莲心碱对自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞增殖及对PDGF—B,bFGF,c …

用［＾３Ｈ］胸腺嘧啶核苷（［＾３Ｈ］ＴｄＲ）掺入法、电镜、免疫组化和原位杂交方法，在自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）观察了莲心碱（Ｌｉｌｅｎ）对血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）增殖的作用及对生长因子ＰＤＧＦ－Ｂ、ｂＦＧＦ及其相关癌基因ｃ－ｓｉｓ和ｃ－ｍｙｃ表达的影响。结果发现Ｌｉｅｎ在降低ＳＨＲ血压同时，能减少ＶＳＭＣ的线粒体，粗面内质网和［＾３Ｈ］ＴｄＲ掺入量，并能逆转ＶＳＭＣ增殖对ＰＤＧＦ０Ｂ、ｂＦＧＦ抗     

瘦素对自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响

目的 探讨leptin对自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞的增殖影响，并研究leptin b型受体在VSMC中的表达。方法 本文主要采用培养的自发性高血压大鼠（SHR）血管平滑肌细胞（VSMC），研究Leptin受体b(OB-Rb)的mRNA的表达，以及对平滑肌细胞增殖的影响。结果 OB－Rb的mRNA仅在SHR大鼠的平滑肌细胞表达，而没有在正常对照大鼠（WKY）的平滑肌细胞中表达。Leptin仅仅可以刺激SHR大鼠VSMC的DNA合成率的增加而对WKY大鼠的VSMC则无作用。同样，Leptin对VSMC细胞增殖的作用，也仅仅在SHR大鼠可以发现，而WKY大鼠则没有。结论 上述研究的结果显示；高血压时，Leptin是一种对血管平滑肌细胞的增殖因子，也许在高血压的发生，发展过程中起重要的作用。     

瘦素对自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响

目的探讨leptin对自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞的增殖影响,并研究leptin b型受体在VSMC中的表达.方法本文主要采用培养的自发性高血压大鼠(SHR)血管平滑肌细胞(VSMC),研究Leptin受体b(OB-Rb)的mRNA的表达,以及对平滑肌细胞增殖的影响.结果 OB-Rb的mRNA仅在SHR大鼠的平滑肌细胞表达,而没有在正常对照大鼠(WKY)的平滑肌细胞中表达.Leptin仅仅可以刺激SHR大鼠VSMC的DNA合成率的增加,而对WKY大鼠的VSMC则无作用.同样,Leptin对VSMC细胞增殖的作用,也仅仅在SHR大鼠可以发现,而WKY大鼠则没有.结论上述研究的结果显示;高血压时,Leptin是一种对血管平滑肌细胞的增殖因子,也许在高血压的发生、发展过程中起重要的作用.     

切除血小板源生长因子α受体基因功能结构域对自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞生长的影响

目的 探讨切除血小板源生长因子（PDGF）-α受体基因功能结构域对自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞（SHR-VSMC）增殖和肥大的影响。方法 采用免疫印迹（Western blot),^3H-TdR及^3H-Leu掺入等方法，观察在SHR及WKY大鼠血管平滑肌细胞中，PDGF-AA和PDGF受体表达的差异性；应用基因重组技术切除PDGF-α受体基因功能结构域后，对PDGF-AA刺激SHR-VSMC增殖和肥大的影响。结果 SHR-VSMC中PDGF-AA和PDGF-α受体蛋白表达较WKY-VSMC明显增加，而PDGF-β受体蛋白表达在SHR-VSMC与WKY-VSMC无明显差异；在不同浓度刺激下，增殖细胞核抗原（PCNA）及^3H-TdR及^3H-Leu掺入率在SHR-VSMC明显增强且呈剂量依赖关系；切除PDGF-α受体基因功能结构域后，PCDN及^3H-TdR及^3H-Leu掺入率显著降低。结论 SHR-VSMC中PDGF-A链及其α受体的自泌性增高，可能是导致SHR-VSMC异常生长，从而触发血管反应性和血管构型变化的重要原因之一，切除PDGF-α受体基因功能结构域将有效防止高血压平滑肌细胞的增殖和肥大。     

