解毒通络调肝方干预TGR5/cAMP信号通路靶向NLRP3炎症小体保护胰岛β细胞的作用机制

目的 探讨解毒通络调肝方通过胆汁酸G蛋白偶联受体5（TGR5）/环状磷酸腺苷（cAMP）信号通路靶向NOD样受体蛋白3（NLRP3）炎症小体保护胰岛β细胞的干预作用。方法 选用32只SPF级雄性db/db小鼠随机分为模型组、解毒通络调肝方低、高剂量组（3.6、7.2 g·kg^-1）、二甲双胍组（0.2 g·kg^-1）,8只db/m小鼠作为空白组,药物干预8周,每2周检测各组小鼠空腹血糖（FBG）,并在末次给药后,进行口服糖耐量实验（OGTT）,酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测空腹胰岛素（FINS）并计算β细胞功能稳态指数（HOMA-β）、白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、IL-1β水平。苏木素-伊红（HE）染色观察小鼠胰腺组织病理学改变,免疫荧光测定小鼠胰腺组织胰岛素（Insulin）的表达,蛋白免疫印迹法（Western blot）和实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测TGR5/cAMP信号通路和NLRP3炎症小体关键靶点的蛋白、mRNA的表达。结果 与空白组比较,模型组小鼠FBG、OGTT、FINS、IL-6、TNF-α和IL-1β显著升高（P<0.01）;与模型组比较,药物治疗6周后,解毒通络调肝方组和二甲双胍组的FBG水平显著下降（P<0.01）;OGTT实验结果表明,与模型组比较,各给药小组小鼠各时间点的血糖均有降低（P<0.05,P<0.01）,解毒通络调肝方各剂量组和二甲双胍组FINS、TNF-α和IL-6水平明显降低（P<0.05,P<0.01）,解毒通络调肝方高剂量组和二甲双胍组IL-1β水平显著降低（P<0.01）。胰腺病理显示模型组小鼠的胰岛形状不规则,分布不均匀,有萎缩的征象,解毒通络调肝方干预后,其细胞计数增加,边界更清晰;免疫荧光结果表示,空白组小鼠的胰岛细胞排列有序,形态饱满,伴有适当的胰岛素分泌,而模型组胰岛细胞形态扭曲,结构萎缩,胰岛素分泌变少,解毒通络调肝方各剂量组和二甲双胍组小鼠的胰岛素含量显著增加。与空白组比较,模型组小鼠胰腺组织中NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白（ASC）、胱天蛋白酶-1（Caspase-1） mRNA表达显著升高（P<0.01）;与模型组比较,解毒通络调肝方高剂量组和二甲双胍组促进了TGR5和cAMP mRNA的上调,并下调了NLRP3、ASC和Caspase-1的mRNA表达（P<0.05,P<0.01）。与空白组比较,模型组小鼠TGR5蛋白表达显著降低（P<0.01）;与模型组比较,解毒通络调肝方高剂量组和二甲双胍组TGR5蛋白显著升高（P<0.01）。与空白组比较,模型组NLRP3、Caspase-1、ASC蛋白表达显著增高（P<0.01）;与模型组比较,解毒通络调肝方各剂量组、二甲双胍组Caspase-1、ASC蛋白表达显著降低（P<0.01）,解毒通络调肝方高剂量组和二甲双胍组NLRP3蛋白表达显著降低（P<0.01）。与空白组比较,模型组小鼠胰腺组织中cAMP含量显著降低（P<0.01）;与模型组比较,解毒通络调肝方高剂量组和二甲双胍组小鼠cAMP含量明显升高（P<0.05,P<0.01）。结论 解毒通络调肝方保护db/db小鼠的胰岛β细胞,其作用机制可能与调节TGR5/cAMP信号通路抑制NLRP3炎症小体有关。     

基于AMPK信号通路探讨黄芪甲苷对db/db小鼠2型糖尿病合并非酒精性脂肪肝病的作用机制

目的 基于网络药理学和实验验证研究黄芪甲苷（ASⅣ）对db/db小鼠2型糖尿病（T2DM）合并非酒精性脂肪肝病（NAFLD）的作用机制。方法 通过随机将24只db/db小鼠分为4组：模型组、二甲双胍组、黄芪甲苷低、高剂量组。采用6只C57小鼠作为空白组。黄芪甲苷低、高剂量组分别予黄芪甲苷0.015、0.030 g·kg^-1灌胃，二甲双胍组予0.067 g·kg^-1灌胃，空白组和模型组予等体积蒸馏水灌胃。灌胃结束后，检测小鼠空腹血糖（FBG），进行口服葡萄糖耐量试验，检测血清血脂水平及肝组织病理情况。通过网络药理学预测黄芪甲苷治疗T2DM合并NAFLD的作用靶点及富集通路，并采用分子生物学技术验证其主要相关富集通路；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测肝组织AMPK、p-AMPK、甾醇调节元件结合蛋白-1（SREBP-1）、脂肪酸合成酶（FAS）蛋白表达。结果 与空白组比较，经ASⅣ治疗的小鼠体质量、肝质量系数、空腹血糖、血清总胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白胆固醇水平降低（P<0.05，P<0.01）。肝组织的病理学显示脂质蓄积情况明显改善，影像学结果显示经黄芪甲苷治疗后，脂肪肝的程度减轻。网络药理学预测结果表明血管内皮生长因子α（VEGFA），半乳糖凝集素3（LGALS3），蛋白激酶B2（Akt2），含Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶1（ROCK1），蛋白激酶B1（Akt1），信号传导及转录激活蛋白（STAT3），间质表皮转化因子（MET）是“药物-疾病”中的关键靶点，京都基因与基因组百科全书（KEGG）富集的结果显示AMP依赖的蛋白激酶（AMPK）信号通路与T2DM合并NAFLD密切相关。Western blot结果显示，与空白组比较，模型组中p-AMPK/AMPK表达水平明显下调，SREBP-1、FAS蛋白表达水平明显上调（P<0.01）；与模型组比较，二甲双胍组、黄芪甲苷高剂量组p-AMPK/AMPK表达水平明显上调，SREBP-1、FAS蛋白表达水平明显下调（P<0.05，P<0.01）。结论 黄芪甲苷通过激活AMPK信号通路来调控脂质类蛋白的表达，从而改善脂质代谢。     

