人血清中氟卡胺HPLC立体选择测定

本文报道了人血清中氟卡胺的HPLC立体测定方法。氟卡胺标准贮备液及内标溶液(2,5-二乙氧基-N-(2-哌啶基甲基)苯甲酰胺盐酸盐)分别由10mg外消旋醋酸盐溶于1000ml去离子水中(10μg/ml),工作标准液则将贮备液稀释10倍而得。在试管中放入1.0 ml血浆,然后加入50μl内标溶液(50 ng),1 ml Tris盐酸(2.0 M,pH 8.5)缓冲液和过量(3 g)氯化钠。NaCl极度溶解后,用5 ml氯丁烷:2-丙醇(95∶5v/v)旋涡提取30秒钟。在室温以每分钟3000     

用改良的甘氨酸沉淀技术制备高纯度和高稳定性的因子Ⅷ浓制剂

作者用改良的甘氨酸沉淀法制备因子Ⅷ浓制剂,适于大规模生产,且能获得高纯度和高稳定性的制剂。取新鲜冰冻血浆水浴融化(不超过1℃),0℃7000g离心。冷沉淀粉碎后用pH7.00.02M Tris-HC1缓冲液按30ml/1原料血浆的比例洗涤,离心或过滤后,冷沉淀重悬于相同缓冲液(24℃)。加热至30℃时,在溶液中搅拌加入2.8M甘氨酸缓冲液至最终浓度为2.0M。该溶液再通过含有玻璃珠层的布氏漏斗进行过滤,滤液中加入固体氯化钠(10g/100ml),30分钟后,经离心或过滤获得因子Ⅷ沉淀。沉淀置-80℃储存2个月无活性损失。混合数批血浆所得沉淀并溶于最终缓冲液     

高热处理的因子Ⅷ浓缩剂的研制和小规模生产

作者介绍一种生产少量因子Ⅷ(FⅧ)的改良方法.取16单位由全血浆分离的冷沉淀物或8单位单采血浆分离的冷沉淀物,用生理盐水加至245g,加入含19.5%甘氨酸、6%NaCl的溶液(pH6.0)中,室温放置20分钟后     

直接紫外分光光度法测定药物中VC含量

本文采用一种VC经Cu~(++)催化氧化作为背景校正的直接、简便的紫外分光光度法测定药物中的VC含量。并对VC或复合维生素片剂中存在的一般化学物质对本法的影响作评价。本法测定VC含量的结果与用碘量法所得结果完全一致。试剂:VC贮备溶液(1000μg/ml),实验所用的标准溶液均用该溶液经蒸馏水适当稀释新鲜配制;Cu~(++)溶液(5μg/ml,pH 6)的制备,由1000μg/ml Cu~(++)溶液5.0ml加入1MNaAc溶液200ml和1M HAc7ml,用     

流感病毒纯糖蛋白的提取及其抗原性和免疫原性的研究

本文介绍用新合成的无离子去污剂提取流感病毒表面蛋白并研究其免疫原性。将7株流感病毒悬液经10%溶液处理30分钟,然后100,000g离心40分钟,含糖蛋白上清置0.5M pH7.2含0.45%NaCl的磷酸盐缓冲液中4℃透析24小时,除去。     

作为抗肿瘤制剂的变性DNA的制备

<正> 根据日本国公开特许公报83年55499号报道;从小牛胸腺或从微生物Clostridium Saccharoperbutylacetonictum获得的DNA,用一碱性溶液处理后就可得到一个抗肿瘤的变性DNA制品。若取C. saccharoperbutylacetonicum的DNA500mg用3N KOH(20ml),在室温条件下,处理2.0小时,然后把混合液的酸碱度调至pH6.0～7.0,用乙醇处理后析出沉淀物,     

1-羟基苯并三唑柱前衍生高效液相色谱法测定发酵液中的天然青霉素

本文叙述用1-羟基苯并三唑-氯化汞作柱前衍生的HPLC方法以测定霉菌发酵液中的天然青霉素。为了得到稳定的衍生物,含氨基青霉素有必要用苯甲酸酐先行酰化。缓冲液和衍生试剂配制 1-羟基苯并三唑6.76 g溶于10 ml水中,加入氯化汞溶液2.5 ml,然后用4M氢氧化钠溶液调节pH至9.2。最后体积为25 ml,1-羟基苯并三唑浓度为2M。苯甲酸酐0.45 g溶解于10 ml乙腈中得到0.2M溶液。     

人造红细胞-吡啶醛化血红蛋白的制备

人造的氧运载体(人造红细胞)可分为能溶解氧的化合物氟化碳和天然血红蛋白溶液或其衍生物两类。利用血红蛋白的人造红细胞氧结合力高,可长期保存。因此作者等研制了氧运载力更高的吡啶醛化的血红蛋白溶液(PLP-Hb)。按Benesch等的方法由新鲜红细胞或过期红细胞制备血红蛋白游离基质(SFH)溶液,系将红细胞用生理盐水反复洗涤3次,用2倍量水溶血,加5％氯化钠制成等张液。再经2800G离心30分钟,取上清液用微孔滤膜(0.45μm)过滤,然后用葡萄糖(1g/L)和维生素C溶液反复透析,制得SFH溶液。     

