两种酶法测定血清游离脂肪酸试剂盒的分析性能比较

目的比较两种酶法测定血清游离脂肪酸试剂盒的分析性能。方法分别应用国产与进口两种血清游离脂肪酸检测试剂盒,通过雅培c8000全自动生化分析仪测定50份体检样本血清游离脂肪酸浓度,进行精密度、准确度、抗干扰和线性试验等分析性能的评价与比较。结果①精密度分析结果：国产试剂的批内CV%为7.6%、5.8%,批间CV%为9.6%;进口试剂的批内CV%为0.7%、2.8%,批间CV%为2.2%。②平均回收率结果：国产试剂平均回收率为100.3%,进口试剂为97.76%,两者差异无统计学意义（P〉0.05）。③线性范围分析结果：在3.11mmol/L内,国产试剂测定血清游离脂肪酸线性相关性良好;在3.23mmol/L内,进口试剂线性相关性良好,且两者差异无统计学意义（P〉0.05）。④干扰试验分析结果：在血红蛋白〈0.12mmol/L,胆红素〈0.34mmol/L,甘油三酯〈11.3mmol/L,维生素C〈1.2mmol/L条件下,两种试剂盒测定血清血清游离脂肪酸的结果之间无显著差异（P〉0.05）。⑤对临床血清游离脂肪酸测定结果分析表明,两种试剂相关性好（Y九强=0.9667X德赛＋0.0175,R2=0.9801,P〈0.05,n=50）,偏差无统计学差异（P〉0.05）。结论国产与进口试剂盒检测血清游离脂肪酸结果一致性较好,且CV%均小于10%。国产试剂精密度相对较低,线性可达3.11mmol/L,抗干扰能力较强。该结果表明两种试剂盒的分析性能无明显差异,具有较好可比性。     

乙型肝炎病毒表面抗原国家定量标准品的研制

目的 研制乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)国家定量标准品及定量线性参考品.方法 收集各地乙型肝炎患者和健康献血员血样,用不同厂家乙型肝炎、丙型肝炎病毒血清学试剂盒筛选.6个协作单位用7种试剂以世界卫生组织(WHO)HBsAg定量标准品标定1份HBsAg国家定量标准品,稀释后得到HBsAg国家定量线性参考品.结果经7种试剂共21次协作标定,得到HBsAg国家定量标准品的浓度为1226 IU/ml,各次检测结果的变异系数均小于15%.将国家定量标准品系列稀释后得到由8个不同浓度血清组成的HBsAg国家线性参考品,经检测后表明其浓度与理论浓度的差值均<15%,通过加速试验检测该参考品的稳定性效期暂定为5年.将其作为HBsAg国家线性参考品并初步限定检测结果的允许值范围.结论 标定1份HBsAg国家定量标准品并建立了由8份血清组成的HBsAg国家定量线性参考品.     

ACCESS化学发光仪残余试剂的回收价值研究

探讨ACCESS化学发光仪(以下简称发光仪)剩余试剂的回收再利用价值.收集残余试剂并按要求储存,用发光仪对回收残余试剂进行精密度、回收率、线性评价和质控血清的检测试验,并与原装试剂进行对比分析.结果表明,回收试剂的批内、批间精密度均小于10%,回收率均在90%~110%,质控血清检测结果偏倚与原装试剂无显著性差异(P＞...     

全自动荧光免疫分析仪GSP~(TM)检测新生儿血斑G6PD性能验证

目的对全自动荧光免疫分析仪GSPTM检测新生儿血斑G6PD的性能进行评估。方法参考《中华人民共和国卫生行业标准》WS/T 420-2013中临床实验室对商品定量试剂盒分析性能的验证,依据CLIA88要求,通过检测试剂盒自带标准品B/C/E三个浓度、试剂盒自带高水平质控品、低水平质控品和试剂盒自带的B-F五个浓度的标准品,分析GSPTM系统的精密度、正确度和线性范围。结果 GSPTM筛查系统检测B/C/E中G6PD批内变异系数为1.53%～1.76%,小于厂家声明的3.4%;批间变异系数为1.96%～2.15%,小于厂家声明的3.9%。GSPTM系统检测的低、高质控品浓度平均值分别为15.90U/dL和53.01U/dL,都在试剂盒声明的允许范围之内。线性标本的检测值和理论值的线性方程为y=1.0414x-1.4594,相关系数的平方R2=0.9993,符合厂家声明的线性范围(R2≥0.995)要求。结论 GSPTM检测系统参与验证的精密度、准确度及线性范围等主要性能在本实验室均达到了相关标准的要求,可用于新生儿血斑G6PD的检测。     