二次打击致抑郁小鼠的证候属性及其机制

目的 探讨母婴分离（MS）联合慢性束缚应激（RS）致抑郁小鼠的证候属性及其机制研究。方法 仔鼠出生第0天（PD0）随机分为空白组和造模组。PD21后剔除雌鼠，随机分为模型组、温阳组、解郁组、温阳解郁组、氟西汀组，采用MS+RS建立二次打击模型，每组15只。采用糖水、悬尾及旷场实验评估小鼠焦虑抑郁样行为；酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测各组小鼠血浆促肾上腺皮质激素（ACTH）及皮质酮（CORT）含量；高效液相-电化学法（HPLC-ECD）检测各组小鼠海马单胺类神经递质含量；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测各组小鼠海马5-羟色胺（5-HT）系统、下丘脑-垂体-肾上腺（HPA）轴及脑源性神经营养因子（BDNF）信号通路基因表达水平；免疫组化法（IHC）检测各组小鼠海马5-HT系统及HPA轴蛋白表达水平；全自动蛋白表达分析系统（Simple Wes）检测各组小鼠海马BDNF等蛋白表达水平。结果 与空白组比较，模型组小鼠出现抑郁样行为，温阳解郁方及氟西汀可显著缓解。与空白组比较，模型组血浆CORT及ACTH含量显著升高（P<0.01）；与模型组比较，温阳解郁方及氟西汀组小鼠血浆CORT及ACTH含量明显降低（P<0.05，P<0.01）。与空白组比较，单胺类神经递质表达方面，模型组海马神经递质表达水平明显降低（P<0.05，P<0.01）；与模型组比较，温阳解郁方及氟西汀组小鼠海马神经递质表达水平明显升高（P<0.05，P<0.01）。与空白组比较，模型组小鼠5-HT能神经受到抑制、HPA轴异常激活，温阳解郁方及氟西汀可调控5-HT能神经及HPA轴的异常状态。与空白组比较，海马组织BDNF、TrkB mRNA及蛋白表达明显降低（P<0.05，P<0.01）；与模型组比较，温阳、解郁、温阳解郁方及氟西汀组小鼠海马BDNF、TrkB mRNA及蛋白表达水平明显升高（P<0.05，P<0.01）。结论 二次打击致抑郁小鼠的证候属性可能是阳虚肝郁型，温阳解郁方可能通过调节5-HT神经系统及HPA轴介导的BDNF信号通路，增加海马神经递质含量，进而缓解模型小鼠抑郁样行为。     

桂枝茯苓丸对PCOS模型小鼠卵巢颗粒细胞自噬的影响

目的 探讨桂枝茯苓丸对多囊卵巢综合征（PCOS）模型小鼠颗粒细胞自噬的影响。方法 20只SD小鼠中随机选取10只建立PCOS小鼠模型,并提取小鼠卵巢颗粒细胞进行体外培养。设置正常小鼠颗粒细胞为空白组,PCOS小鼠颗粒细胞为模型组,模型组颗粒细胞分别给予10%体积的17.6,35.1,70.2 mg·kg^-1桂枝茯苓丸含药血清,10%体积的25 mg·kg^-1二甲双胍含药血清作为培养基培养颗粒细胞,空白组颗粒细胞用10%体积的空白血清培养72 h。造模期间,测量小鼠体质量变化;造模结束后用显微镜观察小鼠卵巢形态,检测空腹血糖;使用放射免疫法检测空腹胰岛素水平和睾酮水平;细胞增殖与活性检测-8（CCK-8）检测卵巢颗粒细胞增殖情况,找到对于细胞活力无明显影响的最高含药血清剂量,用于后续实验;流式细胞仪检测颗粒细胞自噬情况;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测细胞内微管相关蛋白1轻链3Ⅰ（LC3Ⅰ）,LC3Ⅱ,Beclin1,p62蛋白的表达。结果 与空白组比较,模型组小鼠体质量增加、空腹胰岛素及空腹血糖水平增加、睾酮水平增加（P<0.05,P<0.01）,表明PCOS小鼠建模成功。与空白组比较,经10%桂枝茯苓丸含药血清培养基孵育后,各组细胞自噬率均有所下降（P<0.05）;Western blot检测结果表明,与空白组比较,模型组中Beclin1,LC3Ⅱ/Ⅰ的表达水平明显升高,p62的蛋白表达水平明显降低（P<0.05,P<0.01）;与模型组比较,桂枝茯苓丸中、高剂量组中Beclin1,LC3Ⅱ/Ⅰ的表达水平明显下降,p62水平明显升高（P<0.05,P<0.01）。结论 桂枝茯苓丸可以通过下调Beclin1,LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白的表达,抑制卵巢颗粒细胞的自噬水平。     

基于PI3K/Akt信号通路探讨莲甲散结方对肺癌H1975细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响

目的：基于PI3K/Akt信号通路探究莲甲散结方对肺腺癌H1975细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响，并探索其作用机制。方法：采用CCK-8法检测不同浓度的莲甲散结方对H1975细胞活力的影响。在CCK-8结果基础上将H1975细胞分为空白组和莲甲散结方低、中、高剂量组（3、6、9 g/L）。采用克隆形成、5-乙炔基-2′-脱氧尿苷（EDU）细胞增殖实验检测H1975细胞的增殖能力；Transwell迁移和Transwell侵袭实验检测H1975细胞迁移和侵袭能力；Hoechst 33342染色法和流式细胞术Annexin VFITC/PI双染检测H1975细胞凋亡情况。采用蛋白免疫印迹法（Western blot）测定H1975细胞上皮间质转化（EMT）相关蛋白，凋亡相关蛋白，磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)通路蛋白的表达水平。结果：莲甲散结方对肺腺癌H1975细胞的48 h半数抑制浓度（IC50）为7.51 g/L。与空白组比较，莲甲散结方各剂量组克隆数目减少，EDU阳性数目减少（P <0.05,P <0.01）；与空白组相比，莲甲散结方各剂量组迁移能力下降，侵袭能力减弱（P <0.05,P <0.01）；与空白组相比，莲甲散结方各剂量组促进H1975细胞的凋亡率显著增加（P <0.01）。Western blot结果显示，与空白组相比，莲甲散结方中、高剂量组E-cadherin表达升高（P <0.05,P <0.01）,N-cadherin表达降低（P <0.01）。与空白组相比，莲甲散结方各剂量组Cleaved Caspase-3、Bax表达均升高（P <0.05,P <0.01）,Bcl-2表达均下降（P <0.05,P <0.01）。与空白组相比，莲甲散结方中、高剂量组p-PI3K表达下降（P <0.05,P <0.01），莲甲散结方各剂量组p-Akt表达均下降（P <0.05,P <0.01），且呈浓度依赖性。结论：莲甲散结方可以抑制肺腺癌细胞H1975的恶性表型，诱导H1975细胞的凋亡，抑制PI3K/Akt信号通路的活化，下调PI3K/Akt的蛋白磷酸化水平可能是其机制之一。     

