sex- and age-matched control subjects. Percentages of apoptosis and expression of Fas molecule in lymphocytes were assessed by flow cytometry. Fas expression in lymphocytes treated with or without DEX was significantly higher in SLE patients than normal controls [median (interquartile range) of mean fluorescence intensity without DEX: 74.9 (50.7–98.0) vs 20.0 (17.7–25.0), p < 0.001; with DEX: 77.9 (56.0–130.5) vs 20.5 (18.6–24.7), P < 0.001]. DEX (0.1–5 μM) could also induce apoptosis of lymphocytes from SLE and control subjects in a dose-dependent manner. Elevation of apoptotic susceptibility was more prominent in DEX-treated SLE lymphocytes [33.9% (24.7–37.5%) vs 19.6% (13.6–26.1%), P = 0.003]. The higher apoptotic susceptibility of SLE lymphocytes upon DEX treatment in vitro may be related, at least partly, to the pharmacological action of corticosteroids.