香烟烟雾对雄性小鼠睾丸细胞DNA损伤的研究

分别以二甲基亚砜 (DMSO)和磷酸缓冲液 (PBS)作为吸收液 ,用大气收集器 (U形多孔玻板吸收管 )采集香烟主流烟雾 ,制得 DMSO烟雾溶液和 PBS烟雾溶液。用彗星试验检测了这 2种烟雾溶液对小鼠睾丸细胞的 DNA损伤作用。结果显示 :2种烟雾溶液均含有 DNA损伤剂 ,可引起小鼠睾丸细胞的 DNA损伤 ,且 DMSO烟雾溶液的细胞毒性和遗传毒性均明显高于 PBS烟雾溶液。该研究为香烟的雄性生殖毒性评价提供了理论依据 ,同时也为香烟的研究提供了更为方便的手段。     

苯与甲醛致小鼠睾丸细胞DNA损伤联合作用

目的探讨苯与甲醛致小鼠睾丸细胞DNA联合损伤效应。方法采用单细胞凝胶电泳方法，分别检测苯染毒（剂量为50，200，800mg／kg）、甲醛染毒（剂量分别为0．3，1．2，4．8mg／kg）和苯＋甲醛复合染毒后小鼠睾丸细胞DNA损伤情况。结果在受试剂量范围内，小鼠睾丸细胞彗星率随苯或甲醛染毒剂量增加而增加（P〈0．01），其彗星尾长随苯染毒剂量增加而延长（P〈0．01），随甲醛染毒剂量增加而缩短，尤其高甲醛染毒组（P〈0．01）；复合染毒组中彗星尾长随联合染毒中苯染毒剂量增加而延长（P〈0．01），随联合染毒中甲醛染毒剂量增加而缩短（P〈0．01）。苯＋甲醛联合作用经析因素分析存在相加作用（P〈0.01）。结论苯和甲醛均能彼此增强各自所致的睾丸细胞DNA损伤效应。     

二氯乙烷对小鼠DNA损伤的器官特异性及时效关系研究

为了研究 1,2 二氯乙烷 (DCE)的遗传毒性、探测其致癌的靶器官 ,应用组织匀浆提取细胞核进行彗星试验 ,检测了DCE灌胃染毒 3、8、2 4h后对小鼠肝、肺、肾、脾、骨髓、睾丸、胃、肠、膀胱和外周血淋巴细胞的DNA损伤作用及修复动力学改变。实验结果 :1)DCE在小鼠体内遗传毒性的靶器官是肝、肺、肾、骨髓、结肠及胃粘膜细胞和外周血淋巴细胞 ;2 )DNA损伤和修复的动力学改变在器官间存在较大的差异 ,DNA损伤明显且修复较慢的器官或组织 (肺、胃和血液系统 )与其致癌的靶器官有较好的一致性。提示 :体内多器官的彗星试验对确定体内遗传毒性和预测致癌的靶器官是非常有用的 ;对暴露DCE的生物和人群 ,外周血淋巴细胞在彗星试验的拖尾 ,可作为体内DNA损伤效应的生物标志。     

1,2-二氯乙烷对大鼠体外血脑屏障细胞损伤的形态学观察

[目的]进一步探讨1，2-二氯乙烷对血脑屏障细胞的损伤作用。[方法]在体外建立了血脑屏障细胞模型，并从形态学上观察1，2-二氯乙烷对血脑屏障细胞的损伤作用。体外培养脑微血管内皮细胞和神经胶质细胞，将生长良好的脑微血管内皮细胞和神经胶质细胞分为4组，即对照组、5、10、20μl／ml组，用1，2-二氯乙烷对脑微血管内皮细胞和神经胶质细胞染毒，染毒0、10、30、60min后于光镜和电镜下密切观察细胞的形态学变化。[结果]染毒后的脑微血管内皮细胞呈进行性破坏，随着染毒剂量的加大细胞体积逐渐增大，胞膜模糊，细胞与细胞间、细胞与突触间连接减少，甚至消失；随着染毒时间的延长，在10、30、60min后可以观察到有进行性的细胞膜溶解破坏，胞核模糊，界限不清，突触变短。随着染毒浓度的增加或时间的延长，神经胶质细胞树突数量减少，轴突减少变短，细胞与突触间、胞体与胞体间连接减少甚至消失，超微结构显示胞浆中线粒体膜的破坏、缺失，嵴断裂、肿胀及空泡变，粗面内质网轻度扩张、脱颗粒，细胞核内染色质在核周凝集，胶质细胞间及突触间的连接松解。[结论]1，2－二氯乙烷可造成血脑屏障细胞的损伤，引起血管源性脑水肿。     

