韶关地区无偿献血者Rh血型系统部分抗原的分布

目的掌握韶关地区人群Rh血型系统各种分型的分布规律，为献血者招募、科学合理库存血液及建立和完善本地区临床输血基础资料提供理论依据。方法采用u型96孔微量板对献血者血样进行Rh（D）检测，用试管法确认进行Rh（D）阴性和C、c、E、e的分型检测。结果Rh（D）阴性率为0．16％，D基因频率为0．96，d基因频率为0．04；Rh（D）阴性献血者的表型分布规律为ccdee〉Ccdee〉CCdee，ode的基因频率最高；Rh（D）阳性献血者的表型分布规律为CCDee〉CcDEe〉CCDEe〉CcDee，组合基因频率分布规律为Cde〉cDE〉CDE〉oDe。结论本地区Rh（D）阴性率低，Rh（D）阳性献血者的表型分布有地域性特点，应开展冰冻红细胞的制备，注意加强Rh（D）阴性献血者的档案管理和Rh（D）阴性血液的保存，特别要加强D、E同时为阴性和D、c皆为阴性表型血液的贮备工作。     

柱凝集血型检测技术的临床应用

自1988年柱凝集法血型检测技术问世以来,以其操作简单,灵敏度高、特异性强,受到输血界同仁重视。我们使用柱凝集技术进行血型检测3600例,其中博唯优玻璃珠柱400例,达亚美凝胶3200例。准确率在98.6％以上,改变了过去的传统玻片法,为临床安全输血奠定了基础。1 材料与方法1.1 试剂 达亚美血型卡(凝胶法),博唯优血型卡(玻璃珠     

Rh血型D抗原弱表现型基因分型和序列分析

目的 探讨Ｒｈ血型Ｄ抗原弱表现型Ｄ抗原数目和（或）Ｄ抗原表位数减少形成的分子基础。方法 常规ＰＣＲ技术检测３名Ｄ抗原弱表现型非血缘关系个体Ｄ基因的第４内含子,多重ＰＣＲ技术分析第３、第６和第９外显子,并分别对３名个体的Ｄ基因部分序列进行分析。结果 ３名Ｄ抗原弱表现型个体Ｄ基因第４内含子,第３、第６和第９外显子检测结果与正常Ｄ基因完全一致,部分序列分析未发现基因突变和Ｄ／ＣＥ基因交换。结论 Ｄ抗原数     

新乡地区无偿献血者ABO和Rh血型抗原分布调查

目的调查新乡地区汉族无偿献血者红细胞血型系统ABO和Rh抗原的分布情况,保证临床合理计划供血。方法用血型群体遗传学研究方法,随机选择新乡市地区无血缘关系的汉族无偿献血者12000名,进行ABO、Rh血型系统的表现型及基因频率分布调查分析。结果ABO血型表现型频率顺序B>O>A>AB,基因频率q>r>p;12000名无偿献血者检出RhD阴性40人,占0.33%,且Rh(-)以Ccdee和ccdee为多见。Rh血型表现型以CCDee和CcDEe多见,基因组合体频率CDe最高。结论新乡地区汉族人群ABO和Rh等主要血型系统抗原分布与北方汉族人群的分布基本相符,对建立稀有血型档案,保证临床合理计划用血及应急供血,具有重要的临床意义。     

柱凝集技术检查孕妇产前ABO血型不合

目的 :观察柱凝集技术检查孕妇产前 ABO血型不合的灵敏度和特异性。方法 :对 61 6例 O型血型的孕妇先后采用柱凝集技术和传统试管法测定孕妇血液的 Ig G抗体效价。结果 :采用柱凝集技术 ,61 6例孕妇中 2 36例 ( 38% ) Ig G抗 A( B)效价 >1 2 8,1 2 8例 ( 2 0 % )≥ 2 5 6。传统试管法仅 65例 ( 1 1 % )抗体效价≥ 1 2 8,1 9例 ( 3% )≥ 2 5 6。结论 :柱凝集技术检测孕妇产前 ABO血型不合的灵敏度和特异性优于传统试管法。     

