131 I标记人源抗HBs Fab瘤内注射治疗荷人肝癌裸鼠的实验研究

目的　探讨13 1I标记人源抗乙肝表面抗原单克隆抗体Fab片段 (抗HBsFab)瘤内给药治疗荷人肝癌裸鼠移植瘤的合理性。方法　荷瘤裸鼠分为 5组 ,分别经瘤内注射13 1I 抗HBsFab、13 1I 无关Fab、13 1I、PBS及腹腔注射13 1I 抗HBsFab。 5d后每组各取 2只作组织分布测定 ,其余观察 3周 ,计算各组肿瘤生长抑制率。结果　瘤内注射13 1I 抗HBsFab组放射性计数瘤 /肝比值是腹腔注射组的 9倍 ,3周后前者肿瘤生长抑制率高于后者 ,分别为 62 .3%和 46.7%。结论　采用瘤内注射13 1I标记人源抗HBsFab导向治疗肝癌 ,具有低毒高效的治疗作用 ,临床实用价值大     

131I标记的抗肝癌血管内皮细胞单克隆抗体对肝癌治疗的实验研究

目的运用131I标记的抗肝癌血管内皮细胞单克隆抗体,研究靶向血管内皮细胞治疗肝癌的可行性.方法 建立裸小鼠人肝细胞癌动物模型,取30只裸鼠随机分为3组,分别为实验A组、实验B组和对照组,每组各10只.实验A组在接种肝癌细胞的同时,经腹腔注射抗肝癌血管内皮细胞的单克隆抗体,每只200μg/200μl,2次/周;实验B组在接种肝癌细胞的同时,经腹腔注射同剂量的131I标记的抗肝癌血管内皮细胞的单克隆抗体;对照组在接种肝癌细胞的同时,经腹腔注射等量的生理盐水.观察肿瘤的生长情况,计算肿瘤的体积,计算抑瘤率.结果 实验A组的抑瘤率为74.55%,实验B组为86.36%;实验A、B组与对照组比较肿瘤明显受抑(P<0.05).实验B组与实验A组比较显示了明显的放疗作用(P<0.05).HE及免疫组化染色观察证实,经单抗治疗后肿瘤区微血管内血栓形成,血管内皮细胞变性、坏死,血管周围大片肿瘤细胞坏死,瘤内血管密度明显降低.结论 抗肝癌血管内皮细胞单克隆抗体在动物实验中有明显的抑瘤作用,以此抗体为载体与核素相结合,可明显提高治疗肿瘤的疗效.     

^125I粒子植入治疗荷人肝癌裸鼠移植瘤的实验研究

目的 探讨^125I粒子植入对荷人肝癌裸鼠移植瘤生长和细胞增殖及凋亡相关蛋白的影响。方法 建立12只荷人肝癌BEL-7402裸鼠模型，治疗组和对照组各6只。治疗组每只裸鼠移植瘤内植入1枚活度为33．3MBq的^125I粒子，对照组不进行干预。治疗后每3～4d测量1次肿瘤直径，并计算治疗组肿瘤的体积抑制率。21d后处死裸鼠，制作肿瘤组织标本，进行常规病理学检查和免疫组织化学检测增殖细胞核抗原（PCNA）、bcl-2和bax的表达。结果 ^125I粒子治疗组肿瘤体积最大抑制率为49．2％，病理检查显示近粒子处肿瘤细胞变性坏死，远离粒子处可见存活肿瘤细胞。免疫组织化学显示治疗组PCNA表达强度和bcl-2／bax比值均低于对照组。结论 ^125I粒子植入低剂量持续照射可直接杀死荷瘤鼠肝癌细胞或抑制肿瘤生长。     