丹红注射液对动脉粥样硬化小鼠主动脉自噬基因Atg13启动子区甲基化及PI3K/Akt/mTORC1信号通路的影响

目的观察丹红注射液对动脉粥样硬化(AS)小鼠自噬基因Atg13启动子区甲基化及自噬信号通路PI3K/Akt/mTORC1的影响,探讨其可能的作用机制。方法 40只8周龄雄性ApoE~(-/-)小鼠高脂饲料喂养6周,随机分为模型组、阳性对照组和丹红注射液低、高剂量组,每组10只,各给药组给予相应药物干预。6周后RT-PCR检测AS小鼠主动脉自噬基因Atg13、Atg3和Atg4a的mRNA表达;Westernblot检测AS小鼠主动脉Beclin1、LC3Ⅱ/Ⅰ、PI3K、Akt、p-Akt、mTORC1和p-mTORC1的蛋白表达;采用亚硫酸氢盐测序法检测AS小鼠主动脉自噬基因Atg13启动子区甲基化水平。结果与模型组比较,丹红注射液高、低剂量组小鼠主动脉Beclin1蛋白表达明显升高,丹红注射液低剂量组小鼠主动脉LC3Ⅱ/Ⅰ表达明显升高(P0.01),丹红注射液高、低剂量组小鼠主动脉Atg13、Atg3和Atg4a mRNA表达显著升高(P0.01),丹红注射液高、低剂量组小鼠主动脉自噬基因Atg13启动子区甲基化水平明显降低(P0.01),丹红注射液高、低剂量组小鼠主动脉p-Akt蛋白表达明显降低(P0.01),丹红注射液高剂量组小鼠主动脉p-mTORC1蛋白表达明显降低(P0.01)。结论丹红注射液防治AS的机制可能与降低模型小鼠主动脉Atg13启动子区甲基化水平、抑制PI3K/Akt/mTORC1信号通路和促进细胞自噬有关。     

护心康片通过VEGF/VEGFR-2信号通路影响ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化斑块的实验研究

目的 观察护心康片对动脉粥样硬化（AS）小鼠主动脉斑块的影响，探讨其作用机制。方法 以高脂饲料喂养ApoE-/-小鼠12周建立AS小鼠模型，设空白组、模型组、护心康低剂量组、护心康中剂量组、护心康高剂量组和阿托伐他汀钙组，连续给药12周，分别行HE染色观察主动脉形态学改变，油红O染色观察脂质含量，免疫组化法测定CD34、MOMA-2、α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）表达情况，RT-qPCR检测VEGF、VEGFR-2mRNA表达水平，Western blotting检测血管内皮生长因子（VEGF）、血管内皮生长因子受体2(VEGFR-2)蛋白表达水平。结果 与空白组比较，模型组小鼠主动脉有较大斑块形成，脂质含量多（P <0.01）,α-SMA表达减少（P <0.01）,CD34、MOMA-2表达增加（P <0.01）,VEGF、VEGFR-2 mRNA及蛋白表达增加（P <0.01或P <0.05）；与模型组比较，给药各组小鼠主动脉斑块均明显减小，脂质含量减少（P <0.01或P <0.05）,α-SMA表达增加（P <0.01）,CD34...     

洋参御糖丸调控糖尿病大鼠肝脏胰岛素PI3K信号通路的机制研究

目的：观察洋参御糖丸对DM大鼠肝脏胰岛素P13K信号通路的调节作用。方法：4周龄Wistar大鼠50只,选取10只作为空白组,给予普通饲料,其余40只给予高脂高糖饲料,喂养8周,腹腔注射STZ,做成糖尿病大鼠模型,分为模型组、二甲双胍组、洋参御糖方高剂量组、洋参御糖方低剂量组,每组10只。各组给予相应药物灌胃,每日一次,给药剂量：洋参御糖丸低剂量组1．35g·（kg·d）-1,高剂量组2．7g·（kg·d）-1,二甲双胍组70mg·（kg·d）-1。模型纽和空白组给予等体积蒸馏水灌胃。各组继续给予高糖高脂饲料,药物干预4周末,进行肝脏取材。血糖仪测定各组大鼠尾静脉空腹血糖;放免法测定空腹血清胰岛素;氧化酶法测定肝糖原含量;结果：①模型组大鼠血糖、血清胰岛素与空白组比较明显增高（P〈0．05）;洋参御糖丸高、低剂量组及二甲双胍组血糖及血清胰岛素较模型组不同程度降低,（P〈0．05）;二甲双胍组上述指标降低程度优于洋参御糖丸高、低剂量组（P〈0．05）;②模型组大鼠肝糖原含量较空白组明显降低（P〈0．05）;洋参御糖丸高剂量组和二甲双胍纽肝糖原含量较模型纽显著升高,（P〈0．05）;洋参御糖丸低剂量组肝糖原含量与模型组比较差异无统计学意义（P〉0．05）;③模型组大鼠肝脏IRS—1、GLUT-4和P13K—p85蛋白表达与空白组相比显著降低（P〈0．05）;洋参御糖丸高剂量组及双胍组IRS-1、GLUT-4和P13K—p85蛋白表达与模型组比较显著提高（P〈0．05）;而洋参御糖丸低剂量组与模型组相比上述指标无明显差异（P〉0．05）。结论：洋参御糖丸可能通过增加DM大鼠肝脏IRS-2、GLUT-4和P13K—p85蛋白表达,增强胰岛素P13K信号转导,抑制肝糖输出,发挥降糖和改善IR作用。     