酪氨酸蛋白激酶抑制剂对自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞增殖肥大的影响

为明确自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞（SHR－VSMC）增殖与血小板源生长因子－AA（PDGF－AA），PDGF-α受体表达的关系及酪氨酸蛋白激酶在其中的作用，我们在培养的血管平滑肌细胞中，采用免疫印迹（western blot)3H-TdR及3H－Leu掺入等方法，观察在不同来源大鼠（SHR／Wistar)血管平滑肌细胞中，PDGF－AA，PDGF－α受体及PDGF－β受体表达的差异性；在PDGF－AA刺激下细胞的增殖，肥大反应及酪氨酸蛋白激酶抑制剂(genistein)对其的影响，结果表明，在SHR－VSM中PDGF－AA，PDGF－α受体蛋白表达明显高于Wistar-VSMC，而DGF－β受体蛋白表达在SHR－VSMC与Wistar-VSMC无明显差异，在不同浓度PDGF－AA（2、5、10、20)ng/ml刺激下，SHR－VSMC中PCNA表达呈剂量依赖性增高P＜0．01，加入酪氨酸激酶抑制剂，SHR－VSMC中PCNA表达呈剂量依赖性显著减少P＜0．01，在不同浓度PDGF－AA（2、5、10、20）ng/ml刺激下，SHR－VSMC中3H－Leu,3H-TdR掺入率呈剂量依赖性增强；加入酪氨酸激酶抑制剂SHR－VSMC中3H－Leu,3H-TdR掺入率显著减少，PDGF与其受体结合后，可激活受体细胞膜内的酪氨酸蛋白激酶，导致蛋白分子磷酸化的级联反应，启动MAPK，PKC等信号转导通路，调节特定基因的表达或通过改变细胞内相应蛋白质的功能状态导致细胞的增殖肥大，本实验应用酪氨酸激酶抑制剂genistein阻断酪氨酸激酶活性，证实阻断PDGF－AA所介导的自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞增殖肥大，关键是阻断酪氨酸蛋白激酶的活性，酪氨酸蛋白激酶介导的信号转导在其中发挥重要作用。β     

胰岛素对自发型高血压大鼠血管平滑肌细胞生长的影响

血管平滑肌细胞 (VSMC)异常增生和肥大 ,是高血压血管病理改变的标志。由此引起的血管壁增厚 ,管腔狭窄 ,既可能是机体对动脉血压升高的一种代偿 ,也可能和高血压的发生、发展有重要的因果关系。流行病学调查的资料显示高胰岛素血症为引起原发性高血压的独立高危因素。但是 ,胰岛素与 VSMC增殖间的确切关系 ,目前尚不清楚。本研究对比胰素对自发性高血压大鼠 (SHR)和同一株系的正常血压的WKY大鼠 VSMC生长影响 ,旨在探讨胰岛素在调节高血压血管平滑肌细胞生长中的作用。1　材料和方法1.2　实验动物　 SHR和 WKY大白鼠 (购自上海第…     

增殖抑制基因在原发性高血压患者血管平滑肌细胞增殖中的作用

目的探讨增殖抑制基因（HSG）在原发性高血压患者血管平滑肌细胞增殖中的作用。方法选取2006年4月至9月在北京安贞医院行冠状动脉旁路移植术的患者54例,分为高血压冠状动脉旁路移植组（n=28）和正常血压冠状动脉旁路移植组（n=26）。术前留取两组患者静脉血,测定血液生化指标,用放射免疫测定法测定内皮素（ET）和肾素-血管紧张素-醛固酮系统等血管活性多肽;用Trizol一步法提取白细胞、组织和培养血管平滑肌细胞（VSMC）的总RNA,行半定量RT-PCR扩增反应,观察两组患者HSG的表达情况。结果两组指标的血压和体质指数（BMI）的差异具有统计学意义（P〈0．01）。BMI与血糖、BMI与收缩压、BMI与舒张压、血糖与甘油三酯、收缩压与舒张压之间存在着明显的正相关（P〈0．05）。五种血管活性物质均存在高血压搭桥组患者高于正常血压搭桥组患者的趋势,差异没有统计学意义。白细胞、血管组织和VSMC中HSG的表达在高血压搭桥组较正常血压搭桥组低（P〈0．05）。相关性分析表明：血管HSG表达与BMI、收缩压、舒张压之间存在着明显的负相关（P〈0．05）。结论在高血压冠心病患者和正常血压冠心病患者之间,无论在白细胞、VSMC还是在血管组织,都存在HSG表达差别,高血压组的HSG表达水平均低于正常血压组。在血管组织中,HSG的表达与BMI、收缩压和舒张压呈负相关。说明HSG是一种新型的抑制血管平滑肌细胞增殖的基因,其在血管平滑肌中的表达与血压呈负相关。     