端粒酶核酶时间治疗肝癌裸鼠移植瘤研究

目的 探讨在端粒酶峰值时相与谷值时相施以端粒酶抑制剂治疗肝癌裸鼠移植瘤的疗效差异.方法 24只BALB/C裸鼠进行为期4 wk的LD12: 12节律同步化.移植肝癌细胞(SMMC-7721)于裸鼠以建立肝癌裸鼠移植瘤.在移植后 2 wk,瘤体内注射端粒酶抑制剂hTERT-5'RZ以治疗肝癌裸鼠移植瘤,注射时间点为9 HALO或21 HALO,持续2 wk.结果 21 HALO治疗组的肿瘤抑制率(65%)和端粒酶抑制率(90%)高于9 HALO治疗组的肿瘤抑制率(48%)和端粒酶抑制率(70%),差异具有统计学意义. 结论 在肿瘤DNA合成期注射以端粒酶为作用靶点的核酶能更好地抑制肝癌生长,具有更好的治疗效果.     

荷人结肠癌裸鼠瘤内注射^188Re—C50放射免疫治疗实验研究

目的 评价直接法^188Re标记抗CEA单克隆抗体C50和荷人结肠癌裸鼠瘤内注射^188Re－C50放射免疫治疗效果。方法 室温条件下,取4mg维生素C还原C50,0．5h后加入氯化亚锡0．2mL和新鲜淋洗的^188Re370－740MBq,混匀后反应2h以完成整个标记过程。荷人结肠癌裸鼠瘤内分别注射不同剂量的^188Re－C50,观察其治疗作用,并与瘤内注射生理盐水组和^188Re淋洗液组进行比较。结果 标记单抗经放化纯检测,标记液中游离^188Re和胶体^188Re分别少于5％和10％。与对照组比较,瘤内注射14．06MBq以上的标记单抗,其肿生长体积或质量受到明显抑制,甚至体积缩小。结论 直接法^188Re标记C50取得预期结果;瘤内注射^188Re－C50对肿瘤生长有明显的治疗作用。     

hNIS基因转染介导Hela细胞移植瘤放射性核素显像和治疗的实验研究

目的 利用131I对转染hNIS基因的宫颈癌Hela-NIS（＋）细胞移植瘤进行显像及治疗实验研究,评价hNIS基因转染介导131I治疗宫颈癌的可行性.方法 （1）利用Hela-NIS（＋）细胞和未转染hNIS的Hela细胞分别建立荷宫颈癌裸鼠模型,进行131I及99TcmO4-显像,观察移植瘤的显影情况,并计算移植瘤部位与对侧相同部位的T/B比值.（2）通过腹腔注射法观察比较74,111和148 MBq131I对荷Hela-NIS（＋）宫颈癌裸鼠移植瘤的抑制作用,另设不行任何治疗的对照组.用SPSS 13.0软件,样本均数间差异行t检验.结果 （1）成功构建荷Hela-NIS（＋）裸鼠移植瘤与荷Hela裸鼠移植瘤模型.131I显像示荷Hela-NIS（＋）裸鼠移植瘤部位明显放射性浓聚,注射后8 h T/B比值最高达17.34,而未转染hNIS基因的荷Hela裸鼠移植瘤部位始终未见明显的放射性浓聚.99TcmO4-显像示荷Hela-NIS（＋）裸鼠移植瘤部位在注射后25 h内持续放射性浓聚.（2）经不同剂量的131I治疗后2～3周起,各治疗组荷Hela-NIS（＋）裸鼠移植瘤生长开始受到抑制,移植瘤体积有不同程度缩小.111MBq组和148 MBq组的移植瘤抑制率差异无统计学意义（t=0.13～2.17,P＞0.05）,但二者均明显高于74 MBq组的移植瘤抑制率（t=2.74～5.75,P＜0.05）.对照组荷Hela-NIS（＋）裸鼠移植瘤持续生长.结论 荷Hela-NIS（＋）宫颈癌裸鼠移植瘤可明显聚集131I及99TcmO4-,且在较长时间内持续清晰显影;131I体内治疗效果显著.     