循环酶法测定同型半胱氨酸试剂盒评价

目的 选取北京九强、上海执诚、宁波瑞源生产的循环酶法同型半胱氨酸（Hcy）试剂盒,对其方法性能及临床实验室应用的要求进行评价.方法 据NCCLS颁布的的EP5-A、EP6-A和EP7-A评价方案对三个循环酶法Hcy测定试剂盒进行回收实验、干扰实验、线性及精密度评价.结果 九强、执诚、瑞源的循环酶法Hcy测定试剂盒高、低浓度的批内CV分别为3.2、2.4、1.2;3.7、3.8、1.8;总CV（％）分别为4.4、3.4、3.1;4.3、5.6、3.3.回收率97％ ～ 105％.相关系数分别为r=0.996、r=0.993、r=0.995.胆红素在500mg/L、抗坏血酸在500 mg/L、甘油三酯在8.88mmol/L内对九强和瑞源的试剂无明显干扰,相对偏差小于4％.胆红素在500 mg/L、抗坏血酸在500mg/L内对执诚的试剂无明显干扰,相对偏差小于4％;甘油三酯对该试剂有明显干扰,甘油三酯在8.88mmol/L时相对偏差为12.2％.结论 三种循环酶法Hcy测定试剂盒的抗干扰、线性范围及精密度等性能可满足临床检验的需要.     

国产全自动化学发光测定仪检测糖类抗原242和糖类抗原50的分析性能验证

目的在ISO15189实验室认可中对深圳新产业全自动化学发光测定仪Maglumi4000Plus检测糖类抗原242和糖类抗原50的分析性能进行验证。方法参考美国临床和实验室标准化协会(CLSI)系列文件和相关文献,结合实际工作,对深圳新产业全自动化学发光测定仪Maglumi4000Plus检测糖类抗原242和糖类抗原50的精密度、正确度、线性范围、临床可报告范围和生物参考区间进行验证。结果CA242批内精密度和批间精密度CV均小于厂家声明,CA50批内精密度和批间精密度CV均小于厂家声明,验证通过;CA242的5个不同批号的室间质控品测量值与靶值的偏倚为5.25%~11.74%,CA50的5个不同批号的室间质控品测量值与靶值的偏倚为6.53%~12.47%,均在可接受范围内;CA242浓度在1.78~195.00IU/mL范围内其测定的线性相关系数R2为0.9995,CA50浓度在7.09~498.27IU/mL范围内其测定的线性相关系数R2为0.9999;CA242的临床可报告范围上限可扩展至3120.00IU/mL,CA50的临床可报告范围上限可扩展至为7972.32IU/mL;20名健康体检者检测CA242的浓度范围为0.97~10.38IU/mL,20名健康体检者检测CA50的浓度范围为0.50~18.62IU/mL。结论深圳新产业全自动化学发光测定仪Maglumi4000Plus检测CA242和CA50的精密度、正确度、线性范围、临床可报告范围、生物参考区间均和厂家声明基本一致,能够保证检测结果的准确,满足临床检验的需要;而且国产试剂较进口试剂价格低廉,能够降低医疗成本,可以在临床实验室推广使用。     

病理水平抗凝血酶Ⅲ室内质控血浆的制备及应用评价

目的 研制病理水平的抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)室内质控品,并对其稳定性和质控效果进行评估.方法 用病理水平的AT-Ⅲ混合血浆为血浆制备来源,以“复合酶稳定剂AFP+抑肽酶+25mmol/L的pH7.4磷酸缓冲液、60g/L蔗糖、20g/L聚乙二醇2万衍生物、10g/L小牛血清清蛋白、0.5g/L叠氮钠”为保存介质制备AT-Ⅲ质控品;采用L-J质控图比较自制质控品和西门子定值质控品的质控效果;观察自制质控品在室温、4℃、-80℃冰箱保存条件下的稳定性.结果 自制病理水平AT-Ⅲ质控品定值为32.9％,与定值质控品质控效果一致,可监测到试剂、仪器、环境等因素改变引起的失控,在-80℃冰箱保存条件下可稳定5个月,复融后须在室温2h内、4℃冰箱2d内使用完成.结论 自制病理水平AT-Ⅲ质控品的稳定性和质控效果均符合室内质控品的要求,可应用于实验室的室内质控.     