基于自噬探讨健脾益肠散对溃疡性结肠炎模型大鼠肠黏膜保护的作用机制

目的 通过观察健脾益肠散对溃疡性结肠炎模型大鼠结肠自噬相关分子表达的影响,探讨其肠黏膜保护 的作用机制。方法 将 SD 大鼠随机分为正常组、模型组、健脾益肠散组和柳氮磺吡啶组。采用 2, 4, 6-三硝基 苯磺酸 （TNBS） -乙醇溶液复合法建立溃疡性结肠炎大鼠模型;模型复制成功后灌胃给药,每日 1 次,持续 14 d。 观察大鼠一般状况,计算疾病活动指数 （DAI） 评分;苏木素-伊红 （HE） 染色法观察结肠组织病理形态;透射电 镜观察结肠上皮细胞自噬情况;免疫荧光染色法、蛋白免疫印迹法 （Western Blot） 检测结肠组织肌球蛋白样 BCL2 结合蛋白 （Beclin1） 、微管相关蛋白 1 轻链 3 （LC3） 蛋白表达;实时荧光定量聚合酶链反应 （Real-time PCR） 检测自噬蛋白 5 （Atg5） 、自噬蛋白 7 （Atg7） 、泛素结合蛋白 62 （p62） mRNA 表达。结果 与正常组比较, 模型组一般情况较差,DAI 评分明显升高 （P＜0.000 1） ;结肠组织出现明显的上皮细胞损伤,电镜下自噬体的 数量明显减少;结肠组织 Beclin1、LC3-II/LC3-I 蛋白及 Atg5、Atg7 mRNA 表达明显降低 （P＜0.000 1） ,p62 mRNA 表达明显升高 （P＜0.000 1） 。与模型组比较,健脾益肠散组大鼠一般情况明显恢复,DAI 评分明显降低 （P＜0.000 1） ;结肠组织病理损伤有不同程度的改善,电镜下自噬体的数量明显增多;结肠组织 Beclin1、LC3-II/ LC3-I 蛋白及 Atg5、Atg7 mRNA 表达明显升高 （P＜0.01,P＜0.001,P＜0.000 1） ,p62 mRNA 表达明显降低 （P＜0.01） 。结论 健脾益肠散可通过上调自噬相关分子 Beclin1、LC3、Atg5 及 Atg7 的表达,下调 p62 的表 达,增强自噬以达到保护溃疡性结肠炎模型大鼠结肠黏膜损伤的作用。     

乌饭树叶多糖对2型糖尿病小鼠胰岛素抵抗及NF-κB、PPARγ蛋白的影响

目的:研究乌饭树叶多糖对自发2型糖尿病KKAy小鼠胰岛素抵抗及NF-κB、PPARγ蛋白的影响。方法:对7周龄的KKAy小鼠进行空腹血糖(FBG)检测,以FBG≥11.1 mol/L的小鼠作为2型糖尿病小鼠模型。将成模的小鼠随机分为模型组、二甲双胍组(320 mg/kg)、乌饭树叶多糖低剂量组(200 mg/kg)、乌饭树叶多糖高剂量组(400 mg/kg),每组10只,连续灌胃给药6周。另设C57BL/6J小鼠10只作为空白组,灌胃给予等体积生理盐水。末次给药2 h后,检测小鼠给药前后的空腹血糖、血清胰岛素含量;显微镜观察胰腺组织的病理学变化;检测小鼠血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)的含量;ELISA法检测胰腺组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素6(IL-6)、白介素1β(IL-1β)的含量;蛋白免疫印迹法(Western blotting)检测胰腺组织中过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)、核因子κB(NF-κB)的表达。结果:二甲双胍组、乌饭树叶多糖高剂量组小鼠血糖均低于模型组(P0.05)。二甲双胍组、乌饭树叶多糖高剂量组小鼠血清胰岛素浓度均明显高于模型组(P0.05)。二甲双胍组及乌饭树叶多糖高剂量组小鼠血清TC、TG、LDL-C含量明显低于模型组,HDL-C含量明显高于模型组(P0.05)。二甲双胍组、乌饭树叶多糖低剂量组、乌饭树叶多糖高剂量组小鼠胰腺中TNF-α、IL-1β、IL-6的含量明显低于模型组(P0.05)。二甲双胍组、乌饭树叶多糖低剂量组、乌饭树叶多糖高剂量组小鼠胰腺中PPARγ的表达高于模型组(P0.05);二甲双胍组及乌饭树叶多糖高剂量组小鼠NF-κB的表达低于模型组(P0.05)。结论:乌饭树叶多糖可降低2型糖尿病小鼠血糖、血脂、炎症因子,促进胰岛素释放,调节NF-κB、PPARγ蛋白表达,改善胰岛素抵抗的情况。     