亚慢性铝暴露致小鼠脑神经细胞DNA损伤

目的研究亚慢性铝暴露对小鼠脑神经细胞DNA损伤作用。方法雄性ICR小鼠经饮水(双蒸水)中加入三氯化铝染毒,4组分别为低剂量组[10mg/(kg·d)]、中剂量组[50mg/(kg·d)]、高剂量组[300mg/(kg·d)]和对照组(饮双蒸水),各组均正常供给食物,饲养100d后处死小鼠,分别分离脑海马、皮质部位,制成细胞悬液,运用单细胞凝胶电泳技术(SCGE彗星实验)观察DNA损伤程度。结果4组脑海马、皮质部位神经细胞彗星拖尾率差别显著(χ2=385.07,P<0.001)。进一步用Ridit分析,染毒各组海马神经细胞核拖尾长度等级Ridit值与对照组相比差异显著(P<0.001),且低剂量与中剂量组、中剂量与高剂量组相比存在差异,Ridit值有随剂量增加而增大的趋势。各组皮质神经细胞除低剂量组与中剂量组差别不显著外,其他结果均与海马细胞分析结果相似。结论铝暴露可损伤脑神经细胞核DNA。     

养殖污水有机提取物对小鼠睾丸细胞的DNA损伤作用

目的 探讨养殖污水中有机污染物的遗传毒性.方法 雄性健康昆明种小鼠按体重随机分组,每组6只;分别于春、秋季采集天津市某污水养鱼池的养殖污水,以其有机提取物原液（25.00 L/kg）、1/2原液剂量（12.50L/kg）、1/4原液剂量（6.25L/kg）经腹腔注射染毒小鼠,连续3 d;以DMSO为阴性对照,环磷酰胺为阳性对照.通过非荧光染色彗星试验检测养殖污水有机提取物所致小鼠睾丸细胞DNA损伤作用.结果 春、秋季养殖污水有机提取物各染毒剂量组小鼠睾丸细胞拖尾率和平均尾长与阴性对照组比较,差别均有统计学意义（P＜0.01,P＜0.05）,且拖尾率、平均尾长与染毒剂量之间均呈剂量-反应关系（r=0.829～0.942,P均＜0.01）.结论 养殖污水中含有可引起小鼠睾丸细胞DNA损伤的有机污染物,这些污染物有可能通过食物链对人群健康产生潜在危害.     

亚急性1,2-二氯乙烷染毒对小鼠行为及脑神经递质含量的影响

目的 探讨亚急性1,2-二氯乙烷(1,2-dichloroethane,1,2-DCE)染毒对小鼠行为及脑神经递质含量的影响,为揭示1,2-DCE神经毒性机制提供参考.方法 将昆明种小鼠随机分为4组:对照组和低、中、高剂量1,2-DCE染毒组(225、450、900 mg/m3),每组8只小鼠,静式吸入染毒10 d,每天染毒3.5 h.最后一次染毒结束后立即进行旷场试验,实验结束后处死小鼠,快速取大脑组织,采用高效液相色谱法(HPLC)检测脑组织中谷氨酸(Glu)、天冬氨酸(Asp)及γ-氨基丁酸(GABA)的含量.结果 各染毒组小鼠脑组织中Asp和Glu含量随染毒剂量的增加而升高,且各染毒组小鼠的Glu含量[低、中、高剂量染毒组分别为(67.69±9.89)、(67.99±6.23)、(71.16±5.96)μmol/g Pro]与对照组[(50.78±5.15)μmol/g Pro]比较,差异均有统计学意义(P<0.01);低剂量染毒组小鼠脑组织中GABA含量[(8.08±2.37)μmol/g Pro]较对照组[(12.83±3.36)μmol/g Pro]明显降低,但高剂量组[(19.87±5.30)μmol/g Pro]与对照组比较,明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01).低剂量1,2-DCE染毒对小鼠的行为有兴奋作用;而高剂量1,2-DCE染毒对小鼠的探索性及运动性行为有抑制作用.结论 亚急性1,2-DCE染毒可引起小鼠脑组织中氨基酸类神经递质含量及比值的变化,进而导致出现行为的改变,这可能是1,2-DCE神经毒性作用的机制之一.