尿微量白蛋白检测试剂盒性能评价

目的评价北京九强生物免疫比浊法尿微量白蛋白检测试剂盒的性能。方法评价九强生物免疫比浊法检测尿微量白蛋白的精密度、准确度、线性范围、最大稀释倍数、前带性能以及特异性。结果精密度实验显示,日内不精密度高低浓度质控的变异系数(CV)分别为0.61%和0.70%,日间精密度高低浓度质控的CV分别为1.95%和2.83%;准确度实验结果显示,九强生物与罗氏尿微量白蛋白检测试剂盒的检测结果回归方程为Y=1.0169X+5.7251,相关系数(r)为0.9987;测量线性范围与厂家提供的范围一致;最大稀释倍数最大可达40倍;检测样本浓度43000mg/L时前带样本仍在可控范围;在厂家说明书标示的干扰物浓度范围内,对检测结果没有明显影响。结论九强生物的mALB检测试剂盒精密度好、准确度高、线性范围宽、前带性能好,性能完全能满足临床的使用要求。     

全自动荧光免疫分析仪检测17-OHP性能验证及筛查切值的建立

目的对全自动荧光免疫分析仪(Genetic Screening Processor,GSP)检测干血斑17-羟孕酮(17-hydroxyprogesterone,17-OHP)的性能进行验证分析和评价,并初步建立该方法的先天性肾上腺皮质增生症(CAH)筛查的切值。方法前期确定验证方案,对试剂盒自带的B、D、E三个浓度的样本、L、H两个浓度水平的质控品以及试剂盒自带的6个浓度的线性标本进行GSP系统的精密度、正确度和线性范围的验证。同时以99.5百分位数确定17-OHP筛查的初始切值。结果 GSP检测B/D/E中17-OHP批内变异系数分别为6.06%、5.51%、3.63%,均小于厂家声明的8.7%;总变异系数分别为6.95%、5.80%、3.91%,低于厂家声明的最低总变异系数9.2%。检测试剂盒自带的L、H质控品浓度测量均值与靶值的相对偏差分别为5.48%、4.91%,均小于1/3允许总误差(TEa)。6个浓度线性样本的检测值和理论值的线性回归方程为:Y=1.0385X-0.6337,相关系数的平方(R~2)为1,线性相关性良好。样本总体99.5百分位数的17α-OHP水平为14.30nmol/L。结论 GSP检测干血斑17-OHP精密度、准确度、线性范围均达到了厂家声明的检测性能,可常规用于新生儿CAH筛查。本中心初步采用的GSP新生儿CAH筛查的切值为14.0nmol/L。     

新型基于吖啶酯平台的乙型肝炎病毒表面抗原全自动管式化学发光定量检测试剂的建立和评价

目的拟建立一种新型基于吖啶酯平台的乙型肝炎病毒表面抗原全自动管式化学发光定量检测试剂。方法基于自主研发的全自动化学发光免疫检测系统,通过抗体配对筛选,体系调整等方法建立HBsA g全自动化学发光定量检测试剂,并与罗氏试剂进行定量相关性比较,使用不同亚型标本进行评价。结果研发的HBs Ag定量检测试剂定量范围为0~250 IU/ml,与罗氏试剂检测临床标本具有良好的一致性(r2=0.9794),对国家参考品中的灵敏度参考品检测结果均符合国家标准,试剂对不同亚型的检测性能良好,在0.05~250 IU/ml范围内具有很好的线性(r=0.9990),试剂对国家参考品中的准确度参考品检测结果符合国家标准,稀释400倍检测的可报告上限为100 000 IU/ml,批内精密度均小于10%,批间精密度小于15%。结论该研发的试剂具有良好的检测性能,具有广阔的应用前景。     