六味地黄丸通过PI3K/Akt/FoxO3a通路调控自噬对SAMP8小鼠记忆功能的影响

目的 探讨六味地黄丸通过磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）/叉头框转录因子O3a（FoxO3a）通路调控自噬对快速老化小鼠8型（SAMP8）小鼠记忆功能的影响。方法 6月龄SPF级抗快速老化亚系小鼠（SAMR1）雄性小鼠6只设为正常组，6月龄SPF级SAMP8雄性小鼠24只随机均分为模型组、多奈哌齐组（0.747 mg·kg^-1）、六味地黄丸高、低剂量组（2.700、1.350 g·kg^-1），灌胃给药2个月。Morris水迷宫法检测各组小鼠学习和记忆能力；尼氏染色观察小鼠皮层、海马神经元；免疫组化（IHC）检测皮层、海马微管相关蛋白1轻链3B（LC3B）阳性表达；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测各组小鼠皮层自噬关键分子酵母ATG6同系物（Beclin1）、B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）、自噬相关基因5（ATG5）、胱天蛋白酶-3（Caspase-3）、Caspase-9、Akt、p-Akt、FoxO3a、p-FoxO3a的蛋白表达水平。结果 与正常组小鼠比较，模型组小鼠逃避潜伏期明显延长（P<0.05，P<0.01），穿越平台次数、目标象限停留时间显著减少（P<0.01）；皮层、海马神经细胞数量明显减少、体积缩小，分布疏散，LC3B阳性表达显著增多（P<0.01）；皮层Beclin1、ATG5表达显著升高（P<0.01），Bcl-2表达水平降低（P<0.01），Caspase-3、Caspase-9表达水平显著升高（P<0.01），p-Akt/Akt、p-FoxO3a/FoxO3a表达水平显著降低（P<0.01）。与模型组比较，多奈哌齐组及六味地黄丸高、低剂量组小，3 d逃避潜伏期明显缩短（P<0.05，P<0.01）；穿越平台次数显著增加（P<0.01）；目标象限停留时间显著增加（P<0.01）；多奈哌齐组皮层海马神经元神经细胞数量增多，六味地黄丸高、低剂量组小鼠神经元数目及尼氏体明显增加且分布致密，细胞损伤程度较低；多奈哌齐组及六味地黄丸高、低剂量组皮层、海马LC3B阳性表达显著降低（P<0.01）；六味地黄丸高、低剂量组Beclin1表达显著降低（P<0.01），多奈哌齐组和六味地黄丸低剂量组ATG5表达显著降低（P<0.01），多奈哌齐组及六味地黄丸高、低剂量组皮层Bcl-2表达水平显著升高（P<0.01），Caspase-3表达水平显著降低（P<0.01），Caspase-9表达明显降低（P<0.05，P<0.01），p-Akt/Akt、p-FoxO3a/FoxO3a表达水平显著升高（P<0.01）。结论 六味地黄丸有效改善了快速老化SAMP8 AD模型小鼠的学习记忆能力，保护神经元，其机制可能与调控PI3K/Akt/FoxO3a信号通路，下调自噬相关因子ATG5、Beclin1和LC3B表达和减少凋亡有关。     

基于JAK1/STAT3通路的寿胎丸对复发性流产小鼠细胞自噬的影响

目的 观察寿胎丸对复发性流产（RSA）小鼠的妊娠保护作用，基于JAK1/STAT3通路及细胞自噬探讨其作用机制。方法 分别构建正常妊娠小鼠模型及RSA小鼠模型，将小鼠分为空白组、模型组、地屈孕酮组和寿胎丸组，分别予相应药物干预，连续12 d。观察小鼠妊娠情况，计算胚胎丢失率及子宫脏器系数；HE染色观察小鼠蜕膜及胎盘组织病理改变；ELISA检测血清孕酮、β-人绒毛膜促性腺激素（β-HCG）含量；Western blot检测蜕膜组织Janus激酶1(JAK1)、p-JAK1、信号转导和转录激活因子3(STAT3)、p-STAT3、ATG5、Beclin1、LC3蛋白表达；实时荧光定量PCR检测蜕膜组织JAK1、STAT3、ATG5、Beclin1 mRNA表达。结果 与空白组比较，模型组小鼠胚胎丢失率显著升高（P<0.01），子宫脏器系数显著降低（P<0.01）；蜕膜及胎盘组织形态受损，血清孕酮、β-HCG含量显著减少（P<0.01）；蜕膜组织p-JAK1、p-STAT3、ATG5、 Beclin1蛋白表达及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值显著降低（P<0.01, P&l...     

黄连温胆汤对2型糖尿病小鼠学习记忆及海马神经细胞形态的影响

目的研究黄连温胆汤对2型糖尿病小鼠学习记忆及海马神经细胞形态的影响。方法小鼠喂养高糖、高脂、高热量饲料4周后,腹腔注射链脲佐菌素(STZ)100 mg/kg,制备糖尿病小鼠模型,随机分为二甲双胍阳性对照组,模型对照组,黄连温胆汤低、中、高剂量组。黄连温胆汤低中高剂量组,分别给黄连温胆汤5,10,20 g/kg(按生药量计)。阳性药组给予二甲双胍250 mg/kg。连续给药3周后进行跳台实验和水迷宫实验,海马组织HE染色光镜观察。结果黄连温胆汤中、高组、二甲双胍组与模型组比较,小鼠潜伏期明显减低,而错误次数明显减少。黄连温胆汤中、高剂量组海马神经细胞损伤程度较低剂量组轻。结论黄连温胆汤对糖尿病小鼠学习记忆有明确改善作用,且可以减轻海马神经元细胞损伤。     