磁导向131I-Sc-7269-DMN治疗荷人肝癌裸鼠的实验研究

目的　研究磁导向1 31 I标记抗血管内皮生长因子单克隆抗体Sc 72 6 9和葡聚糖磁性纳米颗粒复合物 (Sc 72 6 9 DMN)在荷人肝癌裸鼠模型体内的生物学分布、抑瘤效能及安全性。方法　于 18只荷人肝癌裸鼠肿瘤部位体表持续设置磁场 ,分别自瘤体内均匀注射 (n =9)或尾静脉注射 (n =9) 1 31 I Sc 72 6 9 DMN约 0 74MBq ,进行生物学分布研究。另 2 5只平均分为 5组 ,其中 4组瘤内分别注射1 31 I Sc 72 6 9 DMN、1 31 I Sc 72 6 9、1 31 I DMN及1 31 I(放射性浓度均为 74MBq ml) ,其中1 31 I Sc 72 6 9 DMN组和1 31 I DMN组裸鼠肿瘤部位体表持续设置磁场 ;余 1组作为对照组注射生理盐水。治疗后观察肿瘤生长延迟时间 (TGD)及体重变化 ,并计算抑制率和检测外周血白细胞计数。结果　给药后 4、2 4和 4 8h局部瘤内给药组肿瘤组织百分注射剂量率 (%ID g)分别为 10 4 0 6、10 1 5 8和 10 0 96 ;静脉给药组分别为85 33、89 6 7和 90 0 0 ,两组间差异有显著性 (P <0 0 5 )。1 31 I Sc 72 6 9 DMN组TGD为 (13 3± 3 3)d ,肿瘤抑制率为 89 0 % ,与其他组相比差异有显著性 (P <0 0 5 ) ;该组治疗后外周血白细胞虽有下降[(390 0± 30 9) μl],但与对照组相比差异无显著性。 结论　1 31 I Sc 72 6 9 DMN瘤内注射治疗     

188Re-Hepama-1单克隆抗体荷人肝癌裸鼠模型实验研究

目的 研究188Re-单克隆抗体(简称单抗)Hepama-1在荷人肝癌裸鼠体内生物学分布及肿瘤抑制,为放免治疗提供依据.方法 制备188Re-Hepama-1并测定其标记率及体外稳定性.将40只荷瘤裸鼠用完全随机法分为5组:生理盐水对照组、188ReO4-瘤内注射组、188Re标记健康小鼠IgG(188Re-mIgG)瘤内注射组、188Re-Hepama-1静脉给药组、188Re-Hepama-1瘤内注射组.注射后48 h每组各处死3只,测定肿瘤和肝等重要器官的放射性,用每克组织百分注射剂量率(%ID/g)表示;分别于治疗后1,2,3及4周计算肿瘤体积,与治疗前肿瘤体积进行对比;治疗后4周,每组各处死3只荷瘤裸鼠,观察肿瘤细胞超微结构改变及组织病理学改变.结果 188Re-Hepama-1标记率为85%,放化纯＞95%.注射后48h瘤内注射188Re-Hepama-1组肿瘤组织放射性摄取为11.53%ID/g,静脉注射188Re-Hepama-1组为2.79%ID/g;而瘤内注射188Re-Hepama-1组血、肝、肾等组织摄取均＜1.00%ID/g,明显低于静脉注射188R-Hepama-I组(均＞1.50%ID/g);静脉注射188Re-Hepama-1组和瘤内注射188Re-Hepama-1组的肿瘤体积与188ReO4-组及188Re-mIgG组的差异均具有统计学意义(P均＜0.05).形态学观察可见瘤内注射188Re-Hepama-1组和静脉注射188Re-Hepama-1组细胞凋亡,凋亡小体及变性坏死增多,而其余组少见.结论 静脉注射和瘤体内注射188Re-Hepama-1对裸鼠模型肝癌具有较好的治疗效应.静脉注射188Re-Hepama-1在临床肝癌的导向治疗方面有较好的应用前景.     

