促甲状腺素吖啶酯化学发光免疫分析方法的建立

目的 建立一种定量检测人血清促甲状腺素(TSH)的方法.方法 根据双抗体夹心法实验原理,分别用吖啶酯和生物素标记两株不同的单克隆抗体,链霉亲和素包被微粒,通过链霉亲和素-生物素系统分离固相和液相完成检测.结果 本方法的最低检测限为0.01 μIU/mL,线性范围0.3～60μIU/mL,批内变异为1.9％ ～2.3％,总变异为6.4％ ～8.6％,与ROCHE公司的促甲状腺素检测试剂盒(电化学发光法)比对,相关系数r=0.9935.结果 本方法的各项指标均能满足临床检测的要求,可以临床推广应用.     

平足蛋白吖啶酯化学发光免疫分析方法的建立及在乳腺癌检测中的临床应用

目的 建立一种以活化吖啶酯标记抗人平足蛋白抗体为标记物检测人血清中平足蛋白(PDPN)的磁微粒化学发光免疫检测方法并进行在乳腺癌相关疾病方面的临床应用验证。方法 以包被链酶亲和素磁微粒-活化生物素标记抗人平足蛋白抗体为固相分离载体，生物素标记一株鼠抗人平足蛋白单克隆抗体，吖啶酯标记另一株鼠抗人平足蛋白单克隆抗体，建立人血清样本中PDPN定量免疫分析方法。结果 在线性范围1.00～800.00ng/mL内，相关系数r为0.9990,检出限为0.52ng/mL;批内重复性不超过5.0%,批间差不超过10.0%;正常参考区间为小于4.50ng/mL;测定乳腺癌临床样本，特异性为88%和灵敏度为87%。结论 建立了定量检测人血清中PDPN水平的化学发光免疫分析法，对乳腺癌的发生发展起了辅助诊断作用。     

ELISA差减分析——一种简便实用的免疫逃逸变异HBsAg检测新方法

目的:立足现有实验技术与试剂,建立一项血清免疫逃逸变异HBsAg检测的新方法。方法:以市售ELISA试剂筛选其检测信号在灰区范围的HBV感染者;采用2种不同免疫逃逸变异HBsAg检测能力的ELISA试剂对选留血清进行检测,以"ELISA差减分析"方式确认免疫逃逸变异HBsAg阳性者;以中和实验及雅培化学发光试剂验证检测结果的特异性;并对部分免疫逃逸变异HBsAg阳性者以PCR及直接测序做HBV DNA分析。结果:自10231例受检者中筛选HBsAgELISA检测信号灰区标本244例;复核检测显示G6ELISA、市售ELISA两者对野生HBsAg检测敏感性分别为0.0625ng/ml,与0.125ng/ml;检测阳性率分别为16.80%(G6ELISA)及5.73%(市售ELISA)。ELISA差减分析确定免疫逃逸变异HBsAg阳性者27例,阳性率为11.07%。对部分免疫逃逸变异HBsAg阳性血清做进一步考核,抗HBs中和强度为(84.07%±6.32%),中和率100%(13/13);雅培化学发光试剂复核阳性率为94.4%(17/18,阳性者中包括两份单项G6-ELISA检测最低阳性信号标本);HBV DNA阳性率36.9%(7/19),略低于同期HBsAg低信号阳性者(6/14,42.9%,P0.05);直接测序发现其中"a"区变异3例,分别为P142L、T126A及M133T/K160T;S蛋白亲水区非"a"决定簇变异1例,变异类型为L109Q。结论:ELISA差减分析法能有效地用于部分免疫逃逸变异HBsAg的临床诊断,其诊断能力视所依托试剂免疫逃逸变异检测能力不同而有显著差别。     