加味葛根芩连汤对2型糖尿病db/db小鼠胰腺组织TGR5/cAMP/GLP-1信号通路的影响

目的 探讨加味葛根芩连汤对肥胖型2型糖尿病（T2DM）模型小鼠血糖血脂及胰腺组织中G蛋白偶联胆汁酸受体5（TGR5）相关途径的影响。方法 将10只7周龄无特定病原体（SPF）级雄性m/m小鼠及50只7周龄SPF级雄性db/db小鼠在SPF级实验室适应性喂养1周。m/m小鼠作为空白组。成模后随机分为5组,每组10只,分别作为模型组、二甲双胍组（0.2 g·kg^-1）、加味葛根芩连汤高、中、低剂量组（31.9、19.1、6.4 g·kg^-1）,灌胃体积均为10 mL·kg^-1,模型组和空白组灌服等体积蒸馏水,1次/d,连续12周。定期检测小鼠空腹血糖（FBG）。药物干预12周后,检测血清中糖化血清蛋白（GSP）、血清葡萄糖（GLU）、总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）水平;采用苏木素-伊红（HE）染色观察各组小鼠胰腺组织病理改变,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测胰腺组织TGR5、蛋白激酶A（PKA）、磷酸化（p）-PKA、环磷腺苷效应元件结合蛋白（CREB）、p-CREB、前蛋白转化酶1/3（PC1/3）、胰高糖素样肽-1（GLP-1）蛋白的表达水平,酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测胰腺组织环磷腺苷（cAMP）的含量。结果 与空白组比较,模型组小鼠胰腺组织出现病理学改变;小鼠FBG、GSP、GLU、TC、TG、LDL-C水平显著增高（P<0.01）,HDL-C水平明显降低（P<0.05）;胰腺组织中TGR5、p-PKA（Thr197）/PKA、p-CREB（Ser133）/CREB、PC1/3、GLP-1蛋白表达水平显著降低（P<0.01）;胰腺组织中cAMP的含量显著降低（P<0.01）。与模型组比较,治疗组胰腺组织病变程度减轻;加味葛根芩连汤高剂量组及二甲双胍组均能够明显降低db/db小鼠FBG、GSP、GLU、TC、TG、LDL-C水平（P<0.05,P<0.01）,显著增高db/db小鼠HDL-C水平（P<0.01）;除加味葛根芩连汤中剂量组GLP-1蛋白外,加味葛根芩连汤高、中剂量组及二甲双胍组TGR5、p-PKA（Thr197）/PKA、p-CREB（Ser133）/CREB、PC1/3、GLP-1蛋白表达水平均有不同程度的增加（P<0.05,P<0.01）;加味葛根芩连汤高、中剂量组及二甲双胍组胰腺组织中cAMP的含量明显增高（P<0.05,P<0.01）。结论 加味葛根芩连汤能够改善T2DM模型db/db小鼠的葡萄糖稳态,其机制可能与调控TGR5/cAMP/GLP-1信号通路相关蛋白表达有关。     

铁皮石斛多糖对糖尿病大鼠脂代谢异常的改善作用及机制

【目的】 观察铁皮石斛多糖对糖尿病大鼠脂代谢异常的改善作用及机制。【方法】 将90只大鼠随机选取75只建立糖尿病模型,其余15只设为正常组。将造模成功的68只大鼠随机分为模型组,铁皮石斛多糖低、高剂量组和二甲双胍组,每组17只。铁皮石斛多糖低、高剂量组分别灌胃铁皮石斛多糖100、200 mg/kg,二甲双胍组灌胃盐酸二甲双胍150 mg/kg,正常组和模型组灌胃等体积生理盐水,每日1次,干预30 d。干预结束后,测定空腹血糖（FBG）、胰岛素（FINS）水平,血清甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）水平以及超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）水平,采用苏木素-伊红（HE）染色法观察肝脏组织病理学表现,采用蛋白免疫印迹（Western Blot）法检测肝脏组织胰岛素受体底物2（IRS2）、磷酸化IRS2（p-IRS2）、磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）、磷酸化PI3K（p-PI3K）、蛋白激酶B（AKT）、磷酸化AKT（p-AKT）、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）蛋白相对表达水平。【结果】 与正常组比较,模型组,铁皮石斛多糖低、高剂量组和二甲双胍组干预0、15、30 d FBG水平和FINS水平均升高（P < 0.05）;与模型组比较,各治疗组干预15、30 d FBG水平和FINS水平均降低,且铁皮石斛多糖高剂量组与二甲双胍组比较,差异无统计学意义（P > 0.05）;随着干预时间增加,模型组FBG水平持续上升,各治疗组FBG水平持续下降（P < 0.05）。与正常组比较,模型组,铁皮石斛多糖低、高剂量组和二甲双胍组血清 TG、TC、LDL-C、MDA 水平升高,HDL-C、SOD 水平降低（P < 0.05）;与模型组比较,各治疗组血清TG、TC、LDL-C、MDA水平降低,HDL-C、SOD水平升高（P < 0.05）,且铁皮石斛多糖高剂量组与二甲双胍组比较,差异无统计学意义（P > 0.05）。模型组出现大量肝细胞水肿坏死现象,组织结构紊乱,排列不均,而铁皮石斛多糖高剂量组和二甲双胍组肝组织病理变化得到明显改善。与正常组比较,模型组,铁皮石斛多糖低、高剂量组和二甲双胍组肝脏组织 p-IRS2、p-PI3K、p-AKT、mTOR 蛋白相对表达水平降低（P < 0.05）;与模型组比较,各治疗组肝脏组织p-IRS2、p-PI3K、p-AKT、mTOR蛋白相对表达水平升高（P < 0.05）,且铁皮石斛多糖高剂量组与二甲双胍组比较,差异无统计学意义（P > 0.05）。【结论】 铁皮石斛多糖可改善糖尿病大鼠脂代谢异常,可能是通过激活PI3K/AKT信号通路发挥作用。     

小檗碱靶向Wnt5a/NPC1信号通路调节脂自噬抑制动脉粥样硬化形成

目的 探讨小檗碱（BBR）在防治小鼠动脉粥样硬化（AS）病变中对脂自噬的调节作用及分子机制。方法 采用载脂蛋白E基因敲除（ApoE^-/-）小鼠50只随机分为AS模型组、阿托伐他汀组（5 mg·kg^-1）、BBR低、中、高剂量组（2.5、5、10 mg·kg^-1）；另设10只C57BL/6J小鼠为空白组。12周后苏木素-伊红（HE）及油红O染色检测主动脉AS斑块病理学改变；生化检测血清脂质水平；酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清炎症因子白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平、氧化应激标记物活性氧（ROS）含量及血清脂自噬标记物Beclin1、微管相关蛋白1轻链3Ⅱ（LC3Ⅱ）水平；黄嘌呤氧化酶法检测血清超氧化物歧化酶（SOD）活力；免疫组化（IHC）检测主动脉无翅型MMTV整合位点家族成员5a（Wnt5a）、C1型尼曼-匹克蛋白（NPC1）分布；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测主动脉Wnt5a、NPC1蛋白表达。结果 与空白组比较，AS模型组小鼠可见显著的AS斑块形成，血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、IL-6、TNF-α、ROS、主动脉Wnt5a分布及蛋白表达均显著升高（P<0.01），血清高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、SOD、Beclin1、LC3Ⅱ、主动脉NPC1分布及蛋白表达均显著降低（P<0.01）；与AS模型组比较，阿托伐他汀组、BBR中剂量组及BBR高剂量小鼠AS斑块面积明显减少（P<0.05，P<0.01），血清TC、TG、LDL-C、IL-6、TNF-α、ROS、主动脉Wnt5a分布及蛋白表达均明显降低（P<0.05，P<0.01），血清HDL-C、SOD、Beclin1、LC3Ⅱ、主动脉NPC1分布及蛋白表达均明显升高（P<0.05，P<0.01）；与阿托伐他汀组比较，BBR中剂量组小鼠以上检测指标差异无统计学意义。结论 BBR可通过竞争性结合Wnt5a激活NPC1表达，上调脂自噬水平降低血脂，抑制炎症介质的释放及氧化应激损伤从而发挥防治AS功效。     