汉族18678人Rh_0(D)型抗原和510名献血员Rh分型的调查

我们调查了芜湖地区汉族 18678人Ｒｈ0 (Ｄ)抗原 ,并对其中的 510名献血员进行了Ｒｈ血型分型 ,现报道如下。1　材料和方法1 1　对象及标本采集　献血员 1684 3人 ;本站职工53人 ,产前检查者和其它受检人员 1782人 ,标本为3 8%枸椽酸钠抗凝血。1 2　抗Ｄ、抗Ｅ、抗Ｃ和抗ｃ血清均购于上海血液中心。1 3　Ｒｈ血型检测采用菠萝酶直接法[1] 。凡初测为Ｒｈ0 (Ｄ)阴性者 ,再用三份不同批号的抗Ｄ血清以间接抗人球蛋白试验复检 ,每次试验设阴阳性对照。1 4　Ｒｈ基因组合频率按有关公式计算[2 ] 。用Ｘ2检验判断观察值和期望值的差异。凡每种血…     

产前Rh血型分型133例

对 118 4例孕妇产前检查了Ｒｈ(Ｄ)血型 ,共发现Ｒｈ(Ｄ)阴性者 5例 ,占 0 42 % ,表明Ｄ抗原在汉族人群中阴性率低 ,本院发现Ｒｈ系新生儿溶血病 ,有抗 Ｄ引起的 ,也有抗 Ｅ ,抗 ｃ引起的 ,说明不仅是Ｒｈ(Ｄ)阴性孕妇 ,Ｒｈ(Ｄ)阳性孕妇也会产生Ｒｈ系新生儿溶血病。为了分析Ｒｈ系抗体的产生原因 ,提高对Ｒｈ系新生儿溶血病的诊断 ,作者对 133例孕妇产前检测了Ｒｈ系所有抗原 ,并探讨了Ｒｈ血型分型的临床意义 ,现报道如下。1　试剂与方法1 1　试剂　抗 Ｄ、抗 Ｃ、抗 ｃ、抗 Ｅ、抗 ｅ均为盐水抗血清 ,由美国Ｇｒａｍｍａ生物制品公…     

Rh血型在临床中的应用

目的 探讨Rh血型在临床中的应用价值.方法 用抗D血清检查有无D抗原,因Rh血型系统的抗体多由获得性免疫产生,血清中很少有天然抗体,故不需要做反定型.结果 在抽查的1 000份血型病例中,Rh阴性的比例占0.3%,Rh阳性的比例占99.7%.结论 通过对Rh血型的讨论与分析,能够更好地指导临床合理用血,在输血治疗和新生...     

Rh血型系统抗原检测在临床精准输血中的应用

目的 分析Rh血型系统抗原检测在临床精准输血中的应用价值.方法 选择需要进行输血的患者160例为研究对象,均已明确为ABO血型或Rh血型,采用随机数表法分为对照组与观察组,各80例.对照组输入RhC、E不同表型红细胞悬液2 U,观察组输入RhC、E相同表型红细胞悬液2 U.统计Rh血型系统抗原分布情况和Rh血型系统抗体...     

Ortho BioVue^TM柱凝集系统在红细胞血型分析中的应用

目的探讨柱凝集技术(CAT)在红细胞血型(ABO／RH)分类型中的准确性。方法采用Ortho BioVue^TM柱凝集系统对正常献血者(n=500)及受血者(n=500)进行AB0／RH血型鉴定与RH分型鉴定，试剂和样本均为定量加入使结果趋于标准化。结果献血者(n=500)与已知的血型完全相符，受血者中发现1例正反定型不符合，后经上海血液中心血型参比室鉴定为A2B型，另筛查出RH阴性2例，经过分型鉴定为Rh-1-2-3,4,5，Rh-1-2-3,4,5。准确率为100％。结论该方法试剂和样本均为定量加入，灵敏度高，重复性好，结果易观察，消除了显微镜下的人为因素，可保存备查。对于特殊血型患者可建立血型档案库，保证其及时准确用血。     