莲心碱对血管平滑肌细胞增殖及热应激蛋白70和P53表达的影响

采用培养的内皮素所致血管平滑肌细胞增殖模型。用氚-胸腺嘧啶核苷掺入法、流式细胞术、Westernblot及Northernblot分析方法，观察了莲心减对血管平滑肌细胞增殖的作用及对热应激蛋白70及其mRNA和抑癌基因P53表达的影响。结果发现，遂心碱能逆转内皮素所致的~3H－TdR掺入量增多，阻止血管平滑肌细胞由Go／G1期进入DNA合成期（S期）和有丝分裂期（G2／M期）．并能使效应激蛋白70及mRNA表达减弱，P53抑癌基因及mRNA表达增强。以上结果提示，莲心碱能抑制血管平滑肌细胞增殖，这可能与热应激蛋白70及P53的调控有关。     

桑仙降压颗粒对自发性高血压大鼠平滑肌细胞 Ki-67、bFGF的影响

目的　观察桑仙降压颗粒对自发性高血压大鼠平滑肌细胞核增殖抗厚 (Ki-67)、碱性成纤维因子 (bFGF)的影响 ,探讨降压机制。方法　将 18只SHR随机分为 3组 ,即空白对照组、桑仙降压颗粒组、牛黄降压丸组 ,以Wister大鼠为正常对照 ,正常对照组灌蒸馏水 14d后观察血压及主动脉平滑肌细胞中的Ki-67、bFGF的表达。结果　桑仙降压颗粒组血压明显改善 ,平滑肌细胞无明显增殖 ,Ki-67含量明显减少 ,平滑肌细胞中bFGF阳性表达显著减少。结论　桑仙降压颗粒通过减少bFGF分泌 ,减轻血管平滑肌细胞 (VSMC)的增殖、Ki-67的表达 ,起到控制血压的作用。     

复方丹参滴丸对自发性高血压大鼠血管重构的影响

目的 探讨复方丹参滴丸(DSP)对自发性高血压大鼠(SHR)血管重构的影响.方法 将32只8周龄雄性SHR随机分为4组,DSP小剂量组、DSP大剂量组、福辛普利组、SHRc组.另选8周龄雄性Wistar大鼠为正常对照组.5组分别用灌胃法给药或给蒸馏水8周,测定大鼠尾动脉收缩压、胸主动脉与肠系膜动脉中层壁厚(M)、管腔内径(L)及二者的比值(M/L).结果 与Wistar组比,SHRc组主动脉中层壁[Wistar组:(85±10) μm比SHRc组(120±7) μm]与肠系膜动脉中层壁[Wistar组:(61±8) μm比SHR模型组(84±8) μm]显著增厚(P<0.05),中层壁厚与管腔内径比值(M /L)也显著增大(P<0.05);与SHRc组比,DSP大剂量组[肠系膜动脉M:(65±5) μm;主动脉M:(94±7) μm]、小剂量组[肠系膜动脉M:(70±3) μm;主动脉M:(97±9) μm]与福辛普利组[肠系膜动脉M:(64±7) μm;主动脉M:(93±6) μm]SHR主动脉与肠系膜动脉的M及M /L均明显减轻(P<0.05),而各治疗组间无统计学意义(P>0.05).结论 复方丹参滴丸可抑制SHR的血管壁重构.     

氟伐他汀对高血压血管平滑肌细胞增殖的影响

目的：探讨氟伐他汀对自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞增殖的抑制作用。方法：培养自发性高血压大鼠主动脉血管平滑肌细胞,不同浓度的氟伐他汀和甲羟戊干预后,进行细胞计数和＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入率的测定。结果：（１）氟伐他汀呈浓度依赖性（１０＾－５￣１０＾－７ｍｏｌ）抑制血管平滑肌细胞数目的增加和＾３Ｈ－ＴｄＲ的掺入率;（２）１０＾－３ｍｏｌ的甲羟戊酸几科完全逆转了氟伐他汀对血管平滑肌细胞增殖的抑制作用。结论：     