Abstract：

Objective To explore the effects of 1,2-dichloroethane (1,2-DCE) on the behavior and the brain neurotransmitter levels in mice.Methods Thirty mice were randomly divided into four groups,which were control group and groups of low,meddle and high exposure (225,450 and 900 mg/m3) to 1,2-DCE for 10 days (3.5 h a day) by inhalation.After the last exposure,the open field test was performed immediately.After exposure all mice were killed and the brain tissues were taken up rapidly.The levels of aspartate (Asp),glutamate (Glu) and gamma-aminobutyric acid (GABA) in the brain were detected by high performance liquid chromatography (HPLC ).Results Levels of Asp and Glu in all exposure groups increased with doses.As compared to the control group,levels of Glu in all exposure groups increased significantly (P<0.05 ).Levels of GABA in the low exposure group were significantly lower than those in control group,but those in the high exposure group were significantly higher than those in control group.The results of the open field test showed that effect of low exposure to 1,2-DCE on the behavior was stimulant,but the high exposure to 1,2-DCE inhibited behavior of exploration,excitement and sport.Conclusions Subacute exposure to 1,2-DCE could result in the change of amino acid neurotransmitter content and ratio in the brain,thereby change the behavior of mice appeared,which might be the mechanism of neurotoxicity caused by 1,2-DCE in part.     

亚急性1,2-二氯乙烷染毒致小鼠肝组织氧化损伤的研究

本研究的目的是探讨亚急性1,2-二氯乙烷(1,2-DCE)中毒致肝脏氧化损伤情况,为阐明1,2-DCE中毒性肝损伤的机制提供参考依据。将昆明种小鼠随机分成对照组和不同剂量1,2-DCE染毒组(0.35、0.7、1.2 mg/L),采用静式吸入方式染毒1周;然后,取血和肝组织,分别检测血中总胆红素(TB)和谷胱甘肽(GSH)含量,肝组织中丙二醛(MDA)、GSH含量及超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性。结果中、高剂量染毒组小鼠的血浆中TB含量显著高于对照组小鼠;而中、高剂量染毒组小鼠的肝组织中GSH-Px活性和GSH含量及高剂量组的SOD活性显著低于对照组,高剂量染毒组小鼠的肝组织中MDA含量显著高于对照组。提示亚急性1,2-DCE中毒可引起肝组织的氧化性损伤。     

氟对小鼠睾丸细胞DNA损伤与修复的研究

目的 :探讨氟的生殖遗传毒性。方法 :应用单细胞凝胶电泳试验 (SCGE)研究了氟化钠对离体小鼠睾丸细胞的DNA损伤与修复效应。结果 :氟化钠在 (0 .6 2～ 5 ) mm ol/ L 之间可引起小鼠睾丸细胞 DNA单链断裂 ,出现拖尾的彗星细胞。无论是拖尾细胞百分率 ,还是 DNA迁移长度都随氟化钠浓度的增加而增加 ,表现出明显的计量反应关系。此外 ,氟化钠所致的睾丸细胞 DNA损伤基本在 2 h内完全修复。结论 :在一定浓度下 ,氟化钠可引起离体小鼠睾丸细胞的 DNA损伤 ,可能是一种潜在的雄性生殖毒物。     

1,2-二氯乙烷对非洲绿猴肾细胞损伤机理的离体试验研究

目的　了解 1,2 二氯乙烷对非洲绿猴肾细胞的损伤及其机理。方法　采用 0 5、1 0、2 0mmol/L 3个剂量 1,2 二氯乙烷处理非洲绿猴肾细胞 (Vero细胞 ) 2 4h,并运用显微荧光术测定处理后的Vero细胞内活性氧 (ROS)含量及游离Ca2 + 浓度 ,用比色法测定Vero细胞培养上清液乳酸脱氢酶(LDH)活力。设立对照组。结果　接触 1 0、2 0mmol/L 1,2 二氯乙烷的Vero细胞内游离Ca2 + 浓度及其上清液LDH活力均高于对照组 (P <0 0 1) ,而 0 5mmol/L染毒组的Vero细胞内游离Ca2 + 浓度及其上清液LDH活力与对照组比较差异均无显著性 (P >0 0 5 )。各剂量组的Vero细胞内ROS含量与对照组比较差异均无显著性 (P >0 0 5 )。结论　较高浓度的 1,2 二氯乙烷能损伤Vero细胞 ,其损伤的可能途径是通过增加细胞内游离Ca2 + 浓度。     