131I-K237的制备及对荷人肺癌裸鼠靶向治疗实验

目的 探讨131I标记多肽K237的方法,观察131I-K237对荷人肺癌A549裸鼠肿瘤靶向治疗的疗效.方法 采用Iodogen法进行131I标记多肽K237,人奇静脉内皮细胞（HUVEC）增殖抑制实验和竞争抑制实验检测131I-K237的生物活性.建立荷人肺癌A549裸鼠模型25只,利用随机数字表法分成5组：对照组（注射生理盐水）、131I组（11.1 MBq）、K237组（40μg）、131I-K237静脉组（含K23740μg,11.1 MBq）和131I-K237瘤内注射组（含K237 40μg,11.1 MBq）.各实验鼠均于注药后15 d再次给药,剂量与前次相同.定期测量肿瘤体积.两样本均数比较用成组设计t检验,多组均数比较用单因素方差分析.结果 131I-K237的标记率为（60.16±1.21）%,经分离纯化后其放化纯为（96.87±0.82）%.HUVEC增殖抑制实验显示131I-K237与未标记K237的抑制率差异无统计学意义[（73.69±5.36）%和（62.68 ±3.83）%,t=1.67,P＞0.05].131I-K237静脉注入荷瘤裸鼠后肿瘤/对侧相应部位肌肉组织的放射性（T/N）比值随时间延长而逐渐升高,12 h达到最高,为4.31.治疗结束时,131I-K237静脉和瘤体内注射组、K237组及131I组的抑瘤率分别为75.01%、78.99%、31.15%、12.61%.131I-K237静脉和瘤体内注射组肿瘤平均体积较小,与对照组、K237组和131I组比较,差异均有统计学意义（F=15.233和13.611,P均＜0.01）.结论 131I-K237易于制备,具有较理想的动物体内动力学行为和对肿瘤的高亲和性,对荷人肺癌裸鼠移植瘤的生长具有明显的抑制作用,是一种具有潜在价值的新型靶向性肿瘤血管生成显像和治疗药物.     

核因子-κB抑制剂增强131I治疗甲状腺癌疗效的裸鼠实验研究

目的 通过小鼠活体研究,探讨核因子-κB抑制剂Bay 11-7082在131I治疗DTC中的协同作用.方法 通过裸鼠腹腔注射37 MBq131I,制备清除甲状腺裸鼠模型.将72只种植KTC-1癌细胞的清除甲状腺裸鼠随机分为4组:单独用131I组、单独用Bay 11-7082组、联合用药组和对照组.给药方法为:131I剂量37 MBq,于种植癌细胞第7周第1天腹腔注射;Bay 11-7082剂量按体质量10 mg/kg,于第7周第1、2和3天腹腔注射;联合用药组两药合用,剂量同上;对照组腹腔注射相同体积的生理盐水.成瘤后每周第7天测量癌结节大小,绘制癌结节体积变化曲线.裸鼠清除甲状腺前行99TcmO4-显像,131I清除甲状腺后和131I治疗种植瘤后3d行全身显像(单独用Bay 11-7082组未行治疗后显像).第7周第7天从每组中取6只裸鼠处死,对癌结节进行凋亡染色,计算凋亡指数(染色阳性细胞数/总细胞数×100％).用单因素方差分析和q检验进行数据比较.结果 裸鼠99TcmO4-显像可见甲状腺和胃显影;清除甲状腺时腹腔注射131I后显像可见甲状腺131I浓聚明显;131I治疗后荷裸鼠全身显像可见癌结节131I浓聚.从第8周末开始,3种治疗方案所致的癌结节体积改变差异有统计学意义(F=11.91 ～246.56,均P＜0.01),联合用药组癌结节体积明显小于单一用药组(q=3.36～ 14.99,均P＜0.01).对照组、131I治疗组、Bay 11-7082治疗组和联合用药组的凋亡指数分别为(0.28±0.15)％、(5.49±0.69)％、(6.82±0.72)％和(16.2l±1.57)％,差异有统计学意义(F =304.40,P＜0.01);其中联合用药组明显高于单独用药组(q=15.33和13.33,均P＜0.01).结论 裸鼠体内实验显示,通过Bay 11-7082对核因子-κB通路的抑制,可以增强131I治疗甲状腺癌的疗效,产生协同效应.