非何杰金淋巴瘤患者基因克隆性标记的研究

对非何杰金淋巴瘤（ＮＨＬ）２５例、良性反应性淋巴结细胞增生１０例，在单克隆抗体免疫学分型的基础上，用体外基因扩增聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测了免疫球蛋白重链（ＩｇＨ）和Ｔ细胞受体（ＴＣＲ）基因重排。结果表明，ＩｇＨ和ＴＣＲγ基因重排分析有助于从分子水平上确定肿瘤细胞的来源及其分化阶段，是恶性淋巴瘤可靠的分子克隆性标记，对鉴别诊断良、恶性淋巴结肿大疾病有重要的临床应用价值。     

短暂性脑缺血发作病人认知功能障碍及负性情绪研究

目的 探讨短暂性脑缺血发作(TIA)病人的认知功能状态及负性情绪.方法 对56例TIA病人和60名健康对照者进行认知功能及负性情绪的测评.认知功能的测评采用中文版蒙特利尔认知评估量表(MoCA)和简易精神状态量表(MMSE),负性情绪的测评采用抑郁自评量表(SDS)和焦虑自评量表(SAS).结果 TIA组的MoCA、M...     

高血压大鼠SLC7A8基因腺病毒载体的构建及鉴定

目的 构建携带SLC7A8基因的重组腺病毒载体,为进一步研究SLC7A8基因的功能作准备.方法 含SLC7A8目的 基因编码序列(coding domain sequence,CDS)的互补DNA(complementary DNA,cDNA)的pGEM-T Easy载体测序分析正确后,再将其连接入重组腺病毒载体.以双酶切和测序鉴定正确后,将pAdxsi-GFP-SLC7A8重组腺病毒载体转染大鼠肾小管上皮细胞(rat renal tubular epithelial cells-52e,NRK-52E),流式细胞仪测定转染效率,反转录聚合酶链反应法检测转染后SLC7A8 mRNA的表达.结果 pAdxsi- GFP-SLC7A8重组腺病毒载体构建成功,流式细胞仪测定重组腺病毒载体转染NRK-52E效率为94.1%,且证实转染后肾小管上皮细胞的SLC7A8 mRNA表达.结论 本研究成功构建pAdxsi-GFP-SLC7A8重组腺病毒载体,并成功转染NRK-52E细胞,这为我们进一步探索SLC7A8基因的生物学功能奠定了基础.     

两种尿糖检测方法假阳性和假阴性的实验研究

通过７６４份随机尿液葡萄糖氧化酶法（简称酶法）和班氏法尿米晰对比及结合有关试验，对其假阳性、假阴性的原因及排除方法进行了探讨，认为测定尿糖时尿中的过氧化物可导致酶法假阳性和班氏法假阴性，而尿液中的某些还原物质可导致假阴性和班氏法假阳性，用煮沸尿液测定尿糖是排除两法假阳性和假阴性简单易行的方法。     

脑血管病病人ACE基因缺失多态性的初步研究

①目的 探讨血管紧张素转换酶（ＡＣＥ）基因缺失多态性与中国人脑梗死、高血压脑出血的关系。②方法 应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法,检测６０例正常人。２１例原发性高血压无心脑血管并发症病人,５８例脑梗死病人和３１例高血压脑出血病人的ＡＣＥ基因型。③结果 ＡＣＥ基因缺失多态性与原发性高血压无相关关系（Ｘ＾２＝０．４６７１,Ｐ〉０．０５）。高血压脑出血组ＤＤ基因型频率为２６％,显著高于正常对照组的１０％（     