一种检测狂犬病抗体的狂犬病凝集试验

目前用于检测狂犬病抗体水平的几种方法都费时、费钱,本文介绍一种快速、价廉的狂犬病凝集试验(RAT),其原理是狂犬病抗体能特异性地凝集狂犬病病毒致敏的胶乳珠。病毒包被胶乳珠(Estapor K109,直经为0.8μm的白色或红色珠)的方法是:用0.05M碳酸盐-碳酸氢盐缓冲液稀释纯化的灭活病毒,至蛋白浓度为1000μg/ml,pH9.6。用包被碳酸盐缓冲液彻底清洗1ml10%的胶乳珠,然后经2500g离心30分钟,沉淀悬浮于3ml碳酸     

高效液相色谱法测定动物试样中氟桂嗪(Flunarizine)

本文报道了用HPLC测定动物试样中的氟桂嗪。方法:取试样(血浆、血清、10%脑组织浆)1ml于10ml离心管中,加0.2M醋酸盐缓冲溶液(pH 9.0)3ml,加内标溶液(脑益嗪10ng/μCH_3oH)20μl,充分混匀后,加0.1N NaOH 90μl调节溶液的pH为9.0～9.1,再加正庚烷4ml混匀,然后进行离心分     

高效液相色谱法分析结晶胰岛素

本文介绍高效液相色谱法分析结晶胰岛素作为制备注射剂的质量评价。 Waters色谱仪,附有紫外检测器(λ=220nm)。200×4毫米柱,填充5μm的Nucleosil C_(18)吸附剂。流动相为含有0.01M的1-丁基磺酸钠和0.1M的硫酸钠溶液的乙腈和pH3.0、0.005M的酒石酸盐缓冲液(29:71)的混合液。流速每分钟1cm~3。对照物用单组分胰岛素。分析时间为20分钟。图示由大型有角家畜和猪胃下腺制得的结晶胰岛素分离色谱(略)。两者结构上有所区别。比如由大型有角家畜胃腺得到的胰岛素,在肽链     

在乙醇分级分离血浆过程中Ⅲ型人类嗜T淋巴细胞病毒的灭活和消除

本文报告了在Cohn乙醇分级分离血浆工艺中,不同浓度的乙醇对在不同血浆组份中的Ⅲ型人类嗜T淋巴细胞病毒(HTLV-Ⅲ)的灭活能力,和病毒在分离过程中的消除和灭活情况。无冷沉淀血浆用10～20%乙醇处理30分钟后,感染滴度可降低10～10~2倍,用25～40%乙醇处理30分钟后,滴度降至最初滴度的1×10~(-4)倍以下。重复试验结果相似。在上清组分Ⅰ和组分Ⅲ中病毒灭活比在无冷沉淀血浆中慢。在另一试验中,未经处理血浆经25%乙醇处理30分钟,HTLV-Ⅲ的灭活速率为10~5体外感染单位(IVIU)/ml以上。     

国家食品药品监督管理局国家药品标准(修订)颁布件——冠心宁注射液

以上二味,加水煎煮三次,第一次2小时,第二、三次各1.5小时,合并煎液,滤过,滤液浓缩至相对密度为1.16~1.26(70℃)的清膏,加乙醇至含醇量为75%,冷藏,滤过,滤液浓缩至相对密度为1.20~1.25(70℃)的清膏,加乙醇至含醇量为85%,冷藏,滤过,滤液用40%氢氧化钠溶液调节pH值至约8.0~8.5,冷藏,滤过,滤液回收乙醇至无醇味,用注射用水稀释至约1000 mL,冷藏,滤过,滤液浓缩至相对密度为1.10~1.15(70℃)的清膏,用盐酸溶液调节pH值至2~3,冷藏,滤过,滤液以10%氢氧化钠溶液调节pH值至6.8~7.2,加热煮沸30分钟,加适量活性炭,稍冷,滤过,冷藏,加入注射用水适量和亚硫酸氢钠0.5 g,滤过,滤液调节pH值至6.8~7.3,滤液加注射用水至1000 mL,滤过,灌封,灭菌,即得。     

放射受体分析法测定大鼠组织中氟哌啶醇的含量

用H~3-螺哌啶酮与小牛尾核细胞受体结合的放射受体分析法(RRA)测定大鼠脑和血清中氟哌啶醇的含量。大鼠口服或腹腔注射氟哌啶醇一定时间后,断头,立即取脑,分离并取所需脑区,保存在0.05M冰冷的Tris-HCl(pH7.7)溶液中,以10份冰冷的重蒸馏水制成匀浆液,贮于-20°低温冰箱中备用。血液收集后,于4°离心(10,000×g)10分钟,血浆或血清贮于-20°低温冰箱中。受体制备:冰冻新鲜小牛尾核加10份0.05MTris-HCl(pH7.7)溶液匀浆后,离心(48,000×g)15分钟,上清液弃去,沉淀物以1份Tris-HCl液再悬浮和     