甲醛对小鼠睾丸细胞DNA的损伤作用

目的探讨甲醛对离体小鼠睾丸细胞DNA的损伤作用.方法用不同剂量的甲醛(0、25、50、75、100μmol/L)对小鼠睾丸细胞进行染毒,应用彗星实验检测睾丸细胞DNA的损伤效应.结果甲醛在10、25、50μmol/L时具有DNA断裂作用(P＜0.05,P＜0.01和P＜0.01),在75 μmol/L时既有DNA断裂也有交联作用(P＜0.01),浓度为100μmol/L时尾部DNA百分比和尾距与阴性对照组相比,差异无统计学意义(P＞0.05),同时,甲醛致睾丸细胞DNA断裂的临界浓度在10 μmol/L左右,峰值浓度在50μmol/L附近.结论甲醛能引起离体小鼠睾丸细胞不同程度的DNA损伤,对小鼠睾丸细胞具有生殖遗传毒性.     

甲醛对大鼠组织细胞DNA的损伤作用

目的探讨甲醛对大鼠肝、肾、肺组织细胞DNA损伤作用。方法将24只健康SD大鼠随机分为6组,用蒸馏水及不同剂量（10、20、30、40mg／kg）的甲醛溶液和环磷酰胺经腹腔染毒阴性对照组、染毒组和阳性对照组大鼠,第2天处理动物后,取肝、肾、肺组织用单细胞凝胶电泳实验观察其细胞DNA损伤水平。结果甲醛对大鼠的肝、肾、肺组织细胞DNA具有损伤作用,染毒剂量和损伤呈现一定的剂量一反应关系。随着甲醛染毒浓度的升高,肾、肺、肝细胞拖尾率增加,头尾比降低。结论甲醛可引起大鼠的肝、肾、肺组织细胞DNA损伤,从而进一步证实甲醛具有遗传毒性。     

氧化乐果对小鼠睾丸细胞DNA的损伤

目的 研究有机磷农药氧化乐果对小鼠睾丸细胞DNA的损伤作用.方法 24只昆明小鼠随机分成4组（对照组、1、2、4mg/kg染毒组）,每组6只.经口染毒7 d,用彗星试验技术（SCGE）检测小鼠睾丸细胞DNA的损伤.结果 1、2、4 mg/kg氧化乐果暴露的小鼠睾丸细胞彗星尾长和彗星尾长与头长之比均大于对照组（P＜0.01）,且随氧化乐果染毒剂量的增加,睾丸细胞彗星尾长也增加,具有剂量-效应关系.结论 氧化乐果可引起小鼠睾丸细胞DNA的损伤.     

镉对小鼠睾丸生殖细胞DNA损伤作用研究

目的 研究氯化镉对小鼠睾丸生殖细胞DNA的损伤作用.方法 用不同浓度氯化镉分别对小鼠睾丸细胞进行处理,分为阴性对照组(生理盐水)、微剂量组(0.04mmol\LCdCI2)、低剂量组(0.2mmol\L CdCI2)、中剂量组(1mmol\LCdCI2)、高剂量组(5mmol\L CdCI2),用单细胞凝胶电泳法分别计数各组400个细胞,按照不同的损伤程度进行分类;并分别测量各组50个彗星细胞尾长并计算均方值.结果 各组小鼠睾丸生殖细胞损伤率和尾长均方分别为阴性对照组8.0%、8.543±2.131,微剂量组48.5%、24.761±3.595,低剂量组65.0%、39.246±5.894,中剂量组71.5%、42.745±5.231,高剂量组87.5%、49.374±4.543;4个剂量组小鼠睾丸细胞DNA损伤率显著高于阴性对照组(P＜0.001),四个剂量组小鼠睾丸细胞DNA损伤的彗星细胞尾长均方值显著高于阴性对照组(P＜0.001),并且DNA损伤率和彗星细胞尾长均方值随着剂量增加而增加.结论 微量氯化镉对小鼠睾丸生殖细胞DNA即已存在明确损伤作用,且损伤程度与氯化镉剂量成正比.     