高灵敏电化学发光法特异性测定人血清抗甲状腺球蛋白抗体

目的 通过竞争法一步法原理,建立一种检测人血清抗甲状腺球蛋白抗体(anti-TgAb)的电化学发光免疫分析(ELICA)方法.方法 将样本、三联吡啶钌标记抗体和生物素标记甲状腺结合球蛋白(thyroglobulin,Tg)抗原三者共同孵育形成抗体-抗原复合体,再加入链霉亲和素包被的磁微粒与该复合物共同孵育形成钌标记抗体-生物素抗原-链霉亲和素磁颗粒复合物,通过磁场固定洗涤去除游离物质;然后加入三丙胺得到相对光子强度(relative light units,RLU).检测该方法的灵敏度、线性范围、精密度、准确度及稳定性,并与罗氏公司的anti-TgAb检测试剂盒进行对比.结果 anti-TgAb的最低检测限为5 IU/mL,线性范围为10～1000 IU/mL,准确度为0.900～1.100,批内变异和批间变异均小于5％.与罗氏公司anti-TgAb检测试剂盒的相关系数r=0.996(n=50),稳定性测试(37℃,8d)中,各项性能指标变异程度均符合标准[线性相关系数r=0.9998,准确度低值0.94,准确度高值0.93,批内精密度(CV)高值3.77％,低值4.34％].结论 该方法各项性能指标(灵敏度、精密度、准确度、稳定性等)均能达到临床检测要求,可供临床检测使用.     

CEA电化学发光免疫分析法的建立

目的建立人癌胚抗原（CEA）的电化学发光免疫分析法（ECLIA）。方法生物素标记的CEA McAb、钌复合物标记配对的CEA McAb、链霉亲和素包被的磁性微粒组成CEA ECLIA试剂,用ECLIA仪检测CEA并做方法学评价。用本法与进口的同类ECLIA试剂对119例结直肠癌、150例肺癌、45例胃癌、32例胰腺癌和34例肝细胞癌患者的血清CEA检测结果进行分析。调查218名志愿者血清CEA正常参考值。结果本法检测CEA的批内CV为1.6%～7.1%,批间CV为2.3%～11.7%,灵敏度为0.2 ng/mL。与CA19-9和AFP无交叉反应。自建ECLIA检测CEA浓度范围为0.2～1000.0ng/mL,正常参考值低于5.6ng/mL。结论自建CEA ECLIA与进口试剂比较（r=0.9641,P〈0.05）,正常参考范围接近进口同类方法。具备产业化的潜能。     

癌胚抗原光激化学发光免疫分析法的建立

目的:利用光激化学发光免疫分析技术(Al-phaLISA)建立人血清癌胚抗原(CEA)的快速检测试剂。方法:1株CEA单克隆抗体(mAb)包被受体微球,另1株(mAb)用生物素标记,与链霉亲和素的供体微球共同组成检测试剂,优化反应体系并对试剂的各项性能指标进行评价。结果:自制CEA试剂分析灵敏度为0.11 ng/mL,线性测量范围为0.11～500 ng/mL,分析内和分析间的精密度分别为3.3%～6.8%、5.5%～8.1%,与AFP、CA12-5、CA19-9和人血清白蛋白均无交叉反应,100份临床血清样本用本试剂与罗氏化学发光试剂检测,其相关系数为0.976。结论:自制CEA Al-phaLISA试剂的各项性能指标均能达到临床检测要求,有望替代国外同类试剂应用于临床血清样本CEA浓度的测定。     

总PSA光激化学发光免疫分析法的建立

为了采用光激化学发光免疫分析技术建立快速定量检测总前列腺特异性抗原(tPSA)的方法。用两株配对的tPSA单克隆抗体,一株tPSA单克隆抗体包被受体微球,另一株tPSA单克隆抗体用生物素标记,与链霉亲合素的供体微球共同组成检测试剂。结果:自制tPSA试剂分析灵敏度为0.006ng/ml,线性测量范围为0.006～150ng/ml,分析内和分析间的精密度分别为3.90%～6.67%、4.71%～6.90%,与AFP、CA125、CA19-9和人白蛋白无明显交叉反应,136份临床血清样本用本试剂与罗氏化学发光试剂检测,其相关系数为0.979。提示:自制tPSA光激化学发光免疫分析试剂各项指标均能达到临床要求,有望替代国外同类产品。     

血液筛查实验室HBsAg检测的室间质量评价

目的评价我国采供血机构ELISA检测乙型肝炎表面抗原(hepatitis B surface antigen, HBsAg)的检测能力以及所使用的不同试剂盒的检测性能。方法统计分析2018—2021年国家卫生健康委临床检验中心对全国采供血机构实验室开展的HBsAg室间质量评价数据, 评估参评实验室检测能力, 分析和比较各检测试剂的检测精密度以及检测灵敏度等。结果 2018—2021年参与室间质评的单位数量有稳步的增加, 4种国产试剂和2种进口试剂的使用单位数在每年度均超过10家, 两种进口试剂检测adw血清型样本时, 批内CV<7%的实验室比例相对较高(>75%), 而三种国产试剂的批内CV<7%的实验室比例均在50%左右, 说明国产试剂的批内精密度有待提高。3种国产试剂检测0.2 IU/mL的adw2型样本时, S/CO值≥2的实验室为小于50%, 表明这些试剂检测HBsAg弱阳性标本时存在漏检风险;当检测血清型为ayw1时, 两种进口试剂均100%实验室检测正确, 但B试剂和C试剂正确率相对较低(84.4%和60.9%)。结论我国采供血机构实验室ELISA检测HB...     