尿酸对大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响

目的:观察尿酸（uricacid,UA）对动脉粥样硬化关键环节———血管平滑肌细胞增殖的影响。方法:以体外培养的大鼠血管平滑肌细胞为实验对象,分为对照组、尿酸组和洛沙坦+尿酸组,每组处理后用MTT法分析细胞增殖活力,流式细胞仪（flowcytometry,FCM）检测细胞增殖周期。结果:尿酸作用后培养细胞的MTT值明显高于对照组（40mg/LUA:0.65±0.06;对照:0.37±0.07,P<0.01）,并且存在剂量依赖效应;尿酸所致上述效应还存在时间依赖性;洛沙坦能部分阻断尿酸刺激血管平滑肌细胞增殖作用。流式细胞分析显示尿酸作用使血管平滑肌细胞G1期细胞比例减少,S期细胞比例增加。结论:尿酸能够促进血管平滑肌细胞增殖,存在剂量及时间依赖效应;该作用可能部分通过血管紧张素Ⅱ的受体介导。     

Increased expression of osteoprotegerin in vascular smooth muscle cells from spontaneously hypertensive rats

Osteoprotegerin (OPG) is a secreted protein of the tumor necrosis factor receptor family,whichregulates bone mass by inhibiting osteoclast differentiation and activation.Although OPG is expressed ubiquitouslyand abundantly in many tissues and cell types including vascular cells,the role of OPG in other tissues is unknown.Our previous studies demonstrated that OPG was highly expressed in vascular smooth muscle cells (VSMC) andupregulated during vascular lesion formation.Methods and Results We documented,by Northern blot analysis,that the expression of OPG was more prevalent in the aorta and cultured VSMC from spontaneously hypertensive rats(SHR) compared to Wistar-Kyoto rats (WKY).In addition,we found that the expression of Angiotensin Ⅱ (Ang Ⅱ)type Ⅰ receptor (AT1R) in SHR VSMC was at significantly increased levels than in WKY VSMC.Furthermore,AngⅡ potently induced the expression of OPG in VSMC in a time- and dose-dependent manner through the AT1Rsignaling pathway.Conclusions OPG expression was substantially greater in SHR VSMC,suggesting that OPGmay be an important determinant of vascular remodeling in SHR.(J Ceriatr Cardiol 2004;1:49-54.)     

超声辐照载紫杉醇微泡对大鼠血管平滑肌细胞凋亡的影响

目的 探讨超声辐照载紫杉醇微泡对大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)凋亡的影响及其作用机制.方法 将体外培养的大鼠胸主动脉VSMCs用血小板衍生生长因子-BB刺激后分组如下:对照组(A组)、超声辐照+微泡组(B组)、超声辐照+载紫杉醇微泡组(C组)、单纯载紫杉醇微泡组(D组)和紫杉醇组(E组).采用频率1MHz、声强0.3W/cm2的连续波超声辐照VSMCs 120s,用流式细胞仪、Annexin V/PI染色和免疫细胞化学技术检测各组细胞周期、细胞凋亡以及凋亡相关蛋白表达的变化.结果 与A组比较,各组S期细胞比例均显著降低(P＜0.01),B组G0/G1期细胞比例显著增高(P＜0.01),D组和E组G2/M细胞比例显著增高(P＜0.01),C组G0/G1期细胞比例和G2/M细胞比例均显著增高(P＜0.01).与A组比较,B组和C组VSMCs凋亡率显著增高(P＜0.01),Bax蛋白表达显著上调、而Bcl-2蛋白表达则显著降低(P＜0.01).结论 超声辐照载紫杉醇微泡可诱导VSMCs凋亡,其机制可能是微泡介导的超声空化效应,致Bax蛋白表达上调及Bcl-2蛋白表达下调.     

大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞的原代培养和鉴定

目的探讨大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞的原代培养方法,了解生长特性,为血管增生性疾病的治疗研究提供试验材料。方法采用组织贴块法培养大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞,用倒置相差显微镜观察其生长情况,用免疫组化染色做鉴定,台盼蓝染色进行活力检测。结果85%的组织块接种存活,原代培养后2周左右即可传代,至少可以传8代以上,并且细胞形态、生长特点不发生明显的改变,6代的血管平滑肌细胞纯度达97%以上。台盼蓝染色约有94%以上的细胞为活细胞。镜下培养的血管平滑肌细胞呈典型的"谷峰状"生长,免疫组化染色显示胞浆内α平滑肌肌动蛋白阳性表达。结论正确地利用组织贴块法可以简单、经济、高效地培养出血管平滑肌细胞,为血管增生性疾病的治疗研究提供了理想的细胞模型。     

Enhanced growth rate of cultured smooth muscle cells from spontaneously hypertensive rats