脂蛋白(a)测定试剂性能评价

目的 评估Lp(a)测定试剂盒的胶乳增强免疫透射比浊法在分析性能方面的表现。方法 采用日立7180全自动生化分析仪,按照CLSI EP文件要求对Lp(a)测定试剂的正确度、精密度、线性和参考区间进行评估。结果 胶乳增强免疫透射比浊法Lp(a)测定试剂盒在正确度、精密度、线性和参考区间方面均符合性能评价标准。具体而言,Lp(a)测定试剂的批内精密度为低浓度1.40%、高浓度1.20%;批间精密度为低浓度1.90%、高浓度1.80%。线性范围良好,相关系数r=0.9999。健康人群的Lp(a)参考范围小于300mg/L。结论 胶乳增强免疫透射比浊法Lp(a)测定试剂盒在正确度、精密度、线性和参考区间等方面均达到性能评价标准,具备临床应用的可行性。     

运用行业标准对sdLDL-C试剂盒进行性能评价

目的对Beckman AU5800生化分析仪上检测小而密低密度脂蛋白胆固醇(sdLDL- C)所用试剂盒进行性能评价。方法参考卫健委发布的WS/T 492- 2016、WS/T 408- 2012及WS/T 402- 2012行业标准,选用异常和正常两个水平的质控品验证sdLDL- C试剂盒的测量精密度,选取尽量接近临床高值的样本配制成一定浓度的样本验证sdLDL- C试剂盒的线性范围,选取本院正常体检人群进行参考区间验证。结果 2个水平质控品的实验室内变异系数( CV )分别为4.84%和4.79%,符合试剂盒宣称的不精密度。对线性范围实验未发现离群点,一次多项式 Y =0.491 X -0.383为最适多项式。生物参考区间验证无离群点,实验结果显示所有数据均落在厂家提供的生物参考区间范围内。结论该sdLDL- C试剂盒检测的精密度符合厂商宣称值,sdLDL- C浓度在0.103~2.038mmol/L范围内为线性范围,厂家提供的生物参考区间可被本实验室直接引用。     

胶乳免疫比浊法tPSA、fPSA诊断试剂盒临床应用评价

目的 评估胶乳免疫比浊法总前列腺特异性抗原(total prostate specific antigen, tPSA)、游离前列腺特异性抗原(free PSA,fPSA)测定试剂盒的正确度、精密度、线性范围、抗干扰和方法一致性等性能指标,从而评价其临床应用价值。方法参照WST 420-2013《临床实验室对商品定量试剂盒分析性能的验证》、CNAS-GL037:2019《临床化学定量检验程序性能验证指南》以及NCCLS EP7-A2等文件,对北京九强金斯尔tPSA、fPSA测定试剂盒进行性能验证,并与对应罗氏电化学发光法进行方法学比对。结果 tPSA、fPSA诊断试剂盒测定其企业参考品的偏差均小于±7%;且tPSA、fPSA在原装配套质控品靶值附近的测量重复性精密度和中间精密度的变异系数(CV)均在±5%范围内;在线性范围验证试验中,tPSA、fPSA实测值与线性预期值的相对偏差均小于±10%,且线性回归分析提示其决定系数(R²)分别为0.9977、0.9994。抗干扰试验：当直接胆红素(DBIL)≤18.9mg/dL,血红蛋白(Hb)≤490mg/dL,三酰甘油...     

胶乳免疫比浊法检测CA19-9的性能验证研究

目的 对基于生化分析平台检测CA19-9活性的胶乳免疫比浊试剂盒进行检测性能的验证研究。方法 收集2022年1月至4月期间就诊于中国医学科学院肿瘤医院的肿瘤患者315例及表观健康人43例的血清样本进行性能验证试验。参考CLSI EP15-A方案，用两种水平的质控品验证待测试剂盒的精密度；参考EP6-A方案，评价待测试剂盒的线性范围；验证血清样本的稀释准确性；参考EP7-P方案，用含特定浓度干扰物(胆红素、血红蛋白、乳糜、类风湿因子)的混合血清评价试剂盒的抗干扰能力；使用表观健康人的新鲜血清样本验证待测试剂盒的生物参考区间，使用肿瘤患者的新鲜血清比较待测试剂盒与电化学发光法检测结果的相关性和偏差。结果 精密度验证显示，两种水平质控品的批内CV和批间CV(低浓度：4.08%和4.33%;高浓度：3.01%和3.55%)均小于允许不精密度(批内CV≤6.85%和批间CV≤9.14%)。在21.08～843.21U/mL的检测范围内，检测曲线呈一阶线性分布，理论值与实测值的平均百分偏倚1.57%,线性良好。本试验验证的最大稀释度为1∶64倍稀释，稀释验证样本与原倍血清的相对偏移为9.11%。4...     