人促黄体生成素光激化学发光免疫分析法的建立

目的采用光激化学发光免疫分析技术建立快速定量检测人促黄体生成素（hLH）的方法。方法用2株配对的hLH单克隆抗体,1株hLH单克隆抗体包被受体微球,另1株hLH单克隆抗体先用生物素标记,再与链霉亲合素的供体微球共同组成人促黄体生成素光激化学发光免疫分析试剂,进而优化反应体系并对试剂的各项性能指标进行评价。结果自制hLH试剂分析灵敏度为0.164 U/L,线性测量范围为0.164～135 U/L,分析内和分析间的精密度分别为4.3%～6.1%和7.4%～8.1%,均低于10%,与hTSH、hFSH和hCG无明显交叉反应,158份临床血清样本用本试剂与罗氏电化学发光检测试剂盒平行检测,对所测数值采用配对t检验分析,结果显示两种方法检测结果差异无统计学意义（t=-1.468,P=0.07）。结论自制hLH光激化学发光免疫分析试剂各项指标均能达到临床要求,有望替代国外同类产品。     

乙肝病毒表面抗体TRFIA方法的建立及其应用

建立乙型肝炎病毒表面抗体(抗-HBs)的时间分辨荧光免疫分析法(TRFIA).检测体系由纯化的HBsAg包被的微孔板、Eu3 标记的HBsAg、抗-HBs系列标准品和增强液组成,采用双抗原夹心法定量检测人血清或血浆抗HBs.测定药检所2、5、10 mIU/mL SAb血清盘均可准确检出,阴性血清(20/20)符合率为100%,CV为2.5%.测定范围为5～2000 mIU/mL,正常参考值小于10 mIU/mL.用本法与固相RIA、ELISA和ECLIA对1189份临床血样进行考核,并与参比试剂盒临床符合率一致,具有同等的临床诊断价值.     

肝纤四项联合其他肝功能指标检测对肝脏疾病的临床价值分析

目的通过对5种不同种类的肝脏疾病和对照组进行血清透明质酸(HA)、层黏连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PC-Ⅲ)和Ⅳ型胶原(CⅣ)水平检测,探讨四项指标在肝脏疾病监测中的临床应用价值。方法对慢性重型乙型病毒肝炎患者82例,自身免疫性肝炎患者69例,药物性肝炎患者35例,其他慢性肝炎患者38例,肝功能衰竭患者39例,健康正常对照组61例进行肝纤四项指标的检测,比较各组肝纤四项的水平。同时测定肝病常用指标:胆汁酸、总胆红素(TB)、直接胆红素(DB)、谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、γ-谷氨酰转肽酶(γ- GT)、白蛋白(ALB)、凝血酶原时间(PT)、纤维蛋白原(Fg)水平。分析肝纤四项与各项指标水平的相关性。结果慢性重型乙型病毒肝炎组、自身免疫性肝炎组、肝功能衰竭组四项指标水平均明显高于对照组,药物性肝炎组HA和PC-Ⅲ水平高于对照组,慢性重型乙型病毒肝炎组和肝功能衰竭组各项指标水平无差异,慢性重型乙型病毒肝炎组中肝纤四项指标水平与其他常用肝脏检测指标水平的相关性最为显著,肝功能衰竭组肝纤四项指标水平较为独立。结论肝纤四项指标与其他指标的联合监测能更好的反映发展性肝脏疾病发生发展的活跃情况,及对疾病治疗效果的全面评估。     