以醋酸铜为络合剂用分光光度法测定制剂中苄青霉素的含量

本法以醋酸铜为发色试剂,与苄青霉素在pH6～6.8时形成2∶1的绿色络合物,在25分钟内稳定,于650nm处有最大吸收,摩尔吸收系数0.24×10~3 mol~(-1)cm~(-1),反应物在20～1000μgml~(-1)范围内符合比尔定律。 1.试剂:均为水溶液标准苄青霉素溶液10mg/ml,醋酸铜试液10mg/ml;醋酸钠溶液0.2M。 2.测定方法:用吸管取10mg/ml的苄青霉素溶液(0.1～5.0ml1)至50ml容量     

对百日咳毒素B低聚物的免疫应答

百日咳毒素在百日咳的发病机理及免疫中均起重要作用。它由具有酶活性的A亚单位和无毒的B低聚物组成。本文证实B低聚物能诱导小鼠产生对百日咳天然毒素的免疫应答,并对百日咳毒素的实验性攻击具有防御作用。作者把百日咳毒素溶于含3M尿素、1%3-[(3-胆胺丙基)-二甲氨基]-1-丙烷磺酸盐和100μM三磷酸腺苷(ATP)的10mM磷酸钠缓冲液(pH7.0)中放置15分钟后混合于羧甲基琼脂糖凝胶中,室温放置15分钟后装于层析柱,用磷酸钠缓冲液洗下不与羧甲基结合的A亚单位,再以6倍体积的缓冲液洗涤,     

HPLC法测定达沙替尼含量及有关物质

目的 高效液相色谱法测定达沙替尼原料药的含量及其有关物质。方法 采用YMC Pack Pro C18色谱柱,以流动相A〔50mM醋酸铵溶液pH 5.25∶乙腈∶甲醇(90∶5∶5)〕和流动相B〔50mM醋酸铵溶液pH 5.25∶乙腈∶甲醇(10∶85∶5)〕进行梯度洗脱,流速为1.2mL.min-1,检测波长为320nm,柱温为35℃,进样体积10uL。结果 在选定的色谱条件下,样品和各中间体分离度良好;在5～50μg.mL-1范围内线性关系良好,最低检测线为0.015μg.mL-1。结论 所用方法灵敏、准确、可靠。     

抗JEV质粒DNA免疫:膜锚定和分泌性包膜蛋白的免疫原性

乙型脑炎病毒 ( JEV)包膜 ( E)蛋白能刺激机体产生抗病毒中和抗体。作者用聚合酶链反应法扩增 JEV GP78株的前膜 ( pr M)和 E蛋白区基因并克隆于 p CEP4真核表达载体 ,得到 p MEa(能合成 pr M和膜锚定 E蛋白 ,Ea)和 p MEs(能合成 pr M和分泌性蛋白 ,Es)两种质粒 DNA。为研究其免疫原性并与市售JEV灭活疫苗作比较 ,作者对 BALB/c小鼠进行了免疫和加强免疫 ( 50 μg质粒 DNA或空白载体肌注、1μg质粒 DNA基因枪皮肤注射、1 /1 0人用剂量的 JEV灭活疫苗接种 )。免疫后 7周用致死量 JEV( 2 0 L D50 )进行脑内攻击。攻击前用 …     

黄芩酶解及黄芩苷元乙醇提取工艺研究

目的：优选黄芩药材的酶解工艺及黄芩苷元的乙醇提取工艺。方法：以黄芩苷元的重量为指标。采用正交实验对影响酶解的温度、醋酸溶液的体积、时间和溶液pH值进行考察;采用正交实验对影响提取的提取时间、乙醇浓度和乙醇用量进行考察。结果：最佳酶解工艺为用1．2倍的醋酸溶液（pH为4）浸润12小时。浸润温度为40℃。最佳提取工艺为用6倍量的乙醇回流提取3次,第一次乙醇浓度为90％,第二、三次乙醇浓度为80％,每次2小时。结论：该研究确定的黄芩苷元的酶解乙醇提取工艺合理、可行。     

原位兔眼膜对替利洛尔的吸收

将成形的柱状细胞粘附于兔角膜、巩膜或睑结膜上,将不同浓度(50～100mmol·L-1)和pH6.4～10.4的替利洛尔(tilisolol)溶液100μL加到眼膜上,每间隔10min取0.5μL试样,与0.1mol·L-1的HCl100μL和含300μg·mL-1邻乙氧基苯甲酰胺的甲醇100μL混合,于12000g下离心15min,取50μL上清液加入HPLC系统。将替利洛尔溶液(100mmol·L-1)100μL加至眼膜细胞上,30min后去除保留于细胞的药液,眼膜以盐水冲洗,用抗凝注射器在不同的时间间隔(10～360min)采取兔耳静脉血样,于12000g下离心5min;血浆样700μL与2mol·L-1的高氯酸300μL混合,于12000g下…