Summary Smooth muscle cells were isolated and cultured from the aortic media of age-matched, stroke-prone and stroke-resistant spontaneously hypertensive rats (SHRSP, SHRSR: SHRs) and Wistar-Kyoto rats (WKY), and the growth rate of cells from the three strains was compared. Under electron microscopical observation the cells were identified as modified (or synthetic-type) smooth muscle cells. Cells occurring at low densities showed the same morphology for both SHRs and WKY, but cells occurring at higher densities were observed to be smaller in SHRs than in WKY. An analysis of the growth curves of cells showed a significantly enhanced replication rate in cells from SHRs compared with those from WKY, especially in the early passages. In later passages (repeated until the 9th passage), however, this distinction was not clear. These growth characteristics were also confirmed in cells from both 12- and 24-week-old, age-matched SHRs and WKY. We could not find any difference between the growth characteristics of cells from SHRSP and SHRSR. It is possible to hypothesize from these findings that the abnormality relating to hypertension (hypertension being a common characteristic of SHRSR and SHRSP) is found in the smooth muscle cells, and is reflected as an enhanced growth rate when they are exposed to mitogenic stimuli, such as in atherosclerosis.     

卡托普利对血管平滑肌细胞增殖和PDGF—B、bFGF及相关癌基因的影响

采用内皮素建立培养的血管平滑肌细胞增殖模型。用氚-胸腺嘧啶核苷（［3H］－TdR）参入法，流式细胞术，免疫细胞化学及NorthemBlot杂交方法，观察卡托普利（Cap）对VSMC增殖的作用及对生长因子PDGF－B，bFGF及其相关癌基因c－sis，c－myc表达的影响。结果发现：Cap能逆转内皮素所致的［3H］－TdR参入量增多，阻止血管平滑肌细胞由静止期（G0／G1期）进入DNA合成期（S期）和有丝分裂（G2／M期），并能逆转内皮素引起的PDGF—B，bFGF抗原，c－sis，c－mycmRNA表达增强。提示：aop有抑制血管平滑肌细胞增殖作用，与生长因子及癌基因调控的分子生物学机制有关。     

Insulin induces PKC-dependent proliferation of mesenteric vascular smooth muscle cells from hypertensive patients

Background and objectives Proliferation of human vascular smooth muscle cells (VSMCs) induced by hyperinsulinemia is a very common clinical pathology. Extensive research has focused on PKC (Protein kinase C)-MAPK (mitogen-activated protein kinase) intracellular signal transduction and the phenotypic modulation accompanied by reorganization of intracellular F-actins in VSMCs. Methods DNA synthesis, signaling of ERK1/2 MAPKs, and changes in a-smooth muscle (SM) actin and F-actin were studied in hypertensive and normotensive human arterial VSMCs exposed to insulin and PMA with and without the PKC inhibitor, GF109203X. Results Differences among cell types in MAPK signaling, a-SM actin, and F-actin isoforms in VSMCs harvested from the arteries of patients with essential hypertension (EH) and normotension (NT) were identified in response to insulin treatment. Proliferation and activation of MAPK were more pronounced in EH VSMCs than in NEH VSMCs. Insulin exposure decreased expression of a-SM actin and was accompanied by rearrangement of intracellular F-actins in VSMCs, especially in the EH group. These effects were reversed by treatment with the PKC inhibitor. Conclusions Human mesenteric VSMCs of EH and NT patients differed in proliferation, MAPK signaling, and degree of changes in a-SM actin and F-actin isoforms immediately following insulin exposure in vitro.     

血管平滑肌细胞表型的成骨转换与血管钙化

血管钙化是血管壁中钙盐沉积的过程,导致血管硬化和失去弹性。它通常发生在中老年人,尤其是患有动脉粥样硬化、高血压、糖尿病和慢性肾脏疾病等疾病患者。血管钙化是一个主动的过程,其中平滑肌细胞的成骨转换是重要事件之一。这些细胞在钙化过程中释放钙离子,导致钙盐的沉积,形成钙化斑块。血管钙化受多种因素调节,包括高磷、高钙水平及氧化应激、机械应力等。此外,中医药研究在减轻血管钙化方面显示出潜力,例如灵芝孢子粉和其衍生物,三七、黄芩素、根皮素、雷公藤甲素等。这些研究为进一步理解和干预血管钙化提供了重要的证据,并揭示了一些潜在的抑制因子,可以作为未来治疗血管钙化的研究方向。