罗氏Cobas e411检测血清NT-ProBNP的性能验证

目的 在开展新项目血清N末端B型利钠肽原(NT-ProBNP)前,用实验对其进行性能验证,评估其是否能满足临床使用要求.方法 根据部分EP文件采用二水平质控品,检测40例新鲜血清标本及20例健康体检者的NT-ProBNP,对检测结果的精密度、准确度,线性范围和参考区间等参数进行性能验证.结果 NT-ProBNP二水平质控品批内精密度分别为1.79、58.33,总精密度分别为1.88、81.40,均小于厂商声明的标准差;Cobas e411与罗氏Modular E170检测结果间具有可比性;NT-ProBNP为一阶线性,线性回归方程和判定系数为y=1.050X-35.174,R2=0.998,线性范围5.4 ～ 33588pg/mL;20例参考个体的检测结果均在厂商声明的参考区间内.结论 罗氏Cobas e411检测NT-ProBNP的验证指标均达到规定要求,能满足临床使用要求.     

基于qPCR的两种试剂在HIV-1病毒载量检测中的比较研究

目的比较两种实时荧光定量PCR试剂检测HIV-1病毒载量间的相关性和一致性, 以及性能参数。方法两种检测试剂各采用3个批号对系列稀释的定值质控品检测, 分析两种检测试剂的检测线性度和精密度。再用两种试剂对166例HIV抗体阳性样品和27例阴性样品分别进行检测, 比较两者的相关性和一致性。结果 TaqMan病毒载量检测试剂与系列浓度定值质控品检测结果的决定系数为R2=0.978, Xpert病毒载量检测试剂与系列浓度定值质控品检测结果的决定系数为R2=0.987;对不同浓度定值质控品检测结果的不同批号间和总变异系数均<7%。两种试剂不同批号检测定值质控品的结果差异无统计学意义。两种试剂对血浆样本检测结果显示, 对阴性样品检测的符合率为100%, 在40 cps/mL的临界值处的观察一致性为50%, 在其量化下限附近缺乏一致性, 线性范围内检测结果之间的决定系数为R2=0.946。Bland-Altman分析显示, 偏差均值为0.41 log10(IU/mL)。结论两种试剂检测性能均良好, 在HIV-1病毒载量检测中具有较好的临床等效性。     

孕酮化学发光免疫分析方法的建立

目的 建立具有较宽检测范围的孕酮(P)化学发光免疫分析方法.方法 采用竞争一步法原理建立P化学发光免疫分析检测体系,对各种影响因素如免疫试剂的稀释度、免疫试剂的稀释体系及温育时间等进行了考察和优化,最终选定的实验条件分别对该体系的最低检出限、线性、精密度、准确性、特异性进行评估,并与进口全自动化学发光试剂检测结果进行对比.结果 本系统线性范围为0.5~90 ng/mL,最低检出限为0.05ng/mL,批内批间变异变异系数均小于10%,与高浓度孕烯醇酮、雄烯二酮、雌二醇均无交叉反应,添加回收率在96.1%~106.2%.与进口全自动化学发光试剂同时测定175份样本的P浓度,二者测定结果的相关系数r为0.981.结论 成功建立了孕酮化学发光免疫分析法,该方法线性范围宽,灵敏度高,可作为进口化学发光试剂的替代试剂在临床进行推广.     