线粒体脑肌病临床病理及部分基因突变研究

目的 探讨线粒体脑肌病患者骨骼肌组织病理特点及线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)在3243、8344和8993位点的点突变,为疾病的诊断和鉴别诊断提供依据.方法 取8例患者及10例对照者骨骼肌活检标本速冻后切片,常规和酶组化学染色,光镜下观察其病理特点,并提取骨骼肌中的总DNA ,以相应的引物行PCR扩增,分别应用BglⅠ、ApaI 、SmaⅠ和MspⅠ酶酶切后,琼脂糖电泳判定,检测mtDNA中3243、8344和8993位点是否存在基因突变.结果 8例患者的肌肉病理均存在不整边红纤维;其中2例患者肌肉中mtDNA存在A3243G点突变,1例存在A8344G点突变,8例患者均未发现T8993G和T8993C突变.结论 肌肉组织病理学方法和分子生物学研究可以为线粒体脑肌病的诊断和鉴别诊断提供依据.     

uPA基因真核表达载体的构建和鉴定

目的:构建人尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)基因真核表达载体,并转染人肝癌细胞,为进一步体外研究uPA在肝癌发生发展中的作用奠定基础.方法:从肝癌组织中提取RNA,通过RT-PCR的方式,获得基因uPA的全长cDNA,并克隆于含有HA2-标签(tag)的真核表达载体pCMV上,酶切鉴定,质粒测序鉴定,用pCMV-uPA-HA2进行细胞瞬时转染及WesternBlotting鉴定.结果:经过测序证实得到获得包含uPA基因的pCMV-HA2真核表达载体,瞬时转染细胞有蛋白表达.结论:克隆了人肝癌的uPA基因,成功构建真核表达载体.     

Merlin蛋白基因NF2突变与青海回族胃癌易感特点研究

目的研究merlin蛋白基因NF2在青海回族胃癌组织中突变特点。方法通过PCR和DNA测序技术检测merlin蛋白基因NF2外显子的突变情况。结果随机选取5个青海回族胃癌组织中NF2基因外显子,结果检测到第3和第17外显子突变率较高,分别为11.6%、34.8%,突变位点分别位于NF2基因的705、1259处。结论 merlin蛋白基因NF2外显子的突变,可能是导致其失去抑癌功能的原因之一,并与青海回族胃癌易感性有关。     

PML重组腺病毒载体的构建与鉴定

目的：构建携带PML目的基因的重组腺病毒载体（Ad-pml）。方法：应用基因重组技术将PSG-CMV和PSG5-PML分别用EcoRI和BglII双酶切,构建PSG-PML载体。将质粒PSG-PML与含有5型腺病毒右臂的质粒pPE3共转染至293细胞,产生含PML基因的重组腺病毒（Ad-pml）,并经PCR及DNA测序鉴定。结果：经PCR反应可扩增出1767bp大小的片段,测序结果检测Ad-pml序列正确,通过免疫荧光反应证明病毒包装成功并且具有感染力。结论：成功构建了重组腺病毒载体（Ad-pml）,为研究肿瘤基因治疗提供了基础。     

应用肿瘤坏死因子基因转染肿瘤浸润淋巴细胞进行肝癌基因治疗的实验研究

目的：探讨转基因肿瘤浸润淋巴细胞(tumor infiltrating lymphocytem,TIL)治疗肝癌的价值。方法：用转基因技术将肿瘤坏死因子(TNF—α)基因导人人肝癌肿瘤浸润淋巴细胞，构建转基因TIL。用肝癌细胞株BEL7404注射裸鼠建立裸鼠肝癌移植瘤，用转基因TIL分原位及异位进行治疗，并用TIL作对照。结果：转基因TIL表现出较高的抑制肿瘤作用，对肿瘤的生成率、生长速度的抑制作用比未转基因TIL强。原位注射转基因TIL的抗肿瘤作用较强，优于异位注射治疗。结论：转基因TIL对裸鼠移植性肝癌的实验治疗具有较好作用，本研究为人肝癌的基因治疗研究提供依据。