基于自噬探讨芪灵扶正清解方抗抑郁作用研究＊

目的 观察芪灵扶正清解方对抑郁模型大鼠行为学及海马神经元微结构的影响，探讨其对自噬相关蛋白、基因的调节及其抗抑郁机制。方法 30只SD大鼠随机分3组：正常组、模型组、芪灵组。正常组不干预，其余2组以慢性不可预知温和应激联合孤养建立抑郁大鼠模型。各组大鼠进行糖水消耗实验、敞箱实验行为学观察；HE染色观察海马细胞形态；透射电镜观察海马细胞超微结构及自噬变化；蛋白免疫印迹法（Western blot）和实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测Ulk1、Beclin1、P62、LC3蛋白和mRNA的表达；免疫组织化学染色法（IHC）检测海马组织Beclin1表达。结果 行为学实验提示：与正常组比较，模型组大鼠糖水消耗量明显降低（P<0.05）；直立次数、水平穿越的格数和理毛时间减少，粪便粒数和中央格停留时间增加（P<0.05）；与模型组比较，芪灵组大鼠糖水消耗量明显增加（P<0.05）；直立次数、水平穿越的格数和理毛时间增加，粪便粒数和中央格停留时间减少（P<0.05）。HE染色提示：与正常组比较，模型组海马CA3区细胞数量减少，排列紊乱，部分细胞核模糊；CA1区细胞形态不规则，数量稀疏，体积明显变大，排列紊乱，细胞核模糊；与模型组比较，芪灵组海马CA1区、CA3区细胞形态相对规则，细胞数量相对较多，排列相对齐整，细胞体积相对正常，细胞核较清晰。透射电镜显示：与正常组比较，模型组大鼠海马区神经细胞形态不规则，线粒体结构损伤严重，细胞自噬的表征数量较为丰富；与模型组比较，芪灵组神经细胞形态相对规则，线粒体损伤相对轻微，细胞自噬的表征数量较少。Western blot与qPCR实验提示：与正常组比较，模型组大鼠的Ulk1、Beclin1、LC3-II蛋白和mRNA的表达增加（P<0.05），P62蛋白和mRNA的表达减少（P<0.05）；与模型组比较，芪灵组大鼠的Ulk1、Beclin1、LC3-II蛋白和mRNA的表达减少（P<0.05），P62蛋白和mRNA的表达增加（P<0.05）。IHC实验提示：与正常组比较，模型组大鼠海马CA3区Beclin1表达增加（P<0.05）；与模型组比较，芪灵组大鼠CA3区Beclin1表达减少（P<0.05）。结论 CUMS联合孤养诱导的抑郁模型大鼠海马神经元CA1区、CA3区首先出现损伤性改变，CA3区可能首先出现自噬异常激活；芪灵扶正清解方能改善抑郁模型大鼠的行为学指标，对其海马神经细胞具有一定的神经保护作用，其抗抑郁机制可能与调节海马细胞异常自噬有关。     

降糖三黄片改善2 型糖尿病小鼠胰岛β细胞炎症反应实验研究

目的：研究降糖三黄片通过减少db/db 小鼠胰岛β 细胞炎症反应改善胰岛β 细胞功能的机制。方法：将雄性6 周龄db/db 小鼠24 只随机平均分为3 组：模型组、降糖三黄片组、二甲双胍组；同窝别db/m 小鼠8 只设为对照组。降糖三黄片组予降糖三黄片蒸馏水溶液灌胃，2.64 g/kg，每天1 次；二甲双胍组予盐酸二甲双胍蒸馏水溶液灌胃，0.2 g/kg，每天1 次；对照组及模型组均予等量蒸馏水灌胃，每次1 mL，每天1 次。每2 周测体质量及血糖，干预6 周后取材。摘眼球取血测血糖及胰岛素，取血清用酶联免疫吸附测定（ELISA） 法测白细胞介素（IL） -1β、肿瘤坏死因子-α（TNF-α） 及细胞间黏附分子-1（ICAM-1）的含量；取胰腺行病理片HE 染色。结果：①空腹血糖（FBG）：干预后，降糖三黄片组及二甲双胍组FBG 干预前后比较，差异有统计学意义（P＜0.05）；降糖三黄片组FBG 与二甲双胍组比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。②体质量：干预后，二甲双胍组小鼠体质量上升（P＜0.05）。③胰岛素分泌指标：与模型组比较，降糖三黄片组空腹胰岛素（FINS） 明显升高，差异有统计学意义（P＜0.05）；降糖三黄片组FINS 与二甲双胍组比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。与模型组比较，降糖三黄片组、二甲双胍组胰岛β 细胞分泌指数（HOMA2%β） 均升高，差异均有统计学意义（P＜0.05）；降糖三黄片组HOMA2%β 与二甲双胍组比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。④炎症因子指标：与对照组比较，模型组IL-1β、TNF-α 及ICAM-1 水平均上升（P＜0.05）；与模型组比较，降糖三黄片组及二甲双胍组IL-1β、TNF-α 及ICAM-1 水平均降低（P＜0.05），降糖三黄片组IL-1β、TNF-α 及ICAM-1 水平分别与二甲双胍组比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）。⑤胰腺病理结果：与对照组比较，模型组小鼠胰岛萎缩，部分坏死，结构不完整。与模型组比较，降糖三黄片组胰岛萎缩情况较轻，胰腺炎症较轻，结构相对完整。与二甲双胍组比较，降糖三黄片组胰岛β 细胞数量增多，界限较清楚。与对照组比较，降糖三黄片组胰岛细胞排列拥挤，胞浆不丰富，细胞核较密集。结论：降糖三黄片可能通过减少IL-1β、TNF-α 及ICAM-1 表达，改善db/db 小鼠胰岛β 细胞的炎症反应，保护胰岛β 细胞功能。     