一种国产胃泌素释放肽前体化学发光免疫试剂的性能验证

目的 胃泌素释放肽前体(progastrin- releasing peptide,proGRP)是鉴别小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)与非小细胞肺癌(non- small cell lung cancer,NSCLC)及其他良性肺部疾病的重要标志物。长光华医研发生产了proGRP化学发光免疫分析试剂(chemiluminesent immunoassay,CLIA),厂家声明,该试剂精密性<10%,检出限为5pg/mL,回收率在±10%之间,参考区间为<65pg/mL,线性范围为15~3000pg/mL,血清与血浆相关性良好,血清稳定性可达96 h,与Roche电化学发光法proGRP试剂相关性良好。在此对该试剂进行了性能验证。方法 采取美国临床实验室标准化协会(CLSI)文件推荐的方法及美国病理家协会CAP要求,对该国产proGRP检测试剂盒及配套仪器AE- 180检测系统进行精密度、分析灵敏度、回收率、线性范围、参考区间、血清血浆一致性及血清稳定性进行性能验证,并跟罗氏e601系统平行检测199例包括健康体检样本、小细胞肺癌、非小细胞肺癌及良性肺部疾病样本,比较2种检测系统结果的一致性。结果 该国产化学发光proGRP精密性良好,批内变异系数在2.8%~3.2%,总变异系数为4.3%~5.2%;检出限为5pg/mL;回收率在90.6%~105.2%;参考区间为<65 pg/mL;线性范围为15~3000 pg/mL;血清与EDTA血浆相关性良好;血清稳定性可达96 h;与Roche电化学发光法检测结果相关系数为0.99,斜率和截距分别为0.9889和1.28 pg/mL,相关性良好。结论该国产CLIA 法检测proGRP 性能参数和厂商声明一致,其性能可以满足临床要求。     

一种具监测功能的高精度微量移液器的设计

目的针对全自动临床检验仪器传统移液方式的精度以及可靠性限制问题,设计一款带有液面监测功能的高精度微量移液器。方法基于气动置换技术,以STM32微处理器为主控芯片,通过实时检测移液器内部压力变化,实现了液面探测、吸样异常监测等功能。采用位置-速度双闭环PID算法实现对直线步进电机的精确定位,提高样本吸取的准确度。最后,通过移液过程监测实验和吸样精度验证实验,验证了设计的微量移液器的液面探测功能、吸样异常识别功能及吸样精度。结果该微量移液器移液精度较高,移液误差较小,重复性较好,并能实现移液的全过程监测。结论本文设计的微量移液器满足JJG646—2006国家标准设计规范,适用于全自动临床医疗检验仪器。     

基于全卷积神经网络的直肠癌肿瘤磁共振影像自动分割方法

目的直肠肿瘤(rectum cancer,RC)的图像精确分割是直肠癌诊断和治疗的基础和关键。目前,直肠肿瘤的分割通常是由放射科医生逐切片进行,这种方式主观性强,工作量大。为此,本文提出了一种直肠肿瘤磁共振影像全自动分割网络,在有效减少放射科医生负担的同时提高了肿瘤分割结果的可重复性。方法首先采用一个预训练的ResNet50提取特征,并在网络隐藏层添加3个边输出模块,实现图像数据的多尺度特征提取,最后融合3个边输出模块获得最终的分割结果。将所提网络架构的分割结果与基于U-net网络架构的分割结果进行比较,并分析不同损失函数和感兴趣区域(region of interest,ROI)尺寸对所提网络分割性能的影响。结果本研究使用中山大学附属第六医院512例患者的影像数据对模型进行训练及测试,其中随机选取的461例患者的T2加权磁共振影像用于网络训练,剩下51例患者的T2加权磁共振影像用于网络测试。结果表明,所提网络分割结果的平均Dice相似性系数(Dice similarity coefficient,DSC)、平均敏感度(sensitivity)、平均特异度(specificity)及平均豪斯多夫距离(Hausdorff distance,HD)分别达到了83.61%、89.10%、96.36%和8.49,均优于基于U-net的分割方法。对于包含了肿瘤组织的ROI,尺寸越小,分割效果越好。对于给定尺寸的ROI,几种损失函数并无太大差异。结论该算法能够准确地勾画肿瘤边界,有助于提升医生工作效率。     