苏州地区GSP~(TM)检测17α-羟孕酮的性能验证及切值建立

目的评估全自动荧光免疫分析仪GSP~(TM)检测17α-羟孕酮(17α-OHP)的分析性能,并初步建立应用于先天性肾上腺皮质增生症(CAH)筛查的17α-OHP切值。方法通过检测试剂盒自带标准品B/D/E三个浓度、试剂盒自带高、低水平质控品,和试剂盒自带的A-E六个浓度的标准品,分析GSP~(TM)系统的精密度、正确度和线性范围。检测临床新生儿血片样本3063例,以99.5%百分位数的17α-OHP水平暂定为初始切值。结果 GSP~(TM)筛查系统检测B/D/E中17α-OHP批内变异系数为3.98%~5.97%,均小于厂家声明的8.7%;批间变异系数为4.32%~8.52%,均小于厂家声明的9.2%。GSP~(TM)系统检测的低、高质控品浓度平均值分别为20.65 nmol/L和140.67 nmol/L,都在试剂盒声明的允许范围之内。线性标本的检测值和理论值的线性方程为y=1.1196x-1.7049,相关系数的平方(R2)为0.9998。GSP~(TM)系统TSH测定浓度值与1235系统的测定值之间呈现显著的正相关,Spearman r=0.615,P0.001。GSP~(TM)筛查系统检测结果99.5百分位数的17α-OHP水平为15.50nmol/L。结论GSP~(TM)系统对17α-OHP的定量性能符合厂家声明的要求,应用于新生儿CAH筛查是可行的。本中心初步采用的GSP~(TM)筛查新生儿CAH的17α-OHP切值为15.50nmol/L。     

一种国产胃泌素释放肽前体化学发光免疫试剂的性能验证

目的 胃泌素释放肽前体(progastrin- releasing peptide,proGRP)是鉴别小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)与非小细胞肺癌(non- small cell lung cancer,NSCLC)及其他良性肺部疾病的重要标志物。长光华医研发生产了proGRP化学发光免疫分析试剂(chemiluminesent immunoassay,CLIA),厂家声明,该试剂精密性<10%,检出限为5pg/mL,回收率在±10%之间,参考区间为<65pg/mL,线性范围为15~3000pg/mL,血清与血浆相关性良好,血清稳定性可达96 h,与Roche电化学发光法proGRP试剂相关性良好。在此对该试剂进行了性能验证。方法 采取美国临床实验室标准化协会(CLSI)文件推荐的方法及美国病理家协会CAP要求,对该国产proGRP检测试剂盒及配套仪器AE- 180检测系统进行精密度、分析灵敏度、回收率、线性范围、参考区间、血清血浆一致性及血清稳定性进行性能验证,并跟罗氏e601系统平行检测199例包括健康体检样本、小细胞肺癌、非小细胞肺癌及良性肺部疾病样本,比较2种检测系统结果的一致性。结果 该国产化学发光proGRP精密性良好,批内变异系数在2.8%~3.2%,总变异系数为4.3%~5.2%;检出限为5pg/mL;回收率在90.6%~105.2%;参考区间为<65 pg/mL;线性范围为15~3000 pg/mL;血清与EDTA血浆相关性良好;血清稳定性可达96 h;与Roche电化学发光法检测结果相关系数为0.99,斜率和截距分别为0.9889和1.28 pg/mL,相关性良好。结论该国产CLIA 法检测proGRP 性能参数和厂商声明一致,其性能可以满足临床要求。     

一种过氧化物酶法sdLDL-C测定试剂的性能评价

目的 评价一种过氧化物酶法sdLDL-C测定试剂的分析性能.方法 参考CLSI EP文件要求对此过氧化物酶法sdLDL-C测定试剂的正确度、精密度、线性、回收实验以及参考区间进行评价,并与DENKA SEIKEN sdLDL-C测定试剂进行方法学比对.结果 sdLDL-C测定试剂的正确度、精密度、线性和回收率均达到性能评价标准,其中批内精密度为低浓度3.80％、高浓度2.25％;批间精密度为低浓度3.01％、高浓度2.89％.实测线性范围为0.071～2.533 mmol/L.平均回收率为93.51％.150例表观健康受试者的参考范围为0.14～0.58 mmol/L.与DENKA SEIKEN sdLDL-C测定试剂的检测值拟合方程为Y=0.9666X-0.0031,决定系数R2=0.9991.结论 sdLDL-C测定试剂的正确度、精密度、线性、回收率均达到性能评价标准,在临床应用中与DENKA SEIKEN试剂相关性良好,具有临床适用性.