单细胞电泳检测冰冻保存对外周血细胞DNA的损伤

用对ＤＮＡ损伤十分敏感的单细胞电泳技术测试冰冻对正常人外周血细胞ＤＮＡ的损伤效应。结果显示－２０℃和－８０℃冰冻后慧星细胞百分率比４℃保存样品明显增多，损伤程度亦加剧。相对而言４℃保存ＤＮＡ较稳定，但随时间的延长ＤＮＡ完整性受到破坏也越严重。     

五氯酚钠对鲤鱼肾细胞DNA损伤的体内和体外研究

目的 研究五氯酚钠对鲤鱼肾细胞DNA的损伤效应.方法 选择健康鲤鱼,体内染毒实验:分别设3个五氯酚钠(Na-PCP)染毒组(14.4、28.8、144.0μg/L)和1个对照组(蒸馏水),每组3尾鲤鱼,染毒72 h.体外染毒实验:收集健康鲤鱼肾细胞悬液,分别设3个Na-PCP染毒组(14.4、28.8、144.0μg/L)和1个对照组(蒸馏水),染毒1.5 h.体内、外实验结束后,均采用单细胞凝胶电泳试验检测细胞DNA损伤程度,指标包括Olive尾距、彗尾长、尾距、彗尾DNA含量.结果 体内染毒结果显示,14.4、28.8、144.0μg/L组Olive尾距、彗尾长、尾距、彗尾DNA含量均高于对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01).体外染毒结果显示,除28.8 μg/L组外,14.4、144.0 μg/L组Olive尾距、彗尾长、尾距、彗尾DNA含量均高于对照组,差异均有统计学意义(P＜0.01).体内染毒的0、14.4μg/L组Olive尾距小于体外染毒,差异均有统计学意义(P＜0.05);而体内染毒的28.8、144.0 μg/L组Olive尾距大于体外染毒,差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 五氯酚钠能够诱导鲤鱼肾细胞DNA损伤.     

SOD模拟化合物对人体口腔颊黏膜细胞DNA的损伤作用

目的　探讨 SOD模拟化合物 (m im ics of SOD,MSOD)〔 Mn(EDTB)〕(AC)作为抗癌药物应用于临床的可行性。方法　以人体口腔颊黏膜细胞为材料 ,用彗星实验 ,通过观察尾距和尾部 DNA百分率这两项指标的变化情况检测染毒后口腔颊黏膜细胞 DNA的损伤情况。结果　检测结果表明 2 0、4 0、6 0、80 μg/ m lMSOD处理组与阴性对照组有极显著差异 (P<0 .0 1)。结论　该化合物对人体口腔颊黏膜细胞 DNA有较明显的损伤作用 ,对于它作为新的抗癌药物应用于临床应持慎重态度。     

加氯消毒对水中有机提取物致人胎肝细胞DNA损伤的影响

目的探讨自来水加氯消毒对水中有机提取物致细胞DNA损伤的影响。方法于2007年7月(夏季)和2008年3月(春季)采集以长江为水源的某水厂的水源水、经加氯消毒处理后的出厂水和末梢水,以人胎肝细胞(L-02)为靶细胞,采用单细胞凝胶电泳技术,检测水样有机提取物诱导细胞DNA损伤的效应。水样有机提取物设4个染毒浓度(1.2、6、30、150ml/ml),阳性对照为苯并(a)芘(200μmol/L),溶剂对照为二甲基亚砜(DMSO,10μl/ml)。结果春季水源水、出厂水和末梢水以及夏季出厂水和末梢水水样有机提取物在低、中、高浓度(6、30、150ml/ml)引起的L-02细胞DNA损伤较溶剂对照组明显增加。春夏两季加氯消毒后的出厂水和末梢水有机提取物在低、中、高浓度(6、30、150ml/ml)引起的L-02细胞DNA损伤较水源水明显增强。春季的水样有机提取物对细胞DNA的损伤作用高于夏季。结论水源水、出厂水和末梢水有机提取物均能引起L-02细胞的DNA损伤,氯化消毒增加了水源水的遗传毒性,春季水样的遗传毒性大于夏季。