补阳还五汤防治2型糖尿病小鼠骨骼肌病变的作用

目的 基于线粒体转运、糖代谢、氧化应激及炎性介质探讨补阳还五汤防治2型糖尿病骨骼肌病变的作用。方法 选用60只SPF级雄性C57BL/6J小鼠,高脂饲料联合链脲佐菌素腹腔注射构建2型糖尿病小鼠模型,按随机数字表法随机分组,其中正常组、补阳还五汤高、中、低剂量组、二甲双胍组、模型组各10只。补阳还五汤各剂量组及二甲双胍组灌喂剂量分别为86.5、43.2、21.6 g·kg^-1、150 mg·kg^-1;实验期间定期检测小鼠血糖等指标,实验结束后取骨骼肌,分别置于4%多聚甲醛-80 ℃冰箱冻存。进行血液样本送检,骨骼肌采用苏木素-伊红（HE）染色,酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测炎症指标及活性氧（ROS）,蛋白免疫印迹法（Western blot）、免疫组化检测线粒体蛋白表达情况。结果 与正常组比较,模型组小鼠空腹血糖、饮水量、进食量显著升高（P<0.01）,体质量显著降低（P<0.01）,与模型组比较,补阳还五汤组及二甲双胍组小鼠空腹血糖、进水量、进食量明显降低（P<0.05,P<0.01）,体质量上升（P<0.01）;与正常组比较,模型组TNF-α、IL-6、ROS显著增加（P<0.01）,与模型组比较,二甲双胍组与补阳还五汤各组TNF-α、IL-6、ROS均明显下降（P<0.05,P<0.01）。模型组骨骼肌肌纤维普遍萎缩性变细,提示骨骼肌萎缩,形态结构改变,而二甲双胍组及补阳还五汤各组小鼠骨骼肌病理状态有所减轻,纤维束形态部分恢复正常;与正常组比较,模型组线粒体融合蛋2（Mfn2）显著减少（P<0.01）,与模型组比较,二甲双胍组与补阳还五汤各剂量组Mfn2明显增多（P<0.05,P<0.01）;与正常组比较,模型组分裂蛋白Drp1显著增多（P<0.01）,与模型组比较,二甲双胍组与补阳还五汤各剂量组分裂蛋白1（Drp1）显著减少（P<0.01）。结论 补阳还五汤可以改善2型糖尿病骨骼肌病变小鼠的体质量及骨骼肌病理形态,降低空腹血糖、进食量、进水量、TNF-α、IL-6、ROS值及分裂蛋白Drp1,升高体质量及线粒体融合蛋白Mfn2。     

酸枣仁-延胡索配伍对肝郁型失眠小鼠的作用及机制研究

目的探讨酸枣仁-延胡索配伍对肝郁型失眠小鼠的镇静催眠作用及机制。方法①将96 只昆明小鼠 随机分为4 组：正常组、酸枣仁组（2.25 g·kg-1）、延胡索组（1.50 g·kg-1）、酸枣仁-延胡索配伍组（简称配 伍组,3.75 g·kg-1）,每组24 只;每日1 次,连续灌胃10 d,然后观察戊巴比妥钠阈下剂量（腹腔注射, 35 mg·kg-1）诱导小鼠的睡眠发生率,阈上剂量（腹腔注射,45 mg·kg-1）诱导小鼠的睡眠潜伏期、睡眠时间。 ②将60 只昆明小鼠随机分为5 组：正常组、模型组、酸枣仁组（2.25 g·kg-1）、延胡索组（1.50 g·kg-1）、配伍组 （3.75 g·kg-1）,每组12 只。采用慢性夹尾刺激和对氯苯丙氨酸（PCPA,400 mg·kg-1）腹腔注射的复合因子造模 法复制肝郁型失眠小鼠模型。每日1 次,连续灌胃给药14 d。采用酶联免疫吸附（ELISA）法检测血清去甲肾上 腺素（NE）、多巴胺（DA）、5-羟色胺（5-HT）的含量,检测垂体促肾上腺皮质激素（ACTH）及下丘脑促肾上腺皮 质激素释放素（CRH）的含量;采用免疫组化法检测垂体ACTH 和海马5-HT 的蛋白表达;采用qRT-PCR 法检 测脑组织中K+-Cl-共转运体2（KCC2）、Na+,K+-2Cl-共转运体1（NKCC1）mRNA 表达水平。结果①与正常组 比较,给药组小鼠的睡眠发生率明显提高,睡眠时间显著延长（P < 0.01）;酸枣仁组及配伍组的睡眠潜伏期显 著缩短（P < 0.01）。②与正常组比较,模型组小鼠血清的NE、DA 含量明显升高（P < 0.05,P < 0.01）,5-HT 含量明显降低（P < 0.01）;脑垂体ACTH 及下丘脑CRH 含量明显升高（P < 0.01）;垂体中ACTH 的表达明显上 调（P < 0.01）,海马中5-HT 的表达明显下调（P < 0.01）;脑组织的KCC2 mRNA 表达明显下调（P < 0.01）, NKCC1 mRNA 表达明显上调（P < 0.01）。与模型组比较,配伍组小鼠血清的NE、DA 含量明显降低（P < 0.01）,5-HT 含量明显升高（P < 0.01）;脑垂体ACTH 及下丘脑CRH 含量明显降低（P < 0.01）;脑垂体中 ACTH 的表达明显下调（P < 0.01）,海马中5-HT 的表达明显上调（P < 0.01）;脑组织的KCC2 mRNA 表达明显 上调（P < 0.01）,NKCC1 mRNA 表达明显下调（P < 0.05）。结论酸枣仁-延胡索配伍对肝郁型失眠小鼠具有 镇静催眠作用,可能与其调控KCC2、NKCC1 基因表达,抑制HPA 轴激活,从而调节神经递质水平有关。