结直肠癌检测的生物标志物研究进展

结直肠癌在我国肿瘤中发病率和死亡率位居前五,早期结直肠癌不易被发现,因此影响了结直肠癌的诊断和预后。相对于临床检查,生物标志物的检验更为方便直接,也利于结直肠癌的早期发现,但由于现有标志物灵敏度、特异性较低,急需开发出更多的结直肠癌预后或预测的生物标志物。本文介绍了目前在蛋白质组学、基因组学等多个方面对结直肠癌检测的生物标志物进行的研究,有利于新的潜在检验生物标志物的发现以及结直肠癌治疗能力的提高。     

基于Gabor小波和深度置信网络的肺结节良恶性分类研究

目的从频率域角度研究孤立性肺结节纹理特征,探讨深度置信网络对其良恶性的分类效果,达到辅助医生提高早期肺癌诊断准确率的目的。方法首先,利用Gabor小波对1012例患者的1072张孤立性肺结节CT图像提取纹理特征,用受限玻尔兹曼机对特征向量进行编码,学习数据本质特征;然后,用得到的纹理特征向量集训练深度置信网络,构建分类模型;最后,通过K折交叉验证法从准确性、ROC曲线下面积(AUC值)以及时间成本方面对本文提出的研究方法进行评估。结果经Gabor小波变换并构建DBN分类模型的准确度为83.75%,测试集的AUC值为0.78。与传统支持向量机分类模型相比,所提方法的准确度上升了0.56%,时间成本缩减了一半。结论利用Gabor小波从频率域提取纹理特征,结合深度置信网络构建分类模型能够取得较好的分类效果,一定程度上能够为临床诊断肺结节的良恶性提供参考。     

农民工的主观幸福感及与大五人格中外向性和宜人性的关系

目的:考察农民工的主观幸福感(SWB)与大五人格中外向性和宜人性两人格特质的关系。方法:采用方便取样,选取苏州地区630名农民工,用自编农民工主观幸福感问卷(SWBQ-MW)和大五人格量表(BFM)进行调查。结果:受试SWBQ-MW平均分高于中值3分。高外向性(n=171)和高宜人性特质农民工(n=170)的SWBQ-MW总分及各维度分高于低外向性(n=170)和低宜人特质农民工(n=172)(均P<0.001)。外向性和宜人性得分与SWBQ-M W总分呈正相关(r=0.39,0.23;P<0.01),且都对SWB有预测作用(β=0.35,0.12)。宜人性与性别、收入的交互作用显著(P<0.01或0.001)。高宜人性人群中,不同性别、月收入农民工的SWBQ-MW总分差异无统计学意义;低宜人性人群中,女性的SWBQ-MW总分高于男性(P<0.001),农民工SWBQ-MW总分随收入升高反而降低(P<0.01)。结论:本研究显示农民工的主观幸福感处于中等水平之上,主观幸福感与外向性和宜人性有一定程度的关联,提示培养并发展积极的人格品质可有效地提升农民工的主观幸福感。     

Research Output in Immunology Journals from Chinese Authors: 10-year Survey of Literature

Over the past decade, immunological research in China has developed rapidly. Currently, little is known about China's contribution to the immunology field. The present study was designed to study research output in immunology journals during 1999–2008 in the three different regions of China—Mainland China (ML), Hong Kong (HK) and Taiwan (TW). We also examined the research output from other top-ranking countries—the United States (USA), Japan, Germany, United Kingdom (UK) and France during 1999–2008. Articles published in 114 journals related to immunology were retrieved from the PubMed database. The number and percentage of articles in the world's output showed significantly positive trends during 1999–2008 in ML and TW, but the trend for HK was not significant. China contributed 2.7% of the total 114 journals, 0.3% of the top 10% journals with the impact factor (IF) scores. The USA contributed 32.1% of the total world's output, 47.5% of the top 10% journals with the IF scores and ranked first. Our analysis describes the research output from the three regions of China and the positive trend in China during 1999–2008. Also, by contrast with other top-ranking countries, our results imply China falls behind the ranks in conducting immunology research.     

全自动透析液集中供应系统的改进及应用

目的降低血液透析机桶装液耗材成本,提高工作效率,保证透析液浓度要求。方法研制出了安全、稳定、高效、节能的DCS-200型全自动透析液集中供应系统,此系统能自动配液、自动消毒、自动清洗、自动排放和定时循环。结果本系统为临床节省了很大的成本,提高了工作效率和效益,并且提供了稳定无污染的透析原液,保证临床治疗需要。结论全自动透析液集中供应系统有非常高的临床应用价值,比传统的A/B桶装液和分散开放供液有非常显著的优势。